凍干粉針劑過濾系統(tǒng)工藝實驗的設計

1、凍干粉針劑過濾系統(tǒng)工藝實驗的設計 目  錄摘 要 4前 言 5文獻綜述 6一、 凍干粉針工藝概述 7 二、 過濾除菌方式及發(fā)展趨勢 9三、化學消毒方法滅菌及個種方式的特點 12四、熱力滅菌簡介 17實驗部分 201儀器與試劑 201.1實驗儀器 20 1.2實驗試劑 202試驗方法 202.1原理 202.1.1氣泡點檢測簡介 202.12 CFU簡介 212.2實驗過程 21、2.2.1 過濾系統(tǒng)滅菌 212.2.2. 無菌甘露醇溶液的制備 212.2.3 完整性測試 212.2.4 微生物截留試驗 213實驗結果 214討論 225 結論 22 參考文獻： 24 摘 要

2、滅菌是指殺滅或去除環(huán)境中的一切微生物，包括病原和非病原微生物及細菌的芽孢使之完全無菌，消毒是指殺滅或去除環(huán)境中的病原微生物的過程，使之無害化，不致引起感染或致病【1】從上訴定義可知，消毒和滅菌都需外環(huán)境中的微生物，只是殺滅和去除微生物的目標和程度不同，即消毒處理不一定能達到滅菌要求，滅菌能達到消毒目的。此論文結合了一些國內(nèi)的文獻和個人幾年來的生產(chǎn)實踐經(jīng)驗。結合近幾年文獻在文獻綜述部分對對如何控制好凍干粉針劑的滅菌工藝，控制凍干粉針無菌的關鍵工序和關鍵點，進行了一些論證。在無菌環(huán)境下將藥液冷凍，將原料藥“摻”在某些輔料或溶在某些溶媒中，經(jīng)過一定的加工處理制成不同形式的制劑，就是我們所說的“凍干粉

3、針劑”。凍干粉針劑工藝中的滅菌生產(chǎn)的關鍵，如何控制好生產(chǎn)中的滅菌工藝和消毒工藝，往往成為藥品合格與否的關鍵。此論文本實驗部分主要探討非最終滅菌注射劑生產(chǎn)過程中除菌過濾器對微生物的截留效果, 及氣泡點完整性實驗。確認過濾除菌過濾系統(tǒng)的完整性及過濾系統(tǒng)在微生物截留的有效性與安全性。實驗方法: 采用孔徑為0. 22 m 除菌級聚醚砜濾芯, 以直徑在0. 30.4m 的缺陷假單胞菌為生物指示劑, 將菌液用濾芯過濾, 計算被過濾液體過濾前的微生物數(shù)量與過濾后的微生物數(shù)量比的常用對數(shù)值(LRV) 。結果: 菌液過濾前后微生物數(shù)量比的常用對數(shù)值LRV大于7。結論: 濾芯每平方厘米有效過濾面積符合中國藥典20

4、10年版2 部附錄滅菌法的規(guī)定, 確認除菌過濾工藝在注射劑生產(chǎn)過程中的有效性與安全性。關鍵詞：滅菌 消毒 凍干粉針劑 過濾除菌 消毒劑殺滅微生物 LRV前 言我國衛(wèi)生部于1995年7月11日下達衛(wèi)藥發(fā)（1995）第35號"關于開展藥品GMP認證工作的通知"。藥品認證是國家依法對藥品生產(chǎn)企業(yè)（車間）和藥品品種實施GMP監(jiān)督檢查并取得認可的一種制度，是國際藥品貿(mào)易和藥品監(jiān)督管理的重要內(nèi)容，也是確保藥品質(zhì)量穩(wěn)定性、安全性和有效性的一種科學的先進的管理手段。 我國在真空冷凍干燥技術已有幾十年的歷史，但是對于無菌凍干生產(chǎn)聯(lián)動線只有十幾年的時間，在20世紀八十年代前，對于無菌凍干生產(chǎn)聯(lián)

5、動線依賴于進口。在20世紀70年代我國的凍干制藥設備才處于萌芽狀態(tài)，當時的設備處于半工半機械之中，在80年代時期，改進為單機自動化生產(chǎn)設備，90年代我國生產(chǎn)線改進為洗瓶機，隧道烘箱，灌裝，單機連線的簡單半自動聯(lián)動生產(chǎn)線。在99年的SFDA發(fā)布藥品GMP認證標準出臺刺激了我國的制藥機械的突飛猛進，隨著國外先進制藥設備引進，凍干生產(chǎn)線聯(lián)動生產(chǎn)線才得到完善。為了滿足更好的提高藥品的質(zhì)量，的滿足生產(chǎn)需求，以下將對凍干粉針的無菌工藝進行介紹，凍干粉針的由于是最終滅菌，無菌要求特別嚴格。而滅菌消毒更需要認真，本人結合文獻，與個人經(jīng)驗。對滅菌除菌和消毒進行了總結和研究。這些對生產(chǎn)有一些借鑒作用在實驗部分，為

