《白細(xì)胞檢查》ppt課件

1、白細(xì)胞檢查白細(xì)胞檢查一、一、 白細(xì)胞計(jì)數(shù)白細(xì)胞計(jì)數(shù)一、白細(xì)胞概述一、白細(xì)胞概述 白細(xì)胞為球形，直徑白細(xì)胞為球形，直徑7-25ul，分類有粒，分類有粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞。是肌體的抵御病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞。是肌體的抵御病原微生物等異物入侵的主要防線。原微生物等異物入侵的主要防線。 1. 粒細(xì)胞粒細(xì)胞 來(lái)源于骨髓造血干細(xì)胞來(lái)源于骨髓造血干細(xì)胞 a. 中性粒細(xì)胞：中性粒細(xì)胞： 防御功能防御功能 b. 嗜酸性粒細(xì)胞：嗜酸性粒細(xì)胞： 限制過(guò)敏反響，限制過(guò)敏反響，參與蠕蟲的免疫反響。參與蠕蟲的免疫反響。 c. 嗜堿性粒細(xì)胞：形狀與功能與肥大嗜堿性粒細(xì)胞：形狀與功能與肥大細(xì)胞類似，細(xì)胞類似， 參與

2、超敏反響。參與超敏反響。單核細(xì)胞：?jiǎn)魏思?xì)胞： 來(lái)自粒來(lái)自粒-單祖細(xì)胞，進(jìn)入組織后變?yōu)榫奘蓡巫婕?xì)胞，進(jìn)入組織后變?yōu)榫奘?細(xì)胞，壽命細(xì)胞，壽命2-3月。月。3. 淋巴細(xì)胞：來(lái)源造血干細(xì)胞，分淋巴細(xì)胞：來(lái)源造血干細(xì)胞，分T和和B淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞。二、顯微鏡計(jì)數(shù)法二、顯微鏡計(jì)數(shù)法原理：原理： 用稀乙酸將血液稀釋并破壞紅細(xì)胞，用稀乙酸將血液稀釋并破壞紅細(xì)胞，混勻后，混勻后， 滴入計(jì)數(shù)盤中，在滴入計(jì)數(shù)盤中，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換顯微鏡下計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求得每升血液中白細(xì)胞總數(shù)。算求得每升血液中白細(xì)胞總數(shù)。器材和試劑器材和試劑 白細(xì)胞稀釋液：冰乙酸白細(xì)胞稀釋液：冰乙酸 2

3、.0ml 10g/L亞甲藍(lán)亞甲藍(lán) 數(shù)滴數(shù)滴 蒸餾水蒸餾水 加至加至100ml 器材同紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。器材同紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。操作操作 a. 加白細(xì)胞加白細(xì)胞 稀釋液稀釋液0.38ml于一小試管中于一小試管中 b. 用微量吸管汲取用微量吸管汲取20ul末梢血。末梢血。 c. 擦去微量吸管外余血，將其插入稀釋液底部，擦去微量吸管外余血，將其插入稀釋液底部，悄然悄然將血放出，并汲取上清液洗滌微量吸管將血放出，并汲取上清液洗滌微量吸管3次留意每次留意每次不次不能沖渾稀釋液，混勻。能沖渾稀釋液，混勻。 d. 用微量吸管或玻璃棒取混勻的細(xì)胞懸液用微量吸管或玻璃棒取混勻的細(xì)胞懸液1滴，充滴，充入入計(jì)數(shù)池與蓋片的縫隙中

4、，靜置計(jì)數(shù)池與蓋片的縫隙中，靜置2-3min，使白細(xì)胞下沉。，使白細(xì)胞下沉。 e. 低倍鏡計(jì)數(shù)四角低倍鏡計(jì)數(shù)四角4個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)。個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)。計(jì)算計(jì)算 X/410 20 106/L=白細(xì)胞白細(xì)胞/L式中：在法定計(jì)量單位制中用式中：在法定計(jì)量單位制中用. 109/L表示表示 X：為：為4個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)。個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)。 4：為每大方格即：為每大方格即0.1ul內(nèi)白細(xì)胞平均數(shù)。內(nèi)白細(xì)胞平均數(shù)。 10：1個(gè)大方格的容積為個(gè)大方格的容積為0.1ul，換算成，換算成1ul。 20：血液的稀釋倍數(shù)。：血液的稀釋倍數(shù)。 106：將：將ul換算成換算成L 正常參考值正常參考值成人成

