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文檔簡介
1、第一章文獻(xiàn)綜述金銀花研究進(jìn)展 金銀花,別名雙花、二花、忍冬花、二寶花,為忍冬科植物忍冬(Lonicerajaponica Thunb )、紅腺忍冬(Lonicera hypoigLauca Miq )、華南忍冬(Loniceraconfusa DC.)和毛花柱忍冬(Lonicera dasystyLa Rehd)的花蕾或初放的花。金銀花作為一種常用中藥,在名醫(yī)別錄中被列為上品2005年以前頒布的藥典將忍冬科植物忍冬、紅腺忍冬、山銀花和毛花柱忍冬統(tǒng)一作為金銀花的藥源收錄,而2005版藥典將原收錄的金銀花分為金銀花(Flos Lonicerae japonicae )和山銀花(Flos Lonic
2、erae) 2個品種進(jìn)行收錄,金銀花只收錄了“忍冬”一個種,而把“灰氈毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz. )”、“紅腺忍冬”、“華南忍冬(Loniceraconfusa DC.)”作為山銀花的來源。 金銀花外形呈棒狀,上粗下細(xì),長2-3.5cm外表淡黃色,久貯色深。密生短柔毛及腺毛,下部有細(xì)小的花尊,黃綠色,先端5裂。開放者,花冠筒狀,頂端開裂成唇形;上唇4裂,下唇不裂。筒內(nèi)有雄蕊5枚,附于筒壁;雌蕊1枚,長于雄蕊,子房無色,氣香,味淡,微苦。花期5一7月,果期7一10月。除金銀花植物的花外,其葉、藤均可入藥。 金銀花植物種類繁多,全世界忍冬科植物約2
3、00種,我國有98種,廣泛分布于全國各地。而以西南、華南種類最多,其中可供藥用的達(dá)47種,所有這些種類可分為2類:道地藥材和地方習(xí)用藥材。近30多年來,隨著金銀花需求越來越大,金銀花在我國己進(jìn)行廣泛的人工栽培,栽培的主要地區(qū)有山東、河南、湖南、廣西、貴州、重慶等省市區(qū)。湖南是80年代初開始發(fā)展起來的新產(chǎn)區(qū),現(xiàn)已成為全國最大的金銀花產(chǎn)區(qū)之一。各地栽培的品種主要有山東的忍冬(生產(chǎn)上俗稱濟(jì)銀花)、河南的密銀花、湖南的灰氈毛忍冬(俗稱大葉山銀花)。近年來,各地藥農(nóng)和中藥育種工作者,利用各地品種的優(yōu)良性狀進(jìn)行雜交育種或充分利用自然變異材料,根據(jù)不同的需求,培育出許多性狀優(yōu)良的新品種,并進(jìn)行無性快速繁殖擴(kuò)
4、大種植規(guī)模。如湖南的“湘蕾”系列、山東的“亞特”系列、河南的樹形金銀花、廣東和廣西的盆栽金銀花等都是非常有名的人工培育的新品種,并已進(jìn)行大規(guī)模種植。由于新品種具有許多明顯的優(yōu)良性狀,在生產(chǎn)上得到迅速推廣,栽培面積迅速擴(kuò)大,原有通過野生資源馴化的栽培品種將慢慢被新品種取代。近年來,金銀花的用途越來越廣泛,開發(fā)的產(chǎn)品越來越多,社會對它的需求總量越來越大。我省是全國最大的金銀花產(chǎn)區(qū)之一,主要栽培的品種有湘蕾金銀花和灰氈毛忍冬,種植面積超過25萬畝,年產(chǎn)量達(dá)3萬噸,金銀花產(chǎn)業(yè)己成為我省山區(qū)特色農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)。但是,隨著2005版中華人民共和國藥典將原來的金銀花分為金銀花和山銀花兩種品種后,只有忍冬的花蕾可作
