第三節(jié)動(dòng)物的克隆PPT課件

1、第三節(jié)第三節(jié) 動(dòng)物的克隆動(dòng)物的克隆經(jīng)濟(jì)管理學(xué)經(jīng)濟(jì)管理學(xué)小資料：小資料： 20 20世紀(jì)初，人們不知道神經(jīng)纖維是由神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)世紀(jì)初，人們不知道神經(jīng)纖維是由神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)向外突出形成的，還是由神經(jīng)細(xì)胞周圍的其他細(xì)胞胞質(zhì)向外突出形成的，還是由神經(jīng)細(xì)胞周圍的其他細(xì)胞融合而成的。生物學(xué)家們就這個(gè)問(wèn)題展開(kāi)了激烈的爭(zhēng)論。融合而成的。生物學(xué)家們就這個(gè)問(wèn)題展開(kāi)了激烈的爭(zhēng)論。19071907年，美國(guó)生物學(xué)家哈里森年，美國(guó)生物學(xué)家哈里森(Harrison)(Harrison)從蝌蚪的脊索從蝌蚪的脊索中分離出神經(jīng)組織，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培中分離出神經(jīng)組織，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織

2、存活了好幾周，并且從神經(jīng)細(xì)胞中養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織存活了好幾周，并且從神經(jīng)細(xì)胞中長(zhǎng)出了神經(jīng)纖維。長(zhǎng)出了神經(jīng)纖維。哈里森的實(shí)驗(yàn)不僅解決了神經(jīng)纖維的哈里森的實(shí)驗(yàn)不僅解決了神經(jīng)纖維的起源問(wèn)題，而且開(kāi)創(chuàng)了動(dòng)物組織培養(yǎng)的先河。起源問(wèn)題，而且開(kāi)創(chuàng)了動(dòng)物組織培養(yǎng)的先河。此后，在此后，在許多科學(xué)家的不懈努力下，動(dòng)物組織培養(yǎng)不斷改進(jìn)并逐許多科學(xué)家的不懈努力下，動(dòng)物組織培養(yǎng)不斷改進(jìn)并逐漸發(fā)展成為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。漸發(fā)展成為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。1 1、廣義的動(dòng)物組織培養(yǎng)、廣義的動(dòng)物組織培養(yǎng)( (組培組培) )包括：包括：2 2、動(dòng)物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展：、動(dòng)物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展：18851885年，年，雞神經(jīng)板雞神經(jīng)板在生理鹽水

3、中培養(yǎng)成活。在生理鹽水中培養(yǎng)成活。 1903 1903年，年，皮膚及白細(xì)胞皮膚及白細(xì)胞培養(yǎng)于腹水及血清中，存活培養(yǎng)于腹水及血清中，存活1 1個(gè)月。個(gè)月。 1907 1907年，美，年，美，蛙胚神經(jīng)管蛙胚神經(jīng)管培養(yǎng)在蛙淋巴液中，觀察到培養(yǎng)在蛙淋巴液中，觀察到細(xì)胞的阿米巴運(yùn)動(dòng)，創(chuàng)立了懸浮培養(yǎng)法。細(xì)胞的阿米巴運(yùn)動(dòng)，創(chuàng)立了懸浮培養(yǎng)法。細(xì)胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和器官培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和器官培養(yǎng)。一、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆形成一、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆形成3 3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 將動(dòng)物體的一部分組織取出，經(jīng)過(guò)將動(dòng)物體的一部分組織取出，經(jīng)過(guò)機(jī)械消化或胰酶機(jī)械消化或胰酶消化消化，使其分散成，使其分散成

