測序實驗室操作手冊

1、-作者xxxx-日期xxxx測序實驗室操作手冊【精品文檔】測序實驗室操作手冊文件編號：版次：編制：審核：批準：日 期：【精品文檔】文 件 更 改 記 錄版次號修改頁碼修改后頁數(shù)更 改 內 容 提 要日期A0第一次發(fā)行2014-03-22測序實驗室標準操作手冊一、健康中心實驗室介紹. .2二、實驗室管理.22.1 實驗室行為管理. 32.2 實驗室出入管理. 42.3 實驗室清潔衛(wèi)生管理. 62.4 儀器試劑使用管理. 102.5 實驗室安全管理. 11 實驗室緊急事故處理. 14 實驗室物料管理. 15 三、實驗室保密制度管理.17 四、測序實驗室儀器操作規(guī)程.17 超凈臺操作規(guī)程.18 微量

2、臺式離心機使用規(guī)程.20 移液槍使用維護規(guī)程.21 冰箱使用維護規(guī)程.26PCR 儀使用規(guī)程.29五、高通量測序標準操作規(guī)程.325.1 模板制備標準操作規(guī)程. 325.2 上機測序標準操作規(guī)程. 41 六、測序人員考核標準. 47 七、實驗室管理考核標準.48 八、測序實驗室工作時間表.50 九、附錄.50一、健康中心實驗室介紹健康中心實驗室主要分為 6 個部分：血漿分離室、核酸提取室、文庫構 建室、測序室、QC 檢測區(qū)、倉庫。1. 樣品處理室：用于血液樣品的接收和分離，內部配備臺式冷凍離心機、臺式 微量離心機、超凈工作臺、防護設施等。2. 核酸提取室：用于樣品中核酸的提取和純化，內部配備、

3、超凈工作臺、垂直 混勻儀等。3. 文庫構建室：用于測序文庫的制備與純化，內部配備臺式微量離心機、超凈 工作臺、臺式小離心機、冰箱等。4. 測序室：用于高通量測序過程中樣品的制備，芯片的處理以及上機操作等， 內部配備臺式微量離心機、超凈工作臺 、高通量測序儀、渦旋混勻儀、冰箱等5. QC 檢測區(qū)：用于核酸樣品、文庫樣品的濃度及質量檢測，配備了 PCR 儀、 臺式小離心機、Qubit 熒光計、2100 生物分析儀。6. 倉庫：用于所有物料及耗材的存儲。二、實驗室管理1. 按要求做好防護工作，進不同實驗室穿不同的實驗服，戴好胸卡。2. 各工作區(qū)專用的儀器設備、辦公用品、工作服、實驗耗材和清潔用具等不

4、可 混用。3. 嚴格按技術員等級使用相應儀器。4. 實驗室出現(xiàn)任何意外狀況，見者都需上報。5. 非本實驗室工作人員，未經許可不得入內；外來人員如參觀、維修人員要通 過經理同意并在專人陪同下完成。6. 做好實驗的各項清潔整理工作。2.1 實驗室行為管理2.1.1 嚴格遵守實驗室的上下班作息表：8:30 上班，17:30 下班，11:40-12:40午休時間。上下班按規(guī)定打卡。2.1.2早上 8:40 之前做好實驗室的清潔殺菌工作，9:10 之前一定要進入實驗室 工作。2.1.3 上班時間要堅守崗位，盡職盡責，不準擅離職守，外出辦私事。2.1.4不戴操作過的手套做其它與實驗無關的事如撓癢、開門把手

5、等可能污染 手套的動作；2.1.5最后一個離開實驗室要自覺檢查實驗的水、電、空調、儀器是否按要求 關閉。2.1.6 實驗室嚴禁行為：A. 在實驗室內工作時，動作要輕，嚴格執(zhí)行操作規(guī)程；B. 嚴禁在實驗室跑跳、串崗、閑聊、嬉笑打鬧；C. 在實驗室內不做不必要的動作，不做易發(fā)塵和大幅度的動作；D. 嚴禁在實驗室內吸煙、飲食和進行非生產性活動；E. 嚴禁上班時間玩電腦，不得打游戲，瀏覽與工作無關的網站；F.嚴禁將各種個人物品如手表、手機、化妝品、手紙、錢包、鑰匙等帶入實驗 室；G. 嚴禁在實驗室內座椅或實驗桌上睡覺； H. 嚴禁實驗操作時無精打采、哈氣連天； I. 嚴禁在實驗室內披頭散發(fā)；J. 不得

6、穿前露腳趾、后露腳跟的鞋子；2.1.7 實驗室良好行為：A. 頭發(fā)一律盤起或包入防護帽中，不得有頭發(fā)裸露在外；B. 勤清洗實驗服，保持實驗服整潔，不在實驗服上亂涂亂寫；C. 勤修剪指甲，不留長指甲，不涂指甲油；D. 工作期間坐姿要端正，雙腿交疊時腿要保持平穩(wěn)；E. 站姿要挺直，不可無精打采；F.實驗操作期間盡量不正對著實驗樣本交流，除了工作上必須的交流，盡量少 說話；2.2 實驗室出入管理2.2.1進出實驗室的防護順序 白色實驗服更衣區(qū)：A. 實驗人員進入健康實驗室，首先在白色實驗服更衣區(qū)，換上白色實驗服， 戴一次性口罩、一次性帽子、穿上鞋套；B.要將所有的頭發(fā)包入帽子中，禁止臉部周圍有碎發(fā)露

