桑螵蛸及其粗提物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響

1、桑螵蛸及其粗提物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響 作者：林璐璐， 牛長纓， 雷朝亮【摘要】 目的研究桑螵蛸及其粗提物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響。方法用四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型，分別觀察桑螵蛸及其粗提物對(duì)小鼠的血糖、體重、飲水量以及一般狀況的影響。結(jié)果與模型組相比較，桑螵蛸高、中、低劑量組都能降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖水平(P<0.01) ，改善其“三多一少”的糖尿病癥狀；桑螵蛸的石油醚提取物、水提物和醇提物均能降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖水平，但石油醚提取物的作用最為顯著（P<0.01），其次是水提物（P<0.05），醇提物的作用最不明顯。結(jié)論桑螵蛸對(duì)

2、四氧嘧啶糖尿病小鼠具有良好的治療作用，且其活性成分主要存在于石油醚提取物中。 【關(guān)鍵詞】 桑螵蛸 粗提物 四氧嘧啶 小鼠 血糖Abstract:ObjectiveTo observe the effects of Ootheca Mantidis and its extracts on alloxan- induced diabetic mice. MethodsThe model of diabetic mice was induced by alloxan, and the effects of Ootheca Mantidis(OM) and its extracts on blood

3、sugar, weight, water-intake and general status were observed. Results(1)The high dose group, the middle dose group and the low dose group of OM all could decrease the blood sugar of mice induced by alloxan (P<0.01), symptoms such as polydipsia, diabetes and polyphagia abated. (2) Compared wit

4、h control groups, the water extract(P<0.05),the ethanol extract and the petroleum ether extract(P0.01) of OM all could decrease the blood sugar of mice induced by alloxan, but the effect of the ethanol extract was not obvious. ConclusionOotheca Mantidis has a good therapeutic effect on alloxa

5、n-induced-diabetic mice, and its active component mostly exists in the petroleum ether extract from Ootheca Mantidis.Key words:Ootheca Mantidis; Extracts; Alloxan; Mice; Blood sugar 我國中藥典籍中所提到的“桑螵蛸”是用以入藥的螳螂卵鞘的總稱，它具有補(bǔ)腎壯陽、固精縮尿的作用，同時(shí)也是用斂精固澀法治療糖尿病的復(fù)方中藥中出現(xiàn)頻率較高的一味動(dòng)物藥，它具有有效減少糖尿病人的尿量以及減少尿糖排出的作用，是臨床藥方中經(jīng)常選用的一

6、味中藥1。但桑螵蛸單方是否具有降低血糖的作用，國內(nèi)尚未有這方面的研究報(bào)道。我們采用桑螵蛸及其粗提物對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠進(jìn)行降血糖的研究,為桑螵蛸的研究、開發(fā)和臨床應(yīng)用提供理論參考。1 材料與儀器1.1 動(dòng)物昆明種小鼠128只，體重1722 g，雄性，由湖北省疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供。室溫控制在2227，自由采食和飲水，小鼠飼料為普通優(yōu)質(zhì)飼料。1.2 試劑及儀器四氧嘧啶（美國Sigma 公司 0.5 g裝）；葡萄糖測定試劑盒（上海名典生物工程有限公司,批號(hào)016M082）；達(dá)美康（天津華津制藥廠，批號(hào) H10910053）；752N型紫外可見分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司) 。1.3

7、藥材桑螵蛸，由湖北省同濟(jì)堂藥店提供。2 方法2.1 桑螵蛸對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響桑螵蛸用水煎煮后，過濾濃縮成1 g/ml的藥液，放入4冰箱保存，待測時(shí)用蒸餾水稀釋。 對(duì)46只小鼠腹腔注射四氧嘧啶(270 mg/kg) , 72 h后從空腹小鼠尾尖取血2測血糖水平，選用血糖水平在11.1 mmol /L以上3的小鼠37只，體重(19.8 ±0.8)g，隨機(jī)分成糖尿病模型組(蒸餾水)，桑螵蛸低、中、高劑量處理組（83.3，416.7，833.3 mg/kg，分別是成人日服用量的1，5，10倍量，成人體重按60 kg計(jì)算）。另取10只正常小鼠作正常對(duì)照(蒸餾水)。各組分別灌胃給藥，1次

