第10章 吸光光度法

1、第第10章章 吸光光度法吸光光度法(Spectrophotometry) 基于被測(cè)物質(zhì)的分子對(duì)光的選擇性基于被測(cè)物質(zhì)的分子對(duì)光的選擇性吸收而建立的分析方法。吸收而建立的分析方法。10.1.1 物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收1. 光的分類(lèi)光的分類(lèi)光是一種電磁波光是一種電磁波按波長(zhǎng)不同分類(lèi)按波長(zhǎng)不同分類(lèi)：x射線，紫外光，可見(jiàn)光，射線，紫外光，可見(jiàn)光， 紅外光，微波等。紅外光，微波等。10.1 物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收和光吸收的基本定律物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收和光吸收的基本定律hchE400 nm750 nm電磁波譜范圍表電磁波譜范圍表2. 分子吸收光譜產(chǎn)生原理分子吸收光譜產(chǎn)生原理 由物質(zhì)的價(jià)電子

2、能級(jí)躍遷由物質(zhì)的價(jià)電子能級(jí)躍遷 （能量差在（能量差在120eV）而）而產(chǎn)生的吸收光譜產(chǎn)生的吸收光譜，是是紫外及可見(jiàn)分光光度法紫外及可見(jiàn)分光光度法本章本章研究?jī)?nèi)容。研究?jī)?nèi)容。 由物質(zhì)的分子振動(dòng)能級(jí)（能量差約由物質(zhì)的分子振動(dòng)能級(jí)（能量差約0.05l eV）和）和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)（能量差小于轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)（能量差小于0.05 eV）的躍遷而產(chǎn)生的吸收）的躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜，為光譜，為紅外吸收光譜法紅外吸收光譜法用于分子結(jié)構(gòu)的研究。用于分子結(jié)構(gòu)的研究。說(shuō)明：物質(zhì)只有對(duì)特定波長(zhǎng)說(shuō)明：物質(zhì)只有對(duì)特定波長(zhǎng)(能量能量)的光才能有吸收。的光才能有吸收。 吸收光譜是由物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光具有選擇性吸收吸收光譜是由物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)

3、的光具有選擇性吸收 作用而產(chǎn)生的。作用而產(chǎn)生的。3. 有色溶液對(duì)光的選擇性吸收有色溶液對(duì)光的選擇性吸收 單色光、復(fù)合光、互補(bǔ)光單色光、復(fù)合光、互補(bǔ)光單色光單色光:具有同一波長(zhǎng)的光具有同一波長(zhǎng)的光復(fù)合光復(fù)合光:包含不同波長(zhǎng)的光包含不同波長(zhǎng)的光互補(bǔ)光互補(bǔ)光: 若兩種不同顏色若兩種不同顏色的單色光按一定的強(qiáng)的單色光按一定的強(qiáng)度比例混合得到白光，度比例混合得到白光，這兩種單色光為互補(bǔ)這兩種單色光為互補(bǔ)光。光。藍(lán)藍(lán)黃黃紫紫綠綠綠藍(lán)綠藍(lán)橙橙紅紅藍(lán)綠藍(lán)綠 有色溶液對(duì)光的吸收有色溶液對(duì)光的吸收完全透過(guò)完全透過(guò)吸收黃色光吸收黃色光溶液的顏色與其吸收掉光的顏色為互補(bǔ)色。溶液的顏色與其吸收掉光的顏色為互補(bǔ)色。 物質(zhì)

4、的電子結(jié)構(gòu)不同，價(jià)電子躍遷所需能量不同，物質(zhì)的電子結(jié)構(gòu)不同，價(jià)電子躍遷所需能量不同，所吸收光的波長(zhǎng)不同，因此溶液對(duì)光的選擇性吸收，所吸收光的波長(zhǎng)不同，因此溶液對(duì)光的選擇性吸收，使其呈現(xiàn)不同顏色。使其呈現(xiàn)不同顏色。有色溶液呈現(xiàn)不同顏色的原因有色溶液呈現(xiàn)不同顏色的原因:復(fù)合光復(fù)合光10.1.2 光吸收的基本定律光吸收的基本定律透光率：透光率：0IITtT 取值為：取值為：0.0 % 100.0 %全部吸收全部吸收:T = 0.0 %全部透射全部透射: T = 100.0 %入射光入射光 I0透射光透射光 Itb有色溶液濃度為有色溶液濃度為 C mol/LTAlg吸光度吸光度:1. Lambert-