5、為藥用金銀花來源,而我省大規(guī)模種植的金銀花只能作為山銀花使用。此外,目前國內(nèi)作為藥用金銀花原料標(biāo)準(zhǔn)的都是金銀花而非山銀花。因此,我省山銀花的銷售市場和藥用的合法性將受到巨大的挑戰(zhàn),山銀花的綜合開發(fā)利用研究迫在眉睫。因此,湘蕾金銀花的藥理性質(zhì),比較湘蕾金銀花和金銀花的藥理作用,為山銀花作為藥用金銀花及其他應(yīng)用提供理論依據(jù)。 根據(jù)文獻(xiàn)資料報道,我國有20余種忍冬科忍冬屬植物的花蕾當(dāng)金銀花入藥。早期,以山東、河南生產(chǎn)的濟(jì)銀花、密銀花產(chǎn)量最大。近20多年來,灰氈毛忍冬由于大量的人工栽培,已逐漸成為市場上的主導(dǎo)品種,種植規(guī)模和產(chǎn)量最大,由于其綠原酸含量比濟(jì)銀花、密銀花高,在中成藥投料中已成為最主要的原料
6、。地處雪峰山的湖南省隆回縣小沙江地區(qū)與毗鄰的淑浦縣龍莊灣地區(qū)已成為全國最大的金銀花產(chǎn)地之一,并形成專業(yè)的金銀花產(chǎn)品交易市場。自1997年發(fā)現(xiàn)并選育出灰氈毛忍冬自然變異株湘蕾金銀花至今,湘蕾金銀花栽培在湘、黔、魯?shù)仁〉玫酵茝V,年產(chǎn)干金銀花達(dá)8000噸以上,為當(dāng)?shù)剞r(nóng)民產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。1.1金銀花化學(xué)成分 金銀花的化學(xué)成分分析表明,金銀花含人體必須的30多種元素,其活性成分主要為有機(jī)酸類、黃酮類、三菇皂營類、揮發(fā)油及微量元素等。1.1.1有機(jī)酸類 有機(jī)酸類包括綠原酸、咖啡酸、肉豆范酸及棕擱酸等,其中綠原酸類化合物是金銀花的主要有效成分,包括綠原酸C,sH,909 (Chlorogenic ac
7、id)、異綠原酸(Isochlomgenic acid)和咖啡酸(Caffeic acid) 17,111,其中咖啡酸是綠原酸的水解產(chǎn)物。異綠原酸為一混合物,有7種異構(gòu)體,分別為4, 5一二咖啡酸酞奎尼酸、3,4一二咖啡酸酞奎尼酸、3, 5一二咖啡酸酞奎尼酸、1, 3一二咖啡酸酞奎尼酸、3一阿魏酞奎尼酸、4一阿魏酞奎尼酸、5一阿魏酞奎尼酸,而3, 5一二咖啡酸奎尼酸為其主要成分。從金銀花水溶性部分中經(jīng)乙酞化得到綠原酸四乙酞化合物;從金銀花氯仿萃取物中分離得到肉豆范酸與棕擱酸;從吊子銀花乙酸乙醋萃取物中分離得到綠原酸。用紫外分光光度法測定了忍冬不同部分綠原酸的含量,結(jié)果表明:忍冬各部位中都有一定
8、的綠原酸,但含量高低不同,依次為花>葉>莖>根,葉中綠原酸的含量是花的69.6396。金銀花越冬老葉中綠原酸含量約為藥用金銀花的1.41倍、忍冬藤的9.08倍,表明金銀花不僅是花可以作為藥用,而且金銀花的葉莖都可以充分的利用起來。1.1.2黃酮類化合物 從金銀花中分離出4種黃酮類化合物,分別鑒定為木犀草素-7-0- a -D-葡萄糖營,木犀草素一7-0- 0 -D一半乳糖營,棚皮素一3-0- 0 -D-葡萄糖昔及金絲桃營。黃麗英等12,從金銀花氯仿萃取物中又分離得到5-經(jīng)基一3',4',7一三甲氧基黃酮。對細(xì)氈毛忍冬花蕾進(jìn)行研究,分離得到了木犀素.早期,以山東