4、單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞；然后在人工控制的培養(yǎng)條；然后在人工控制的培養(yǎng)條件下，使這些細(xì)胞得以生存，并保持生長(zhǎng)、分裂乃致接件下，使這些細(xì)胞得以生存，并保持生長(zhǎng)、分裂乃致接觸抑制和有規(guī)律的衰老、死亡性能等生命活動(dòng)現(xiàn)象。觸抑制和有規(guī)律的衰老、死亡性能等生命活動(dòng)現(xiàn)象。一、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆形成一、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆形成 幼齡動(dòng)物幼齡動(dòng)物取動(dòng)物器官取動(dòng)物器官和組織和組織剪碎組織剪碎組織胰蛋白酶處理胰蛋白酶處理細(xì)胞培細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程思考：思考：2 2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)

5、體的器官或組織做動(dòng)物、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？細(xì)胞培養(yǎng)材料？1 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處？有何獨(dú)特之處？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清主要成分：葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。等。獨(dú)特之處有：獨(dú)特之處有：1 1、液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 2 2、成分中有動(dòng)物血清等、成分中有動(dòng)物血清等因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)強(qiáng)思考：思考：3 3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？、為

6、什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？4 4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？培養(yǎng)成新個(gè)體？成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)養(yǎng)不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體育成新的動(dòng)物個(gè)體培養(yǎng)過(guò)程：培養(yǎng)過(guò)程：動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官物的組織、器官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶胰蛋白酶1010代細(xì)胞代細(xì)胞5050代細(xì)胞代細(xì)胞細(xì)胞株細(xì)胞株無(wú)限傳代無(wú)限傳代細(xì)胞系細(xì)胞系剪碎原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代

7、培養(yǎng)細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞株、細(xì)胞系細(xì)胞株、細(xì)胞系植物體植物體培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果獲得細(xì)胞獲得細(xì)胞或細(xì)或細(xì)胞產(chǎn)物胞產(chǎn)物快速繁殖、培育無(wú)快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等病毒植株等培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的葡萄糖、動(dòng)葡萄糖、動(dòng)物血清物血清蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖原理原理動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較3 3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 將動(dòng)物體的一部分組織取出，經(jīng)過(guò)將動(dòng)物體的一部分組織取出，經(jīng)過(guò)機(jī)械消化或胰酶機(jī)械消化或

8、胰酶消化消化，使其分散成，使其分散成單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞；然后在人工控制的培養(yǎng)條；然后在人工控制的培養(yǎng)條件下，使這些細(xì)胞得以生存，并保持生長(zhǎng)、分裂乃致接件下，使這些細(xì)胞得以生存，并保持生長(zhǎng)、分裂乃致接觸抑制和有規(guī)律的衰老、死亡性能等生命活動(dòng)現(xiàn)象。觸抑制和有規(guī)律的衰老、死亡性能等生命活動(dòng)現(xiàn)象。一、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆形成一、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆形成4 4、動(dòng)物組織培養(yǎng)、動(dòng)物組織培養(yǎng) 動(dòng)物動(dòng)物組織組織在體外以及人工條件下維持生活狀態(tài)或生在體外以及人工條件下維持生活狀態(tài)或生長(zhǎng)特性。長(zhǎng)特性。5 5、器官培養(yǎng)、器官培養(yǎng)如何獲得純系的細(xì)胞系？如何獲得純系的細(xì)胞系？把把一個(gè)細(xì)胞一個(gè)細(xì)胞從群體中分離出來(lái)培養(yǎng)從群體

9、中分離出來(lái)培養(yǎng)（克隆培養(yǎng)法）（克隆培養(yǎng)法）思考：思考：二、克隆培養(yǎng)法二、克隆培養(yǎng)法1 1、克隆培養(yǎng)法概念：、克隆培養(yǎng)法概念：2 2、特征：、特征：3 3、基本要求：、基本要求：遺傳性狀均一、表現(xiàn)性狀相似。便于研究。遺傳性狀均一、表現(xiàn)性狀相似。便于研究。 把把一個(gè)一個(gè)細(xì)胞從群體中分離出來(lái)培養(yǎng)，使之繁殖成細(xì)胞從群體中分離出來(lái)培養(yǎng)，使之繁殖成一個(gè)新的細(xì)胞群體的技術(shù)。（克隆培養(yǎng)與群體培養(yǎng)是一個(gè)新的細(xì)胞群體的技術(shù)。（克隆培養(yǎng)與群體培養(yǎng)是一個(gè)等位概念）一個(gè)等位概念）必須保證分離出來(lái)的細(xì)胞是必須保證分離出來(lái)的細(xì)胞是一個(gè)一個(gè)而不是多個(gè)而不是多個(gè), ,即必須肯即必須肯定所建成的克隆定所建成的克隆來(lái)源于單個(gè)細(xì)胞。