5、Beer定律定律KbCA取值為：取值為：0 光度法定量依據(jù)光度法定量依據(jù) 一束單色光通過(guò)含有吸光物質(zhì)的溶液后，溶一束單色光通過(guò)含有吸光物質(zhì)的溶液后，溶液的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度及吸收層厚度成正液的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度及吸收層厚度成正比。這是進(jìn)行比。這是進(jìn)行定量分析的理論基礎(chǔ)定量分析的理論基礎(chǔ)。 溶液中含有多種吸光物質(zhì)時(shí)，由于各吸光物溶液中含有多種吸光物質(zhì)時(shí)，由于各吸光物質(zhì)對(duì)某一波長(zhǎng)的單色光均有吸收作用，若各吸光質(zhì)對(duì)某一波長(zhǎng)的單色光均有吸收作用，若各吸光物質(zhì)之間相互不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，該波長(zhǎng)下溶液的物質(zhì)之間相互不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，該波長(zhǎng)下溶液的總吸光度應(yīng)等于各吸光物質(zhì)的吸光度之和。這一總吸光度應(yīng)等于各

6、吸光物質(zhì)的吸光度之和。這一規(guī)律稱(chēng)規(guī)律稱(chēng)吸光度的加和性吸光度的加和性。朗伯朗伯-比爾定律表明：比爾定律表明：吸光系數(shù)吸光系數(shù) K 比例常數(shù)比例常數(shù)b：吸光物質(zhì)的厚度：吸光物質(zhì)的厚度 光程（光程（cm）C：吸光物質(zhì)的濃度（：吸光物質(zhì)的濃度（ g / L，mol / L等）等）入射光波長(zhǎng)入射光波長(zhǎng)物質(zhì)的性質(zhì)物質(zhì)的性質(zhì)溫度等溫度等影響影響K的因素的因素:C：mol / L 摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù) L mol 1 cm -1C： g / L 吸光系數(shù)吸光系數(shù) K L g 1 cm -1bCAKbCA K的單位：取決于的單位：取決于C的單位的單位2. 摩爾吸光系數(shù)和桑德?tīng)栰`敏度摩爾吸光系數(shù)和桑德?tīng)栰`敏度

7、 摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù) 其大小反應(yīng)了吸光物質(zhì)對(duì)光的其大小反應(yīng)了吸光物質(zhì)對(duì)光的吸收能力吸收能力, ,也反應(yīng)了分光光度法測(cè)也反應(yīng)了分光光度法測(cè)定吸光物質(zhì)的靈敏度。定吸光物質(zhì)的靈敏度。 的獲得：實(shí)驗(yàn)測(cè)定的獲得：實(shí)驗(yàn)測(cè)定 對(duì)同一吸光物質(zhì)，對(duì)同一吸光物質(zhì)，max 處的處的 最大最大, ,即在即在max處測(cè)處測(cè)定的靈敏度最高。定的靈敏度最高。 105低靈敏度低靈敏度中等靈敏度中等靈敏度高靈敏度高靈敏度 對(duì)同一種待測(cè)物質(zhì)，不同的方法具有不同的對(duì)同一種待測(cè)物質(zhì)，不同的方法具有不同的 ，表明具有不同的靈敏度。表明具有不同的靈敏度。 桑德?tīng)柹５聽(tīng)?(Sandell) 靈敏度靈敏度 S2cmugMS 當(dāng)儀器的檢

8、測(cè)極限當(dāng)儀器的檢測(cè)極限 A=0.001時(shí)，單位截面積光程內(nèi)所時(shí)，單位截面積光程內(nèi)所能檢測(cè)出來(lái)的吸光物質(zhì)的最低含量，單位為能檢測(cè)出來(lái)的吸光物質(zhì)的最低含量，單位為 gcm-2 。S 越小，測(cè)定的靈敏度越高。越小，測(cè)定的靈敏度越高。例題例題 一單色光通過(guò)1cm厚的有色溶液是強(qiáng)度減弱20%,如通過(guò)5cm的相同溶液,其強(qiáng)度減弱了百分之幾？A1 = Kb1C A2 = Kb2C 2121bbAAA1 = lgT1 A2 = lgT2T1802121lglgbbTTT232.8減弱了67.210.2 吸收光譜（吸收曲線）吸收光譜（吸收曲線） 測(cè)量某物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)單色光的吸收程度，以波長(zhǎng)測(cè)量某物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)單

