細胞產(chǎn)物分析答案

1、1、名詞解釋1、細胞產(chǎn)物 細胞代謝產(chǎn)生的物質(zhì)通稱 。 細胞產(chǎn)物是細胞新陳代謝等生命活動中所產(chǎn) 生的代謝產(chǎn)物，不是生命體的結(jié)構(gòu)成分，但有的細胞產(chǎn)物具有調(diào)節(jié)、免疫等功能 。從生 源來看包括植物、動物、微生物的細胞代謝產(chǎn)物。2、吸收光譜法 是基于被測物質(zhì)的 分子 對 光 具有選擇吸收的特性而建立的分析方法3、超聲波輔助提取法超聲波輔助提取法是利用超聲波具有的機械效應、空化效應及熱效應， 通過增大介質(zhì)分子的運動速度， 增大介質(zhì)的穿透力以提取細胞中有效成分的方 法。4、保留時間一種化合物在規(guī)定條件下在層析系統(tǒng)中的運行時間。5、展開劑 提取分離時，用來分離極性不同的兩種物質(zhì)的溶劑叫做展開劑。6、光譜法 光

2、譜法是基于物質(zhì)與輻射能作用時，測量由物質(zhì)內(nèi)部發(fā)生量子化的能級之 間的躍遷而產(chǎn)生的發(fā)射、吸收或散射輻射的波長和強度進行分析的方法。7、回流發(fā) 將樣品放入燒瓶中，加入溶劑浸沒，然后在燒瓶上接回流冷凝器。燒瓶加 熱使溶劑沸騰并形成回流，一般回流 12h 后，冷卻過濾出溶劑，燒瓶中再加新溶劑繼 續(xù)加熱回流，反復操作 3 4 次，合并提取液可得提取物。提取效率高，但操作繁瑣， 不適用于熱不穩(wěn)定物質(zhì)的提取。8、分離柱 在色譜分離法中柱色譜中裝填固定相的圓柱。9、正相色譜 液 -液色譜有正相和反相之分，采用極性固定相和相對非極性流動相，就 稱為正相。10、反相色譜 液 -液色譜有正相和反相之分，采用相對非極

3、性固定相和極性流動相， 則稱為反相。11、基線 當色譜柱后沒有組分進檢測器時，記錄到的信號12、液液萃取 利用組分在兩個互不相溶的液相中的溶解度差異而將其從一個液相轉(zhuǎn) 移到另一個液相的分離過程稱為液液萃取，也叫溶劑萃取，簡稱萃取。13、超臨界流體萃取利用溶劑在超臨界條件下特殊的流體性能對樣品進行提取。超臨界流體是指在臨界溫度和臨界壓力以上的流體。14、洗脫劑在柱色譜分離過程中混合物中各組分在吸附劑和洗脫劑之間發(fā)生吸附 -溶解分配，強極性洗脫劑對極性大的有機物溶解的多，弱極性或非極性洗脫劑對極性小的 有機物溶解的多，隨洗脫劑的流過不同極性的有機物以不同的次序形成分離帶15、薄層色譜法將適當粘度的

4、固定相均勻涂鋪在薄板上，點樣后用流動相展開，使各組份分離 ，又稱薄層層析，屬于液固吸附色譜。是一種微量、快速而簡單的色譜法。 特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。16、半仿生提取原理：將整體藥物研究法與分子藥物研究相結(jié)合 ,從生物藥劑學的角度模擬口服藥及藥物經(jīng)胃腸道轉(zhuǎn)操作方法： 將藥料先用一定 pH 的酸水提取 ,繼以一定 pH 的堿水提取 ,提取液分別濾過、濃縮 ,制成口服途徑給藥優(yōu)點：這種新提取法可以提取和保留 更多的有效成分，能縮短生產(chǎn)周期，降低成本。17、質(zhì)譜氣體分子或固體、液體的蒸氣受到一定能量的電子流轟擊或強電場作用，丟失價電子生成分子離子；同時，

5、化學鍵也發(fā)生某些有規(guī)律裂解，生成各種碎片離子。 這些帶正電荷的離子在電場和磁場的作用下，按質(zhì)荷比（即質(zhì)量與電荷比值m/z ） 的大小分開，排列成譜，記錄下來即為質(zhì)譜18、色譜法既是一種分離方法，又是一種分析方法。色譜法是又叫層析法，是利用不同的物質(zhì)在固定相與流動相中不同的平衡分配系數(shù)來進行分離的一種方法。所有的色譜 系統(tǒng)都由兩相組成： 固定相：是固定不動的一相，是固體物質(zhì)或者是固定于固體物質(zhì)上的 成分。流動相：是流動的一相，可以是氣體或液體，如水和各種有機溶劑。19、溶劑極性溶劑極性是指溶劑對電荷的親和能力，常用介電常數(shù)來比較溶劑的極性大小。2、簡答題1、儀器分析方法 優(yōu)點 儀器分析技術(shù) 是現(xiàn)

