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文檔簡介

1、精品文檔專題一課題1果酒和果醋的制作1、發(fā)酵:通過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過程。2、有氧發(fā)酵:醋酸發(fā)酵谷氨酸發(fā)酵 無氧發(fā)酵:酒精發(fā)酵乳酸發(fā)酵3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式:出芽生殖4、在有氧條件下,酵母菌進行有氧呼吸, 大量繁殖。CHO +6Of6CO +6HO 22122665、在無氧條件下,酵母菌能進行酒精發(fā)酵。CHO-2CHOH+ 6CO 2662125 6、20 c左右 最適宜 酵母菌繁殖 酒精發(fā)酵時一般將溫度控 制在 18 C-25 c 7、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄

2、皮的色素也進入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在缺氧呈酸性的發(fā)酵 液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。8、果醋制作過程中,起作用的菌種是醋酸菌,該菌種是單細胞細菌(原核生物),代謝類型是異養(yǎng)需 氧型,生殖方式為二分裂9、當氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變 為乙醛,再將乙醛變?yōu)榇姿?。CH OH + O- CHCOOH + HO 23522在變酸的酒的表面觀察到的菌膜就是醋酸菌在液面繁殖而形成的 10、控制發(fā)酵條件的作用醋酸菌對氧氣的含量特別敏感,當進行深層發(fā)酵時,即使只是短時間中斷通入氧氣,也會引起醋酸菌死亡。

3、 醋酸菌最適生長溫度為3035 C ,控制好發(fā)酵溫度,使 發(fā)酵時間縮短,又減少雜菌污染的機會。有兩條途徑生成醋酸:直接氧化和以酒精為底物的氧化。11、實驗流程:挑選葡萄-沖洗-榨汁-酒精發(fā)酵-果酒(-醋酸發(fā)酵-果醋)12、酒精檢驗:果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生,可以用重銘酸鉀來檢驗。在酸性條件下,重銘酸鉀與 酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2mL,再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的HSO3 42 滴,振蕩混勻,最后滴加常溫下飽和的重銘酸鉀溶液3滴,振蕩試管,觀察顏色13、充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用的;排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的;出料口是用來取樣的。 排氣口要通過一

4、個長而彎曲的膠管與瓶身相連接, 氣中 微生物的污染。開口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。時,應(yīng)該關(guān)閉充氣口 ;應(yīng)該充氣 口連接氣泵,輸入氧氣。 其目的是防止空 使用該裝置制酒 制醋時,圖I一憫朋帶該的瓶了就而勒酒14利用上圖制作果酒、果醋時,在發(fā)酵過程中,每隔 12h將瓶蓋擰松一次(注意,不能打開瓶蓋)目的是放出二氧化碳。當發(fā)酵產(chǎn)生酒精后,對裝置的處理是打開瓶蓋,蓋上一層紗布,進行制葡萄醋的發(fā)酵15防止發(fā)酵液被污染:榨汁機要清洗干凈, 并晾干發(fā)酵裝置要清洗干凈,并用體積分數(shù)70%的酒精消毒,或用洗潔精洗滌。裝入榨好的葡萄汁后,封閉充氣口。 16控制好發(fā)酵條件:將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶,留大約三分之

5、一的空間。制葡萄酒的過程中, 將 溫度嚴格才制在 1825 C,時間控制在 10到20天,可通過出料口發(fā)酵的情況進行及時的監(jiān)測。 在制葡萄醋的過程中, 將溫度嚴格控制在 3035 C,時間控制在7到8天,并注意適時通過充 氣口充氣。疑難解答(1)你認為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?應(yīng)該先沖洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機會。(2)你認為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?如:要先沖洗葡萄,再除去枝梗;榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈,并進行酒精消毒;每次排氣時只需擰松瓶蓋,不要完全揭開瓶蓋等。C?制葡萄醋時,為什么要將溫度控制在2518)制葡萄酒時,為什么要將

6、溫度控制在3 (.30 35 C ?溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20 c左右最適合酵母菌的繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度為3035 C,因此要將溫度控制在3035 Co專題二課題1微生物的實驗室培養(yǎng)培養(yǎng)基:人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì),是進行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn),固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生

7、物的分_ 離和鑒定,半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運動及菌種保藏等。培養(yǎng)基的化學成分包括水、無機鹽、碳源、氮源,此外還需要滿足微生物生長對Ph、特 殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求 培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對PH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性,培養(yǎng)細菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件無菌技術(shù)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,要注意以下幾個方面: 對實驗操作的空間、操作者的衣著和手,進行清潔和消毒。 將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌。 為避免周圍環(huán)境中微生物

8、的污染,實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行。實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么目的?答:無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。消毒與滅菌的區(qū)別消毒指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽胞和抱子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽抱和抱子。滅菌方法有灼一燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。 滅菌方法:接種環(huán)、接種針、試管口