9、色光的吸收程度，以波長(zhǎng)（ ）為橫坐標(biāo)，吸光度（為橫坐標(biāo)，吸光度（A）為縱坐標(biāo)，繪制吸光度隨波）為縱坐標(biāo)，繪制吸光度隨波長(zhǎng)的變化曲線，即為吸收光譜。長(zhǎng)的變化曲線，即為吸收光譜。1. 最大吸收波長(zhǎng)最大吸收波長(zhǎng)max ：光吸收程度光吸收程度最大處的波長(zhǎng)。最大處的波長(zhǎng)。2. 同一物質(zhì)濃度增加時(shí)，吸收曲線同一物質(zhì)濃度增加時(shí)，吸收曲線形狀相同，形狀相同，max不變，吸光度增大。不變，吸光度增大。 可見(jiàn)光光度法：可見(jiàn)光光度法：測(cè)定的物質(zhì)要有顏色測(cè)定的物質(zhì)要有顏色參比溶液的選擇參比溶液的選擇參比的作用：扣除非待測(cè)組分的吸收。（利用參比溶液來(lái)調(diào)節(jié)儀器的零點(diǎn)） A 總 = A 待測(cè)物 + A 干擾 + A 池令

10、A 參比 = A干擾 + A 池 = 0參比溶液的選擇： （1）當(dāng)試液及顯色劑均無(wú)色時(shí)，可用蒸餾水作參比溶液；（2）顯色劑為無(wú)色，而被測(cè)試液中存在其他有色離子，可用不加顯色劑的被測(cè)試液作參比溶液；（3）顯色劑有顏色，可選擇不加試樣溶液的試劑空白作參比溶液；（4）顯色劑和試劑均有顏色，可將一份試液加入適當(dāng)掩蔽劑，將被測(cè)組分掩蔽起來(lái)，使之不再與顯色劑作用，而顯色劑及其他試劑均按試液測(cè)定方法加入，以此作為參比溶液，這樣就可以消除顯色劑和一些共存組分的干擾；（5）改變加入試劑的順序，使被測(cè)組分不發(fā)生顯色反應(yīng)，可以此溶液作為參比溶液消除干擾。10.3 顯色反應(yīng)及其影響因素顯色反應(yīng)及其影響因素1. 顯色反

11、應(yīng)顯色反應(yīng) 待測(cè)物質(zhì)是無(wú)色或很淺的顏色，需要選適當(dāng)?shù)拇郎y(cè)物質(zhì)是無(wú)色或很淺的顏色，需要選適當(dāng)?shù)脑噭┡c被測(cè)離子反應(yīng)生成有色化合物再進(jìn)行測(cè)定，試劑與被測(cè)離子反應(yīng)生成有色化合物再進(jìn)行測(cè)定，此反應(yīng)稱(chēng)為此反應(yīng)稱(chēng)為顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)，所用的試劑稱(chēng)為，所用的試劑稱(chēng)為顯色劑顯色劑。10.3.1 顯色反應(yīng)和顯色劑顯色反應(yīng)和顯色劑顯色反應(yīng)的類(lèi)型：顯色反應(yīng)的類(lèi)型：主要有氧化還原反應(yīng)和絡(luò)合反應(yīng)主要有氧化還原反應(yīng)和絡(luò)合反應(yīng)兩大類(lèi)，而絡(luò)合反應(yīng)是最主要的。兩大類(lèi)，而絡(luò)合反應(yīng)是最主要的。顯色反應(yīng)的要求：顯色反應(yīng)的要求：a. 選擇性好選擇性好b. 靈敏度高靈敏度高 (104)c. 產(chǎn)物的化學(xué)組成穩(wěn)定產(chǎn)物的化學(xué)組成穩(wěn)定d. 化學(xué)性質(zhì)

12、穩(wěn)定化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定e. 反應(yīng)物和產(chǎn)物有明顯的顏色差別反應(yīng)物和產(chǎn)物有明顯的顏色差別 ( 60 nm)2. 顯色劑顯色劑無(wú)機(jī)顯色劑無(wú)機(jī)顯色劑: 過(guò)氧化氫，硫氰酸銨，碘化鉀過(guò)氧化氫，硫氰酸銨，碘化鉀有機(jī)顯色劑：有機(jī)顯色劑： 磺基水楊酸，丁二酮肟，磺基水楊酸，丁二酮肟，1,10-鄰二氮菲，鄰二氮菲， 二苯硫腙等二苯硫腙等3. 多元絡(luò)合物多元絡(luò)合物混配化合物混配化合物 Nb-5-Br-PADAP-酒石酸酒石酸 V-PAR-H2O 離子締合物離子締合物 AuCl4-羅丹明羅丹明B金屬離子金屬離子-配體配體-表面活性劑體系表面活性劑體系 Mo-水楊基熒光酮水楊基熒光酮-CTMAB 10.3.2 影響顯色反應(yīng)的