6、了證明過濾系統(tǒng)的完整性和安全性，對過濾濾系統(tǒng)氣泡點及微生物截留進行實驗，主要是為了保證凍干粉針無菌生產(chǎn)的質(zhì)量安全。文 獻 綜 述凍干粉針劑是非最終滅菌產(chǎn)品，非最終滅菌產(chǎn)品潔凈度的要求相對要高。過濾設備的升級，過濾產(chǎn)品材質(zhì)的升級，操做自動化提高，檢測設備的完善，都有力的保證了凍干粉針生產(chǎn)無菌的要求。以除菌過濾產(chǎn)品為例，針對不同的藥液，使用不同材質(zhì)的濾膜，同時過濾器完整性檢測儀的應用，又能夠檢測濾膜的完整性及過濾系統(tǒng)的密閉性，他們都為半成品的無菌做了可靠保障。車間滅菌方法為例，除常規(guī)滅菌方法外，臭氧和環(huán)氧乙烷滅菌的應用，殺滅了死角的細菌，給無菌生產(chǎn)提供了保障，在常規(guī)加熱滅菌中，分為濕熱滅菌和干熱滅

7、菌，其中濕熱滅菌的穿透力比較強，而干熱滅菌可除去內(nèi)毒素。 凍干工藝在藥物生產(chǎn)安全性方面就存在很多風險.物料,人員,設備,環(huán)境是直接影響著成品的質(zhì)量.所謂物料就是指用于包裝的原料、輔料和包裝材料。藥品的生產(chǎn)是與各種物料開始的，即使藥品生產(chǎn)過程控制的十分完美，但是所用的物料達不到規(guī)定標準，那么藥品的生產(chǎn)過程就沒有意義了。因此藥品生產(chǎn)要從物料開始。人員主要的污染源，所以要對人員進行GMP衛(wèi)生培訓，設備：無論藥品生產(chǎn)企業(yè)的規(guī)模大小，還是生產(chǎn)何種類型的藥品或品種數(shù)量都離不開組織生產(chǎn)必不可少的要素設備。設備是藥品生產(chǎn)中物料投入到轉(zhuǎn)化成品的工具和載體，所以藥品質(zhì)量的優(yōu)略與設備與設備這個生產(chǎn)的主要息息相關，在

8、生產(chǎn)中，設備的 設計、選型、安裝應符合生產(chǎn)要求,易于清洗、消毒或滅菌,便于生產(chǎn)操作和維修防止差錯和減少污染.干燥滅菌設備、配制的微生物截留濾灌裝加塞設備、加塞后與凍干之間的轉(zhuǎn)運、膠塞轉(zhuǎn)運等存在很大影響產(chǎn)品質(zhì)量的風險，對生產(chǎn)的安全性形成很大的挑戰(zhàn)。主要表現(xiàn)在：干燥滅菌機的熱分布、熱穿透性能試驗不能滿足要求，還有些生產(chǎn)使用廠家由于沒有配備必要檢測設備，在生產(chǎn)前根本沒有對其性能進行驗證就投入運行，另外對干燥滅菌機的生產(chǎn)速度與工藝要求的匹配性非常陌生，根本無法滿足抗生素瓶的無菌要求；灌裝加塞設備國內(nèi)很多廠家采用的是敞開式層流系統(tǒng)，操作人員可以隨意進入到百級層流下，灌裝藥液管路及灌裝泵不能實現(xiàn)；膠塞轉(zhuǎn)運

9、、半加塞后轉(zhuǎn)運至凍干機均采用人工進行，對整個分裝冷凍干燥過程的無菌要求形成巨大挑戰(zhàn)；軋蓋機在非百級層流下工作也對膠塞要求在無菌環(huán)境下進行軋蓋封口形成挑戰(zhàn)。環(huán)境：主要包括外部環(huán)境和內(nèi)部環(huán)境，外部環(huán)境包括廠址的選擇，選擇的一個原則就是防止污染，就是從廠房設計與布局總體去考慮，如何預防、減少與消除生產(chǎn)環(huán)境有可能對藥品生產(chǎn)所產(chǎn)生的污染?！?】   對于以上問題，本文在結合大量文獻的基礎上，總結出了一些設計方案，并提出了一些用于合理化的設計方案，以改進凍干粉針的滅菌工藝的，達到成品無菌一 凍干粉針工藝概述1凍干粉針簡介凍干粉針是藥物的一種制劑形式，是將藥用成分（原

10、料）及輔助成分（輔料），用溶媒（例如水）溶解后，配制成一定濃度的溶液，分裝于安瓿或西林瓶等容器中，在無菌密閉環(huán)境中，低溫下凍結，再通過降低環(huán)境氣壓，緩慢升高制品溫度的方法使制品中的溶媒（例如水）升華，留下固體形態(tài)的疏松塊狀或粉末狀藥物而成的制劑。在使用時，需要加入溶媒（如水），將藥物溶解成溶液再用于注射或輸液治療疾病。2凍干粉針工藝流程 3凍干粉針工藝無菌關鍵流程 圖一為凍干工藝生產(chǎn)過程，原料藥配制后的，初濾和精濾是除菌過程；膠塞清洗后是滅菌工序，西林瓶的洗烘聯(lián)動也能除內(nèi)毒素和細菌，灌裝和半壓塞工序在百級下操作，操作的無菌要求也極其高， 配制工序過程稱量配制過程在十萬級環(huán)境下進行，易染菌，主要