10、來(lái)源于單個(gè)細(xì)胞。二、克隆培養(yǎng)法二、克隆培養(yǎng)法4 4、提高克隆形成率的措施：、提高克隆形成率的措施：5 5、用途：、用途：選擇適宜的培養(yǎng)基、添加血清、激素刺激、選擇適宜的培養(yǎng)基、添加血清、激素刺激、 CO2CO2培培養(yǎng)箱、養(yǎng)箱、PHPH值等值等如從普通細(xì)胞系中分離出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系。如從普通細(xì)胞系中分離出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系。三、動(dòng)物的細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用三、動(dòng)物的細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用 什么是細(xì)胞融合技術(shù)？什么是細(xì)胞融合技術(shù)？ 為什么要進(jìn)行細(xì)胞融合？為什么要進(jìn)行細(xì)胞融合？ 如何實(shí)現(xiàn)細(xì)胞融合？如何實(shí)現(xiàn)細(xì)胞融合？三、動(dòng)物的細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用三、動(dòng)物的細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用（一）細(xì)胞融合與

11、細(xì)胞雜交（一）細(xì)胞融合與細(xì)胞雜交細(xì)胞細(xì)胞A A細(xì)胞細(xì)胞B B雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞滅活的病毒滅活的病毒物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法仙臺(tái)病毒仙臺(tái)病毒皰疹病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒新城雞瘟病毒細(xì)胞核細(xì)胞核病毒顆粒病毒顆粒細(xì)胞核細(xì)胞核滅活的病毒顆粒黏附在細(xì)胞表面滅活的病毒顆粒黏附在細(xì)胞表面細(xì)胞膜被病毒顆粒穿過(guò)細(xì)胞膜被病毒顆粒穿過(guò)細(xì)胞膜連接細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合，形成雜種細(xì)胞細(xì)胞融合，形成雜種細(xì)胞 化學(xué)：化學(xué)：PEGPEG（聚乙二醇）（聚乙二醇） 物理：電融合物理：電融合 生物：滅活的病毒（仙臺(tái)病毒）生物：滅活的病毒（仙臺(tái)病毒）仙臺(tái)病毒仙臺(tái)病毒紫外線紫外線喪失感染性喪失感染性（不感染細(xì)胞）（不感染細(xì)胞）保留融合活性保

12、留融合活性細(xì)胞融合方法：細(xì)胞融合方法：主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體獲得雜種植株獲得雜種植株用用 途途物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒物理（離心、振蕩、物理（離心、振蕩、電刺激）電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的原理動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物

13、、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較讀下面一段文字資料，思考以下問(wèn)題：讀下面一段文字資料，思考以下問(wèn)題： 長(zhǎng)期以來(lái)，為了獲得抗體，采用的是把某種抗原反長(zhǎng)期以來(lái)，為了獲得抗體，采用的是把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中分離出所需抗體復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且抗的方法。用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應(yīng)不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn)，在體的特異性差，純度低，反應(yīng)不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B B細(xì)胞可以產(chǎn)生多細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)達(dá)

14、百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B B細(xì)胞只分泌一細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)一抗體，必須用單個(gè)B B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。（二）（二） 雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備什么是抗體？什么是抗體？由何種細(xì)胞產(chǎn)生？由何種細(xì)胞產(chǎn)生？主要分布在哪里？主要分布在哪里？起何作用？起何作用？什么是單克隆抗體？什么是單克隆抗體？效應(yīng)效應(yīng)B B細(xì)胞細(xì)胞血清血清特異性免疫作用特異性免疫作用抗體：抗體：機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的，并機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的，并且能與該抗原發(fā)生

