新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求

1、新生兒遺傳代謝病篩查新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求采血技術實驗技術規(guī)范化要求四川省南充市婦幼保健院四川省南充市婦幼保健院四川省新生兒疾病篩查南充分中心四川省新生兒疾病篩查南充分中心陳濤陳濤0817-223566523篩查標本達到實驗室時間（平均）篩查標本達到實驗室時間（平均）4年篩查量分布年篩查量分布篩查數量篩查數量1萬1-=3 -=10 -20萬20萬篩查中心篩查中心183169131比例（比例（%）13.64 23.48 52.27 9.85 0.76 5678910新生兒遺傳代謝病篩查血片新生兒遺傳代謝病篩查血片采集技術規(guī)范采集技術規(guī)范l血片采集是新生兒遺傳代謝病篩查技術

2、流程中最重要的環(huán)節(jié)。l血片質量直接影響實驗室檢測結果，開展新生兒遺傳代謝病血片采集及送檢的醫(yī)療機構應當按本技術規(guī)范要求完成血片采集工作。11一、基本要求一、基本要求l （一）采血機構設置。 設有產科或兒科診療科目的醫(yī)療機構均應當開展新生兒遺傳代謝病篩查血片采集。l （二）采血人員要求。l 1.具有與醫(yī)學相關的中專以上學歷，從事醫(yī)學臨床工作2年以上。l 2.接受過新生兒遺傳代謝病篩查相關知識和技能的培訓并取得技術合格證書。培訓內容包括：新生兒遺傳代謝病篩查的目的、原則、方法及網絡運行；濾紙干血片采集、保存、遞送的相關知識；新生兒遺傳代謝病篩查相關信息和檔案管理。12二、采血機構和人員職責二、采血

3、機構和人員職責l （一）積極開展新生兒遺傳代謝病篩查的宣傳教育工作。l （二）加強對本機構血片采集人員的管理和培訓。l （三）承擔本機構新生兒遺傳代謝病篩查有關信息的收集、統(tǒng)計、分析和上報工作。l （四）血片采集人員在實施血片采集前，應當將新生兒遺傳代謝病篩查的目的、意義、篩查疾病病種、條件、方式、靈敏度和費用等情況如實告知新生兒的監(jiān)護人，并取得書面同意。l （五）認真填寫采血卡片，做到字跡清楚、登記完整?？ㄆ瑑热莅ǎ翰裳獑挝?、母親姓名、住院號、居住地址、聯系電話、新生兒性別、孕周、出生體重、出生日期、采血日期和采血者等。13二、采血機構和人員職責二、采血機構和人員職責l （六）嚴格按照新生

4、兒遺傳代謝病篩查血片采集步驟采集足跟血，制成濾紙干血片，并在規(guī)定時間內遞送至新生兒遺傳代謝病篩查實驗室檢驗。l （七）因特殊情況未按期采血或不合格標本退回需要重新采血者，應當及時預約或追蹤采集血片。l （八）對可疑陽性病例應當協(xié)助新生兒遺傳代謝病篩查中心，及時通知復查，以便確診或采取干預措施。l （九）做好資料登記和存檔保管工作，包括掌握活產數、篩查數、新生兒采血登記信息、反饋的檢測結果及確診病例等資料，保存時間至少10年。14三、血片采集步驟三、血片采集步驟l （一）血片采集人員清洗雙手并佩戴無菌、無滑石粉的手套。l （二）按摩或熱敷新生兒足跟，并用75%乙醇消毒皮膚。l （三）待乙醇完全揮

5、發(fā)后，使用一次性采血針刺足跟內側或外側，深度小于3毫米，用干棉球拭去第1滴血，從第2滴血開始取樣。l （四）將濾紙片接觸血滴，切勿觸及足跟皮膚，使血液自然滲透至濾紙背面，避免重復滴血，至少采集3個血斑。l （五）手持消毒干棉球輕壓采血部位止血。l （六）將血片懸空平置，自然晾干呈深褐色。避免陽光及紫外線照射、烘烤、揮發(fā)性化學物質等污染。l （七）及時將檢查合格的濾紙干血片置于密封袋內，密閉保存在28冰箱中，有條件者可0以下保存。l （八）所有血片應當按照血源性傳染病標本對待，對特殊傳染病標本，如艾滋病等應當作標識并單獨包裝。15四、采血工作質量控制四、采血工作質量控制l （一）血片采集的濾紙應