11、控制點是染菌的程度和配制的時間，室溫溫度，濕度等。物測試。 配制時間在工藝設計時也應考慮，如果生產(chǎn)時間過長，潔凈間溫度，濕度適宜細菌的繁殖過快，細菌量達到了過濾系統(tǒng)的承受量，半成品的染菌程度 加大，將嚴重影響成品的質(zhì)量初濾和精濾工序?qū)Νh(huán)境的要求相對嚴格，對濾膜的材質(zhì)，完整性都有著嚴格的要求膠塞是在萬級下滅菌，百級分裝，不太容易染菌，主要注意點是，滅菌后放置時間不易過長。加入加塞器時注意不要染菌。洗瓶工序由于都是洗烘聯(lián)動，細菌的清除率極高。染菌的可能性不大。分裝工序，由于凍干粉針為非最終滅菌產(chǎn)品，所以這道工序是凍干粉針是否合格的關鍵。所以此道工序減少人為污染，保持環(huán)境無菌狀態(tài)，由為重要。分裝主要

12、培養(yǎng)操作人員的無菌意識，如果能夠?qū)崿F(xiàn)機械的自動化程度，應該是最終解決辦法。環(huán)境這一塊，隨時監(jiān)控好生產(chǎn)車間的溫度，濕度，空氣漂浮物數(shù)量等等。生產(chǎn)后徹底清場。注意消毒液的更換，等等。4國內(nèi)凍干粉針生產(chǎn)工藝的進展 凍干粉針無菌工藝，近幾年，主要向著機械自動化，和消毒設備無害化方向進展，檢測設備的簡易化都有較大提高。凍干機結構緊湊占地面積小、生產(chǎn)效率高、節(jié)能和自動化程度高等特點，但普遍沒有解決滅菌問題，成為生產(chǎn)上的遺憾。 完整性檢測方面，現(xiàn)在的儀器能夠進行氣泡點、擴散流、水侵入和壓力衰減測試，運用這些工業(yè)上可接受的物理測試，檢測濾材及濾器的過濾精度及完整性，這些方法滿足我國藥典及GMP規(guī)范中對除菌過濾

13、器進行驗證的要求，既可以離線測試又可以在線測試，既可以判斷濾材精度是否合格又可以檢查濾殼以及密封件是否完好，測試時不影響下游的無菌狀態(tài)過濾的完整性檢測，檢測，對過濾系統(tǒng)的完整性及藥物無菌的安全性。有了可靠保障消毒設備中，臭氧的應用，也減小了消毒劑殘留所帶來的危害。對潔凈間整體環(huán)境的提升，起到了有利作用。大型臭氧發(fā)生器谷稱公斤級臭氧發(fā)生器，主要由空氣壓縮及凈化系統(tǒng)、冷卻系統(tǒng)、臭氧發(fā)生系統(tǒng)、電源控制系統(tǒng)、臭氧化氣體處理系統(tǒng)五大部件組成。采用當今最新型功率電子模塊組成的變頻電源電路、脈沖寬度調(diào)控控制等系列新技術、新工藝，產(chǎn)品操作簡便，結構緊湊，性能穩(wěn)定，臭氧量高，易于維護。二 除菌過濾方式及發(fā)展趨勢

14、1除菌過濾系統(tǒng)簡介過濾是一種通用的滅菌方法，除菌行過濾器應該得到驗證，從而可在線的去除流體中的活性微生物，生成無菌濾出液【3】過濾除菌用物理阻留法去除懸浮于介質(zhì)中的微生物，稱為過濾除菌。過濾須通過致密的濾材，僅適于液體與氣體等流動物質(zhì)的處理?！?】凍干粉針工藝中的過濾系統(tǒng)粗濾系統(tǒng)和精濾系統(tǒng)組成，其中包括微孔濾膜,平板濾器、硅膠管、蠕動泵等組成。凍干粉針劑生產(chǎn)以微孔濾膜,濾膜以混合纖維素，聚酰胺類，聚醚砜( PES) 微孔濾膜等最為常用，平板濾器的材質(zhì)為316L。生產(chǎn)前整個過濾系統(tǒng)需滅菌，生產(chǎn)前后濾膜都需做氣泡點實驗。 2.微孔濾膜簡介: ：微孔濾膜由精制硝化棉，加入適量醋酸纖維素、丙酮、正丁醇