13、因素影響顯色反應(yīng)的因素溶液酸度（溶液酸度（pH值及緩沖溶液）值及緩沖溶液）顯色劑的用量顯色劑的用量顯色反應(yīng)時(shí)間顯色反應(yīng)時(shí)間顯色反應(yīng)溫度顯色反應(yīng)溫度溶劑溶劑干擾離子干擾離子10.4.1 測(cè)量波長(zhǎng)和標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作測(cè)量波長(zhǎng)和標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作1. 測(cè)量波長(zhǎng)的選擇測(cè)量波長(zhǎng)的選擇無(wú)干擾無(wú)干擾: 選擇選擇 max有干擾有干擾: 干擾最小，吸收最大干擾最小，吸收最大A A 10.4 吸光光度分析及誤差控制吸光光度分析及誤差控制定量方法定量方法: 標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)曲線法AxCxAC0配制系列待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)溶液配制系列待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)溶液: C1、C2Cn 相同條件下測(cè)吸光度相同條件下測(cè)吸光度: A1、A2An 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

14、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作AC0參比溶液選擇不當(dāng)，參比溶液選擇不當(dāng)，參比與待測(cè)液的吸收池厚度不等，參比與待測(cè)液的吸收池厚度不等，吸收池位置不妥，吸收池位置不妥，吸收池透光面不清潔等，吸收池透光面不清潔等，被測(cè)物質(zhì)在低濃度時(shí)顯色不完全等。被測(cè)物質(zhì)在低濃度時(shí)顯色不完全等。 標(biāo)準(zhǔn)曲線不過(guò)原點(diǎn)的原因標(biāo)準(zhǔn)曲線不過(guò)原點(diǎn)的原因:10.4.2 對(duì)朗伯對(duì)朗伯- -比爾定律的偏離比爾定律的偏離AC0負(fù)偏離負(fù)偏離1. 非單色光引起的偏離非單色光引起的偏離2. 介質(zhì)不均勻引起的偏離介質(zhì)不均勻引起的偏離3. 由于吸光物質(zhì)本身的化學(xué)反應(yīng)引起的偏離由于吸光物質(zhì)本身的化學(xué)反應(yīng)引起的偏離A 解離解離B

15、絡(luò)合絡(luò)合C 締合締合正偏離正偏離4. 顯色反應(yīng)的干擾及其消除：顯色反應(yīng)的干擾及其消除：10.4.3 吸光度測(cè)量的誤差吸光度測(cè)量的誤差 吸光度標(biāo)尺刻度不均勻，吸光度標(biāo)尺刻度不均勻，吸光度的讀數(shù)誤差即吸光度的讀數(shù)誤差即為濃度的測(cè)量誤差，故吸光度應(yīng)控制一定的讀數(shù)范圍。為濃度的測(cè)量誤差，故吸光度應(yīng)控制一定的讀數(shù)范圍。%100%100cdcAdAEr透光率讀數(shù)的絕對(duì)誤差是均勻的透光率讀數(shù)的絕對(duì)誤差是均勻的因此，測(cè)量誤差與透光率讀數(shù)范圍的關(guān)系：因此，測(cè)量誤差與透光率讀數(shù)范圍的關(guān)系：%100lnTTTEr%100AdAEr%100lnTTdTT為透光率讀數(shù)的絕對(duì)誤差，一般為為透光率讀數(shù)的絕對(duì)誤差，一般為0.

16、01。TTAln434. 0lgTdTdA434. 0Er-T 關(guān)系圖：關(guān)系圖：T = 36.8 %，A = 0.434 時(shí)誤差最小。時(shí)誤差最小。 Er 4%時(shí)時(shí): T: 15%65 % A: 0.20.810.5 示差吸光光度法示差吸光光度法1. 示差吸光光度法的原理示差吸光光度法的原理 (高濃度高濃度)常規(guī)法常規(guī)法: 以試劑空白為參比以試劑空白為參比示差法示差法: 以濃度為以濃度為 Cs 的標(biāo)準(zhǔn)溶液為參比的標(biāo)準(zhǔn)溶液為參比 (CsCx)示差法定量依據(jù)示差法定量依據(jù)ACCxAxbCAsxAA )(sxCCbxCbAsxxCCC2. 示差吸光光度法的誤差示差吸光光度法的誤差常規(guī)法常規(guī)法T0 5

