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文檔簡介
1、實驗報告實驗人員:孫芳 班次:7年制2班 組別:2 日期:2014/9/24 指導(dǎo)老師:沈建新小組成員:xxx,yyy,zz試驗號和題目:一、刺激強度、刺激頻率對骨骼肌收縮的影響實驗?zāi)康模?、了解并熟悉計算機生物機能實驗系統(tǒng)的組成和基本使用方法2、制備具有生理活性的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本3、觀察記錄刺激強度、刺激頻率對骨骼肌收縮的影響實驗對象:蛙實驗藥品與器材:任氏液;生物信號采集系統(tǒng),蛙類手術(shù)器械,蛙搗毀針,保護電極,張力換能器,萬能支架、連接導(dǎo)線等。實驗方法:1、 坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本的制備:1) 洗干凈實驗動物 2) 雙毀髓:找到枕骨大孔處將刺蛙針刺入1-2mm,分別搗損腦組織和脊髓。3)
2、剝制后肢,分離一側(cè)后肢 4) 分離坐骨神經(jīng),穿線備用 5) 游離腓腸肌,肌腱結(jié)扎備用 6) 標本檢驗。2、 連接實驗裝置: 將換能器的輸出線接至bl-420f生理記錄裝置的1通道,保護電極接至電脈沖輸出通道。然后把制備好的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本棉線的另一端接在張力換能器上,將坐骨神經(jīng)通過保護電極接至電脈沖刺激輸出通道,而腓腸肌肌腱端的棉線與張力換能器簧片相連,保持適度松緊并與桌面垂直。3、 2、實驗記錄:開機后進入實驗 先用單刺激,找出閾強度、最適刺激強度;然后固定最適刺激強度,用連續(xù)單刺激,找出出現(xiàn)完全強直收縮時的最小刺激頻率。實驗結(jié)果: 1、 刺激強度與肌肉的收縮關(guān)系實驗ba4.0s8.0g
3、圖1 刺激強度與骨骼肌收縮的關(guān)系(蛙坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本)a.肌肉收縮強度(右側(cè)為標尺);b.刺激標記(單位為v)圖片中,在低于0.090v的電壓刺激時,肌肉不發(fā)生收縮,說明在較低的電位刺激時,并不能引起肌肉發(fā)生收縮反應(yīng)。而隨著刺激強度的增大,用0.095v電壓刺激的時候,蛙的腓腸肌收縮一次,表明神經(jīng)接受刺激,興奮沿神經(jīng)傳導(dǎo)至腓腸肌,引起腓腸肌肌膜電位發(fā)生變化,同時興奮收縮,這說明蛙坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本的閾電位為0.090-0.095v之間接近0.095v。隨著刺激強度的不斷增加,有較多的神經(jīng)纖維興奮,肌肉的收縮反應(yīng)也相應(yīng)逐步增大。當用0.135v以上的電壓刺激時,肌肉的收縮強度不再隨著電壓的
4、變大而變大,表明蛙坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本的最適刺激強度為接近0.135v(0.130v-0.135v之間)。2、 刺激頻率與肌肉收縮的關(guān)系實驗ab20.0g4.0s圖2、 刺激頻率與肌肉收縮的關(guān)系實(現(xiàn)代實驗)a.肌肉收縮強度(右側(cè)為標尺);b.刺激標記(單位:hz,v)在用強度為1.00v的電壓改變頻率刺激神經(jīng)時,肌肉的收縮頻率隨著刺激電流頻率的變大而發(fā)生變化。首先,在1hz的電流刺激神經(jīng)干時,肌肉出現(xiàn)單收縮,其大小形狀相同;隨著頻率的逐漸變大,當刺激頻率為3hz時肌肉發(fā)生不完全強直收縮,標本呈現(xiàn)快速連續(xù)顫動,張力曲線成鋸齒狀;刺激頻率越來越大,重疊區(qū)域越來越大,最后在頻率到達15hz時,發(fā)生