7、出帽子；C. 佩戴實驗室胸牌；D. 按七步洗手法洗手并擦干或吹干，然后進行實驗操作；E.操作完畢，脫下手套、帽子、口罩和實驗服，實驗服整齊疊好放到對應的實 驗柜中；F.在普通清潔區(qū)按七步洗手法洗手，擦干或吹干；G. 離開實驗室，關上實驗門。 藍色實驗服更衣區(qū)A. 進入崗位實驗室（如 DNA 提取室、測序室），需要換上藍色防護服，先脫下 白色實驗服，將實驗服整齊疊好放入更衣柜，再換上藍色防護服。B.藍色防護服的穿衣順序為：鞋套（褲子）衣服口罩帽子；C. 按七步洗手法洗手并擦干或吹干；D. 處理血液樣本時要進行特殊防護，如戴雙層口罩和防護目眼鏡；E.操作完畢，脫下手套， 按從上到下的順序脫下實驗服

8、；F.在普通清潔區(qū)按七步洗手法洗手并擦干或吹干；G. 離開實驗室，關上實驗門。 正確的洗手方法：用流動的水沖洗手部，使手掌、手背、手指、指縫和手腕部充分浸泡，打上洗手液等，在手掌、手背、手指、指縫和手腕部皮膚 處反復揉搓 30 秒鐘，用流水沖洗干凈。2.2.2進出實驗室的注意事項：A. 穿衣時，不要使衣服觸及地板、桌子、椅子等物品，不要沾污袖子和褲腿下擺，姿勢要保持直立，按從下至上順序穿衣。B.口罩應完全遮蓋鼻子及口，上緣不能低于鼻孔，下緣不能高于口唇。C. 為了防止再次進入和往返作業(yè)對實驗室造成交叉污染，人員在作業(yè)中途和作 業(yè)完畢均應按規(guī)定的順序退出實驗室。D. 先在實驗室脫下手套，進入更衣

9、室后先關門，然后按先上后下的順序脫下一 次性帽子、口罩、防護服放入指定盛具內，再換鞋后離開。E. 最后離開實驗室人員應仔細檢查每間房所有該關的電器是否已關閉，并在進 入實驗室的門邊安全登記表進行登記。2.2.3嚴格控制進入實驗室人員： 禁止外來人員隨意進入實驗室，因工作需要需進入實驗室的維護、檢測人員和其他人員，如參觀者等必須嚴格按以下步驟執(zhí)行：A. 經過實驗室管理人員同意；B.必須嚴格按要求著裝進入；C. 進入應由專人陪同并按要求登記實驗室來訪人員進出情況登記表； D. 維修人員的工具、儀器等需經消毒處理后才能進入實驗室。 下列人員不準進入實驗室：A. 皮膚有曬焦、剝離、外傷和炎癥、瘙癢癥者

10、。B.鼻子排出物過多者。C. 凍傷、濕疹等疾病患者。D. 過多掉頭皮、頭發(fā)者，長指甲者，有搓皮膚、挖鼻孔、搔頭等不良習慣者。E. 沒有按規(guī)定洗去化妝品、指甲油和未穿潔凈工作服者；沒有及時刮須、剪指 甲者。2.2.4物品進出的管理A. 大的物件搬進崗位實驗室時，先在公共實驗室內用實驗室真空吸塵器或自來 水將灰塵擦凈，然后用中性消毒劑對物件內外表面按要求進行消毒處理，再 用純水將消毒劑清洗干凈；B.測序室內凈化系統(tǒng)運行期間，不許搬進大的物件；C. 小物件在進崗位實驗室前，應先在公共實驗室內擦拭清潔消毒，通過傳遞窗 紫外消毒再帶進去；2.3 實驗室清潔衛(wèi)生管理2.3.1 整理A. 將實驗區(qū)內不需要的

11、物品整理好：可以回收利用的（如槍頭盒）：暫存實驗臺下面的空柜子中，柜子做好標記 并通知相關人員；或直接扔到垃圾房中。 不可回收利用的：廢棄物可直接倒掉。B. 廢液缸的垃圾達到廢液缸的一半就要清理掉，冰盒用完后敞開蓋子，整齊的 擺放在冰盒晾曬區(qū)。C. 工作時要保持臺面有序不亂；任何物品使用完畢后立即按要求放回原位；記 錄單等文件填寫完畢，要按要求放回原處或上交存檔。D. 實驗臺面、實驗架和柜子里的物品按物品標記要求分類放置。E. 移液器使用后按要求放置：調回最大量程；清潔移液器表面；放回規(guī)定槍架 位置。F. 槍頭盒：實驗人員離開實驗桌或長時間不使用（10 分鐘以上）時槍頭盒要蓋 好，放置在規(guī)定區(qū)

12、域。2.3.2 及時補充抽屜內的防護用品如口罩、手套、鞋套等。A. 所有的儀器設備放在相應的黃色警示區(qū)內，儀器底部邊緣不得超出警示區(qū)， 禁止隨意搬動儀器，如意外情況需搬動儀器一定要經過相應實驗區(qū)負責人的 同意，用完后要及時歸還，儀器歸還后實驗區(qū)負責人要檢查儀器是否使用正 常。B.各實驗區(qū)的實驗物品都要做好各實驗區(qū)相應的標記，公用的物品只需標記部門名稱；通用物品也要做好標記如鋁飯盒，按用途分類做好標 記。C. 實驗物品的放置與標簽對應。D. 實驗試劑開啟后要在瓶身和蓋子上標注開啟日期，新配置的試劑要標注試劑 名稱、配制人、配制時間，試劑的放置要安全、整齊、便于拿取。E. 根據(jù)實驗服的編號將實驗服