6、代發(fā)展起來的一種分析方法，大多要借助一定的儀器設備根據(jù)某種或某類物質(zhì)的 物理或物理化學性質(zhì)， 來研究其結(jié)構(gòu)、 組成或含量的方法， 又稱為物理化學分析法或物理分 析法。優(yōu)點 ： 可以達到無損分析(應用物質(zhì)的物理特性)靈敏度高，可以檢測到10-15g，屬于微量或痕量分析(要求的樣品量小，有時只需 1 微克)簡便、快速、易于實現(xiàn)自動操作 缺點 ：成本高2、簡述分光光度計儀器構(gòu)成紫外 -可見分光光度計組件：1.光源 (氫燈，氘燈， 185 350 nm ； 鹵鎢燈， 250 2000 nm.) 基本要求：光 源強，能量分布均勻，穩(wěn)定。2. 單色器 作用：將復合光色散成單色光 (棱鏡：玻璃， 350 2

7、500 nm, 石英，反射光柵)185 4500 nm)(光柵 ：平面透射光柵，3 樣品池 玻璃，光學玻璃，石英4 檢測器 作用：將光信號轉(zhuǎn)換為電信號，并放大5 信號輸出表頭、記錄儀、屏幕、數(shù)字顯示3、質(zhì)譜中常用的離子源答： 在離子源中樣品被電離成離子，不同性質(zhì)的樣品可能需要不同的電離方式。電子轟擊電離 ( electron impact, EI) 電子轟擊電離使用具有一定能量的電子直接作用 于樣品分子， 使其電離。 用鎢或錸制作的燈絲在高真空中發(fā)射出電子。 燈絲與電離盒之間的 電壓稱為電離電壓。對有機化合物通常選用 70eV 的電壓?；瘜W電離( Chemical ionization, CI

8、) 化學電離 :是將樣品氣體和反應氣體分子混合 (其 中樣品含量約 0.1)，進入電離室后， 首先用電子轟擊方式使反應氣體電離， 然后反應氣體 與樣品氣體進行離子 -分子反應而使樣品氣體電離， 因此樣品的離子是由離子 - 分子反應產(chǎn)生 的。這樣產(chǎn)生的離子能量較小， 故碎片較少。 對于不穩(wěn)定的有機化合物，可得到較強的分子 離子峰。大氣壓化學電離( atmospheric pressure chemical ionization, APCI) 在大氣壓下，化 學電離反應的速率更大， 電離效率應更高。 主要困難是將大氣壓力下產(chǎn)生的離子轉(zhuǎn)移到處于 高真空( <10-6Torr) 狀態(tài)的質(zhì)量分析器

9、中?，F(xiàn)在常用的是電暈放電大氣壓電離?？煸愚Z擊 ( Fast atom bombardment, FAB) 快原子轟擊屬于二次離子質(zhì)譜， 以高能 量的初級離子轟擊表面， 再對由此產(chǎn)生的二次離子進行質(zhì)譜分析。 以液體基質(zhì)負載樣品， 使 用中性原子束作為初級高能量粒子。 理想的基質(zhì)必須蒸汽壓低， 同時是被分析樣品的良好溶 劑，甘油是最常用的一種基質(zhì)。電噴霧電離( Electro spray ionization, ESI) 原理： 不銹鋼毛細管被加以 3-5kV 的 正電壓，與相距約 1cm 接地的反電極形成強靜電場。被分析的樣品溶液從毛細管流出時在 電場作用下形成高度荷電的霧狀小液滴； 在向質(zhì)量

10、分析器移動的過程中， 液滴因溶劑的揮發(fā) 逐漸縮小， 其表面上的電荷密度不斷增大。 當電荷之間的排斥力足以克服表面張力時， 液滴 發(fā)生裂分； 經(jīng)過這樣反復的溶劑揮發(fā)液滴裂分過程， 最后產(chǎn)生單個多電荷離子。 電噴霧通 常要選擇合適的溶劑。 除了考慮對樣品的溶解能力外， 溶劑的極性也需考慮。 一般來說， 極性溶劑（如甲醇、乙腈、丙酮等）更適合于電噴霧。電噴霧離子化可分為三個過程:1、形成帶電小液滴。 2、溶劑蒸發(fā)和小液滴碎裂。 3、最終形成氣相離子* 4、 簡要比較氣相液相色譜的優(yōu)缺點 1.氣象色譜采用氣體作為流體相，色譜柱阻力小，可以采用長柱，所以分離效率高 2，氣象色譜無需使用有機溶劑和價格昂貴