15、、乙醇、等制成，親水，具有無毒衛(wèi)生，是一種多孔性的薄膜過濾材料，孔徑分布比較均勻穿透性的微孔，微孔率高達80的絕對孔徑。主要用于水系溶液的過濾，故也稱水系膜。 易燃，保存時應注意密封，防潮濕，防火?！?】 特點：孔徑比較均，孔隙率高，無介質(zhì)脫落，質(zhì)地薄，阻力小，吸附極小。 微孔濾膜，有親水性和疏水性之分，在現(xiàn)在的眾多微孔濾膜中PVDF材料的是應用最廣的，效果最好的3各種微孔濾膜的種類及特點（1）混合纖維素( CN- CA)CN - CA 是一種較標準的常用微孔濾膜,開發(fā)最早,應用也比較成熟. 由于成孔性能良好,親水性強,因此該種濾膜的系列孔徑規(guī)格分級最多,從0.05m 到8m， 【6】國內(nèi)制膜

16、企業(yè)普遍生產(chǎn)的的一種濾膜，凍干過濾工序常用此膜，質(zhì)量良莠不齊。藥廠使用性價比較高（2） 聚酰胺類如尼龍6 ( PA - 6) 和尼龍66 ( PA - 66) 微孔濾膜,這類膜親水性好,較耐堿而不耐酸. 在酮、酚、醚及高分子量醇類中,不易被浸蝕. 孔徑型號也較多.質(zhì)地堅固，個別品種注意溶出度。價格適中。 （3） 聚醚砜( PES) 微孔濾膜PES特性 耐熱性優(yōu)越，熱變形溫度200，高溫下強度大。 耐水性優(yōu)越，耐酸、堿。 難燃性，燃燒時發(fā)煙少。 透明、無毒?！?】該類膜具有良好的化學穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性,耐輻射,濾速快,應用面也較廣.膜產(chǎn)品已得到認可和應用.是比較理想的濾膜。只是此膜大多依靠進口，或

17、國外提供原料國內(nèi)加工，價格較貴。適用于貴重藥液過濾和大批量藥液過濾除此之外聚氟乙烯類，聚碳酸酯和聚酯類如聚偏氟乙烯膜( PVDF) 和聚四氟乙烯膜(PTFE) . 這兩類微孔濾膜,都有極好的化學穩(wěn)定性,適合在高溫下使用. 特別是PTFE 膜,其使用溫度- 40 260 ,一部分是采用聚氟類微孔濾膜.還有聚碳酸酯和聚酯類聚 ，烯烴類，無機基材類微孔濾膜等。藥廠有時也有應用。4氣泡點檢測簡介氣泡點檢測原理：截留效率是微孔膜最重要的性能指標，它受控于膜的最大孔徑和膜的孔徑分布。用來測量膜最大孔徑的最普通最經(jīng)典的方法是泡點壓力法，其原理是基于假定微孔膜是由很多圓形毛細管狀的孔道組成。測泡點壓力時，是先

18、將微孔膜完全濕潤 (親水性的膜一般用純水濕潤，疏水性的膜可用甲醇、異丙醇等溶劑濕潤)，然后在裝置中對膜一側(cè)施加氣體壓力，在膜另一側(cè)看氣泡的最低壓力值時稱這個壓力點為泡點，膜孔徑與泡點壓力之間的關系是【8】P=4cos/D其中：P壓差 表面壓力 浸潤液與濾材的接觸角 D孔徑（厘米） 氣泡點檢測是證明過濾系統(tǒng)是針對濾膜完整性的一種重要手段，三 化學消毒劑在凍干粉針工藝上的應用1化學消毒劑簡介：定義：化學消毒滅菌法是利用化學物質(zhì)抑制和殺死微生物?？捎媒?、噴霧和熏蒸等方法 理想的化學消毒劑特質(zhì) （1）殺菌譜廣； （2）使用有效濃度低； （3）殺菌作用速度快； （4）性能穩(wěn)定； （5）易溶于水； （6

19、）可在低溫下使用； （7）不易受各種物理化學因素影響； （8）對物品無腐蝕性； （9）無臭無味，無色； （10）毒性低，消毒后無殘留毒害； （11）使用安全，不易燃燒； （12）價格低廉； （13）運輸方便； （14）可大量生產(chǎn)供應?！?】化學消毒劑的使用原則：（1）有針對性地根據(jù)所要殺滅微生物的特點，選用合適的消毒劑。（2）嚴格掌握消毒劑的濃度、消毒時間及消毒方法，否則達不到消毒滅菌的作用。（3）被消毒的物品，在消毒前必須清洗干凈。（4）浸泡消毒時，物品必須全部浸泡在溶液內(nèi)，軸節(jié)應打開。（5）對易揮發(fā)的消毒溶液，必須將蓋蓋嚴，定期測量比重，以保證濃度。（6）浸泡的器械在使用前應用滅菌蒸餾水或