13、整齊的放到相應標記柜子中，禁止將實驗服放到 實驗桌上或凳子上，實驗鞋也放到標記好的柜子中擺放整齊。F.實驗室的通道要暢通無阻，特別是藍色實驗服通道不僅要暢通無阻，還禁止 隨意走動，只有換上干凈的鞋套才可進入。G. 實驗室的自來水水龍頭已做好標記，按標記要求使用。1)普通清潔區(qū)：Ø洗手專用：可用來穿白色實驗服或便服時洗手專用水龍頭，為了不引起污染， 戴操作手套時盡量不使用該水龍頭；Ø清潔專用：可用打掃衛(wèi)生時，或清潔廢液缸專用，盡量戴手套使用該水龍頭2)藍色實驗服清潔區(qū)：Ø洗手專用：穿藍色實驗服時洗手專用水龍頭，為了不引起污染，戴操作手套 時盡量不使用該水龍頭；

14、16;清潔專用：穿藍色實驗服清潔，或清潔廢液缸專用，盡量戴手套使用該水龍 頭H. 凳子（椅子）的擺放要求：無人使用時，凳子（椅子）推入桌下，椅背擺正； 做完實驗后也應該立即回位。I.工作中所用到的相關文件、記錄等應分類擺放整齊、填寫清楚無誤。紙質記 錄單等要遠離水源，必須避免受到污染和損壞。2.3.3 實驗前清潔整理工作：A. 將窗臺上的灰塵用干布擦凈；B.實驗臺用 75%酒精擦拭干凈；C. 超凈臺臺面用 75%酒精由內向外擦拭干凈，開紫外照射 30min，再吹風 10min； D. 實驗需要的耗材（如雙面板）按要求先 75%酒精擦拭，再紫外照射 30min； E.移液槍用先 75%酒精擦拭，

15、再紫外照射 30min；F.儀器外表面用 75%酒精擦拭，屏幕可以觸屏的儀器屏幕用潔凈的干布擦拭；G. 廢液缸用 75%酒精擦拭外表面，再紫外照射 30minH. 注：沒有超凈臺的實驗區(qū)，也按以上步驟清潔，但不需紫外照射 30min。 超凈臺開紫外和吹風期間，人盡量不要留在實驗室，實驗室門關閉并在門上 掛上紫外消毒牌，消毒完畢要及時取下消毒牌。2.3.4 實驗工作結束后的清潔整理工作：A. 實驗臺用 75%酒精擦拭干凈。B.超凈臺臺面用 75%酒精由內向外擦拭干凈。C. 實驗用過的耗材（如雙面板）按要求用 75%酒精擦拭干凈。D. 移液槍用先調到最大量程，再用 75%酒精擦拭。E. 儀器外表面

16、用 75%酒精擦拭，可以觸屏的儀器屏幕用潔凈的干布擦拭，儀器 內表面用干布擦拭異物、冷凝水等；F. 廢液缸先倒掉垃圾，用 75%酒精噴灑內外表面，靜置 10min，裝有血液樣本 的廢液缸倒掉垃圾后要用 84 消毒液噴灑廢液缸內外，并將 84 消毒液沒過廢 液缸底部，靜置 30min，然后先用自來水沖洗，再用純水潤洗三遍，然后放 到廢液缸晾曬區(qū)；G. 各實驗區(qū)的垃圾清理干凈，分類放到清潔房；H. 每天實驗結束后，各實驗區(qū)地面用清水拖一遍。2.3.5 實驗室每周清潔整理：A. 每周五清潔超凈臺：先將超凈工作臺臺面上的物品取出，用 1%的苯扎溴銨 溶液清潔超凈臺的臺面、內壁和外壁，再用純水清潔一遍，

17、超凈臺擋風玻璃 內外側要純水擦拭，最后填寫超凈臺每周清潔表。B. 實驗室內部清潔：每周五用 1%的苯扎溴銨溶液擦拭實驗臺面、地板和門把 手，再用純水清潔一遍。C. 實驗儀器清潔：實驗儀器按要求用 75%酒精擦拭外表面。D. 實驗室消毒：實驗室整理清潔后開實驗室紫外燈或臭氧，并在消毒的實驗室 門口掛上消毒牌。E. 實驗服的清潔：白色實驗服和藍色實驗服分開洗，每周一完成白色實驗服的 清洗工作，白色實驗服用洗衣機清洗干凈，用衣稱掛起晾干；藍色實驗服每 周一、周三清洗，先用洗衣機清洗干凈，用滅菌鍋滅菌再烘干，然后放到實 驗室的相應柜子中；藍色實驗鞋套每天清洗烘干。2.3.6 每月清潔整理：A. 墻壁清

18、潔：每個月用 1%的苯扎溴銨溶液清潔實驗的墻壁、天花板、燈，并用 純水清潔一遍，玻璃直接用純水擦拭。B. 實驗容器清潔：將反復使用的容器如廢液缸、雙面板、試管架等用 84 消毒劑 浸泡 30 分鐘，先用自來水沖洗干凈、再用純水潤洗兩遍，晾干放到各實驗室。C. 更換記錄表：更換實驗室各種記錄表，對于記錄潦草的表格進行重新抄錄，換下來的表格分類入檔。表 1 清掃和滅菌方法清潔范圍/ 物品具體方法整個房間一周 1 次，用臭氧處理 1 個半小時，再打開通風系統(tǒng) 2 個小時地板每天用清水清潔一次，每周使用消毒液擦洗一次墻面每月使用消毒液擦洗一次頂棚每月使用消毒液擦洗一次設備、器具和雜物水洗和擦拭后，滅菌