8、/d，連續(xù)給藥15 d。于末次給藥后1 h取血測定血糖水平，給藥前測定體重，連續(xù)給藥15 d 后，測定體重和72 h內(nèi)的飲水量用SPSS軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行方差分析，比較各處理組效果。2.2 桑螵蛸粗提物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響桑螵蛸分別用水、95%的乙醇和石油醚提取，用水和95%的乙醇高溫回流，過濾干燥后濃縮成浸膏，分別作為供試品1和2，用石油醚則過夜提取，待揮去石油醚后，殘留物作為供試品3，放入4冰箱保存，待使用時(shí)用蒸餾水稀釋。 將62只小鼠隨機(jī)分成糖尿病模型組(蒸餾水)、桑螵蛸水提物處理組、醇提物處理組、醚提物處理組以及陽性藥物對(duì)照組，腹腔注射四氧嘧啶(270 mg/kg) , 72 h后從

9、空腹小鼠尾靜脈取血測血糖水平，選用血糖水平在11.2 mmol /L以上的小鼠51只，體重(21.0±0.5)g，另取10只正常小鼠做正常對(duì)照(蒸餾水)，分別灌胃給藥（每天給予各提取物83.3 mg/kg，成人日服用量，給予正常對(duì)照組和糖尿病模型組相應(yīng)量的蒸餾水，給予陽性對(duì)照組達(dá)美康9.6 mg/kg成人日服用量，體重按60 kg計(jì)算），1次/d，連續(xù)給藥15 d。于末次給藥后1 h取血測定血糖水平，給藥前測定體重，連續(xù)給藥15 d 后，測定體重和72 h內(nèi)的飲水量。用SPSS軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行方差分析，比較各處理組效果。3 結(jié)果3.1 桑螵蛸對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響3.1.1 桑螵蛸

10、對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響與糖尿病模型組小鼠相比，桑螵蛸低、中、高劑量處理組小鼠血糖水平明顯降低（P<0.01）。在血糖降低的絕對(duì)值方面，各劑量組與糖尿病模型組均存在顯著差異（P<0.05），與正常對(duì)照組比較，各處理組降低小鼠血糖水平與正常對(duì)照小鼠有較小的差距，而此差距是隨著桑螵蛸劑量的降低而逐漸加大的。見表1。表1 桑螵蛸的不同劑量對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響（略）與糖尿病模型組比較，*P<0.05，*P<0.013.1.2 桑螵蛸對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠體重以及飲水量的影響結(jié)果顯示，桑螵蛸低、中、高劑量處理組小鼠給藥后的72 h飲水

11、量與糖尿病模型組相比差異極顯著（P<0.01）；而在小鼠體重方面，與糖尿病模型組相比，桑螵蛸低、中、高劑量處理組小鼠平均體重均明顯較低，其中低劑量處理組差異顯著（P<0.05），中、高劑量處理組差異極顯著（P<0.01）。結(jié)果見表2。表2 桑螵蛸的不同劑量對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的平均體重（略）與糖尿病模型組比較，*P<0.05，*P<0.013.1.3 四氧嘧啶糖尿病小鼠一般狀況的觀察46只小鼠注入四氧嘧啶后，第3天造模動(dòng)物對(duì)比于正常對(duì)照組在進(jìn)食、飲水、尿量的方面均有增加，即“三多一少”的癥狀，第4天后，有3只死亡，6只不達(dá)模

12、型標(biāo)準(zhǔn)。連續(xù)給藥后7 d后，桑螵蛸低、中、高劑量處理組精神逐漸好轉(zhuǎn)，皮毛逐漸恢復(fù)光澤，飲水、飲食、尿量逐漸降低，身體逐漸變胖；而糖尿病模型組則情況較差，皮毛粗亂且無光澤，無活力，身體瘦弱，飲水、飲食和尿量增加較多。給藥15 d以后上述情況更加明顯。3.2 桑螵蛸粗提物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的影響3.2.1 桑螵蛸粗提物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響與糖尿病模型組小鼠相比，桑螵蛸水提取物處理組、乙醇提物處理組以及石油醚提取物處理組的小鼠血糖水平均有所降低，且以石油醚提取物處理組最為明顯（P<0.01），其次是水提取物處理組（P<0.05），乙醇提物處理組則差異不顯著。而

13、與陽性對(duì)照組比較，各處理組（除正常對(duì)照組）降低小鼠血糖水平均有差異，其中石油醚提取物處理組與其差異顯著（P<0.05），其它處理組均有極顯著差異。在血糖降低的絕對(duì)值方面，石油醚提取物處理組與陽性對(duì)照組無顯著差異，與糖尿病模型組有極顯著差異（P<0.01）。結(jié)果見表3。表3 桑螵蛸的不同粗提物對(duì)小鼠的血糖濃度的影響（略）與糖尿病模型組比較，*P<0.05，*P<0.01；與陽性對(duì)照組比較，#P<0.05，# P<0.013.2.2 桑螵蛸粗提物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠體重以及飲水量的影響與糖尿病模型組小鼠相比，桑螵蛸