15、特異性結(jié)合的具有且能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。免疫功能的球蛋白。用單個(gè)用單個(gè)B B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性增殖（擴(kuò)增殖（擴(kuò)增）增），也就是通過(guò)克隆，形成細(xì)胞，也就是通過(guò)克隆，形成細(xì)胞群，這樣的細(xì)胞群就有可能產(chǎn)生出群，這樣的細(xì)胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。單克隆抗體：?jiǎn)慰寺】贵w：討論：怎樣才能獲得單克隆抗體？提示提示1 1：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？：僅用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可行嗎？提示提示2 2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無(wú)限增殖的？殖的？提示提示3 3：有什么方法能使：有什么方法能使B B細(xì)胞產(chǎn)生抗

16、體的能細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖能力同時(shí)具備呢？力和腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖能力同時(shí)具備呢？（二）（二） 雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備設(shè)計(jì)方案：設(shè)計(jì)方案：一個(gè)一個(gè)B B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞 單克隆抗體制備過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程 注射抗原注射抗原B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到小鼠腹

17、腔注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體兩次篩選分別有什么目的？?jī)纱魏Y選分別有什么目的？本過(guò)程利用了哪些原理？本過(guò)程利用了哪些原理？為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與胞與B B細(xì)胞融合？細(xì)胞融合？ 第一次篩選得到雜交瘤細(xì)胞第一次篩選得到雜交瘤細(xì)胞 第二次篩選出特異抗體的細(xì)胞群。第二次篩選出特異抗體的細(xì)胞群。免疫原理、細(xì)胞融合原理、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理免疫原理、細(xì)胞融合原理、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理 細(xì)胞的同源性越近，融合形成的雜種細(xì)胞越易成細(xì)胞的同源性越近，融合形成的雜種細(xì)胞越易成活。繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有活。繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B B細(xì)胞分泌細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還

18、有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲抗體的能力，而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體。得大量單克隆抗體。四、動(dòng)物的克隆繁殖四、動(dòng)物的克隆繁殖 理論上，分化的動(dòng)物細(xì)胞能像植物細(xì)胞一理論上，分化的動(dòng)物細(xì)胞能像植物細(xì)胞一樣脫分化、再分化成一個(gè)動(dòng)物體嗎？樣脫分化、再分化成一個(gè)動(dòng)物體嗎？ 動(dòng)物細(xì)胞實(shí)際上表現(xiàn)出全能性的情況如何動(dòng)物細(xì)胞實(shí)際上表現(xiàn)出全能性的情況如何呢？呢？受精卵受精卵 胚胎干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞 多能干細(xì)胞多能干細(xì)胞 單能干細(xì)胞單能干細(xì)胞 體細(xì)胞體細(xì)胞四、動(dòng)物的克隆繁殖四、動(dòng)物的克隆繁殖（一）動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度（一）動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度（2 2）低等動(dòng)物細(xì)胞：全能性一般容易體現(xiàn)。如

19、水螅的上）低等動(dòng)物細(xì)胞：全能性一般容易體現(xiàn)。如水螅的上皮細(xì)胞，不經(jīng)過(guò)分裂就可以轉(zhuǎn)變?yōu)樯掀?、肌肉?xì)胞。皮細(xì)胞，不經(jīng)過(guò)分裂就可以轉(zhuǎn)變?yōu)樯掀?、肌肉?xì)胞。（1 1）高等動(dòng)物細(xì)胞）高等動(dòng)物細(xì)胞 在動(dòng)物的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，在動(dòng)物的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，分化的結(jié)果使得細(xì)胞在分化的結(jié)果使得細(xì)胞在形態(tài)和功能上高度特化，形態(tài)和功能上高度特化，這是由于細(xì)胞在伴隨著它們發(fā)這是由于細(xì)胞在伴隨著它們發(fā)育過(guò)程中在時(shí)間、空間的變化，育過(guò)程中在時(shí)間、空間的變化，基因表達(dá)的調(diào)控使得細(xì)基因表達(dá)的調(diào)控使得細(xì)胞中合成了專一的蛋白質(zhì)胞中合成了專一的蛋白質(zhì)。（二）動(dòng)物難以克隆的（二）動(dòng)物難以克隆的根本原因根本原因四、動(dòng)物的克隆繁殖四、動(dòng)物的克隆繁