6、當與試劑盒標準品、質控品血片所用濾紙一致。l （二）采血針必須一人一針。l （三）正常采血時間為出生72小時后，7天之內，并充分哺乳；對于各種原因（早產兒、低體重兒、正在治療疾病的新生兒、提前出院者等）未采血者，采血時間一般不超過出生后20天。l （四）合格濾紙干血片應當為：l 1.至少3個血斑，且每個血斑直徑大于8毫米。l 2.血滴自然滲透，濾紙正反面血斑一致。 l 3.血斑無污染。l 4.血斑無滲血環(huán)。l （五）濾紙干血片應當在采集后及時遞送，最遲不宜超過5個工作日。l （六）有完整的血片采集信息記錄。 新生兒遺傳代謝病篩查濾紙血片的新生兒遺傳代謝病篩查濾紙血片的采集（采集（clsi)17

7、注意事項注意事項l 當采集血標本時應遵守注意事項。病人的標本可能感染了人類免疫缺陷病毒（hiv）或乙型肝炎病毒（hbv）。 應遵守恰當的血樣采集技術來盡可能降低實驗室人員危險性，并且要戴手套戴手套。181.21.2 標本的可接受性標本的可接受性 l 本標準并不是解釋如果沒有完全按照標準采集的所有血斑標本定為不可接受的（即是不能進行檢測）。只是證明拒絕分析標本及表明其是不可接受的，如果進行檢測的話對于特定的分析物會產生不可靠、誤解或臨床上不準確的結果。既然，由于這一定義，不可接受的標本產生無用的信息，就不應分析檢測這樣的標本，并應通知負責采集血樣的人員盡快地重新采集可接受的標本。如果檢測了標本，

8、事實上，如果檢測了標本，事實上，實驗室承認標本的適當性，以及承擔負責分析結果實驗室承認標本的適當性，以及承擔負責分析結果的可靠性的可靠性。 192.12.1 足（后）跟（足（后）跟（heelheel）l 新生兒篩查時，推薦使用足跟采血，應從足跟掌側的中間或側面采集。 “中間”是指盡可能地靠近人體的中線，“側面”是指盡可能地遠離人體的中線。“掌側”是指足部的行走側。不能使用以前使用的穿刺部位或足跟的曲面?zhèn)取?03.3.濾紙血樣采集技術濾紙血樣采集技術 l 3.1 腳跟穿刺l 3.1.1 準備步驟l 3.1.2 預防措施l 3.1.3 位置準備l 3.1.4 采血部位的消毒l 3.1.5 穿刺l

9、3.1.6 直接應用l 3.1.6.1 擠壓l 3.1.6.2 多層l 3.1.7 采集血樣l 3.1.8 干燥l 3.1.9 堆積l 3.1.10 運輸l 3.1.11 保存213.1.83.1.8干燥干燥 l 應避免接觸或污染血斑。血標本應放置在室溫(15 oc to 22 oc)并避免陽光直照（非直接室內光線通常不會有害的），周圍無吸附物質的水平支架上至少三個小時。 濾紙上的血斑不應加熱、堆積在一起、或在干燥的過程中接觸到其它的表面。 223.1.93.1.9 堆積在一起堆積在一起 l 當不可避免地將暴露的干血斑成批地堆積在一起時，應采用下列的程序。 在將標本放置在運輸容器中之前， 除非

10、標本有其它物理屏障隔開，如隔紙，玻璃紙，否則，應將采樣卡片的上的干血斑旋轉180o后再放置。 233.1.10 3.1.10 運輸（郵寄）運輸（郵寄） l 除非篩查實驗室有別的指導，應在采集標本后24小時內將采集血樣的卡片運輸到或郵寄到實驗室，并保留適當的跟蹤記錄文件。 應避免在采集血樣場所的耽擱，相對于可能的耽擱其運輸環(huán)境應結構化來最大限度地提高運輸的效率。 243.1.113.1.11保存保存 l 如果實驗室要保存剩余的干血斑標本到更長的時間，必須保管好它們確保保存后其狀態(tài)未受到損害。一種方法是將標本保存在具有干燥劑和濕度指示卡的不漏氣的、可封口的塑料袋中。 濕度應維持在低于30%。 如果

11、可能的話，陽性和陰性血斑質控品應與剩余標本放置在一起，這樣，當從保存環(huán)境中取出標本時可以通過檢測質控品的情況來檢查標本的完整性。 254.44.4運輸和包裝的預防措施運輸和包裝的預防措施l 標本不應放置在密封不透氣的容器中（塑料或橡皮信封）。必須遵守郵遞和地方運輸法規(guī)17。 如果地方法規(guī)要求用防水容器包裝用于運輸，則必須包括足夠量的包裝好的干燥劑和濕度指示卡來保證干血片未暴露在過量的濕氣中。濕度和濕氣對干血斑標本的穩(wěn)定性和分析物的回收是有害的。 具有生物危險的標本在運輸中應具有特殊的防護措施。 264.4.24.4.2 包裝包裝 l 包裝不應導致濾紙的受壓。在血斑標本運輸中在同一容器中不應放置