5、人 ： 4-10109/L新生兒：新生兒： 15-20109/L6月月-2歲：歲：11-12109/L6. 本卷須知本卷須知 采血時(shí)不能擠壓過(guò)度，因此針刺深度必需適采血時(shí)不能擠壓過(guò)度，因此針刺深度必需適當(dāng)。當(dāng)。 在大方格內(nèi)壓線細(xì)胞應(yīng)按計(jì)數(shù)原那么計(jì)數(shù)。在大方格內(nèi)壓線細(xì)胞應(yīng)按計(jì)數(shù)原那么計(jì)數(shù)。 稀釋液要過(guò)濾，小試管、計(jì)數(shù)板須清潔，以稀釋液要過(guò)濾，小試管、計(jì)數(shù)板須清潔，以免免雜質(zhì)、微粒等被誤以為細(xì)胞。雜質(zhì)、微粒等被誤以為細(xì)胞。 充池前的搖勻要留意，氣泡不能太多。充池前的搖勻要留意，氣泡不能太多。 加蓋玻片方式：加蓋玻片方式：“推式，不要推式，不要“蓋式。蓋式?？己嗽u(píng)價(jià)考核評(píng)價(jià) a. 常規(guī)考核規(guī)范常規(guī)考

6、核規(guī)范 RCSRCS= 100%評(píng)價(jià)：評(píng)價(jià)： 白細(xì)胞白細(xì)胞 4109/L者，者， RCS30% 白細(xì)胞在白細(xì)胞在4.1-14.9109/L者者 RCS20% 白細(xì)胞白細(xì)胞15 109/L者者 RCS15% 超越上述規(guī)范者為不合格超越上述規(guī)范者為不合格 b. 其他方法其他方法四大格所見白細(xì)胞最大值四大格所見白細(xì)胞最大值最小值最小值四大格所見白細(xì)胞數(shù)平均值四大格所見白細(xì)胞數(shù)平均值白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)一、外周血正常白細(xì)胞形狀一、外周血正常白細(xì)胞形狀 1. 中性粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞 胞體圓形，直徑胞體圓形，直徑10-15um，為紅細(xì)胞的兩倍。胞質(zhì)豐富，粉，為紅細(xì)胞的兩倍。胞質(zhì)豐富，粉紅色，含較多細(xì)

7、小均勻的紫紅色中性顆粒。紅色，含較多細(xì)小均勻的紫紅色中性顆粒。細(xì)胞核染色質(zhì)粗糙不勻，陳列嚴(yán)密，為深細(xì)胞核染色質(zhì)粗糙不勻，陳列嚴(yán)密，為深紫紅色。紫紅色。 根據(jù)核外形分類：中性桿狀核粒細(xì)根據(jù)核外形分類：中性桿狀核粒細(xì)胞中性分葉核粒細(xì)胞胞中性分葉核粒細(xì)胞規(guī)范：核徑最窄處小于最寬處規(guī)范：核徑最窄處小于最寬處1/3為分葉核為分葉核 核徑最窄處大于最寬處核徑最窄處大于最寬處1/3為桿狀核為桿狀核嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞 細(xì)胞圓形，直徑細(xì)胞圓形，直徑13-15um，略大于中性粒細(xì)胞。，略大于中性粒細(xì)胞。胞漿內(nèi)充溢粗大、整齊、均勻、陳列嚴(yán)密、有立體胞漿內(nèi)充溢粗大、整齊、均勻、陳列嚴(yán)密、有立體感的桔紅色嗜酸性顆

8、粒，偶見少許淡藍(lán)或無(wú)色胞漿感的桔紅色嗜酸性顆粒，偶見少許淡藍(lán)或無(wú)色胞漿。嗜酸性粒細(xì)胞容易破碎，顆粒可分散于細(xì)胞周圍。嗜酸性粒細(xì)胞容易破碎，顆?？煞稚⒂诩?xì)胞周圍。嗜堿性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞 細(xì)胞圓形，直徑細(xì)胞圓形，直徑10-12um，略小于中性粒細(xì)胞。，略小于中性粒細(xì)胞。胞漿少，常呈淡紅或淡紫紅色，含少量粗大、不均胞漿少，常呈淡紅或淡紫紅色，含少量粗大、不均勻、陳列不規(guī)那么的紫黑色嗜堿性顆粒，常蓋于核上，勻、陳列不規(guī)那么的紫黑色嗜堿性顆粒，常蓋于核上，及細(xì)胞邊緣。及細(xì)胞邊緣。單核細(xì)胞單核細(xì)胞 細(xì)胞圓形或不規(guī)那么形，為外周血中最大的細(xì)胞，細(xì)胞圓形或不規(guī)那么形，為外周血中最大的細(xì)胞，直徑直徑15-25

