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文檔簡介
勻漿液上清液沉淀粗酶液以對硝基苯酚的絕對量(mol數(shù))為橫坐標,od405nm值為縱坐標,繪制標準曲線。求出pnp的克分子消光系數(shù)()值。8.80103( mol/l)-1cm-12.2.2 酶活力的測定酶活力的測定以0號管調(diào)零點,測定各管的od405nm值,從對照標準曲線求出產(chǎn)物的mol數(shù),算出酶活力。avc= (mg/ml)vtb=(u/ml) 21蛋白濃度酶活力計算:式中:a為稀釋倍數(shù),b為由標準曲線查得的pnp mol數(shù),t為反應時間,c為由標準曲線查得的蛋白mg數(shù),v1為測定酶活力所用的酶量(ml數(shù)) v2為測定酶活力所用的酶量(ml數(shù))酶的比活力(u/mg) 純化倍數(shù)=各步比活力/第一步比活力得率%=各步總活力*100/第一步總活力 酶活力(u/ml)蛋白濃度(mg/ml)步驟總體積 ml蛋白mg/ml總蛋白mg酶活力u/ml總活力u比活力u/mg純化倍數(shù)得率%勻漿過濾液4007.24 20.3 正丁醇處理上清液470 33.8 0.35飽和(nh4)2so4上清液440 35.3 0.7飽和(nh4)2so4沉淀溶解透析上清液40.3 314.7 deae-32酶液9.63.82 1002.2 sephadex g75酶液13.20.49 451.5
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