12、化學或其它類型的標本。 274.4.34.4.3 堆積放置堆積放置 l 由于標本之間的濾取（交叉污染）可能發(fā)生，標本與標本之間的接觸是不恰當的。如果堆積放置不可避免的話，可有幾種方法： l (1)對采集血樣的表格加上遮蓋紙片。 l (2)將暴露的干血斑旋轉180度。 l (3)標本之間放置玻璃紙。 284.4.44.4.4 運輸時間運輸時間 l 標本應在采集的24小時內送或郵寄到篩查實驗室。 295.15.1最少的預先打印的信息最少的預先打印的信息 l 下面列出的是達到篩查目的要求的最少的所需的信息。為了滿足其特殊的要求，根據篩查計劃可包括一些額外的信息。 l (1) 新生兒姓名, 母親姓名,

13、病人識別號(選擇: 地址和電話號碼)。l (2) 出生日期 。l (3) 出生體重。 l (4) 性別。 l (5) 喂奶狀況。 l (6) 標本采集時間和新生兒年齡（小時）。 l (7) 提供血樣的單位和地址。l (8) 醫(yī)生的姓名和電話號碼。l (9) 篩查計劃或實驗室和地址。 l (10)填寫分析實驗結果位置。l (11)具有一定數量1/2寸（13mm）內徑在濾紙一側印有破折或點狀線的圈(選擇：在兩側印好的圈)。75ul血液可填滿標本采集圈，而100ul的血液會稍微超出印好的圈。l (12)在濾紙部分標出濾紙的廠家和批號。 305.2.35.2.3 標本卡片編號標本卡片編號 l 每一標本

14、采集卡片的連續(xù)編號應預先打印在卡片的每一信息部分，如果血斑部分從卡片上分開。應考慮標本識別號的持續(xù)唯一性。為了達到這一識別及干血片標本與新生兒資料表的聯系，條形碼是一適當的方法。 31如何采集可接受的血片標本如何采集可接受的血片標本 la1 準備la1.1 洗手la1.2 戴消毒無滑粉的手套以及不同的新生兒要更換手套la1.3 確認新生兒的身份 la2 采樣技術 戴手套 32 la2.1 a2.1 用用70%70%酒精消毒新生兒足跟酒精消毒新生兒足跟la2.2 a2.2 讓足跟自然干燥讓足跟自然干燥 a2.3 a2.3 針刺部位應在如上圖所示的陰影區(qū)域針刺部位應在如上圖所示的陰影區(qū)域 a2.4

15、 a2.4 用推薦長度的柳葉刀用推薦長度的柳葉刀進行如圖所示進行如圖所示的針刺（深度小于的針刺（深度小于2.0m2.0m） 35 l a2.5 a2.5 用消毒的棉球輕輕地拭去第一滴血（第一滴血用消毒的棉球輕輕地拭去第一滴血（第一滴血含有組織液可能會稀釋樣本）含有組織液可能會稀釋樣本）l a2.6 a2.6 等待形成大的血滴等待形成大的血滴 l a2.7 a2.7 可用拇指進行溫柔的擠壓及間斷性地放松易于可用拇指進行溫柔的擠壓及間斷性地放松易于形成血滴形成血滴 36l a2.8 a2.8 輕輕地將濾紙卡片接觸血滴，用每一滴血輕輕地將濾紙卡片接觸血滴，用每一滴血滴在每一預先定好的圈內。觀察每一圈

16、血流透過濾滴在每一預先定好的圈內。觀察每一圈血流透過濾紙的情況。紙的情況。 l a2.9 a2.9 所有使用過的用具均應放置在適當的生物危所有使用過的用具均應放置在適當的生物危害的容器中害的容器中。 3738 l a2.10 采集完標本后，應將新生兒的足抬高，使用消毒棉球壓著針刺位置。但不要使用膠粘帶。 l a2.11 讓血標本完全自然干燥，放置在水平支架上，如塑料的試管架，在室溫中放置至少3小時（不能堆積在一起或加熱）。 l a2.12 標本干燥后，放置在批準的運輸容器中 39l a3 易犯的錯誤 l a3.1 殘留的酒精未能自然干燥可能稀釋標本，影響到實驗結果。 l a3.2 在后彎曲的足