9、um，胞漿豐富，染淡藍(lán)或灰藍(lán)色，呈毛玻，胞漿豐富，染淡藍(lán)或灰藍(lán)色，呈毛玻璃樣半透明，含有大量細(xì)小、灰塵樣嗜天青顆粒，可璃樣半透明，含有大量細(xì)小、灰塵樣嗜天青顆粒，可見空泡。細(xì)胞核大，呈不規(guī)那么圓形、腎形、馬蹄形或見空泡。細(xì)胞核大，呈不規(guī)那么圓形、腎形、馬蹄形或不規(guī)那么分葉，有時(shí)折疊扭曲。染色質(zhì)細(xì)致、疏松如網(wǎng)不規(guī)那么分葉，有時(shí)折疊扭曲。染色質(zhì)細(xì)致、疏松如網(wǎng)狀。狀。淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 大淋巴細(xì)胞：體積較大，直徑大淋巴細(xì)胞：體積較大，直徑10-15um，胞漿豐富，胞漿豐富 ，呈，呈 透明藍(lán)色，常有少量粗大、大小不均的紫透明藍(lán)色，常有少量粗大、大小不均的紫 紅色嗜天青顆粒。細(xì)胞核染色質(zhì)疏松。紅色嗜天青顆

10、粒。細(xì)胞核染色質(zhì)疏松。 小淋巴細(xì)胞：細(xì)胞圓形，直徑小淋巴細(xì)胞：細(xì)胞圓形，直徑6-10um，胞漿很少，有的，胞漿很少，有的 僅在核的一側(cè)出現(xiàn)一線藍(lán)色胞漿，甚至完僅在核的一側(cè)出現(xiàn)一線藍(lán)色胞漿，甚至完 全沒(méi)有。細(xì)胞核圓形，偶見凹陷，染色質(zhì)全沒(méi)有。細(xì)胞核圓形，偶見凹陷，染色質(zhì) 粗糙致密，可有塊狀。粗糙致密，可有塊狀。 二、外周血中異常白細(xì)胞形狀二、外周血中異常白細(xì)胞形狀 1中性粒細(xì)胞毒性變化：中性粒細(xì)胞毒性變化：中性粒細(xì)胞大小不均；病程長(zhǎng)的化膿性炎癥中性粒細(xì)胞大小不均；病程長(zhǎng)的化膿性炎癥毒性顆粒：化膿菌感染及大面積燒傷毒性顆粒：化膿菌感染及大面積燒傷空泡變性：敗血癥空泡變性：敗血癥杜勒體：是核和胞質(zhì)發(fā)

11、育不平衡表現(xiàn)杜勒體：是核和胞質(zhì)發(fā)育不平衡表現(xiàn)核變性：核固縮、核溶解、核破裂核變性：核固縮、核溶解、核破裂 2、中性粒細(xì)胞的核象、中性粒細(xì)胞的核象變化變化核左移核左移核右移核右移3. 淋巴細(xì)胞異常：淋巴細(xì)胞異常：異型淋巴細(xì)胞：分三型異型淋巴細(xì)胞：分三型具有衛(wèi)星核的淋巴細(xì)胞：受電離輻射，除淋巴細(xì)胞減具有衛(wèi)星核的淋巴細(xì)胞：受電離輻射，除淋巴細(xì)胞減 少，還有衛(wèi)星核的淋巴細(xì)胞少，還有衛(wèi)星核的淋巴細(xì)胞 3. 其它異常細(xì)胞其它異常細(xì)胞 三、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)法三、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)法 血涂片的光學(xué)顯微鏡檢查，是血液細(xì)胞形狀學(xué)血涂片的光學(xué)顯微鏡檢查，是血液細(xì)胞形狀學(xué)檢查的根本方法，特別是對(duì)于血液病的診斷，占有檢查的根

12、本方法，特別是對(duì)于血液病的診斷，占有極重要的位置。極重要的位置。 1. 原理：原理： 將標(biāo)本制成血涂片，經(jīng)將標(biāo)本制成血涂片，經(jīng)Wright染色染色后，在顯微鏡下根據(jù)白細(xì)胞形狀學(xué)特點(diǎn)逐個(gè)分類計(jì)后，在顯微鏡下根據(jù)白細(xì)胞形狀學(xué)特點(diǎn)逐個(gè)分類計(jì)數(shù)，得出各種白細(xì)胞相對(duì)比值或百分率，并注數(shù)，得出各種白細(xì)胞相對(duì)比值或百分率，并注意察看其形狀和質(zhì)量的變化。意察看其形狀和質(zhì)量的變化。 器材和試劑器材和試劑 采血器具和酒精、載玻片和推片、染色缸和架、采血器具和酒精、載玻片和推片、染色缸和架、顯微鏡、鉛筆、拭鏡紙。顯微鏡、鉛筆、拭鏡紙。 Wright染色液、二甲苯染色液、二甲苯操作操作 a. 血涂片的制造血涂片的制造