9、、河南生產(chǎn)的濟(jì)銀花、密銀花產(chǎn)量最大。近20多年來,灰氈毛忍冬由于大量的人工栽培,已逐漸成為市場上的主導(dǎo)品種,種植規(guī)模和產(chǎn)量最大,由于其綠原酸含量比濟(jì)銀花、密銀花高,在中成藥投料中已成為最主要的原料。地處雪峰山的湖南省隆回縣小沙江地區(qū)與毗鄰的淑浦縣龍莊灣地區(qū)已成為全國最大的金銀花產(chǎn)地之一,并形成專業(yè)的金銀花產(chǎn)品交易市場。自1997年發(fā)現(xiàn)并選育出灰氈毛忍冬自然變異株湘蕾金銀花至今,湘蕾金銀花栽培在湘、黔、魯?shù)仁〉玫酵茝V,年產(chǎn)干金銀花達(dá)8000噸以上,為當(dāng)?shù)剞r(nóng)民產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。1.1.5微量元素 金銀花含微量元素共15種:Fe, Mn, Cu, Zn, Ti, Sr, Mo, Ba, Cr,
10、Pb,V, Co, Li, Ca 等.1.2金銀花的藥理作用 金銀花為常見中藥,其臨床應(yīng)用極為廣泛,其主要作用有抗病原微生物(細(xì)菌、真菌、病毒)作用、抗炎解熱作用、保肝利膽、止血作用、抗生育作用、抗氧化作用、免疫調(diào)節(jié)作用、降血脂作用、中樞興奮等作用。1.2.1抗病原微生物作用 金銀花對多種致病菌均有一定的抑制作用,這些病原菌包括引起中醫(yī)熱毒證的金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎球菌、腦膜炎雙球菌;引起腸道急性熱性感染的傷寒桿菌、副傷寒桿菌、志賀氏菌、福氏痢疾桿菌以及霍亂弧菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、結(jié)核桿菌等。用金銀花提取液對不同血清型變形鏈球菌進(jìn)行抑菌試驗(yàn),該研究表明金銀花提取液主要是抑菌作用,
11、利用金銀花水提液對金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌、傷寒桿菌、福氏痢疾桿菌、甲型溶血性鏈球菌進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明金銀花對這幾種細(xì)菌均具有很好的抑菌作用。用金銀花葉提取物對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌進(jìn)行抑菌作用,研究表明金銀花葉提取物也有一定的抑菌作用。 金銀花有抗病毒作用,對流感病毒、孤兒病毒、疙疹病毒增多有抑制作用;研究表明綠原酸對常見呼吸道病毒有較強(qiáng)的抑制作用。 金銀花對皮膚真菌也有一定的抑制作用,此外金銀花對革蘭陰性細(xì)菌內(nèi)毒素有較強(qiáng)的拮抗作用。 關(guān)于金銀花抑菌、抗病毒有效成分一般認(rèn)為是綠原酸類化合物,雙花醇即有較強(qiáng)的體外抗菌活性,而芳樟醇、香葉醇、a一松油醇等也具有明顯抗菌抗病毒作用。1.2.