19、或消毒；或直接用消毒液擦拭藍色防護服每周一、三清洗滅菌一次白色實驗服每周一清洗一次實驗鞋套每天清洗一次注意事項：A. 實驗室的一切清潔工作必須濕式打掃，在實驗室凈化系統(tǒng)工作狀態(tài)下進行。B.準備專用的實驗室清掃材料和工具，清潔用品不得采用易掉纖維的織物，一 般可用長纖維材料或聚氨酯海棉。2.3.7 實驗垃圾分類放置： 普通垃圾放在黑色垃圾袋中，與血液、血漿有關的垃圾放在黃色醫(yī)療垃圾袋中，每天處理完樣品后及時將垃圾處理掉，垃圾袋扔在清洗間指定垃圾 桶中。2.3.8 消毒劑的使用與配制1)84 消毒液的使用：84 消毒被血液污染的物品，稀釋比例為 1：20，約 2000mg/L，相當于 1 份 84

20、 消毒液20 份清水。實驗室用法為 10ml 消毒液+200ml 清水，作用時 間為大于 30min。使用注意事項：A. 稀釋后的 84 消毒液極易分解，使殺菌力降低，因此必須現(xiàn)配現(xiàn)用，使用時 間不超過 1 天。B.配制時應先加水再倒入藥液。C. 84 消毒液有強烈腐蝕性，因此，稀釋前請盡量戴上手套。D. 在完成稀釋后，不要脫下手套，若沾到皮膚上立即用清水沖洗。E.未經配置的 84 消毒液在陽光下會產生毒氣，因此請放置在陰涼的地方。F.使用后的 84 消毒液直接倒入實驗室的下水道。2)苯扎溴銨的使用 用途用法 實驗室墻面、地面、天花板、臺面等定期消毒時，將一瓶苯扎溴銨溶液倒入 淡藍色垃圾桶內，

21、再注入純水至垃圾桶桶線處。3)乙醇的使用 用途用法A. 95%乙醇：從倉庫領用的乙醇即為 95%乙醇，只用于酒精燈。B.75%乙醇：以 1000：267 稀釋 95%乙醇即為 75%乙醇，用于實驗物品、實驗 臺面的日常清潔滅菌，酒精棉的浸泡，進出超凈臺物品的滅菌消毒。4)碘伏的使用 用途用法：直接使用碘伏原液擦拭物品表面，擦拭 2 遍，作用時間 2 分鐘，稍干以后用75%乙醇脫碘，用于不適合浸泡消毒的物品，例如未分離血漿的采血管等。2.4 儀器試劑使用管理2.4.1 嚴格遵守各種儀器的操作規(guī)程和登記制度，按儀器的使用權限使用儀器，未 經過相關儀器使用培訓，禁止隨意使用儀器。2.4.2 實驗前要

22、先檢查儀器是否損壞，接通電源后，檢查是否運轉正常及表面是否 清潔衛(wèi)生。發(fā)現(xiàn)問題及時報告實驗室管理人員，并找上一次使用者說明情況。 知情不報者追查當次使用者的責任。2.4.3 任何使用者必須在掌握儀器設備的性能與操作程序后方可操作，操作儀器前要熟讀儀器旁邊張貼的儀器使用注意事項，確保已熟悉這些再使用，凡對使 用的儀器的操作無把握者，務必請教儀器負責人或其他人員。2.4.4 儀器使用中發(fā)現(xiàn)異常及時上報并填寫意外事故記錄單。2.4.5 儀器使用過后按要求對儀器進行清潔、整理并按要求填寫儀器使用記錄 表。2.4.6 需要過夜運行的儀器一定要做好標記。2.4.7 本實驗室成員不得隨便帶外來人員到實驗室，

23、如室外人員需要用本實驗室儀 器設備和試劑，則需由實驗室負責人同意，并讓其做好登記。2.4.8 各種財產包括儀器、設備工具、試劑等嚴禁帶出實驗室，如有特殊需要，經 實驗室管理人員同意后方可帶出，并負責帶回。2.4.9 試劑使用過程中要熟悉試劑的保存條件，使用完畢后按要求放回原處。2.4.10 剛開封的試劑要在試劑瓶身及瓶蓋上標上開封日期，配制試劑要標明試劑的 濃度、名稱、配制日期、配制人。2.4.11 對于有害試劑，使用過程中要嚴格執(zhí)行操作規(guī)程，注意安全，防止意外事故 的發(fā)生。2.4.12 對處理有潛在危害的樣本時，要嚴格執(zhí)行相關操作規(guī)程并熟悉發(fā)生意外時的 處理方法。2.4.13 儀器試劑在使用