13、 b. 染色染色 c. 選擇血涂片的體尾交界處染色良好的部位，在選擇血涂片的體尾交界處染色良好的部位，在油鏡下，計(jì)數(shù)油鏡下，計(jì)數(shù)100-200個(gè)白細(xì)胞。個(gè)白細(xì)胞。 正常參考值正常參考值 中性桿狀核粒細(xì)胞：中性桿狀核粒細(xì)胞： 1%-5% 中性分葉核粒細(xì)胞：中性分葉核粒細(xì)胞： 50%-70% 嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞E：0.5%-5% 嗜堿性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞B：0%-1% 淋巴細(xì)胞：淋巴細(xì)胞： 20%-40% 單核細(xì)胞：?jiǎn)魏思?xì)胞： 3%-8%5. 本卷須知：本卷須知： a. 血膜要干透后才干染色，否那么染色時(shí)易零落血膜要干透后才干染色，否那么染色時(shí)易零落 b. 染色時(shí)間與染液濃度、室溫及細(xì)胞多少

14、有關(guān)，染色時(shí)間與染液濃度、室溫及細(xì)胞多少有關(guān)，普通染液淡、染色時(shí)間長(zhǎng)些效果好。普通染液淡、染色時(shí)間長(zhǎng)些效果好。 c. 染液不能過(guò)少，以防蒸發(fā)沉淀。染液不能過(guò)少，以防蒸發(fā)沉淀。 d. 沖洗時(shí)不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖，防染料沖洗時(shí)不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖，防染料冷靜。沖洗時(shí)間也不能長(zhǎng)。冷靜。沖洗時(shí)間也不能長(zhǎng)。 e. 染色過(guò)淡，可復(fù)染。染色過(guò)淡，可復(fù)染。 f. 染色過(guò)深可用水沖洗或浸泡，還可用甲醇脫色染色過(guò)深可用水沖洗或浸泡，還可用甲醇脫色 g. 留意紅細(xì)胞、血小板形狀的改動(dòng)及有無(wú)血液寄留意紅細(xì)胞、血小板形狀的改動(dòng)及有無(wú)血液寄生蟲。生蟲。 h. 如發(fā)現(xiàn)幼稚或異常白細(xì)胞，應(yīng)分類報(bào)告如發(fā)現(xiàn)幼稚或異常

15、白細(xì)胞，應(yīng)分類報(bào)告三、三、 白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類 計(jì)數(shù)的臨床意義計(jì)數(shù)的臨床意義 一、生理變化一、生理變化 1. 年齡年齡 2 . 日間變化日間變化 安靜松弛安靜松弛-低低 活動(dòng)和進(jìn)餐后活動(dòng)和進(jìn)餐后-高高 午后高于清晨：一日之內(nèi)最高和最低可相差一午后高于清晨：一日之內(nèi)最高和最低可相差一倍倍 3. 運(yùn)動(dòng)、疼痛、和心情的影響運(yùn)動(dòng)、疼痛、和心情的影響 4. 妊娠和分娩妊娠和分娩 結(jié)論：白細(xì)胞計(jì)數(shù)動(dòng)搖在結(jié)論：白細(xì)胞計(jì)數(shù)動(dòng)搖在30%以下，在臨床診斷上以下，在臨床診斷上無(wú)無(wú) 意義，只需經(jīng)過(guò)定時(shí)和反復(fù)察看才有意義。意義，只需經(jīng)過(guò)定時(shí)和反復(fù)察看才有意義。二、病理變化二、病理變化 核左移核左移: 周圍

16、血中桿狀核細(xì)胞增多，甚至出現(xiàn)晚幼粒、周圍血中桿狀核細(xì)胞增多，甚至出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細(xì)胞。常見于急性化膿感染。白血病、中幼粒、早幼粒等細(xì)胞。常見于急性化膿感染。白血病、急性中毒、急性溶血也可見。急性中毒、急性溶血也可見。 核右移：正常人周圍血中的中性粒細(xì)胞核以核右移：正常人周圍血中的中性粒細(xì)胞核以2-3分葉分葉為主，假設(shè)為主，假設(shè)5分葉核以上超越分葉核以上超越3%時(shí)叫核右移。常伴白細(xì)胞時(shí)叫核右移。常伴白細(xì)胞總數(shù)減少，為造血功能衰退的表現(xiàn)。主要見于營(yíng)養(yǎng)性巨總數(shù)減少，為造血功能衰退的表現(xiàn)。主要見于營(yíng)養(yǎng)性巨幼細(xì)胞貧血、惡性貧血。幼細(xì)胞貧血、惡性貧血。中性粒細(xì)胞增多中性粒細(xì)胞增多 急性感染、急