12、2抗炎及解熱作用金銀花具有明顯抗炎作用。注射給藥時可明顯抑制新鮮雞蛋清、鹿角菜膠等所致大鼠腳躊水腫,明顯抑制巴豆油性肉牙囊大鼠的炎性滲出和炎性增生,于體外還能抑制人的x一球蛋白的熱變性。從黃褐毛忍冬花中提取到的黃褐毛忍冬具有顯著抗炎活性發(fā)現(xiàn)Lonicerosidea和Lonicerin兩種單體的抗炎止痛作用。對金銀花解熱、抗炎、免疫等實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,其水煎劑、口服液和注射液對角叉菜膠、三聯(lián)菌苗致熱有不同程度的退熱作用,對蛋清、角叉菜膠、二甲苯所致水腫亦有不同程度的抑制作用,動物實(shí)驗(yàn)表明,金銀花水提液能顯著促進(jìn)白細(xì)胞的吞噬功能,使受損傷淋巴細(xì)胞接受抗原信息功能提高到正常水平,使受損傷淋巴細(xì)胞母
13、細(xì)胞化反應(yīng)恢復(fù)正常,還能顯著增強(qiáng)IL2的產(chǎn)生,使受損淋巴細(xì)胞抗體產(chǎn)生能力顯著增強(qiáng)1.2.3保肝利膽作用 金銀花所含多種綠原酸類化合物具有顯著的利膽作用,可增進(jìn)大鼠膽汁分泌。動物實(shí)驗(yàn)表明,金銀花中的三菇皂昔對CC從引起的小鼠肝損傷有明顯的保護(hù)作用,黃褐毛忍冬總皂普能顯著抑制CC 14、對乙酞氨基酚及D一半乳糖胺所致肝中毒小鼠血清ALT的升高,同時降低肝臟甘油三醋含量,并明顯減輕肝臟病理損傷的嚴(yán)重程度,使肝臟點(diǎn)狀壞死數(shù)總和及壞死改變出現(xiàn)率明顯降低。而且金銀花還能顯著降低多種模型小鼠血清膽固醇(Tc)及動脈粥樣硬化指數(shù)(AI),提高高密度脂蛋白一膽固醇(HDLG)含量,保護(hù)胰腺p細(xì)胞及降糖作用。另外
14、,對乙酞氨基酚所致小鼠急性肝損傷也有明顯的保護(hù)作用。1.2.4止血作用 金銀花炭水煎液、混懸液具有顯著的止血作用,且混懸液的作用強(qiáng)于水煎液。金銀花炭中蹂質(zhì)的含量僅為生品的1/2,但其止血作用明顯優(yōu)于生品, 1.2.5抗生育作用 金銀花乙醇提取后的煎劑注射給藥,對小鼠、狗、猴等多種動物具有抗生育作用。1.2.6抗氧化作用 金銀花對燙傷小鼠中性粒細(xì)胞釋放H,Oz有一定程度的改善作用,能使?fàn)C傷小鼠中性粒細(xì)胞合成和釋放溶酶體酶的能力相應(yīng)減少,說明其具有抗氧化反應(yīng)的作用。1.2.7毒副作用金銀花水浸液灌服對家兔、犬等無明顯毒性反應(yīng),對呼吸、血壓、尿量均無影響, 目前,金銀花的應(yīng)用廣泛,如在醫(yī)藥方面、保健
15、食品方面、化妝品方面、花卉觀賞方面等。1.3.1醫(yī)藥上的應(yīng)用1.3.1.1古代醫(yī)學(xué)的應(yīng)用 性味歸經(jīng):味甘,性寒。歸肺、胃、大腸經(jīng) 功效:清熱解毒,疏散風(fēng)熱。 主治:癰腫療瘡,外感風(fēng)熱,瘟病初起,熱毒血痢。金銀花甘寒,長于清氣分熱邪、透營達(dá)氣、解火毒、消癰腫,且清熱解毒之力頗強(qiáng),為瘡瘍用藥。其氣清香,宣散平和,清熱而不傷氣,化熱而不傷陰,故為治療溫?zé)峄鸲局哑贰?常用于治療:瘡癰初起,紅熱腫痛者:療瘡腫毒,紅腫熱痛,堅硬根深者;腸癰腹痛:肺癰咳吐膿血者;肺經(jīng)熱邪,心胃熱毒者;熱入營血,舌絳神昏,心煩少寐者。本品有透營轉(zhuǎn)氣之功,性寒而香,善解熱毒,消臃滯,涼血熱,止瀉痢,故常用于熱毒血痢,便膿血者