24、過程中發(fā)生意外狀況一定要及時上報實驗室管理人員并做 簡單的應急處理 。2.5實驗室安全管理2.5. 1 實驗室財產安全防護：A. 非本實驗室工作人員不得隨意進入本實驗室，如有外來人員需進入實驗室必 須通過領導同意并在實驗人員的陪同下完成，陪同的實驗人員有責任監(jiān)督和 協(xié)助外來人員的相關工作。B.實驗室的倉庫應上鎖，只準倉管人員進入，其它實驗員禁止隨意進入。C. 實驗員辦公室不存放私人貴重物品。一旦實驗室發(fā)生盜竊案件，實驗員應保 護好現(xiàn)場，并及時向上級領導匯報。D. 實驗室各儀器試劑都有固定的安放位置，實驗人員有責任監(jiān)督本實驗的儀器 試劑動向，一旦發(fā)現(xiàn)其離開固定位置要了解儀器試劑的去向，確保其回歸

25、原 位。E. 實驗人員禁止隨意將實驗室財產帶出實驗室、丟棄或饋贈他人。實驗物品如 需借出必須經過實驗室負責人同意并做好記錄，借出后要在歸還日期到達后 負責將借出物品追回。2.5. 2 防中毒、防感染：A. 實驗室中存有有毒試劑時，要說明使用有毒試劑的時安全防護方法，遇到意 外要注明緊急處理方法，實驗人員要嚴格按要求執(zhí)行。B. 在制取有毒氣體時應在通風櫥內進行，實驗室要有良好的通風設備保持室內 通風，實驗員要按要求及時開啟通風設備。C. 人員未離開實驗室時不要開各種紫外燈，開紫外燈或臭氧消毒器時實驗人員 要快速離開實驗室并做好消毒標志。D. 實驗操作臺上都要有廢液缸，實驗臺旁邊都要有翻蓋垃圾桶，

26、廢液缸中的垃 圾達到廢液缸三分之二左右就要清理掉，不同類別的垃圾放在不同類型的垃 圾桶中，黃色醫(yī)療垃圾每次做完實驗就要及時清理掉。E. 處理血液樣本時一定要做好安全防護措施以防感染，戴雙層口罩，穿防服， 戴防護目眼鏡，如遇到血液緊急事故時要穿專門的防護裝備。2.5. 3 防火災：A. 實驗室應配備急救箱。各實驗室、倉庫必須必備滅火器，并對實驗人員進行 培訓確保每位實驗人員都會使用滅火器材。B.在實驗室使用酒精燈時，一定要注意防火，特別要注意不要在點燃的酒精燈 旁邊使用易燃物品，如酒精，酒精棉等。易燃試劑的保存也要注意防火。 注：在超凈臺內，戴手套點酒精燈時，不要在酒精燈的下風口點火，要在其 側

27、邊和上風口，否則很容易使手套點燃。C. 使用完加熱設備確保其電源關閉，如需過夜運行的加熱設備，一定要檢查其 控溫裝置是否正常，不正常的話要停用并及時上報，如需強制運行則禁止過 夜運行或長時間無人監(jiān)督運行，下班放假之前一定要確保加熱設備關閉。2.5. 4 防凍傷：A. 在普通冰箱和冷柜中快速拿取物品時一定要戴乳膠手套或一次性手套，長時 間拿物品或冰箱除冰時可在勞工手套外戴一次性手套進行操作。B. 接觸冰凍的冰袋時一定要戴勞工手套，從-80冰箱中拿放物品時一定要戴勞 工手套，冰箱除冰時可在勞工手套外戴一次性手套。C. 干冰溫度極低，為-78。5，當干冰與人的皮膚接觸時就會升華，而在升華 的過程中會

28、吸收大量的熱，就會引起人體皮膚組織凍傷，拿取干冰時一定不 要用手直接接觸，否則，瞬間可凍傷皮膚。短時間接觸干冰可帶勞工手套， 但是如果碰觸的時間過長，如十幾二十分鐘，要戴厚的棉手套或用夾子、盒 子等工具協(xié)助干冰的轉運。D. 被干冰凍傷后的正確處理方法，應該是到 22-25左右的室內，或浸入38-42的溫水中，迅速提高體溫，而不能用火烤、冷水浸泡或者用雪搓。盡 量將傷處抬高、保暖，凍傷嚴重要報告上級并及時就醫(yī)，要填寫意外事故 記錄單。2.5. 5 防水災：A. 實驗室水池的地漏必須保持暢通，要及時清理水池內的垃圾防止堵塞水池， 用容器接水時一定要有人現(xiàn)場監(jiān)督，等關閉水閥方可離開。B. 停水期間禁

29、止隨意打開水龍頭閥門，如需打開要及時關上，停水后要檢查實 驗室各水龍頭閥門是否關閉，并做好禁止開水龍頭閥門的標志。C. 實驗完成后泡沫冰盒里的冰要及時清理掉，禁止將試劑或樣品長時間放在泡 沫冰盒中，試劑用完后要及時放好，防止泡沫冰盒中冰融化將試劑或樣品淹 沒。D. 秋冬季定期檢測水管是否漏水；下大雨天檢測實驗室天花板是否漏水；每天 檢查實驗空調是否漏水，出現(xiàn)漏水情況要及時上報實驗室管理人員，并填寫意外事故記錄單。2.5. 6 防觸電：A. 實驗員必須掌握安全用電常識和發(fā)生觸電事故的救助方法，組織實驗員進行 “安全用電”常識的教育。B.實驗室的儀器使用完后按要求關閉電源或拔下插頭。C. 實驗室內

30、的電路及用電設備要定期檢查，確保用電安全。如有電器著火，應 立即切斷電源，用滅火器撲滅，電源未切斷前，切忌用水或化學泡沫滅火器 滅火。D. 一旦發(fā)生人身觸電事故，應立即切斷電源，及時進行人工呼吸，急送醫(yī)院救 治。2.6 實驗室緊急事故處理2.6.1 血液、血漿濺落： 實驗過程中，由于血液、血漿溢出濺落造成實驗物品、操作臺或地面等的污染，應立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的無紡布，等消毒液徹底浸泡30 分鐘后，用無紡布擦拭掉，若是實驗室物品則傳出實驗室再用純水沖洗晾 干。若血液、血漿濺落于防護服上，應立即脫下防護服，在濺落部位用消毒劑浸泡 30 分鐘，再單獨清潔防護服。2.6.2 采血管破碎：A.

