實驗八 大黃中蒽醌類成分的提取分離和鑒定PPT學習教案

1、會計學1實驗八實驗八 大黃中蒽醌類成分的提取分離和大黃中蒽醌類成分的提取分離和鑒定鑒定2掌握掌握PH梯度法的原理及操作技術梯度法的原理及操作技術 1熟練進行薄荷中熟練進行薄荷中的揮發(fā)油和青蒿的揮發(fā)油和青蒿中的青蒿素的提中的青蒿素的提取分離操作；取分離操作；能進行當歸、丁能進行當歸、丁香中揮發(fā)油的提香中揮發(fā)油的提取分離操作。取分離操作。3通過磷酸氫鈣柱色譜分離大黃酚及大黃素甲醚的試驗，進一步熟悉柱色譜操作技術通過磷酸氫鈣柱色譜分離大黃酚及大黃素甲醚的試驗，進一步熟悉柱色譜操作技術。 一、實驗目的一、實驗目的 能夠運用回流提取法對大黃中總蒽醌類化合物進行提取，并能根據色譜結果，設計液液萃取法分離混

2、合物的實驗方案。 4學習蒽醌類化合物鑒定方法 第1頁/共17頁二、實驗原理二、實驗原理第2頁/共17頁三、實驗步驟三、實驗步驟1乙醇總提取物的制備 游離蒽醌的提取 取大黃粗粉50g，置于500ml圓底燒瓶中，加95%乙醇以約高出生藥面為度，置水浴加熱回流23小時，趁熱抽濾。濾渣再以95%乙醇熱提二次，趁熱抽濾后合并三次乙醇提取液。濃縮乙醇提取液，得到乙醇總提取物。2總游離蒽醌的提取，親脂性成分與親水性成分分離 將乙醇總提取物浸膏加水適量混懸，加乙醚150ml于500ml分液漏斗中萃取，充分振蕩后放置，傾出醚層，再加50ml乙醚振搖，放置，傾出醚層，同法操作6次，直至乙醚液呈色較淺時為止，合并乙

3、醚液，乙醚溶液含總游離蒽醌。第3頁/共17頁3蒽醌的分離 大黃酸的分離 將含有游離蒽醌的乙醚溶液移至250ml的分液漏斗中，加5%NaHCO3水溶液20ml，振搖。放置分層，放出下層NaHCO3溶液，置于另一三角瓶中，上層乙醚溶液留存于分液漏斗中，再加5%NaHCO3溶液15ml萃取一次，每次振搖提取后，放置分層時間應稍久，以免乙醚溶液混在下層水液中，影響分離效果。提取過程中，如乙醚揮發(fā)，可酌量補加。合并NaHCO3提取液，注意其呈色，在攪拌下小心滴加鹽酸調pH23，觀察酸化過程中的呈色變化，析出物抽濾收集，干燥后稱重。第4頁/共17頁 大黃素的分離留存在分液漏斗中的乙醚液，用5%Na2CO3

4、水溶液每次1520ml如上法相同萃取數(shù)次，直至提取液呈色較淺時為止，約需67次，合并Na2CO3提取液，小心滴加鹽酸酸化至pH23，放置待沉淀析出，抽濾收集析出物經水洗滌，抽干移至表面皿上，干燥后稱重。第5頁/共17頁 大黃酚和大黃素-6-甲醚的分離留存的乙醚液，置圓底燒瓶中，回收乙醚，放置。抽濾收集沉淀，經水洗，抽干移至表面皿上，干燥后稱重。4鑒定（1）堿液試驗：分別取蒽醌化合物結晶少許，置試管中，加1ml乙醇溶解，加數(shù)滴5%氫氧化鉀試劑振搖，溶液呈紅色 （2）醋酸鎂試驗：分別取各蒽醌化合物結晶少許，置試管中，加1ml乙醇溶解，加數(shù)滴0.5%醋酸鎂試劑，產生橙、紅、紫等顏色 第6頁/共17頁

5、（3）薄層檢識第7頁/共17頁（4）紙色譜檢識支持劑：新華色譜濾紙（中速、20cm7cm）樣品：各蒽醌成分1%三氯甲烷溶液對照品：1%大黃酸三氯甲烷溶液；1%大黃素三氯甲烷溶液； 1%蘆薈大黃素三氯甲烷溶液展開劑：甲苯顯色劑：0.5%醋酸鎂甲醇溶液第8頁/共17頁四、思考題四、思考題1在實驗過程中采用pH梯度萃取法分離游離蒽醌，萃取過程中若出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，應如何處理？2大黃酚和大黃素甲醚結構相似，怎樣分離？第9頁/共17頁 蘆薈大黃素的分離留存在分液漏斗中的乙醚液，用0.5%NaOH水溶液每次15ml萃取34次。乙醚溶液再以蒸餾水萃取23次，以洗去堿液。合并NaOH和水的提取液，加鹽酸調pH23

6、，放置。抽濾析出沉淀，收集沉淀，經水洗，抽干移至表面皿上，干燥后稱重。第10頁/共17頁蒽蒽醌醌的的提提取取與與分分離離提取方法提取方法 分離方法分離方法 堿溶酸沉法蒽醌苷和游蒽醌苷和游離蒽醌的分離蒽醌的分離離利用利用PH梯度萃取梯度萃取法分離法分離有機溶劑提取法利用色譜法分離利用色譜法分離游離蒽游離蒽醌的分醌的分離離蒽醌苷蒽醌苷的分離的分離第11頁/共17頁蒽醌苷蒽醌苷的分離的分離游離蒽醌游離蒽醌的分離的分離提取方法分離方法分離方法有機溶劑有機溶劑提取法提取法常用甲醇或常用甲醇或乙醇提取，乙醇提取，可將不同極可將不同極性或類型的性或類型的醌類成分都醌類成分都提取出提取出來，得到總來，得到總醌

7、類再進行醌類再進行分離。分離。堿溶酸沉堿溶酸沉法法適用于具適用于具有酚羥基有酚羥基的醌類化的醌類化合物，由合物，由于其可溶于其可溶于堿液，于堿液，加酸后又加酸后又沉沉淀出。淀出。 游離蒽醌與蒽游離蒽醌與蒽醌苷的分離醌苷的分離利用苷與利用苷與苷元極性苷元極性不同，溶不同，溶解度不同解度不同的特點進的特點進行分離。行分離。pH梯度梯度萃取法萃取法此法是分此法是分離游離蒽離游離蒽醌最常用醌最常用的方法。的方法。是利用其是利用其酸性的差酸性的差異進行分異進行分離的。離的。（三）（三） 蒽醌類化合物的提取與分離蒽醌類化合物的提取與分離色譜法色譜法常用的吸常用的吸附劑有硅附劑有硅膠和聚酰膠和聚酰胺，慎用胺，慎用氧化鋁，氧化鋁，因羥基蒽因羥基蒽醌能與氧醌能與氧化鋁形成化鋁形成牢固的螯牢固的螯合物，難合物，難以洗脫。以洗脫。蒽苷的分蒽苷的分離比苷元離比苷元困難，分