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1、細(xì)菌染色體細(xì)菌染色體型裂解途徑型裂解途徑P1型裂解途徑型裂解途徑 這些這些sus突變型之所以在帶有相應(yīng)的抑制基因宿主突變型之所以在帶有相應(yīng)的抑制基因宿主中可產(chǎn)生后代,是由于翻譯過程中,在終止密碼子處中可產(chǎn)生后代,是由于翻譯過程中,在終止密碼子處插入一個特定的氨基酸,防止在終止密碼子位置上提插入一個特定的氨基酸,防止在終止密碼子位置上提早終止。早終止。 在 B 菌 株 中 在 K 菌 株 ( ) 的 噬 菌 斑 中 的 噬 菌 斑 r- (大 ,邊 緣 清 晰 ) r+ (小 ,邊 緣 模 糊 ) (小 ,邊 緣 模 糊 ) RF (2 r+ 噬 菌 體 ) 噬 菌 體 總 數(shù) 100 2 K
2、菌 株 平 板 上 的 噬 菌 斑 數(shù) B 菌 株 平 板 上 的 噬 菌 斑 數(shù) 100T4 rII 突變型和野生型噬菌體突變型和野生型噬菌體在在E.coli B菌株中的噬菌斑菌株中的噬菌斑三、重組檢驗與基因精細(xì)構(gòu)造分析recombination test P 杏眼X 白眼 Wa + + W Wa + Y F1 杏眼 X 杏眼 Wa + Wa + Y + W F2 杏眼 杏眼 杏眼 白眼 Wa + + W Wa + W + Wa + Wa + Y Y 基因內(nèi)重組基因內(nèi)重組 + + Wa W 配子配子 + + + + Wa W Wa + + + + Wa W Wa W W Wa + Wa +
3、或或 Y Y 或或 Wa + Y Wa + Y紅眼紅眼比較:比較:F1 F1 杏眼杏眼 基因型基因型 紅眼紅眼 基因型基因型 Wa + Wa + 反式反式 Wa W Wa W 順順式式 + W + + + W + + 1 噬菌體雜交實驗噬菌體雜交實驗 r47r+ X r+r104 B B K()親組合:親組合:r47r+、r+r104, r+r+ 重組合:重組合:r+r+、r47r104,2 2 重組值的計算重組值的計算 重組值重組噬菌斑數(shù)重組值重組噬菌斑數(shù) 100 100 總噬菌斑數(shù)總噬菌斑數(shù)在在K(K( ) )上生長的噬菌斑數(shù)上生長的噬菌斑數(shù)2 2100100 在在B B上生長的噬菌斑數(shù)上
4、生長的噬菌斑數(shù)親本型親本型重組型重組型 重組率重組率RfRf 24 24噬菌斑總數(shù)噬菌斑總數(shù)h+r+半小h-r+透小h-r- 透大h+r-半大xx重組型重組型 用不同的用不同的rII突變型成對組合同時去感染大腸桿突變型成對組合同時去感染大腸桿菌菌K( )一互補(bǔ)檢驗的原理和方法 3 判別方法判別方法: 順式順式 反式反式 分析結(jié)論:兩突變分析結(jié)論:兩突變 + +/- - + -/- + 表現(xiàn)型表現(xiàn)型 野生型野生型 野生型野生型 屬于兩個順反子屬于兩個順反子 表現(xiàn)型表現(xiàn)型 野生型野生型 突變型突變型 屬于同一順反子屬于同一順反子 順式測驗 反式測驗 突 變 位 點在 同 一 順反子內(nèi) A B + A B 突 變 位 點在 不 同 的順反子內(nèi) + A B + A B 圖5-20 順反測驗結(jié)果的圖解。當(dāng)順式有功能,而反式?jīng)]有功能時,突變 位點突變位點在同一順反子內(nèi);當(dāng)順式有功能,而反式也有功能時,突變 位點突變位點在不同順反子內(nèi)。 當(dāng)順式有功能,反式無功能時,兩突變位點在當(dāng)順式有功能,反式無功能時,兩突變位點在同一順反子內(nèi)同一順反子內(nèi)當(dāng)順式有功能,反式也有功能時,兩突變位點當(dāng)順式有功能,反式也有功能時,兩突變位點在不同順反子內(nèi)在不同順反子內(nèi)野生型蛋白質(zhì)野生型蛋白質(zhì)活性位點活性位點突變影響突變影響86位氨基酸位氨基酸突變影響突變影響37位
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