5、完全強直收縮,肌肉呈現(xiàn)一持久強力收縮,張力曲線平滑并高于單收縮與不完全強直收縮。結(jié)果分析討論 1、從刺激到產(chǎn)生收縮的過程:腓腸肌的收縮是由支配它的坐骨神經(jīng)興奮引起的,坐骨神經(jīng)末梢和腓腸肌靠近處形成神經(jīng)-肌肉接頭。坐骨神經(jīng)干受到刺激后,神經(jīng)細胞膜上離子通道開放,引起膜內(nèi)外電位發(fā)生變化,膜去極化達到閾電位水平后產(chǎn)生動作電位(單個閾下刺激是不能產(chǎn)生動作電位的)。動作電位產(chǎn)生后會沿著細胞纖維傳至神經(jīng)末梢,軸突末梢膜去極化,引發(fā)該處特有的電壓門控性鈣離子通道開放,細胞間隙中的鈣離子順化學梯度進入軸突末梢,觸發(fā)其內(nèi)囊泡的移動、融合和排放遞質(zhì)。遞質(zhì)與終板膜上相應(yīng)受體結(jié)合使終板膜上的離子通道開放形成終板電位,
6、當終板膜處的肌細胞膜的靜息電位因去極化達閾電位水平時產(chǎn)生動作電位傳到整個肌細胞將引起肌肉興奮,肌肉通過粗細肌絲的滑行完成興奮收縮耦聯(lián)過程,出現(xiàn)一次機械收縮。2、刺激強度與頻率和肌肉收縮的關(guān)系:單根神經(jīng)纖維或肌纖維對刺激的反應(yīng)是“全或無”式的。但在神經(jīng)纖維肌肉標本中,則表現(xiàn)為當刺激強度很小時(閾下刺激),不能引起神經(jīng)纖維動作電位的產(chǎn)生和肌肉的收縮;當刺激強度在一定范圍內(nèi)變動時,肌肉收縮的幅度與之成正比。因為一條坐骨神經(jīng)干是由許多興奮性不同粗細不等的神經(jīng)纖維所組成的。弱刺激只能使其中少量興奮性高的神經(jīng)纖維先興奮,并引起它所支配的少量肌纖維收縮。隨著刺激強度逐漸增大,發(fā)生興奮的神經(jīng)纖維數(shù)目逐漸增多,
7、其所引起收縮的肌纖維數(shù)目亦增多,結(jié)果肌肉收縮幅度隨刺激強度的增加而增強。當刺激達到某一強度時,神經(jīng)干中全部神經(jīng)纖維興奮,它們所支配的全部肌纖維也都發(fā)生興奮和收縮,從而引起肌肉的最大收縮。此后,若再繼續(xù)增強刺激強度,肌肉收縮反應(yīng)不再繼續(xù)增大??梢娫谝欢ǚ秶鷥?nèi),骨骼肌收縮力的大小決定于刺激的強度。3、刺激頻率與肌肉收縮的關(guān)系: 蛙腓腸肌在收縮時,肌細胞會相繼出現(xiàn)絕對不應(yīng)期、相對不應(yīng)期、超常期和低常期,若在相對不應(yīng)期或者超常期早期給予細胞另外一個刺激,肌細胞的第一次興奮正處于舒張期,而新的刺激會使得肌肉發(fā)生收縮,這樣肌肉會出現(xiàn)持續(xù)收縮的狀態(tài),稱之為不完全強直收縮;但若在肌細胞興奮地低常期或者超常期后
8、期給予一個新的刺激,肌細胞此時正處于收縮狀態(tài),新的刺激也會使得細胞收縮,兩次收縮效果相疊加,肌肉處于持續(xù)最大收縮狀態(tài),此稱之為完全強直收縮。不同頻率的電脈沖刺激神經(jīng)時,肌肉會產(chǎn)生不同的收縮反應(yīng)。若刺激頻率較低,每次刺激的時間間隔超過肌肉單次收縮的持續(xù)時間,則肌肉的反應(yīng)表現(xiàn)為一連串的單收縮;若刺激頻率逐漸增加,刺激間隔逐漸縮短,肌肉收縮的反應(yīng)可以融合,開始表現(xiàn)為不完全強直收縮,以后成為完全強直收縮。4、 為什么刺激頻率增高肌肉收縮的幅度也增大?隨著刺激頻率的增高,各次刺激引起的收縮過程發(fā)生融合而疊加起來,這時肌肉強直收縮產(chǎn)生的張力大于單收縮,這可能與連續(xù)刺激肌肉時,從肌質(zhì)網(wǎng)重復(fù)釋放的ca2+濃度,使橫橋得以有較長的時間持續(xù)活動有關(guān)注意事項 1 經(jīng)常用任氏液浸潤標本,保持生理活性。2. 分離肌肉時應(yīng)按層次剪切。分離神經(jīng)時,必須將周圍的結(jié)締組織剝離干凈。切勿讓蟾蜍的皮膚分泌物和血液等沾污神經(jīng)和肌肉,也不
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