11、的高壓泵，因此氣象色譜儀的價格和運行費 用較低，且不易出故障3，能和氣象色譜相匹配的檢測器種類很多，具有通用型檢測器，因而可用于各種物質(zhì) 的分離與檢測4，氣相色譜不能分析在柱工作溫度下不氣化的組分 5，氣象色譜不能分析在高溫下不穩(wěn)定的化合物6. 在全部有機化合物中僅有 20%的樣品使用氣象色譜分析，高效液相色譜法恰可彌補氣 象色譜的不足之處，對 80%的有機化合物進行分離和分析* 5、 質(zhì)樸分析基本原理答 :由分子結(jié)構(gòu)與裂解方式的經(jīng)驗規(guī)律 ,根據(jù)分子離子和各種碎片離子的質(zhì)荷比及其 相對豐度 ,就可以進行結(jié)構(gòu)分析6、比較親浸提法、滲漉法、回流提取法 浸提法加溶劑將樣品浸沒，并間歇式地振搖或攪拌，

12、2 3d 后過濾出溶劑，再加新溶劑浸提樣品，一般浸提 3 次后，樣品中的絕大多數(shù)可提取物質(zhì)都被轉(zhuǎn)入到浸提液中，合 并提取液并濃縮可以得到提取物 浸膏室溫下進行， 對于熱不穩(wěn)定以及含有大量淀粉、 果膠和黏液質(zhì)的動植物樣品較適用。 該法簡單易行，也適合大量樣品的提取。這種方法費時、提取效率低，用水作溶劑時，可以導致霉變，因而該方法較適合用 有機溶劑提取。若必須用水作溶劑，可在水中加入適量的防腐劑（如苯甲酸鈉等 ）以防止提取液發(fā)霉變質(zhì)。滲漉法 用溶劑不斷地淋洗樣品，一般可在管狀容器池中進行，上層加溶劑淋洗，下層流出 浸提液，當溶劑滲入上層樣品后，溶出液密度不斷加大而向下層移動，上層不斷添 加的新溶劑

13、或稀浸提液置換其位置，造成良好的濃度差，使擴散能較好地進行。 滲漉法對藥材的粒度及工藝技術(shù)條件要求較 高，若條件操作不當，可影響滲漉效率，甚 至影響滲漉過程的正常進行。此外，對新鮮 及易膨脹藥材、無組織結(jié)構(gòu)的藥材不宜使用。 比靜止的浸提法效率要高，但需要大量的溶劑?；亓鞣?將樣品放入燒瓶中，加入溶劑浸沒，然后在燒瓶上接回流冷凝器。燒瓶加熱使溶劑 沸騰并形成回流， 一般回流 12h 后， 冷卻過濾出溶劑， 燒瓶中再加新溶劑繼續(xù)加熱 回流，反復操作 34 次，合并提取液可得提取物。 提取效率高，但操作繁瑣，不適用于熱不穩(wěn)定物質(zhì)的提取。7、簡述液相微提取的分類及優(yōu)缺點 答：分類： 1、根據(jù)液滴狀態(tài)的

14、不同可分為單滴液相微萃?。?SD-LPME） 和中空纖維液相微萃取 (HF-LPME) ； 2、根據(jù)懸掛液滴位置的不同可以分為直接液相微萃取(D-LPME) 和頂空液相微萃取 (HS-LPME) ；3、根據(jù)操作方式的不同可以分為靜態(tài)液相 微萃取 ( S-LPME) 、動態(tài)液相微萃取 (D-LPME) 和連續(xù)流動液相微萃取 (CFME) ； 4、 根據(jù)作用相的多少可分為兩相液相微萃取和三相液相微萃取 (LLLME )優(yōu)點：適應了綠色分析技術(shù)發(fā)展的需要( LLE 消耗 mL 級有機溶劑， LPME 僅需 L 級)。富集倍數(shù)大，萃取效率高(富集倍數(shù)達 1000 倍)，可使分析方法的靈敏度提高兩 個數(shù)

15、量級以上。便于與具有微量進樣方法的特定儀器聯(lián)用。樣品溶液用量少 (l10mL 左 右)缺點： 易受萃取溶劑、萃取溫度、鹽效應和 pH 值以及攪拌速度的影響。8、柱色譜常用的固定相有哪些答：常用固定相硅膠： 柱層析硅膠是具有固體特性的膠態(tài)體系，由形成凝集結(jié)構(gòu)的膠體粒子構(gòu)成。膠 體粒子是水合狀態(tài)硅膠(多硅酸)的縮聚物，屬非晶態(tài)物質(zhì)。它具有多孔性的硅氧環(huán) ( siloxane)及 SiOSi的交鏈結(jié)構(gòu)其骨架表面的硅醇( silano)基團能通過氫鍵與 極性或不飽和分子相互作用。膠體粒子的集合體的間隙形成內(nèi)部的微孔隙結(jié)構(gòu)。因此， 它是一種具有豐富微孔結(jié)構(gòu)，高比表面積、高純度、高活性的優(yōu)質(zhì)吸附材料?？捎?/p>