17、后跟進行穿刺將使得血液從穿刺部位流出，使得正常的血斑難以形成。不能使用以前穿刺的部位。 l a3.3 擠壓穿刺部位可能導致溶血，使得組織液混合到標本中去。 40 l a3.4 不能在目標血斑上連續(xù)滴上幾滴血（例如 a）。如果血流減少以至不能完全地填滿圈，則需要重復采血技術a2.1到a2.11步驟。 注意血樣b由于不足的血液所至低質量的標本。 l a3.5 避免接觸在采血前的圈子區(qū)域或采集完血樣后的血斑。不能讓水、 牛奶、消毒液、手套上的粉狀物或其它物質接觸標本卡片。 l a3.6 在標本干燥之前不要將標本放置在運輸容器之中。 l a3.7 如血斑未能完全的干燥將會影響到實驗結果 41附錄e 血

18、片采集及干燥設備42利器損傷利器損傷43銳器刺傷引起的職業(yè)感染l 接觸各種病原體及傳染病，進行各種侵入性操作時接觸血液、體液，被各種銳器刺傷等。l 而種種污染的針頭刺傷針頭刺傷是醫(yī)院內傳染乙型肝炎病毒（hbv）、丙型肝炎病毒（hcv）及人類免疫缺陷病毒（hiv）等的重要途徑。l 據世界衛(wèi)生組織報道: 被hiv陽性病人針刺傷后獲得的可能性是0.2%0.4%； 受針刺傷感染的可能性是0.2%6.0%； 受刺傷感染的可能性是19%40%。l 據國內幾家醫(yī)院調查資料顯示: 大約有78.4%81.9%的醫(yī)務人員工作中有被銳器刺傷的歷史，針刺傷5次以上者達17.9%。 44l 血液傳播主要病原菌：hbv，

19、hcv，hdv，hivl 1994年美國cdc 報道職業(yè)傳播hiv，17例確定，15例可能，主要原因是針刺引起感染。l 尚無證據證明hiv可通過氣溶膠傳播。l 10個臨床和研究實驗室進行hbv表面抗原調查，從3個實驗室的11個工作臺檢測到31個陽性/800個環(huán)境標本。45新生兒遺傳代謝病篩查新生兒遺傳代謝病篩查實驗室檢測技術規(guī)范實驗室檢測技術規(guī)范l本規(guī)范適用于承擔新生兒苯丙酮尿癥和先天性甲狀腺功能減低癥等新生兒遺傳代謝病篩查實驗室檢測的醫(yī)療機構。46一、基本要求一、基本要求l （一）機構設置。省、自治區(qū)、直轄市人民政府省、自治區(qū)、直轄市人民政府衛(wèi)生行政部門按照本區(qū)域規(guī)劃指定具有能力的醫(yī)衛(wèi)生行政

20、部門按照本區(qū)域規(guī)劃指定具有能力的醫(yī)療機構為新生兒遺傳代謝病篩查中心療機構為新生兒遺傳代謝病篩查中心, ,其實驗室年其實驗室年篩查檢測量應當達篩查檢測量應當達3 3萬人次以上萬人次以上。l （二）人員要求。l 1.實驗室負責人：與醫(yī)學相關的本科以上學歷，高級職稱，具有兒科或臨床檢驗工作經驗，從事新生兒遺傳代謝病篩查工作5年以上，掌握新生兒遺傳代謝病篩查網絡運作和管理。l 2.實驗室技術人員：中專以上學歷，從事檢驗工作2年以上，具有技師以上職稱，接受過省級以上衛(wèi)生行政部門組織的新生兒遺傳代謝病篩查相關知識和技能培訓并取得技術合格證。l 3.文案人員47一、基本要求一、基本要求l （三）設備要求。

21、l （四）房屋要求。l 1.實驗室用房2間，使用面積至少40平方米以上。l 2.綜合用房2間，至少20平方米以上，用于濾紙干血片的驗收、計算機錄入和資料登記保存。l 3.血片儲藏室或冷庫1間，用于濾紙干血片的長期保存。l 4.房屋面積應當根據篩查量及篩查病種適當增加。48二、實施原則與職責二、實施原則與職責l （一）必須符合新生兒疾病篩查管理辦法及醫(yī)療機構臨床實驗室管理辦法。l （二）收到標本應當在24小時內登記，不符合要求的標本應當立即退回重新采集。l （三）采用國家規(guī)定的實驗方法，且具有國家批準文號的試劑和設備進行檢測。l （四）必須接受衛(wèi)生部臨床檢驗中心的質量監(jiān)測和檢查。l （五）檢測結果及時反饋，發(fā)現漏檢病例，須尋找原因。49二、實施原則與職責二、實施原則與職責l （六）必須建立以下實驗室規(guī)章制度： 1.人員分工責任制度。 2.各種技術操作程序。 3.質量