微生物的實驗室培養(yǎng)第二課時課堂PPT

1、1第二課時純化大腸桿菌2微生物實驗室培養(yǎng)（知識點總結(jié)）（知識點總結(jié)）3復(fù)習(xí)題1、甲、乙、丙是三種微生物，下表、甲、乙、丙是三種微生物，下表、是用來培養(yǎng)微是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在中正常生長繁殖；甲中正常生長繁殖；甲能在能在中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是：長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是：粉狀硫粉狀硫10gk2hpo44gfeso40.5g蔗糖蔗糖10g（nh）2so40.4gh2o 100mlmgso49.25gcaci20.5g+-+

2、-+a、甲乙丙都是異養(yǎng)微生物、甲乙丙都是異養(yǎng)微生物b 、甲乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物、甲乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物c、甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物、甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物d、甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物、甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物4復(fù)習(xí)題2、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是：化學(xué)消毒 灼燒滅菌 干熱滅菌 紫外線滅菌 高壓蒸汽滅菌 巴氏消毒法 a、 b、 c、 d、5三、純化大腸桿菌三、純化大腸桿菌接種大腸桿菌于培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)使其形成由單個細(xì)胞繁殖形成的

3、子細(xì)胞群體，即菌落。6在火焰旁右手拿錐形瓶，左手拔出棉塞；右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口迅速通過火焰；左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立刻蓋上皿蓋。待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置。7q1.培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌后，需冷卻到培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌后，需冷卻到_左右時，左右時，才能倒平板。用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？才能倒平板。用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？_q2.操作時錐形瓶口通過酒精燈火焰的目的是：操作時錐形瓶口通過酒精燈火焰的目的是： _q3.將平板倒置的目的是：將平板倒置的目的是：_q4.在倒平板過程中，將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間在倒平板過程中，將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部

4、位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？_8原理：通過通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操連續(xù)劃線的操作作，將聚集的菌種逐步稀釋逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面 。9灼燒接種環(huán)冷卻 劃線 （第一區(qū)域）蘸取菌液灼燒接種環(huán)冷卻 劃線 （第二區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻 劃線 （第三區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻 劃線 （第四區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻 劃線 （第五區(qū)域）灼燒接種環(huán)平板倒置放置培養(yǎng)10第一區(qū)域第二區(qū)域第三區(qū)域第四區(qū)域第五區(qū)域11q2：每次劃線前灼燒接種環(huán)的目的：q3：劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)的目的：答案：避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基答案：殺死上次劃線結(jié)束后

5、殘留的菌種答案：及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染環(huán) 境和操作者。q1：第一步灼燒接種環(huán)的目的：12稀釋涂布平板接種原理：將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，并將不同稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時，即可獲得單個細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。 131、梯度稀釋、梯度稀釋2、涂布平板、涂布平板稀釋涂布平板接種14結(jié)果分析與評價1、培養(yǎng)基制備成功的標(biāo)準(zhǔn)2、接種操作成功的標(biāo)準(zhǔn)如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12天后無菌落生長，說明培養(yǎng)基配制是成功的，否則實驗失敗，需重新配制。如果培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、性狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點，則說明操作是符合要求的。如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達(dá)到要求，實驗失敗，需分析原因，再次實驗。151、臨時保藏臨時保藏：適用于頻繁使用的菌種。將菌種接種到固體斜面培養(yǎng)基，在適宜的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后，將試管置于4的冰箱中保藏2、甘油冷凍管保藏：甘油冷凍