14、水提取物處理組、石油醚提取物處理組小鼠的72 h飲水量均明顯較少（P<0.01），而與陽性對(duì)照組相比，乙醇提取物處理組差異最顯著（P<0.01），其次是水提取物（P<0.05），石油醚提取物處理組則不明顯。在體重方面，石油醚提取物處理組與糖尿病模型組差異最顯著（P<0.01），而與陽性對(duì)照組差異不明顯。結(jié)果見表4。表4 桑螵蛸的不同粗提物對(duì)小鼠平均體重和72 h內(nèi)平均飲水量的影響（略）與糖尿病模型組比較，*P<0.05，*P<0.01；與陽性對(duì)照組比較，#P<0.05，# P<0.0

15、13.2.3 四氧嘧啶糖尿病小鼠一般狀況的觀察60只小鼠注入4氧嘧啶后, 第1天和第2天均比較正常，第3天開始，個(gè)別造模動(dòng)物開始死亡，至第4天為止，死亡4只，不達(dá)模型標(biāo)準(zhǔn)的7只。連續(xù)給藥7 d后，桑螵蛸石油醚提取物處理組以及陽性對(duì)照組的小鼠精神逐漸好轉(zhuǎn)，皮毛逐漸恢復(fù)光澤，飲水、飲食和尿量逐漸降低，水提取物處理組和乙醇提取物處理組小鼠稍有好轉(zhuǎn)；而模型組一般情況較差，皮毛粗亂且無光澤，體力衰減，飲水、尿量增加較多。連續(xù)給藥15 d后上述情況更加明顯。4 討論 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明桑螵蛸可以顯著（P<0.01）降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平，增加小鼠體重(P<0.05)和減少

16、飲水量（P<0.01），減輕小鼠“三多一少”的糖尿病癥狀，使其逐步好轉(zhuǎn)，并隨著桑螵蛸濃度的增加，顯示此作用呈一定的劑量依賴關(guān)系。用各種溶劑對(duì)桑螵蛸進(jìn)行進(jìn)一步的提取，發(fā)現(xiàn)桑螵蛸的石油醚提取物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用最顯著（P<0.01），且明顯（P<0.01）增加小鼠體重和減少飲水量，有效改善“三多一少”的糖尿病癥狀，其次是桑螵蛸的水提物(P<0.05)有降血糖作用，而醇提物作用均不明顯。說明具有治療糖尿病作用的活性成分主要存在于桑螵蛸的石油醚提取物中，有少部分存在于水提物中。 近年來，人們研究的用于治療糖尿病的中藥活性成分主要有生

17、物堿、黃酮、多糖、皂苷、萜類等4。而石油醚提取出的一般是甾體、萜類、脂肪油等，所以桑螵蛸降血糖的有效成分可能是石油醚提物中的甾體皂苷或萜類物質(zhì)。事實(shí)上，關(guān)于含有皂苷或萜類物質(zhì)的中藥治療糖尿病的研究很多，上海瑞金醫(yī)院通過研究就闡明了人參皂苷抗糖尿病及其對(duì)胰島素的增敏作用5，而另有研究證明萜類物質(zhì)山茱萸環(huán)烯醚萜總苷的降血糖作用可能與抑制非酶糖基化終產(chǎn)物的形成以及阻止其對(duì)超氧化物歧化酶的破壞作用等有關(guān)6。因而，桑螵蛸降血糖作用機(jī)理可能與這兩種機(jī)理相似。 另外，對(duì)比于陽性藥物，桑螵蛸的石油醚提取物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用仍有一定差距，這可能與桑螵蛸的石油醚提取物的濃度有關(guān)，濃度的高低可能影響其

18、將血糖的作用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 1李德珍施今墨治療糖尿病探析J.中醫(yī)雜志，2001，42（5）：261.2S.C. Cavalher-Machado, W. Tavares de Lima, A.S. Damazo, et al. Down-regulation of mast cell activation and airway reactivity in diabetic rats: role of insulinJ.Eur Respir J, 2004, 24: 552.3Mou Xin-li, Lu Jin-liang, Wu Tao. Antihyperglycemic activity of Hypoglycemic Ziyabiti Tablet in normal and diabetic miceJ.Chinese Traditional PatentMedicine, 2005, 27(8):926.4楊懷瑾，劉立超，黃洪林抗糖尿病中藥