16、。神農(nóng)本草經(jīng)把其列為上品,名醫(yī)別錄記述了它有治療“暑熱身腫”的功能。李時珍在本草綱目稱它可以“久服輕身,長年益壽”。古代名醫(yī)陶弘景更對它的藥用作了如下評述:“忍冬煮汁釀酒飲,補(bǔ)虛療風(fēng)。此既長年益壽,可常采用,而仙經(jīng)少用。凡易得之草,人多不肯為之,要求難得者,賤近而貴遠(yuǎn),庸人之情也” 1.3.1.2現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的應(yīng)用現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明:金銀花具有抗病原微生物、抗炎、解熱、保肝、抗生育、止血、免疫調(diào)節(jié)、降血脂、中樞興奮等作用。可用治40多種疾病,如呼吸道感染,細(xì)菌性感染,急性扁桃體炎,高熱癥,梅核氣(慢性咽喉炎),小兒肺炎,腮腺炎,小兒風(fēng)疹矽肺合并肺部感染,闌尾炎,闌尾膿腫,鉤端螺旋體,乳腺炎,急性腎
17、盂腎炎,膽汁返流性胃炎,肝炎,急性腸炎,菌痢,慢性腸炎,急性阿米巴痢疾,妊娠早期急性尿路感染性附件炎,高血脂癥,慢性骨髓炎,復(fù)發(fā)性口瘡,皮膚病,褥瘡,腫瘤放療化療口干癥等常見病和疑難雜證1.3.2其他方面的應(yīng)用 金銀花經(jīng)過一定工藝處理后,制成色香味俱全,同時又保留有金銀花原有保健功能的金銀花茶,金銀花飲料,金銀花糖果等,還可作為香料,代替部分啤酒花;在化妝品和日用保健品中的應(yīng)用,如制成的銀花露、銀仙牙膏、忍冬花牙膏、金銀花癢子水等均受到廣大消費(fèi)者的歡迎521。同時,金銀花原植物有的常綠,有的半常綠,花期長,花型漂亮,且對二氧化硫有抗性,很多人把它放入室內(nèi)作為觀賞植物。金銀花還可作為牲畜的青飼料
18、,既可以作為食物來源,又可以起到抗菌消炎,清熱解毒的作用。3研究的目的、意義及主要內(nèi)容3.1研究的目的和意義 隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)及社會的飛速發(fā)展,人們對生活水平的要求不斷提高,生活質(zhì)量大大改善,人類健康己成為當(dāng)今世界研究的主題之一。人們對綠色保健藥品及綠色安全食品的需求越來越迫切,開發(fā)和利用天然植物為人類造福,是當(dāng)前的發(fā)展趨勢,也是世界上最有前途,最有生氣的朝陽產(chǎn)業(yè)之一。 目前,人們不管對食品還是對藥品都心存恐懼,其主要原因在于抗生素藥物殘留相當(dāng)嚴(yán)重以及對病菌易產(chǎn)生耐藥性,國外已經(jīng)逐步采用禁止和限制應(yīng)用的措施。然而,由于抗生素作為一種抗菌類常用藥,需求量大,給禁止和限制使用帶來困難。但是,如果能