9、等使用灼燒滅菌法; 玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱; 培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈比較項理化因素的作用強度消滅微生物的數(shù)量芽抱和抱子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能火菌強烈全部微生物能制作牛肉膏蛋白豚固體培養(yǎng)基(1)方法步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。 稱量:牛肉膏比較黏稠,可以用玻棒挑取,放在稱量紙上稱量。牛肉膏和蛋白豚都容易吸潮,稱 取時動作要迅速,稱后要及時蓋上瓶蓋。 倒平板時要待培養(yǎng)基冷卻至50 c左右時,在酒精燈火焰附近進行, 等平板冷凝將平板倒置 倒

10、平板操作的討論1 .培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50 c左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了。2 .為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3 .平板冷凝后,為什么要將平板倒置?答:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可 以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。4 .在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?答:空

11、氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。純化大腸桿菌(1)微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。 在數(shù)次劃線后培養(yǎng), 可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。(4)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是:使聚集在一起的微生物分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成

12、單個的菌落,以便于純化菌種。(5)平板劃線法操作步驟:將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán),并打開棉塞。 將試管口通過火焰。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管通過火焰,并塞上棉塞。左手將皿蓋打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。灼燒接種環(huán),待其冷卻后,從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不 要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 平板劃線操作的討論仍然需要灼燒每次劃線前灼1 .為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在

13、劃線操作結(jié)束時, 接種環(huán)嗎?為什么?答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種, 使下一次劃線時, 接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。2 .在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進行劃線?答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。3 .在作第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?答:劃線后,線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃

14、線的末端開始,能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。(6)涂布平板操作的步驟:將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取少量菌液,滴加到培養(yǎng)基表面。 將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃盡后,冷卻810s。用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進行無菌操作?提示:應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要 接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。菌種的保存(1)對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的方

15、法。臨時保藏方法將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng)。 當菌落長成后,將試管放入4c的冰箱中保藏。以后每 36個月,都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。缺點:這種方法保存的時間不長,菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。(2)對于需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法。 在3mL的甘油瓶中,裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中, 與甘油充 分混勻后,放在 20 c的冷凍箱中保存。 疑難解答確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12天,無菌落生長,說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則 需要重新制備。課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)尿

16、素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當土壤中的細菌將尿素分解 成氨之后,才能被植物利用。土壤中的細菌之所以能分解尿素,是因為他 們能合成服酶尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的篩選菌株(1)實驗室中微生物的篩選應(yīng)用的原理人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等),同時抑制或阻止其他微生 物生長。(2)選擇性培養(yǎng)基在微生物學中,將允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng) 基,稱作選擇培養(yǎng)基。 (3)配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點加入某種物質(zhì)以達到選擇的目的。例如,培養(yǎng)基中不加入有機物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物;培養(yǎng)基中不加入氮

17、元素,可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物;加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。統(tǒng)計菌落數(shù)目(1)測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法(活菌計數(shù)法)和顯微鏡直接計數(shù)。(2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通 過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù), 就能推測出樣品中大約含有多少活細菌。為了保證結(jié)果準確,一般設(shè)置35個平板,選擇菌落數(shù)在 30300的平板進行計數(shù),并取平均值。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的 實際數(shù)目低,這是因為當兩個或多個細胞在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落。因此,統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。 采用

18、此方法的注意事項:選擇菌落數(shù)在30300的平板上計數(shù)。需培養(yǎng)計算出三個或三個以上的平板菌落求平均數(shù)。統(tǒng)計的菌落往往比活菌的實際數(shù)目低。每克樣品中的菌落數(shù)=(C +V) XM其中,C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(ml) , M代表稀釋倍數(shù)。設(shè)置對照設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響,提高實驗結(jié)果的可信度。II I1實驗設(shè)計實驗設(shè)計包括實驗方案,所需儀器、材料、用具和藥品,具體的實施步驟以及時間安排等的綜合考慮和安排。(1) 土壤取樣:同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物,數(shù)量最大,種類最多。在富含有機質(zhì)的土壤表層,有更多的微生物

19、生長。從富含有機物、潮濕、 pH -7的土壤中取樣。鏟去表層土,在距 的土壤層取樣。8cm3地表約.(2)樣品的稀釋:樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在30300之間、適于計數(shù)的平板。測定土壤中細菌的數(shù)量,一般選用10 1010 6 4 5測定放線菌的數(shù)量,一般選用10 101054 3測定真菌的數(shù)量,一般選用10 1010 4 3 2(3)微生物的培養(yǎng)與觀察不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。細菌3037 C 12天放線菌 2528 C 57天霉菌2528 C 34天每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目

20、,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止因培養(yǎng)時間 不足而導致一樓菌落的數(shù)目。一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、唯獨及培養(yǎng)時間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。形狀、大小、隆起程度、顏色疑難解答 (1)如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)?統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計3個平板,計算出平板菌落數(shù)的平均值每克樣品中的菌落數(shù) =(C/V)*M其中,C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(ml), M代表稀釋倍數(shù)專題三課題1菊花的組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的基本過程細胞分化:在生物個體發(fā)育過程中,細胞在 形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能 上