16、通式 SiO2 · xH2O 表示氧化鋁： 色譜用的氧化鋁可分酸性、中性和堿性三種。酸性氧化鋁 pH 約為 4-4.5 ，用 于分離羧酸、氨基酸等酸性物質(zhì)；中性氧化鋁pH 值為 7.5，用于分離中性物質(zhì)，應用最廣；堿性氧化鋁 pH 為 9-10，用于分離生物堿、胺和其它堿性化合物等。吸附劑的活性 與其含水量有關(guān)。含水量越低，活性越高。脫水的中性氧化鋁稱為活性氧化鋁。聚酰胺： 由酰胺聚合而成的一類高分子物質(zhì)，又 稱錦綸、尼龍等，層析常用的是錦 綸 6 和錦綸 66；其單體物質(zhì)是已內(nèi)酰胺、已二胺和已二酸。分子中的酰胺鍵是其結(jié) 構(gòu)的重要部分，酰胺鍵也是與其它極性鍵基團產(chǎn)生氫鍵的物質(zhì)基礎。是

17、吸附層析，酰胺 鍵與物質(zhì)分子中的極性鍵的相互作用應該是吸附作用的主要原因； 分離物質(zhì)的氫鍵作用 是聚酰胺層析的根本原因；但非氫鍵物質(zhì)也可用聚酰胺進行分離。3、論述題1、簡述色譜分離法的分類答 ;按流動相可劃分為：氣象色譜和液相色譜；按固定相氣象色譜又可分為：氣-液色譜和氣-固色譜， 液相色譜又可分為： 液 -液色譜和液 -固色譜。按色譜過程機理可劃分為： 吸附色 譜、分配色譜、排阻色譜、離子交換色譜。按固定相與流動相的相對極性大小可劃分為：正 相色譜和反相色譜。2、薄層色譜的基本實驗過程及注意事項制板 選擇合適的玻璃板 (小板使用顯微鏡上的載玻片) ，依次用水和乙醇洗凈， 晾干。 取適量薄層色

18、譜用的固定相，加適量蒸餾水調(diào)成糊。調(diào)制時慢慢攪拌，勿使產(chǎn)生氣 泡。將 糊倒在玻璃板上，搖動攤平，晾干。使用前放入烘箱內(nèi)，在105-115左右烘干 40-50 分鐘，冷卻后使用。點樣 在薄板上輕輕畫出一條平行于玻璃板底邊的細線，將試樣用最少量展開劑溶解， 用毛細管蘸取試樣溶液，在線上點樣。在樣點上薄層色譜板載樣量有限，勿使點樣量過多。展開 吹干樣點，豎直放入盛有展開劑的有蓋展開瓶中。展開劑要接觸到吸附劑下沿， 但切勿接觸到樣點。 蓋上蓋子， 展開。待展開劑上行到一定高度(由試驗確定適當?shù)恼归_高 度)，取出薄層板，再畫出展開劑的前沿線。顯色，計算 Rf 值 揮發(fā)干展開劑，選擇合適的顯色方法顯色。量

19、出展開劑和各組分的移動距離，計算各組分的相對移動值。3 柱層析的操作過程及注意事項裝柱 要求 :固定相的上表面一定要平整，并且固定相的高度要根據(jù)需要，短了可能分離 效果不好，長了也會出現(xiàn)擴散或拖尾導致分離效果不好。1、 濕法裝柱 :是先把硅膠混懸于流動相溶劑中， 然后加入到裝有溶劑的柱子頂端， 在保持一定流速的條件下固定相逐漸沉積 并達到需要的高度， 并始終保持一定的液面高度， 不可將柱子 “走干 ”，最大的優(yōu)點是柱子裝 的比較結(jié)實，沒有氣泡。 2、 干法裝柱： 直接往柱子里填入硅膠，然后再輕輕敲打柱子兩側(cè) （濕法也要敲的，效果好點） ，至硅膠界面不再下降為止，然后再填入硅膠至合適高度，減 壓抽氣可以使得柱子裝得結(jié)實，接著是用洗脫劑 “走柱子 ”，干法裝柱較方便，技術(shù)要求低， 但容易產(chǎn)生氣泡， 在上樣前需要用大