19、在植物次生代謝物中尋找一些替代抗生素的天然藥物,既能解決抗生素泛用導(dǎo)致的耐藥性問題,又能滿醫(yī)療的需求。而其中特別是中藥的殘留量少,且對病原菌不易產(chǎn)生耐藥性,有利于人們的健康和環(huán)境保護(hù),選擇天然產(chǎn)物作為抗生素類藥物替換品將具有重要意義。中草藥金銀花具抗菌消炎作用,而且其臨床應(yīng)用廣泛,藥用歷史悠久,資源豐富,它能否代替部分抗生素作為抗菌類藥,值得研究,這也是本試驗(yàn)的目的之一。 2結(jié)果與分析2.1金銀花提取物的體外抑菌作用2.1.1不同溶劑提取物的抑菌效果2.1.1.1金銀花水提物對5種細(xì)菌的抑菌效果 結(jié)果見表2.1,試驗(yàn)得知,金銀花水提物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、鏈球菌以及肺炎雙球
20、菌均有一定的抑菌效果。從3種金銀花水提物的抑菌效果來看,其中湘蕾對前4種菌的抑菌效果表現(xiàn)為極敏,對后1種菌表現(xiàn)為高敏?;覛置嵛锏囊志Чc湘蕾水提物相當(dāng)(P<0.05),而濟(jì)銀花水提物的抑菌效果相對較差(P<0.01)。與氨節(jié)青霉素(25 mg/mL)相比,湘蕾水提物的抑菌效果稍差些,但它的粗提物能達(dá)到這樣的抑菌效果也有開發(fā)的價值。 從表2.2可看出,金銀花超渣提取物仍具有一定的抑菌效果,對5種細(xì)菌均表現(xiàn)為高敏或中敏。對同種細(xì)菌的抑菌效果而言,在3種超渣水提物抑菌效果中,灰氈毛水提物的抑菌效果與湘蕾相似(P<0.05),而濟(jì)銀花水提物的抑菌效果相對較差(P>0.05
21、)。金銀花70%醇提物對5種細(xì)菌的抑菌效果 金銀花70%醇提物對5種細(xì)菌的體外抑菌作用表明,70%醇提物對上述5種細(xì)菌均有抑菌作用,且對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、鏈球菌為極敏,對肺炎雙球菌為高敏,其中最大的抑菌直徑達(dá)26.1 mm。在3種70%醇提物中,湘蕾70%醇提物的抑菌效果與灰氈毛相似(P<0.05),而濟(jì)銀花相對較差(P>0.05);與對照相比,湘蕾70%醇提物抑菌效果高于或相當(dāng)于氨節(jié)青霉素(P<0.05)。結(jié)果見表2.3. 從表2.4可得出,金銀花超渣70%醇提物也對這5種細(xì)菌有不同程度的抑菌作用,湘蕾在這3種金銀花中表現(xiàn)極為突出,它的70%醇提物對大
22、腸桿菌、金黃色葡萄球菌和鏈球菌表現(xiàn)為極敏,而對福氏痢疾桿菌和肺炎雙球菌表現(xiàn)出高敏。與灰氈毛和濟(jì)銀花比較,湘蕾70%醇提物的抑菌效果與母本灰氈毛相似(P<0.05), 但比濟(jì)銀花顯著(P>0.05)。與未經(jīng)超臨界萃取的70%醇提物相比,抑菌直徑降幅很大,最大的達(dá)到6.7mm 表2.5表明,3種金銀花95%醇提物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、鏈球菌以及肺炎雙球菌均有不程度的抑菌效果。湘蕾95%醇提物對前3種菌表現(xiàn)為極敏,對后兩種菌表現(xiàn)為高敏:與灰氈毛和濟(jì)銀花相比,湘蕾95%醇提物的抑菌效果與灰氈毛相似(P<0.05 ),比濟(jì)銀花顯著(P<0.01);與氨節(jié)青霉素