20、生理鹽水將消毒液沖洗干凈，以免刺激人體組織?！?0】目前的化學消毒劑中，沒有一種能夠完全符合上述要求的！因此在使用中，只能根據(jù)被消毒物的特點使用 2 GMP對藥廠使用化學消毒劑的規(guī)定（1）應按照操作規(guī)程對潔凈區(qū)進行必要的清潔和消毒。所采用消毒劑的種類應多于一種。為及時發(fā)現(xiàn)是否出現(xiàn)耐受菌株及其蔓延情況，應定期進行環(huán)境監(jiān)測。紫外線殺菌效力有限，不能用以替代化學消毒劑。(2) 應監(jiān)測消毒劑和清潔劑的微生物污染狀況，配制后的消毒劑和清潔劑應存放在事先清潔過的容器內(nèi)，存放期不得超過規(guī)定時限。A/B級區(qū)應使用經(jīng)除菌過濾的消毒劑和清潔劑。(3) 必要時可采用熏蒸的方法以降低潔凈區(qū)內(nèi)衛(wèi)生死角的微生物污染，應對

21、熏蒸劑的殘留水平予以驗證?！?1】3消毒藥物的選擇： （1）.消毒藥對微生物有一定選擇性，針對所要殺滅的微生物的特點，選擇合適的消毒劑是消毒工作成敗的關鍵。如果要殺滅細菌芽孢，則必須選擇高效的化學消毒劑才能取得可靠的消毒效果。季銨鹽類是陽離子表面活性劑，因殺菌作用的陽離子具有親脂性，而革蘭陽性菌的細胞壁含類脂多于革蘭陰性菌，故革蘭陽性菌更易被季銨鹽類消毒劑滅活。 （2）消毒劑的配合： 消毒劑的正確配合運用也是有效使用消毒劑的關鍵。洗必泰和季銨鹽類消毒劑用70%酒精配制比用水配制穿透力強，殺菌效果更好。酚在水中的溶解度低，制成甲酚的肥皂溶液，可殺滅大多數(shù)細菌繁殖體，對結核桿菌亦能在15分鐘內(nèi)殺滅

22、。 （3）消毒劑的濃度： 一般來說，消毒劑的濃度和消毒效果成正比，即消毒劑越濃，其消毒效力越強。如石炭酸的濃度降低1/3，其效力降低1/7291/81，但也不能一概而論，如70%酒精比其他濃度酒精消毒效力都強。但濃度越大，對機體或器具的損傷或破壞作用也越大。因此，在配制消毒劑時，要按消毒對象的重量或體積計算選擇其最有效而又安全的濃度，不可隨意加大或減少藥物濃度。 （4）.環(huán)境溫度、濕度和酸堿度： 一般來說，消毒劑隨溫度升高其殺菌能力增強。溫度每升高10，石炭酸的消毒作用可增加58倍，金屬鹽類增加25倍?！?2】 4常用的化學消毒劑（1）酒精消毒劑: 簡介：70%-75%的酒精用于滅菌消毒，藥廠

23、應為75%的酒精。用于包括皮膚消毒、設備消毒等。 有人以為，酒精濃度越高，消毒效果越好，這是錯誤的。酒精消毒的作用是凝固細菌體內(nèi)的蛋白質(zhì)，從而殺死細菌。但95%的酒精能將細菌表面包膜的蛋白質(zhì)迅速凝固，并形成一層保護膜，阻止酒精進入細菌體內(nèi)，因而不能將細菌徹底殺死。如果酒精濃度低于70%，雖可進入細菌體內(nèi)，但不能將其體內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固，同樣也不能將細菌徹底殺死。只有70%-75%的酒精即能順利地進入到細菌體內(nèi)，又能有效地將細菌體內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固，因而可徹底殺死細菌。乙醇屬中效消毒劑，目前醫(yī)藥生產(chǎn)單位使用很普遍。 【13】主要優(yōu)缺點： 優(yōu)點：具有中效、速效的殺菌作用； 無毒、無刺激，對金屬無腐蝕性；

24、缺點：受有機物影響大； 易揮發(fā)，不穩(wěn)定。 殺菌作用：乙醇為中效消毒劑，能殺滅細菌繁殖體、結核桿菌及大多數(shù)真菌和病毒， 但不能殺滅細菌芽胞。 適用范圍：適用于皮膚、環(huán)境表面及設備表面消毒。 配制方法：取95%的酒精，按比例加入純化水到75%，經(jīng)0.45nM的濾膜過濾，放置在密閉容器內(nèi)，有效期7天。 2 新潔爾滅 新潔爾滅屬季銨鹽類消毒劑，它是一種陽離子表面活性劑，在消毒學分類上屬低效消毒劑。 （1） 殺菌原理： 該消毒劑殺菌作用機制主要有：改變細胞的滲透性，使細菌破裂；使蛋白質(zhì)變性； 抑制細菌體內(nèi)某些酶，使之失去活性；因其有良好的表面活性，可高濃度聚集于菌體表面，影響細胞的新陳代謝。 （2）主要

25、優(yōu)缺點： 優(yōu)點： 無難聞的刺激性氣味； 易溶于水； 有表面活性作用； 耐光耐熱； 性質(zhì)較穩(wěn)定，可以長期貯存。 缺點：易受有機物的影響；吸附性強。一塊 10cm×10cm 的紗布浸入 1000m11/1000 的新潔爾滅溶液中，可使該溶液變成 1/2000 之的濃度。 （3）殺菌作用： 新潔爾滅對化膿性細菌、腸道菌及部分病毒有一定的殺滅能力；對結核桿菌、真菌的殺 滅效果不好；對細菌芽胞僅能起抑制作用。 本消毒劑對革蘭氏陽性菌的殺滅能力一般較對革蘭氏陰性菌強，抑菌濃度遠低于殺菌濃度。 （4）適用范圍：墻面抹擦，地漏液封，浸潤雙手等。（5）使用方法： 對污染物品的消毒：可用 0.1-0.5