17、1050100示差法示差法T0 5 1050100TsTx例：習(xí)題例：習(xí)題10-8例題例題 一未知濃度的有色溶液采用普通光度法一未知濃度的有色溶液采用普通光度法,其其吸光度值為吸光度值為1.22,相同條件下測(cè)得同一物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)相同條件下測(cè)得同一物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度為溶液的吸光度為1.0, 如改用示差法測(cè)定未知濃如改用示差法測(cè)定未知濃度的溶液度的溶液,其吸光度有多大？其吸光度有多大？解解:普通光度法普通光度法: As=1.0 Ts=10% . 示差法示差法: %100ST擴(kuò)大了擴(kuò)大了10倍倍,%60XT22. 0SAAx=1.22 Tx=6% 1. 弱酸弱堿離解常數(shù)的測(cè)定弱酸弱堿離解常數(shù)的測(cè)定HR

18、= H+ + R-R RA HR HRC= HR + R10. 6 吸光光度分析法的應(yīng)用吸光光度分析法的應(yīng)用配制高酸度、高堿度、某配制高酸度、高堿度、某pH條件下總濃度條件下總濃度 C 相同的三份相同的三份HR 溶液。溶液。繪制酸式繪制酸式 HR 或堿式或堿式 R- 的吸的吸收曲線，選擇收曲線，選擇最佳最佳吸收波長(zhǎng)。吸收波長(zhǎng)。在該波長(zhǎng)處，測(cè)某在該波長(zhǎng)處，測(cè)某pH條件下條件下HR溶液的吸光度溶液的吸光度A。aaRaHRKHKAKHHAARbHRbARHRaaRaHRKHCKbKHHCbA(4) 當(dāng)高酸度時(shí)，當(dāng)高酸度時(shí)， HR C，則，則AHR HRbC。(5) 當(dāng)?shù)退岫葧r(shí)，當(dāng)?shù)退岫葧r(shí)， R C，

19、則，則AR RbC。根據(jù)分布系數(shù)的概念根據(jù)分布系數(shù)的概念A(yù)AAApHpKHRRalg說(shuō)明：說(shuō)明：AHR 酸性溶液中全部以酸性溶液中全部以HR存在時(shí)的吸光度存在時(shí)的吸光度 AR 堿性溶液中全部以堿性溶液中全部以R存在時(shí)的吸光度存在時(shí)的吸光度 A 某某pH下下HR+R的吸光度的吸光度 且三個(gè)吸光度的測(cè)定波長(zhǎng)相同且三個(gè)吸光度的測(cè)定波長(zhǎng)相同RHRaAAAAHK2. 絡(luò)合物組成的測(cè)定絡(luò)合物組成的測(cè)定（1）飽和法（摩爾比法）飽和法（摩爾比法）M + nR = MRn 固定固定CM，改變，改變CR，使其從，使其從 0 開(kāi)始增大，開(kāi)始增大， 配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。 以試劑空白為參比在特定波長(zhǎng)測(cè)定

20、以試劑空白為參比在特定波長(zhǎng)測(cè)定A。 以以 A 對(duì)對(duì) CR/CM 作圖。作圖。ACR/CMn（2）連續(xù)變化法（等摩爾系列法）連續(xù)變化法（等摩爾系列法） 固定固定CM+ CR =C （CM / C 從從 0 1），）， 配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。 在絡(luò)合物的在絡(luò)合物的 max 處測(cè)定處測(cè)定A。 以以 A對(duì)對(duì) CM/C 作圖作圖 , 求得求得 CR / CM =n。0.501.0ACM / C0.33CM / C =0.5，n = 1CM / C =0.33，n = 2M + nR = MRn1. 解釋下列名詞：解釋下列名詞：a. 光吸收曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線；光吸收曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線； b. 互補(bǔ)色

21、光及單色光；互補(bǔ)色光及單色光； c. 吸光度及吸光度及透射比。透射比。答：答：a、光吸收曲線：描述溶液對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收情況的關(guān)、光吸收曲線：描述溶液對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收情況的關(guān)系曲線，又稱(chēng)吸收光譜曲線。是測(cè)量某種物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)單色光系曲線，又稱(chēng)吸收光譜曲線。是測(cè)量某種物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)單色光的吸收程度，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖而得出的曲的吸收程度，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖而得出的曲線。線。標(biāo)準(zhǔn)曲線：在選擇的實(shí)驗(yàn)條件下分別測(cè)量一系列不同含量的標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線：在選擇的實(shí)驗(yàn)條件下分別測(cè)量一系列不同含量的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)溶液中待測(cè)組分的含量為橫坐標(biāo)，吸光度溶液的吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)