23、相比,湘蕾95%醇提物抑菌效果不及它。 由表2.6可知,湘蕾超渣95%提取物對5種細(xì)菌也有不同程度的抑菌效果,對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌表現(xiàn)為高敏,對福氏痢疾桿菌、肺炎雙球菌和鏈球菌表現(xiàn)為中敏。與灰氈毛和濟(jì)銀花比較,湘蕾對金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌和肺炎雙球菌的作用效果稍強(qiáng)于灰氈毛,比濟(jì)銀花顯著(P<0.01),而對大腸桿菌和鏈球菌的抑菌效果,湘蕾稍弱于灰氈毛,同樣比濟(jì)銀花顯著(P<0.01)。與湘蕾未經(jīng)超臨界萃取的95%醇提物相比,湘蕾95%醇提物比超渣95%醇提物抑菌效果顯著(P<0.01)0 綜合上述結(jié)果,同時發(fā)現(xiàn)在不同溶劑提物物中,以70%醇提物的抑菌效果為最佳,抑
24、菌直徑最大的到26.1 mm,相當(dāng)于25 mg/mL的氨節(jié)青霉素(P<0.05);水提物的抑菌效果次之,它對這5種細(xì)菌也表現(xiàn)出極敏或高敏;95%醇提物的抑菌效果居尾。同時,還發(fā)現(xiàn)水煎渣再醇提,有抑菌效果,但比直接醇提物抑菌效果差。2.1.2金銀花鮮樣和干樣70%醇提物抑菌效果的比較 試驗(yàn)結(jié)果表明70%醇提物的抑菌效果最好,為此,本試驗(yàn)進(jìn)一步以70%乙醇作為提取溶劑,比較金銀花鮮樣、凍干樣和曬干樣70%醇提物的抑菌效果,結(jié)果見表2.7。從表可得知,金銀花鮮樣、凍干樣和曬干樣70%醇提物對5種細(xì)菌均表現(xiàn)不同程度的抑菌效果,其中湘蕾鮮樣提取物(2g鮮藥/mL)對5種細(xì)菌的抑菌效果表現(xiàn)為高敏,湘
25、蕾凍干樣提取物(2g干藥/mL)對5種細(xì)菌均表現(xiàn)極敏,最大的達(dá)27.5mm;曬干樣提取物(2g干藥/mL)對5種細(xì)菌均表現(xiàn)極敏。在相同細(xì)菌和濃度的條件下,湘蕾凍干樣提取物的抑菌效果湘蕾比曬干樣顯著(P>0.05):從抑菌直徑上看,湘蕾鮮樣比凍干樣和曬干樣小,但湘蕾鮮樣的實(shí)際濃度不到凍干樣和曬干樣四分之一,依這個數(shù)值計算,鮮樣提取物的抑菌直徑遠(yuǎn)超過同濃度的曬干樣和凍干樣。與灰氈毛和濟(jì)銀花比較,在相同條件下,湘蕾與灰氈毛的抑菌效果相當(dāng)(P<0.05),而比濟(jì)銀花顯著(P<0.01)。與氨節(jié)青霉素(25mg/mL)相比,湘蕾凍干樣和曬干樣強(qiáng)于或相當(dāng)于它(P<0.05);鮮樣提
26、取物抑菌效果稍弱于它。 4小結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:3種溶劑提取物中,以70%醇提物抑菌作用最強(qiáng);鮮樣和干樣金銀花中,以鮮樣的抑菌效果最好,利用冷凍干燥技術(shù)生產(chǎn)金銀花藥材是今后發(fā)展方向;3種不同品種,以湘蕾金銀花和灰氈毛忍冬抑菌效果最佳,金銀花超渣提取物具一定的抑菌作用,這為金銀花綜合應(yīng)用提供理論依據(jù)。GC-MS 分析結(jié)果表明,湘蕾一號金銀花花蕾揮發(fā)油中被分離鑒定出70個化合物占揮發(fā)油總量的96.01%湘 蕾 一 號 金 銀 花 花 蕾 含 有 芳 樟 醇香葉醇,松油醇等有效成分分別占全油的28.86%,、2.92%和6.01%其中主要有效成分芳樟醇的百分含量最高為28.86%。據(jù)文獻(xiàn)報道金銀花忍冬.