31、 若在冰盒中發(fā)現(xiàn)破碎的采血管，應立即穿上防護服，戴好手套、口罩、防護 眼鏡，用鑷子將破碎采血管取出丟棄于黃色醫(yī)療垃圾袋中，將冰盒內剩余的 采血管全部用碘伏擦拭 2 遍，作用 2 分鐘，稍干后用 75%乙醇脫碘，再放到 新的采血管架上傳入實驗室進行血漿分離。冰盒內剩余物品放在冰盒中，將 消毒劑倒?jié)M整個冰盒，蓋上冰盒蓋子，30 分鐘后倒掉消毒劑，用浸泡過消毒 劑的抹布擦拭剩余物品和整個冰盒，最后用純水沖洗干凈晾干再使用。B.若不小心將采血管摔碎，應立即用無紡布覆蓋，然后傾倒適量消毒劑，放置30 分鐘后再清理。采血管摔碎片應用鑷子清理，污染區(qū)域應當用消毒劑清洗。2.6.3 血液、血漿污染皮膚A. 血

32、液或體液污染皮膚和眼睛：在實驗過程中，如手或其它部位的皮膚沾上血 液或體液標本以及試劑，應立即用洗手液和流動水清洗污染的皮膚，消毒液 如 75%乙醇或 %碘伏進行消毒。血液、血漿或試劑不慎濺入眼內應立即 用清水洗，均需填寫意外事故記錄單。B.如有傷口，應在傷口旁端輕輕擠壓，盡可能擠出損傷處的血液，再用洗手液和流動水進行沖洗。禁止進行傷口的局部擠壓。受傷部位的傷口沖洗后，用 消毒液如 75%乙醇或 0.5%碘伏進行消毒，并包扎傷口，必要時進行預防補 救措施并填寫意外事故記錄表。2.6.4 注意事項A. 清理過血液、血漿的無紡布應丟入黃色醫(yī)療垃圾袋中，不可循環(huán)使用，上述 步驟均應佩戴手套。B.消毒

33、劑為稀釋過的 84 消毒液，使用方法可參考“實驗室清潔衛(wèi)生管理”。2.7實驗室物料管理2.7.1 領料管理8.1.1 分子實驗室每個崗位各選一名領料負責人，負責崗位物料的統(tǒng)計、領取 與申購。8.1.2物料預算：領料負責人每月 25 號統(tǒng)計本月試劑耗材用量并做出下個月試 劑耗材預算，向倉管人員提交下月的預算單。倉管人員統(tǒng)計預算，查看庫存， 及時補充物料。8.1.3 領料：領料負責人每周五負責統(tǒng)計各崗位剩余的物料，估計下個星期物 料需求量，如剩余量不夠一周使用，及時填寫物料領取單，向倉庫管理人員 領取，物料領取單必須在周五下班前交給倉庫管理人員，周五早上 8:40-9:00 時間段完成領料。8.1

34、.4 應實驗需求需要使用新品種的耗材，各領料人員可向采購人員申購，采 購單要填寫物料的具體信息。因采購物料有一定的周期，緊急物料的申購一 定要提前半個月。8.1.5 實驗室操作人員禁止隨意進入倉庫，如意外情況需單獨進入倉庫，要做 好倉庫鑰匙借用記錄。2.7.2 倉管人員須知A. 職責：倉庫管理人員負責倉庫物料的統(tǒng)計、發(fā)放和申購。倉庫管理人員要明 白各種試劑耗材的儲存條件。B. 每周領料結束后，倉庫管理人員要及時統(tǒng)計倉庫物料的剩余情況，不夠的物 料要及時補充，物料補充路徑有兩種，一：向采購人員申購，二：向倉庫領取。補充的物料到貨后，要在下次領料之前將新到物料統(tǒng)計到 庫存單中。C. 倉庫人員要負責

35、將倉庫中物品分類擺放整齊，儲存架位做好標記，易于查找 拿取。D. 倉庫管理人員禁止隨意將倉庫鑰匙外借，如意外情況需外借要做好借用記 錄。2.7.3 物料滅菌1)藍色防護服的清潔消毒：A. 清潔：將藍色實驗服從實驗服袋子中取出，實驗服和實驗服袋子同時放到洗 衣機中清洗，清洗完后及時取出。B.裝袋：將同一編號的實驗服按從下到上，上衣、褲子、帽子疊整齊放到相應 編號的實驗服袋子中，鞋子單獨放到實驗服袋子外面的小口袋中。C. 消毒：將疊好的實驗服用滅菌鍋固體滅菌 30 分鐘。D. 烘干：實驗服滅菌完成后及時取出，放到清洗間的烘箱中烘干，烘干后及時 取出放到相應編號的實驗柜中。2)實驗耗材滅菌：A. 整