26、%濃度的溶液噴灑，浸泡或抹擦，作用10-60 分鐘。 (3) 臭氧簡介：臭氧是一種廣譜殺菌劑，可殺滅細菌繁殖體和芽胞、病毒、真菌等，并可破壞肉毒桿菌毒素。 臭氧對空氣中的微生物有明顯地殺滅作用，采用 30mg/m3 濃度的臭氧，作用 15 分鐘，對自然菌的殺滅率達到 90%以上。用臭氧消毒空氣，必須是在人不在的條件下，消毒后至少 過 30 分鐘才能進入?？捎糜谑中g室，病房，無菌室等場所的空氣消毒。 主要用于潔凈間的消毒滅菌，臭氧發(fā)生器可以流動使用，對不同的罐進行消毒，每個生產(chǎn)單元在每次換料前，都可以及時得到消毒，使用效率很高，也很方便，不要用那么多的酒精、氮氣，也不要用高壓蒸汽。所以在制藥廠就

27、能夠得到推廣。滅菌形式：臭氧能氧化分解細菌內(nèi)部葡萄糖所需的酶，使細菌滅活死亡。直接與細菌、病毒作用，破壞它們的細胞器和DNA、RNA，使細菌的新陳代謝受到破壞，導致細菌死亡。透過細胞膜組織，侵入細胞內(nèi)，作用于外膜的脂蛋白和內(nèi)部的脂多糖，使細菌發(fā)生通透性畸變而溶解死亡。注意事項： 臭氧對人有毒，國家規(guī)定大氣中允許濃度為 0.2mg/m3，故消毒必須在無人條件下進 行。 臭氧為強氧化劑，對多種物品有損壞，濃度越高對物品損壞越重，可使銅片出現(xiàn)綠色 銹斑、橡膠老化，變色，彈性減低，以致變脆、斷裂，使織物漂白褪色等。使用時應注意。 溫度和濕度可影響臭氧的殺菌效果： 臭氧作水的消毒時，0最好，溫度越高，越

28、有利于臭氧的分解，故殺菌效果越差加濕有利于臭氧的殺菌作用、要求濕度>60%，濕度越大殺菌效果越好。臭氧在常溫下為爆炸性氣體，有特臭。臭氧在水中的溶解度較低（3%）。臭氧穩(wěn)定性差，在常溫下可自行分解為氧。所以臭氧不能瓶裝貯備，只能現(xiàn)場生產(chǎn)，立即使用。(4)環(huán)氧乙烷簡介:氣體滅菌劑，在25室溫下能殺滅一切病原體。它殺滅細菌芽孢的濃度與時間為： 884mg/L，24h; 442mg/L，4h;884mg/L，2h。本品對物品的損害小，不損壞金屬、棉、毛、橡膠、合成纖維，但可損壞賽璐珞制品、聚乙烯、聚氯乙烯。本品的穿透力強，能穿透紙張、塑料薄膜等包裝材料?！?4】消毒方法：液體消毒：可于水浴中用

29、其15%溶液浸泡數(shù)小時。此法適用于某些生物制品、培養(yǎng)基、移植物或埋藏物的滅菌。熏蒸消毒： 可于丁基橡膠尼龍袋、聚乙烯塑料袋、密閉的消毒柜或其他容器內(nèi)進行。投藥量一般為440880mg/L，作用時間為1624h(>15);如于丁基橡膠袋中劑量加大至2500mg/L，則作用24h (>20) 即可。消毒后的物品應徹底通風散氣。密切接觸皮膚的乳膠或塑料制品，須通風18h以至數(shù)日，才可使用。熱空氣或超聲波可加速其擴散。，【15】四 熱力滅菌熱力滅菌簡介：制藥工業(yè)所用滅菌設備的常用滅菌方法熱力消毒系指利用熱力作用殺滅病原微生物防止疾病傳播的處理。若將微生物全部殺滅則稱熱力滅菌。其主要作用是通

30、過菌體酶的破壞與蛋白質(zhì)的凝固使微生物死亡。干熱消毒是在無水情況下加熱以達消毒的處理。其主要作用是通過氧化，破壞細菌原生質(zhì)使微生物死亡。濕熱殺菌作用較干熱為強，但所有微生物均可被此兩種處理方法殺滅而達滅菌。 微生物對熱的抵抗力多用熱死亡時間表達，即在一定溫度與條件下，全部殺死該種微生物所需的時間。不同微生物在濕熱或干熱處理下的熱死亡時間不盡相同，其中以細菌芽胞最長，而嗜熱脂肪芽胞桿菌芽胞又較一般病原菌芽胞的熱死亡時間為長(見表1)。 微生物煮沸壓力蒸氣干 熱100121132160180細菌繁殖體*病毒真菌孢子產(chǎn)氣夾膜梭菌芽胞腐敗梭菌芽胞炭疽桿菌芽胞破傷風梭菌芽胞肉毒桿菌芽胞嗜熱脂肪芽胞桿菌芽胞