27、RB6S"揮發(fā)油中有效成分為芳樟醇香葉醇, 松油醇 。其中主要有效成分為芳樟醇。芳樟醇的含量為19.96% 。而湘蕾一號金銀花花蕾揮發(fā)油中均含有芳樟醇,香葉醇,松油醇,等有效成分且均高于金銀花忍冬中的含量$特別是主要有效成分芳樟醇的含量高達(dá)28.85%遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于金銀花忍冬中的含量研究結(jié)果表明湘蕾一號金銀花花蕾的質(zhì)量優(yōu)于金銀花忍冬是值得大力推廣和應(yīng)用的優(yōu)良品種#湘蕾與濟(jì)銀花有效含量對比試驗(yàn)金銀花為常用中藥, 具有清熱解毒之功效。近十幾年來, 我省大面積載培金銀花, 產(chǎn)量占全國總產(chǎn)量的 60% , 產(chǎn)品暢銷國內(nèi)外市場。我省在規(guī)模發(fā)展金銀花生產(chǎn)的同時, 注重金銀花優(yōu)良品種的選育研究, 經(jīng)過十
28、幾年的努力, 選育了湘蕾一號, 亦名太湖一號優(yōu)良品種。該品種具有適應(yīng)性強(qiáng)單株產(chǎn)量高, 株形優(yōu), 蕾期長, 花蕾粗, 棒狀, 色澤優(yōu), 氣香濃,種植效益好等優(yōu)良的農(nóng)藝性狀和商品性狀。金銀花新品種湘蕾一號與歷史上金銀花道地產(chǎn)區(qū)的商品濟(jì)銀花、密銀花以及本地廣泛種植的常規(guī)品種的農(nóng)藝性狀和商品外形質(zhì)量的比較研究已做了大量的工作, 但有效成分的比較研究尚未開展。為了更科學(xué)地評價湘蕾一號0的內(nèi)在質(zhì)量, 充分發(fā)揮和利用湘蕾一號的優(yōu)良性狀, 筆者對湘蕾一號和濟(jì)銀花、密銀花及本地廣泛種植的常規(guī)品種的有效成分綠原酸含量作了較為深入的比較研究, 現(xiàn)報道如下。1 實(shí)驗(yàn)材料1. 1 實(shí)驗(yàn)藥材 濟(jì)銀花采自山東省臨沂地區(qū)平邑
29、縣, 密銀花采自河南省新密縣, 本地常規(guī)品種采自湖南省隆回縣小沙江鎮(zhèn),湘蕾一號采自湖南省溆浦縣1.2 儀器試劑 高效液相色譜儀: 美國 PE 公司生產(chǎn)的HPLC 儀, LC- 295 紫外檢測器, 200 系列二元泵, 南京千譜公司HW 色譜工作站。綠原酸對照品: 美 國 Sigma- AldrichChemie GmlbH 公司提供, 其他試劑均為分析純。2 方法和結(jié)果2.1 色譜條件 固定相: 大連江申公司, ODS 柱: 250 4. 6mm,5u 填料; 流動相: 乙腈 - 0. 1% 磷酸 ( 20B80) ; 流速: 0. 8ml#min-1; 檢測波長: 326nm; 進(jìn)樣量;
30、10ul; 柱溫: 室溫。2. 2 線狀關(guān)系的考察 精密稱取減壓干燥至恒重的綠原酸對照品。加 95% 的乙醇制成 0. 159mg#ml- 1的溶液, 精密吸取上述貯備液 1. 0ml、2. 0ml、4. 0ml、6. 0ml、8. 0ml、10. 0ml, 置于10ml 量瓶中用 95% 乙醇稀釋至刻度, 搖勻。取上述對照品稀釋溶液, 各進(jìn)樣 10ul, 按上述色譜條件測定峰面積, 以峰面積積分值為縱坐標(biāo), 綠原酸量( ug) 為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線, 回歸方程為: y= 6990+ 1984557X, r= 0. 9997。表明綠原酸在0. 0159 0. 159ug 具有良好的線性關(guān)系。2. 3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 以濟(jì)銀花樣品溶液, 在 0、1、2、4、8、10h 分別進(jìn)樣 10ul, 記錄峰面積積分值, 結(jié)果見表 1, 其 RSD 值為0. 141% 。可見供試品溶液在 10h 內(nèi)穩(wěn)定。2. 4 精密度試驗(yàn) 取對照品溶液, 進(jìn)樣 10ul, 重復(fù)進(jìn)樣 6 次,記錄峰面積積分值, 結(jié)果峰面積積分值的RSD 為 0. 508% 。2. 5 重復(fù)
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