36、裝：口戴一次性口罩、雙手戴一次性 PE 手套，將槍頭插滿相應的槍頭盒， 蓋上槍頭盒，EP 管裝滿鋁飯盒蓋上鋁飯盒蓋子，紅色槍頭盒中裝洗干凈的 無紡布。B.標記：在裝有滅菌耗材的容器（槍頭盒、鋁飯盒等）的右上方貼上約長 1。5cm 的滅菌指示帶，在滅菌指示帶上寫上滅菌日期（如 2013 年 8 月 7 日寫 成：8/7/2013，年份一般省去，直接寫 8/7）。C. 包扎：將 1ml 槍頭盒兩個一包、200µl 槍頭盒兩個一包、10µl 槍頭盒四個一 包，用包布按要求包起，包好后在包布上貼上約 3cm 的滅菌指示帶，在滅 菌指示帶上寫上部門名稱、所滅物品的名稱、滅菌日期，然后

37、將準備好的滅 菌物品放到待滅菌區(qū)。D. 滅菌：將待滅菌區(qū)的耗材放到滅菌鍋中固體滅菌 30 分鐘。E.烘干：滅菌完成，將滅菌物品取出放到清洗間的烘箱中烘干，烘干后及時取 出放到已滅菌區(qū)分類擺放整齊。3)注意事項：A. 滅菌好的耗材在使用過程中不要撕掉容器右上方的滅菌指示帶。B.在容器和包布上重新貼滅菌指示帶時一定要撕去原有的滅菌指示帶。C. 禁止在使用過(有黑色斜線)的滅菌指示帶上修改日期。D. 在裝槍頭和 EP 管盒時盡量少說話。E.在裝槍頭和 EP 管時，掉落的槍頭和 EP 管禁止使用。F.滅菌指示帶上的日期一定要寫滅菌當天的日期。G. 滅菌后一定要及時填寫滅菌登記表。三、實驗室保密制度管理

38、3.1 不得與部門以外人員討論實驗相關的數(shù)據(jù)、進程。3.2 不得將部門任何資料傳輸?shù)骄W絡或傳輸給他人。3.3 不得將部門的會議內容隨意泄露。3.4 沒有權限看的文件絕不偷看。3.5 實驗室所有有用的文件、資料、數(shù)據(jù)歸檔處理，借閱必須做好登記。3.6 實驗室所有與工作有關的文件資料的報廢處理，必須使用碎紙機，不準未 經切碎作收購處理。3.7 員工本人工作所持有的各種文件、資料、電腦復印軟件，當本人離開實驗室 或辦公室外出時，須存放入文件柜或抽屜，不準隨意亂放，更不能未經批準， 攜帶外出進入公共場所。3.8 禁止在部門以外的打印機上打印資料，打印的資料必須及時取回，禁止將廢 棄的打印資料隨意丟棄，

39、要用碎紙機銷毀。3.9 未經公司領導批準，不得向外界提供公司的任何資料。四、測序實驗室儀器操作規(guī)程儀器操作規(guī)程1.超凈臺操作規(guī)程2.微量臺式離心機操作規(guī)程3.移液槍使用維護規(guī)程4.冰箱使用維護規(guī)程5. PCR 儀使用規(guī)程超凈臺操作規(guī)程1.目的 規(guī)范凈化工作臺操作與維護工作，確保儀器正常運作。2.適用范圍 適用于潔凈室、微生物實驗室中潔凈工作臺的操作與維護管理。3.人員職責 操作人員負責此儀器操作和維護管理4.操作規(guī)程4.1 準備工作：先用 75%的酒精噴灑臺面，用潔凈的無紡布由內向外擦超凈臺臺 面，將實驗需要的耗材用 75%的酒精噴灑，無紡布擦拭后放入超凈臺中，盡 量將物品放在超凈臺兩側，不要

40、將物品堆積在一起，以防紫外照射不均。4.2 紫外殺菌：使用工作臺時，應提前 40 分鐘開機，按下超凈臺臺面下方右側的 綠色電源安，同時開啟紫外殺菌燈，處理操作區(qū)內表面積累的微生物。4.3 啟動風機：紫外殺菌 30 分鐘后，關閉紫外，打開風機，風速為 2，將擋風玻 璃向上提一段距離，吹 10 分鐘（不需開照明燈）。4.4 吹風結束：拉下?lián)躏L玻璃，風速為 0，關閉風機（不需開照明燈）。4.5 實驗結束：實驗結束，將實驗物品拿出超凈臺，超凈臺內物品擺放整齊，用75%的酒精噴灑臺面，用潔凈的無紡布由內向外擦超凈臺臺面，關閉擋風玻 璃，紫外殺菌 30 分鐘，30 分鐘后關閉電源。5.注意事項：5.1 紫

41、外滅菌期間不要開實驗室內的白熾燈以免影響滅菌效果。5.2 利用紫外滅菌時，盡量將物品放在超凈臺兩側，不要將物品堆積在一起，以 防紫外照射不均。5.3 由于紫外滅菌時會產生臭氧對人身體有害，紫外滅菌和吹風期間人員盡量不 要待在實驗室。5.4 對新安裝的或長期未使用的工作臺，使用前必需對工作臺和周圍環(huán)鏡先用超 凈真空吸塵器或用不產生纖維的工具進行清潔工作，再采用藥物滅菌法或紫 外線滅菌法進行滅菌處理。5.5 帶移門的工作臺操作時，移門開啟高度雖無明確規(guī)定，但一般不宜開啟過高（拉至頂端）或關至過低（落至臺面），以免影響風速和和潔凈度。5.6 操作區(qū)內不允許存放不必要的物品，保持工作區(qū)的潔凈氣流流型不