20、殖核移植核移植胚胎細(xì)胞核移植胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植（難度高）（難度高） 1 1、基本過(guò)程：、基本過(guò)程：動(dòng)物體細(xì)胞核移植動(dòng)物體細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核細(xì)胞的細(xì)胞核, ,移如入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞移如入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中中. .使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎, ,這個(gè)新的胚胎最終這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體. .( (三三) )細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物的克隆繁殖細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物的克隆繁殖四、動(dòng)物的克隆繁殖四、動(dòng)物的克隆繁殖細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物的克隆繁殖：細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物的克隆繁殖：胚胎細(xì)胞核

21、的移植成功率遠(yuǎn)高于成體細(xì)胞。胚胎細(xì)胞核的移植成功率遠(yuǎn)高于成體細(xì)胞。2.2.培育過(guò)程：培育過(guò)程：去核卵細(xì)胞去核卵細(xì)胞體細(xì)胞核體細(xì)胞核細(xì)胞核移植細(xì)胞核移植重組細(xì)胞重組細(xì)胞電脈沖刺激電脈沖刺激早期胚胎早期胚胎(或重組胚胎）或重組胚胎）胚胎移植胚胎移植母體子宮母體子宮妊娠、出生妊娠、出生 個(gè)體個(gè)體3 3、原理：、原理：動(dòng)物體細(xì)胞動(dòng)物體細(xì)胞核核具有具有全能性全能性綿羊綿羊“多莉多莉”克隆過(guò)程：克隆過(guò)程：卵細(xì)胞卵細(xì)胞母綿羊母綿羊母綿羊母綿羊乳腺細(xì)胞乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核細(xì)胞核移植細(xì)胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C C母綿羊子宮母綿羊子宮胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多莉羊的培育過(guò)

22、程多莉羊的培育過(guò)程融合后的卵細(xì)胞融合后的卵細(xì)胞體細(xì)胞克隆成功的意義：體細(xì)胞克隆成功的意義：1 1、證明了高度分化的細(xì)胞也可以回復(fù)到類似受、證明了高度分化的細(xì)胞也可以回復(fù)到類似受 精卵時(shí)期的功能。精卵時(shí)期的功能。2 2、證明了細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用。、證明了細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用。應(yīng)用：應(yīng)用： 為遺傳疾病的治療、優(yōu)良品種的培育等提供了重要途為遺傳疾病的治療、優(yōu)良品種的培育等提供了重要途徑；對(duì)瀕危動(dòng)物的保存也有重要意義。徑；對(duì)瀕危動(dòng)物的保存也有重要意義?？寺⊙虺晒Φ姆肿蛹?xì)胞生物學(xué)機(jī)理：克隆羊成功的分子細(xì)胞生物學(xué)機(jī)理： 重組移核細(xì)胞丟失了源于乳腺細(xì)胞的調(diào)節(jié)蛋白，重組移核細(xì)胞丟失了源于