31、222510106030030011123351212<1<1<1<1<1<1122333466123030<1<1<1<1<1<1255【17】1 濕熱滅菌法系熱滅菌法的一種，即以沸水、蒸汽和蒸汽加壓滅菌。常用的巴氏滅菌法就是濕熱滅菌，此法又有兩種方式：(1)低溫長時間處理，在61.762.8攝氏度以下處理30分鐘;(2)高溫短時間處理，在71.6攝氏度或略高溫度下處理15分鐘，濕熱滅菌中，以蒸汽加壓滅菌效果最好，可用常壓蒸汽滅菌，也可在高壓蒸汽鍋中滅菌，其蒸汽溫度可達121攝氏度，能將耐熱的芽孢在30分鐘內(nèi)全部殺死。但

32、對某些易被高壓破壞的物質(zhì)，如某些糖或有機含氮化合物，宜在60千帕壓力下(110攝氏度)滅菌1530分鐘。【18】在一般情況下，熱壓滅菌法所需的溫度（蒸汽表壓）和時間的關系為：115（67kPa）、30min; 121（97kPa）、20min; 126（139kPa）、15min。在特殊情況下，可以通過試驗確認合適的滅菌溫度和時間。（XVIII）濕熱法是在高壓滅菌器中使用高壓蒸汽或高溫水進行滅菌的方法。因微生物在濕熱的環(huán)境中，一些重要的蛋白發(fā)生變性和凝固，會使微生物死亡，從而達到滅菌的目的。較之干熱滅菌，在濕熱的條件下，微生物可在相對較低的溫度下被殺死。高壓滅菌器的常規(guī)操作溫度是121 ，時間

33、是1020 min；也可選擇達到相同殺滅效果的115 ，一般時間45 min。通常濕熱滅菌方法適用于可承受所需溫度，且能被濕氣穿透但不會受到不良影響的、包裝在密閉容器中的藥物制劑。蒸汽滅菌對油類、脂肪類、油性制劑、其他不能被濕氣穿透的制劑，以及可能會被凝結水破干熱滅菌：使微生物氧化，而不是蛋白質(zhì)變性?！?9】2 干熱滅菌法系熱滅菌法的一種，其中有焚燒法和干烤法等。一般細菌的繁殖體在干熱80100°C經(jīng)1小時即死亡，芽胞則需160°C經(jīng)2小時才死亡。干熱滅菌法在醫(yī)療中有一定意義?！?0】干熱法是在特別設計的滅菌設備中進行滅菌的方法，通過氣體或電加熱，設備內(nèi)溫度是可控的。干熱滅

34、菌是基于焚化或氧化使微生物脫水死亡，從而達到滅菌的目的。因干熱滅菌在殺滅微生物方面的效果較差，故需要更高的溫度和更長的時間。具體的溫度和時間需根據(jù)產(chǎn)品的裝量大小和類型、容器及其熱分布特性來確定。一般來說，進行滅菌處理的個體單位應盡量小，裝載滅菌設備時熱空氣應能在設備容器室內(nèi)自由循環(huán)。干熱滅菌的溫度通常是160170 ，時間2 h。更高的溫度可縮短時間，反之，較低的溫度則需要更長的時間。干熱滅菌通常用于濕熱滅菌無效的物質(zhì)，包括不揮發(fā)油、甘油及各種熱穩(wěn)定的粉末等。干熱滅菌也是玻璃器皿和手術器具滅菌的有效方法。實 驗 部 分 過濾系統(tǒng)氣泡點及PH值變化實驗設計1.儀器與試劑：1.1儀器：（1）微孔濾

35、膜： 孔徑0.22m 級別: 除菌級 直徑：150mm 濾膜面積: 225平方厘米 廠家：杭州西斗門設備廠（2）平板濾器：直徑：150mm 級別: 除菌級 廠家：上海先維過濾設備廠完整性檢測儀： 型號：FILGUARD-212 廠家：上海先維過濾設備廠 （3）蠕動泵，三角瓶 ，脈動滅菌柜，10L立瓶，5L三角瓶，管路等。1.2實驗試劑：（1）甘露醇:山東潔晶醫(yī)藥科技有限公司 批號：10080907 配制40L 5%的甘露醇滅菌溶液。（2）微生物指示劑: 缺陷假單孢菌( ATCC19146直徑0.3m 0. 4m m) , 北京鑫四環(huán)消毒技術開發(fā)中心。( 3) 菌液濃度: 每平方厘米應達到10個