42、受干擾。5.7 操作區(qū)內盡量避免作用明顯擾亂氣流流型的動作。5.8 禁止在預過濾器進風口部位放置物品，以免擋住進風口造成進風量減少，降 低凈化能力。5.9 本產品在受到外界電磁干擾時，可能會有影響。請遠離此類干擾源或采取其 他必要措施。5.10操作區(qū)的使用溫度不可以超過 60。6.維護規(guī)程及維護方法6.1 根據(jù)環(huán)境的潔凈程度，定期（一般 36 個月）將預過濾器中的粗效濾料拆 下清潔，清潔方法：用吸塵器吸除濾料上的灰塵，清潔 2-3 次后需換新的粗 效濾料。（粗效濾料水洗后只能用一次）。6.2 定期（一般為一周）用 1%的潔爾滅對超凈臺的臺面清潔，用清水對擋風玻 璃進行清潔，并填寫清潔記錄表，同

43、時經常用紗布沾酒精或丙酮等有機溶劑 將紫外線殺菌燈表面擦干凈，保持表面清潔，否則會影響殺菌效果。6.3 當加大風機電壓已不能使風速達到0。32m/s時必須更換高效空氣過濾器。6.4 定期（一般每兩個月一次）用熱球式電風速計測量工作區(qū)風速，如發(fā)現(xiàn)不符 合技術參數(shù)的要求，則應調節(jié)風速設置為“高速”檔。6.5 當“風速”已調至“高速”檔時，工作區(qū)風速仍達不到0。3m/s，則必須更換高效 空氣過濾器。更換高效過濾器后，應用塵埃粒子計數(shù)器四周邊框密封是否良 好，若有泄露需采取封堵措施。6.6 更換高效空氣過濾器及預過濾器時均應停機進行。6.7 更換高效空氣過濾器時需注意一下事項：6.8 更換新的高效空氣

44、過濾器時應特別注意其拆箱、搬運及安裝取用的過程應保護濾紙完整無損，禁止用手觸及濾紙造成破損。6.9 安裝前，將新的高效空氣過濾器對著亮處，以肉眼查看高效空氣過濾器是否 因運輸?shù)仍蚨霈F(xiàn)漏洞。如有漏洞則不能使用。6.10更換過濾器時，可打開頂蓋，更換時應注意過濾器上的箭頭標志，箭頭 指向即為層流氣流向。6.11在擰緊壓塊螺栓時，用力要均勻、適當，既要確保高效空氣過濾器的固 定及密封穩(wěn)定可靠，又要避免高效空氣過濾器變形而導致泄露。6.12更換后，應用塵埃粒子計數(shù)器檢漏，尤其要在高效空氣過濾器四周進行 掃描檢查。6.13為防止環(huán)境污染，對換下的廢舊高效空氣過濾器作燒毀處理微量臺式離心機使用規(guī)程1

45、目的 保證微量臺式離心機的正常使用。2 適用范圍 適用于本實驗室室使用的微量臺式離心機。3 責任： 分子技術員應嚴格按照此規(guī)程操作4操作步驟：4.1 離心機應放置在水平堅固的臺面上，并力求使儀器處于水平位置以免離心時 造成儀器振蕩。4.2 插上電源插頭，打開機身電源開關，按 open 鍵后聽到開蓋聲后，用手扶住 打開機蓋，將預先平衡好的樣品對稱放置于轉頭的樣品架上，雙手扶住蓋子 關閉機蓋，聽到關蓋聲后表明蓋子已關好。4.3 選擇離心單位、設定離心速度、溫度、時間，按 start 開始離心，待速度穩(wěn)定 上升后方可離開進行其他操作。4.4 待離心機完全停止轉動時按 open 鍵打開機蓋，小心取出離

46、心樣品。4.5 離心完畢后，離心機蓋子保持敞開，以便操作過程中產生的水汽等充分揮發(fā)，等實驗結束后蓋上蓋子關閉電源開關，拔下電源插頭。5儀器維護5.1 離心機應始終處于水平位置，外接電源系統(tǒng)的電壓要匹配，并要求有良好的 接地線，機器不使用，要拔掉電源插頭。5.2開機前應檢查轉頭安裝是否牢固，機腔中有無異物掉入。5.3樣品應預先平衡，使用離心筒離心時離心筒與樣品應同時平衡。5.4 揮發(fā)性或腐蝕性液體離心時，應使用帶蓋的離心管，并確保液體不外漏以免 腐蝕機腔或造成事故。5.5 除工作溫度、運轉速度、轉速單位和運轉時間外，不要隨意更改機器的工作 參數(shù)，以免影響機器性能。轉速設定不得超過最高轉速，以確保機器安全運 轉。5.6 使用中如出現(xiàn) 或其它數(shù)字，機器不運轉，應關機斷電，10 秒鐘后重新 開機，待所設轉速顯示后，再按運轉鍵，機器將照常運轉。5.7不得在機器運轉過程中或轉子未停穩(wěn)的情況下打開蓋門，以免發(fā)生事故。5.8 分離結束后，先關閉離心機，在離心機停止轉動后，方可打開離心機蓋，取 出樣品，不可用外力強制其停止運動。5.9離心機運轉過程出現(xiàn)異常，應先按“stop”離心機停止轉動后，再進行處理。6注意事