《中藥制藥分離工程》課程計劃性實驗指導(dǎo)講義

1、中藥制藥分離工程課程實驗講義v第一版主編：彭國平副主編：鄭云楓李存玉李紅陽芍藥甘草湯的精制分離一、實驗?zāi)康?、掌握設(shè)計中藥復(fù)方的精制分離方法與技術(shù)2、掌握芍藥廿草湯分離過程中的醇沉、超濾、樹脂吸附技術(shù)3、熟悉不同精制工藝對芍藥甘草湯的固含物及有效成分的影響4、了解大孔樹脂、超濾等吸附、分離原理二、儀器與試劑1、儀器：電磁爐、煎煮鍋、量筒、藥典篩、藥液桶、天平（百分之一、十萬分 之一）、表面皿、蠕動泵、超濾膜（截留分子量lokda、lookda）、量筒、燒杯、 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、敞口玻璃柱（h： 60cm, 0： 3.5cm）,滴水閥、高效液相色譜儀2、藥材：赤芍、甘草3、試劑：蒸憎水、大孔樹脂（hp

2、d400）、95%乙醇，乙月青、甲醇、三氟乙酸均 為色譜純，純凈水三、實驗內(nèi)容1、芍藥甘草制劑的制備稱取藥材赤芍300g、甘草300g置于煎煮鍋中，加10倍量水，提取2次， 每次2小時，合并提取液，抽濾，得芍藥廿草提取液。2、實驗實施方式根據(jù)實驗分組，每組同學(xué)中藥制藥分離技術(shù)課程所學(xué)，選擇組別所感興趣的 制備工藝，即以下3種芍藥甘草湯精制工藝中的一種展開實驗，分別分析不同工 藝對芍藥昔、甘草酸和甘草昔的得率，所制備的有效部位的固含物，并匯報、討 論。采用相同工藝的組別制備的有效部位成分含量及固含物作為組別間評分比 較的指標(biāo)。3、精制分離工藝 工藝一、醇沉工藝取芍藥甘草提取液，加熱濃縮，濃縮至藥

3、液比重為1.1-1.2 g/ml,加入95% 乙醇使得濃縮液醇濃度為70%, 4°c放置12小時，濾出上清液，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 減壓濃縮（70°c）至無醇味，得芍藥甘草湯清膏。工藝二、超濾工藝取芍藥甘草提取液，布氏漏斗抽濾，收集濾液，進(jìn)而采用截留分子量為 lookda的超濾膜超濾，待充分平衡后，分別收集超濾液。工藝三、大孔樹脂吸附工藝取芍藥甘草提取液，調(diào)節(jié)ph為56之間，取預(yù)處理好的200 ml大孔樹脂 樹脂裝柱，芍藥甘草提取液，控制流出液速度在20ml50ml之間，待上樣液 面與樹脂接近時，采用蒸憾水洗脫2倍柱體積。然后，采用70%的乙醇（3倍柱 體積）洗脫，收集流出液，旋

4、轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀冋收乙醇，蒸徭水洗岀濃縮液，量取體積, 得有效部位。4、檢測%1 固含物檢測將表面皿洗干凈后置于105°c烘箱中，烘至恒重；精密量取原液、醇沉液、 超濾液和大孔樹脂70%乙醇洗脫液各10ml,置于已恒重的表面皿中，蒸干，置 烘箱中105°c,干燥2h,取出放入干燥器中，冷卻至室溫，稱量，再放至烘箱中 （105°c）干燥lh,兩次的重量差異低于0.3mgo%1 成分檢測（1）甘草酸測定色譜條件與系統(tǒng)適用性實驗 以十八烷基硅烷健合硅膠為填充劑，以乙睛 0.1%三氟乙酸（40-60）為流動相，檢測波長為254nmo對照品溶液的制備 取甘草酸對照品適量，精密稱定，

5、加甲醇分別制成每1曲 含甘草酸200 pg的溶液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10pl,注入液相色譜儀, 測定，即可。（2）甘草昔測定色譜條件與系統(tǒng)適用性實驗 以十八烷基硅烷健合硅膠為填充劑，以乙月青 0.1%三氟乙酸（20-80）為流動相，檢測波長為276nmo對照片溶液的制備 取甘草昔對照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成每lml 含廿草營200 pg的溶液，即得。測定法分別精密吸取對照甜溶液與供試品溶液各10 pl,注入液相色譜儀,測定，即可。（3）芍藥昔色譜條件與系統(tǒng)適用性實驗 以十八烷基硅烷健合硅膠為填充劑，以甲醇 -0.1 mol/l三氟乙酸溶液（40： 60）為流動項；檢測波長為230nm。對照品溶液的制備 取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥器屮干燥36小時的芍藥廿對 照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含100 pg的溶液，即得。測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10pl,注入液相色譜儀, 測定，即可。四、結(jié)果與討論1、對比醇沉、超濾、樹脂吸附技術(shù)對芍藥廿草湯中固含物的影響，哪種除雜效 果較好。2、對比醇沉、超濾、樹脂吸附技術(shù)對芍藥甘草湯有效成分芍藥昔、甘草昔、甘 草酸的精制效果。3、中藥制劑在生產(chǎn)過程中，應(yīng)該選用哪些分離技術(shù)，實現(xiàn)制劑的成分保留和雜 質(zhì)的去除，以及此類技術(shù)的優(yōu)缺點。五、注意大孔樹脂預(yù)處理：取大孔樹脂（hpd400） 200 m