36、菌的挑戰(zhàn)水平。( 4) 培養(yǎng)基: 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基: 北京三藥科技開發(fā)公司, 批號: 091111; 營養(yǎng)瓊脂: 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司, 批號: 200907081; 營養(yǎng)肉湯: 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司, 批號:2009120712實驗方法：2.1 原理：2.1.1氣泡點檢測簡介氣泡點檢測原理：截留效率是微孔膜最重要的性能指標，它受控于膜的最大孔徑和膜的孔徑分布。用來測量膜最大孔徑的最普通最經(jīng)典的方法是泡點壓力法，其原理是基于假定微孔膜是由很多圓形毛細管狀的孔道組成。測泡點壓力時，是先將微孔膜完全濕潤 (親水性的膜一般用純水濕潤，疏水性的膜可用甲醇、異丙醇等溶劑濕潤)，然后在裝置

37、中對膜一側(cè)施加氣體壓力，在膜另一側(cè)看氣泡的最低壓力值時稱這個壓力點為泡點，膜孔徑與泡點壓力之間的關系是【8】P=4cos/D其中：P壓差 表面壓力 浸潤液與濾材的接觸角 D孔徑（厘米） 氣泡點檢測是證明過濾系統(tǒng)是針對濾膜完整性的一種重要手段2.1.2: 經(jīng)培養(yǎng)所得菌簇形成單位的英文縮寫。 細菌（可見）和真菌的測量單位。菌落形成單位，將稀釋后的一定量的菌液通過澆注或涂布的方法，讓其內(nèi)的微生物單細胞一一分散在瓊脂平板上，待培養(yǎng)后，每一活細胞就形成一個菌落。與常規(guī)利用顯微鏡對微生物數(shù)量進行測量不同，主要是對可見（即多數(shù)情況下形成菌落）的細菌數(shù)量進行測量的單位。2.2實驗過程2.2.1 過濾系統(tǒng)滅菌:

38、 將試驗所需的不銹鋼桶、硅膠管、過濾器及濾芯等置于脈動真空滅菌器中于121度 滅菌40 min。2.2.2. 無菌甘露醇溶液的制備：配制20L 5%的甘露醇溶液，置于脈動真空滅菌器中于121度 滅菌40 min。2.2.3 完整性測試：（1）系統(tǒng)密閉性檢查：按下圖所示，連接整個過濾系統(tǒng)，安裝濾器。封閉出料口，將上口與壓縮空氣管道相連。緩慢開啟壓縮空氣閥門，壓力表顯示0.6mpa時，打開完整性檢測儀，打開功能5，按開始鍵，儀器開始手動檢測，在按加壓鍵，升到0.2Mpa時松開生壓鍵，穩(wěn)定1-2分鐘，如顯示器壓力值不下則氣密性完好。(2)濾膜氣泡點測試：系統(tǒng)檢測合格后，打開完整性檢測儀，設置好時間，

39、打開功能3系統(tǒng)自動進行氣泡點，檢測完畢后，顯示器顯示氣泡點壓力。按打印鍵，打印出結果。2.2.4 微生物截留試驗： （1） 截留試驗: 將缺陷假單胞菌液360 mL 加入0.5% 甘露醇溶液中攪拌均勻, 取1mL 按中國藥典2005 年版2 部附錄0.5%微生物限度檢查法進行檢查, 計數(shù)過濾前液體的微生物數(shù)量。然后將菌液全部用過濾器濾過, 取1000mL按過濾前藥液微生物數(shù)量檢查法同法操作, 計數(shù)過濾后的液體的微生物數(shù)量。計算被過濾液體過濾前的微生物數(shù)量( N0 ) 與過濾后的微生物數(shù)量(N) 比的常用對數(shù)值,即: LRV = 1gN0-1gN= 7.7。2.5微生物截留試驗：除菌濾器再次進行

40、起泡點測試, 確認試驗過程中濾膜的完整性。記錄見表一系統(tǒng)完整性確認記錄3.實驗結果：表一：完整性確認檢驗結果測量值標準規(guī)定是否符合是/否×實驗前0.3245MPa實驗后0.3241MPa0.30MPa完整性確認檢驗結果：實驗前后都0.30Mpa，所以完整性確認檢驗結果合格。表2微生物截留試驗結果過濾前微生物數(shù)量( N)過濾后微生物數(shù)量(N)1gN1gNLRV標準規(guī)定7.0×10 CFU1.2×10 CFU9.82.17.7LRV 7微生物截留實驗4.討論濾膜的氣泡點國內(nèi)沒有嚴格規(guī)定，廠家給的標準為0.30Mpa，所以此次驗證以此為準，實驗前后濾膜的氣泡點0.30Mpa，符合廠家標準，完整性確認檢驗結果系統(tǒng)。實際生產(chǎn)中，氣泡點是過濾系統(tǒng)檢測的主要手段。通常也有不合格的情況，如遇到此情況，需認真分析原因，：常見的不合格原因有以下幾種濾芯潤濕時間；不夠濾芯為安裝好；過濾系統(tǒng)漏氣完整性檢測儀漏氣；壓源壓力不足6Mpa；濾芯未沖洗干凈；濾芯已壞需要更換等等。如果過濾前未確定不合格，應更換濾芯，如