23、乳腺細(xì)胞的調(diào)節(jié)蛋白，經(jīng)過(guò)三次分裂后，原乳腺細(xì)胞的調(diào)節(jié)蛋白便全部被經(jīng)過(guò)三次分裂后，原乳腺細(xì)胞的調(diào)節(jié)蛋白便全部被卵細(xì)胞質(zhì)中的蛋白因子替換了，因此核卵細(xì)胞質(zhì)中的蛋白因子替換了，因此核DNADNA被重新被重新編排，細(xì)胞開(kāi)始表達(dá)自己的基因。編排，細(xì)胞開(kāi)始表達(dá)自己的基因。A A 、 B B細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞, ,請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題: :A A細(xì)胞細(xì)胞B B細(xì)胞細(xì)胞C C細(xì)細(xì)胞胞D D細(xì)細(xì)胞胞(1)(1)若若A A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞B B細(xì)胞為淋巴細(xì)胞細(xì)胞為淋巴細(xì)胞, ,那么那么D D細(xì)胞稱細(xì)胞稱為為 細(xì)胞細(xì)胞,D,D細(xì)胞具有兩個(gè)親本細(xì)胞的特征細(xì)胞具有兩個(gè)親本細(xì)胞的特征,

24、,一方一方面因具有骨髓瘤細(xì)胞的面因具有骨髓瘤細(xì)胞的 性質(zhì)性質(zhì), ,通過(guò)通過(guò) 方方式產(chǎn)生大量細(xì)胞式產(chǎn)生大量細(xì)胞, ,我們稱之為我們稱之為 過(guò)程過(guò)程; ;另一方面能另一方面能分泌大量的抗體分泌大量的抗體, ,我們把該過(guò)程分泌的抗體我們把該過(guò)程分泌的抗體稱稱 . .雜交瘤雜交瘤連續(xù)分裂連續(xù)分裂有絲分裂有絲分裂單克隆單克隆單克隆抗體單克隆抗體練一練練一練(2)D(2)D細(xì)胞中產(chǎn)生的抗體其化學(xué)本質(zhì)是細(xì)胞中產(chǎn)生的抗體其化學(xué)本質(zhì)是 , ,合成合成該物質(zhì)的場(chǎng)該物質(zhì)的場(chǎng) , ,它是由它是由 控制合控制合成的成的, ,合成過(guò)程包括合成過(guò)程包括 和和 兩個(gè)重要步驟兩個(gè)重要步驟. .球蛋白球蛋白核糖體核糖體基因基因轉(zhuǎn)

25、錄轉(zhuǎn)錄翻譯翻譯(3)D(3)D細(xì)胞中產(chǎn)生的抗體具有細(xì)胞中產(chǎn)生的抗體具有 作用作用, ,與血清抗體相與血清抗體相比其優(yōu)越之處在于比其優(yōu)越之處在于 強(qiáng)強(qiáng), , 高高. .免疫免疫特異性特異性靈敏度靈敏度(4)(4)若若A A為人細(xì)胞為人細(xì)胞,B,B為鼠細(xì)胞為鼠細(xì)胞, ,用同位素標(biāo)記用同位素標(biāo)記A A細(xì)胞膜上的蛋白細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)質(zhì),B,B不標(biāo)記不標(biāo)記, ,在在C C細(xì)胞時(shí)細(xì)胞時(shí), ,檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)整個(gè)細(xì)胞一半有放射性檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)整個(gè)細(xì)胞一半有放射性另一半沒(méi)有另一半沒(méi)有. .在在D D細(xì)胞時(shí)細(xì)胞時(shí), ,檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)整個(gè)細(xì)胞都有放射性檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)整個(gè)細(xì)胞都有放射性, ,請(qǐng)解釋原因請(qǐng)解釋原因 . .構(gòu)成細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)分子大都可以流動(dòng)構(gòu)成細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)分子大都可以流動(dòng)練一練練一練謝謝！謝謝！動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：1 1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境 （添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）2 2、營(yíng)養(yǎng)、營(yíng)養(yǎng)（氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、葡萄糖、葡萄糖、動(dòng)物血清動(dòng)物血清等）等）3 3、溫度和、溫度和pHpH 36.5+ 36.5+（- -）0.50.5度度, 7.2-7.4, 7.2-7.44 4、氣體環(huán)境：、氣體環(huán)境： COCO2 2培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