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文檔簡介

1、bca蛋白濃度測定bc蛋白濃度測定perce®b proe asa kit(試劑盒室溫保存）1。 準(zhǔn)備bsa標(biāo)準(zhǔn)品 按ta配制一系列的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品 原液（sc）：取出一個(gè)amle（內(nèi)含mgml的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品 （此量足夠3個(gè)eplcatio）2.準(zhǔn)備bc工作液（workig regnt,w） （1)用公式計(jì)算總工作液量（標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)待測樣品數(shù))（復(fù)制數(shù)）*(每個(gè)工作液的量）=總的需要的工作液的量例子：3個(gè)待測樣品,每個(gè)樣品2個(gè)復(fù)制所需的工作液量（個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品+個(gè)待測樣品）（2個(gè)復(fù)制數(shù))*（2ml)=48ml工作液note:試管法:每個(gè)試管需2l工作液 微孔板:每個(gè)孔需0ul工作液（例子中需共48

2、ml) (2）b試劑a:b=5：配制適量ba工作液，充分混勻。對(duì)于上面的例子,試管法需要0 baa液1ml ba b液，微孔板法需5ml a液和1l液液加到液中時(shí)，迅速渾濁，但是通過混勻立即變成清澈綠色的工作液.工作液在密閉室溫下可以保存數(shù)天.3.微孔板步驟(樣品與工作液比例1：8）（)。標(biāo)準(zhǔn)液和樣品各5ul加入微孔板中 nt:若樣品有限,可各加0ul（樣品與工作液比例=1：20）（2).每孔加20ul的工作液并且充分震蕩30s.（3).在37度孵育樣品30in，或室溫2。(4).冷卻至室溫。（5）。在酶標(biāo)儀中測量562nm時(shí)的吸光值（)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，再用標(biāo)準(zhǔn)曲線判斷出樣品的蛋白濃度。 not：40590nm的波長均可 fue 1: typcal coor eseesfor sad bgg usgthe standrd es protcol(°/30-miut inc

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