21、出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程 離體的植物組織或細胞,在培養(yǎng)了一段時間以后,會通過細胞分裂,形成愈傷組織,愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則,是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞。由高度分化的植物組織或細 胞產(chǎn)生愈傷組織的過程,稱為植物細胞的脫分化,或者叫做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進 行培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官,這個過程叫做。再分化形成的試管苗,移栽到地 再分化里,可以發(fā)育成完整的植物體。植物細胞工程具有某種生物全套遺傳信息的任何一個活細胞,都具有發(fā)育成完整個體的能力,即每個生物細胞都 具有全能性。但在生物體的生長發(fā)育過程中并不表現(xiàn)出來,這是因為在 特定的時間和空間 條件下,通過基因的

22、 選擇性表達, 構(gòu)成不同組織和器官。植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有:實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖;培育脫毒作物;制作 人工種子;培育作物新品種以及細胞產(chǎn)物的 工廠化生產(chǎn)等。細胞分化是一種持久性的變化,它有什么生理意義?使多細胞生物體中細胞結(jié)構(gòu)和功能趨向?qū)iT化,有利于提高各種生理功能的效率。影響植物組織培養(yǎng)的條件1材料:不同的植物組織,培養(yǎng)的難易程度差別很大。植物材料的選擇直接關(guān)系到試驗的成敗。植 物的種類、材料的年齡和保存時間的長短等都會影響實驗結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇 未開花植物 的莖上部新萌生的側(cè)枝作材料 。一般來說,容易進行無性繁殖的植物容易進行組織培養(yǎng)。選取生長 旺盛嫩枝進行組培的是嫩枝生理狀態(tài)

23、好,容易誘導脫分化和再分化。2營養(yǎng):離體的植物組織和細胞,對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對特殊,需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的培養(yǎng)基是 MS培養(yǎng)基,其中含有的 大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co,有機物 有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等,常常需要添加 植物激素。3激素:植物激素中 生長素和細胞分裂素 是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長 素存在的情況下,細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強趨勢。在培養(yǎng)基中需要添加生長素和細胞分裂素等植物激素,其濃度、使用的先后順序、等都影響結(jié)果。用量的比例 _生長素/細胞分裂素比值與結(jié)果實驗結(jié)果使用順序

24、促根分化, 有利于分裂但不分先生長素,比值高時抑芽形成化后細胞分裂素促芽分化, 先細胞分裂 比值低時 抑根形成 細胞既分裂也分化 素, 比值適中 促進愈傷組織生長后生長素+分化頻率提高同時使用4環(huán)境條件:PH、溫度、光等環(huán)境條件。不同的植物對各種條件的要求往往不同。進行菊花的組織培養(yǎng),一般將pH控制在5.8左右,溫度控制在1822 C,并且每日用日光燈照射12h.4、操作流程(1)配制MS固體培養(yǎng)基:配制各種母液:將各種成分按配方比例配制成的濃縮液(培養(yǎng)基母液)o 使用時根據(jù)母液的濃縮倍數(shù),計算用量,并加蒸儲水稀釋。 配制培養(yǎng)基:應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機物和植物激素的

25、母液,并用蒸播水定容到 1000毫升。 在菊花組織培養(yǎng)中,可以不添加植物激素。原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。滅菌:采取的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。(2)外植體的消毒外植體:用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。選取菊花莖段時,要取生長旺 盛的嫩枝。菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉,用軟刷輕輕刷洗,刷洗后在流水下沖洗20min 左右。用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分,放入體積分數(shù)為 70%的酒精中搖動 23次,持續(xù),立即將外植體取出,在無菌水中清3次,漂洗消毒液。洗。取出后仍用無菌吸水紙吸干外植體表面水分,放入 67s質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液中12min。取出后,在無菌水中至少清洗78個外植

26、體。外植注意:對外植體進行表面消毒時,就要考慮藥劑的消毒效果,又要考慮植物的耐受能力(3)接種:接種過程中插入外植體時形態(tài)學上端朝上,每個錐形瓶接種體接種與細菌接種相似,操作步驟相同, 而且都要求無菌操作。 插入時應(yīng)注意方向, 不要倒插。(4)培養(yǎng):應(yīng)該放在無菌箱中進行,并定期進行消毒,保持適宜的溫度(1822 C)和光照(12h )(5)移栽:栽前應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜,讓其在培養(yǎng)間生長幾日,然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。 然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時間, 進行壯苗。 最后進行露天栽 培。( 6 )栽培外植體在培養(yǎng)過程中可能會被污染, 原因有外植體消毒不徹底; 培養(yǎng)基滅菌不徹底; 接種中被雜菌污染;錐形瓶密封性差等。專題六 課題 2 胡蘿卜素的提取胡蘿卜素性質(zhì):橘黃色結(jié)晶,化學性質(zhì)比較穩(wěn)定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機溶 劑。依據(jù)碳碳雙鍵的數(shù)目劃分為a、0、T 三類。其中最主要的組成成分為0-胡蘿卜素。作用:治療夜

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