17、性中毒、急性大出血、嚴(yán)重組織損急性感染、急性中毒、急性大出血、嚴(yán)重組織損傷、白血病或惡性腫瘤。傷、白血病或惡性腫瘤。中性粒細(xì)胞減少中性粒細(xì)胞減少 某些感染、某些血液病、本身免疫性疾病、脾功某些感染、某些血液病、本身免疫性疾病、脾功能亢進(jìn)。能亢進(jìn)。淋巴細(xì)胞增多淋巴細(xì)胞增多 某些病毒、細(xì)菌感染、某些慢性感染、淋巴細(xì)胞某些病毒、細(xì)菌感染、某些慢性感染、淋巴細(xì)胞白血病白血病淋巴細(xì)胞減少淋巴細(xì)胞減少 接觸放射線及運(yùn)用腎上腺皮質(zhì)激素接觸放射線及運(yùn)用腎上腺皮質(zhì)激素嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)一、原理一、原理 用嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液，將血液稀釋一定倍數(shù)，并用嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液，將血液稀釋一定倍數(shù)，并

18、破壞紅細(xì)胞和大部分其他白細(xì)胞，并使嗜酸性粒細(xì)胞著破壞紅細(xì)胞和大部分其他白細(xì)胞，并使嗜酸性粒細(xì)胞著色，滴入計(jì)數(shù)池，計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)，換色，滴入計(jì)數(shù)池，計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)，換算成每升血中嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)。算成每升血中嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)。二、試劑二、試劑 伊紅、伊紅、95%苯酚、苯酚、40%甲醛、蒸餾水甲醛、蒸餾水三、操作三、操作 1. 在小試管中加稀釋液在小試管中加稀釋液0.38ml 2. 將將20ul血標(biāo)本參與管內(nèi)，溶解紅細(xì)胞，然后滴入血標(biāo)本參與管內(nèi)，溶解紅細(xì)胞，然后滴入計(jì)數(shù)池。計(jì)數(shù)池。 3. 靜置靜置3-5min，低倍鏡計(jì)數(shù)兩個(gè)計(jì)數(shù)室中，低倍鏡計(jì)數(shù)兩個(gè)計(jì)數(shù)室中10個(gè)大方個(gè)大方格

19、內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)。格內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)。四、計(jì)算四、計(jì)算嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞/L=10個(gè)大方格內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)個(gè)大方格內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)20 106五、本卷須知五、本卷須知 1. 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)在半小時(shí)內(nèi)計(jì)數(shù)終了。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)在半小時(shí)內(nèi)計(jì)數(shù)終了。 2. 在血液稀釋混勻中，不要用力振蕩。在血液稀釋混勻中，不要用力振蕩。 3. 住院病人作嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，應(yīng)固定時(shí)間，住院病人作嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，應(yīng)固定時(shí)間，以免受日間生理變化影響。以免受日間生理變化影響。 4. 留意與中性粒細(xì)胞區(qū)別。留意與中性粒細(xì)胞區(qū)別。六、臨床意義六、臨床意義 1. 生理變化生理變化 勞動(dòng)、冰冷、精神刺激等使嗜酸性粒細(xì)胞降低，勞動(dòng)、冰冷、精神刺激等使嗜酸性粒細(xì)胞降低，白天低，夜晚高，上午動(dòng)搖較大，下午比較恒定。白天低，夜晚高，上午動(dòng)搖較大，下午比較恒定。 2. 病理變化病理變化 增多：過(guò)敏性疾病、寄生蟲病、某些傳染病、增多：過(guò)敏性疾病、寄生蟲病、某些傳染病、皮膚病、某些惡性腫瘤、某些血液病皮膚病、某些惡性腫瘤、某些血液病 減少：減少： 長(zhǎng)期運(yùn)用腎上腺皮質(zhì)激素，某些傳染長(zhǎng)期運(yùn)用腎上腺皮質(zhì)激素，某些傳染病早期。病早期。 還可用于察看急性傳染病、大手術(shù)和燒傷病人還可用于察看急性傳染病、大手術(shù)和燒傷病人預(yù)后，測(cè)定腎上腺皮質(zhì)