22、溶液中待測(cè)組分的含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，得到一條通過(guò)原點(diǎn)的直線，稱(chēng)為標(biāo)準(zhǔn)曲線，又稱(chēng)為縱坐標(biāo)作圖，得到一條通過(guò)原點(diǎn)的直線，稱(chēng)為標(biāo)準(zhǔn)曲線，又稱(chēng)工作曲線。工作曲線。b、互補(bǔ)光：兩種光按一定的強(qiáng)度比例混合可成為白光，這兩種、互補(bǔ)光：兩種光按一定的強(qiáng)度比例混合可成為白光，這兩種光稱(chēng)為互補(bǔ)光。光稱(chēng)為互補(bǔ)光。 單色光：具有單一波長(zhǎng)的光。單色光：具有單一波長(zhǎng)的光。c、吸光度：、吸光度：A=lgI0/I，其物理意義是有色溶液吸收單入射光的程，其物理意義是有色溶液吸收單入射光的程度。度。透射比：透過(guò)光強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度的比值稱(chēng)為透射比，又稱(chēng)透光透射比：透過(guò)光強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度的比值稱(chēng)為透射比，又稱(chēng)透光度，用

23、度，用T表示，表示，T=I/I0。2. 符合朗伯-比爾定律的某一吸光物質(zhì)溶液，其最大吸收波長(zhǎng)和肖光度隨吸光物質(zhì)濃度的增加其變化情況如何？答：最大入射光波長(zhǎng)max不隨濃度c的變化而改變，吸光度A與c成正比。即最大吸收波長(zhǎng)不變，吸光度增大3. 吸光物質(zhì)的摩爾吸收系數(shù)與下列哪些因素有關(guān)？入射光波長(zhǎng)，被測(cè)物質(zhì)的濃度，絡(luò)合物的解離度，掩蔽劑。答：摩爾吸收系數(shù)與入射光波長(zhǎng)有關(guān)，與被測(cè)物質(zhì)的濃度、絡(luò)合物的解離度、掩蔽劑無(wú)關(guān)。4. 試說(shuō)明吸光光度法中標(biāo)準(zhǔn)曲線不通過(guò)原點(diǎn)的原因。答：造成這種情況的原因比較復(fù)雜，可能是由于參比溶液選擇不當(dāng)，吸收池位置不妥，吸收池透光面不清潔等原因所引起的。5. 在吸光光度中，影響顯

24、色反應(yīng)的因素有哪些？答：影響顯色反應(yīng)的主要因素有：溶液酸度，顯色劑用量，顯色時(shí)間，顯色溫度，溶劑及共存離子等。6. 酸度對(duì)顯色反應(yīng)的影響主要表現(xiàn)在哪些方面？答：酸度對(duì)顯色反應(yīng)的影響主要表現(xiàn)為：影響顯色劑的平衡濃度的顏色；影響被測(cè)金屬離子的存在狀態(tài)；影響絡(luò)合物的組成等。7. 在吸光光度法中，選擇入射光波長(zhǎng)的原則是什么？答：選擇入射光時(shí)，若無(wú)干擾時(shí)，選擇最大入射波長(zhǎng)，提高測(cè)定的靈敏度；若有干擾時(shí)，應(yīng)選擇吸收最大，而干擾最小的入射波長(zhǎng)。8. 分光光度計(jì)是由哪些部件組成的？各部件的作用如何？答：8. 分光光度計(jì)是由哪些部件組成的？各部件的作用如何？解：主要部件：光源、單色器、比色皿、檢測(cè)器和顯示裝置。光源可以發(fā)射連續(xù)光譜，是產(chǎn)生入射光的基礎(chǔ)；單色器是將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的裝置，提供單色光作為入射光；比色皿是盛放試液的容器；檢測(cè)器的作用是接受從比色皿發(fā)出的透射光并轉(zhuǎn)換成電信號(hào)進(jìn)行測(cè)量；顯示裝置的作用是把放大的信號(hào)以吸光度A或透射比T的方式顯示或記錄下來(lái)。9. 測(cè)量吸光度時(shí)，應(yīng)如何選擇參比溶液？解：（1）當(dāng)試液及顯色劑均無(wú)色時(shí)，