大學(xué) 細(xì)胞工程試題及答案

1、細(xì)胞模擬試題及答案一、 填空（每空一分，共25分）1.實驗室的物理防護(hù)是由隔離的設(shè)備、實驗室的設(shè)計、實驗實施等三個方面組成，根據(jù)其密封程度的不同，分為P1、P2、P3、P4四個生物安全等級。典型的P4實驗室由更衣區(qū)、過濾區(qū)、緩沖區(qū)、消毒區(qū)、核心區(qū)組成。2.細(xì)胞系是原代培養(yǎng)經(jīng)初步純化獲得的以一種細(xì)胞為主的、能在體外長期生存的不均一細(xì)胞群體。3.細(xì)胞株是指從一個經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。4.干細(xì)胞是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。干細(xì)胞的增殖特性為緩慢性和 自穩(wěn)性。5.培養(yǎng)細(xì)胞的生長特點為貼附、接觸抑制和密度抑制。6.植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是基

2、于 動物細(xì)胞的全能性。7.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的方法為分批培養(yǎng)法、連續(xù)培養(yǎng)法和 半連續(xù)培養(yǎng)。8.植物組織培養(yǎng)中培養(yǎng)材料的消毒過程中，消毒的基本原則是 既要殺死附著其上的微生物又不損傷材料。9.細(xì)胞生長測定的一般方法為：細(xì)胞計數(shù)、測定細(xì)胞密實體積、細(xì)胞鮮重或干重。 10.體外培養(yǎng)的細(xì)胞根據(jù)其生長方式主要分為貼附型細(xì)胞和非貼附型細(xì)胞。11.人工種子的組分包括胚狀體、人工胚乳和 人工種皮 。12.細(xì)胞融合主要經(jīng)過了兩原生質(zhì)體或細(xì)胞互相靠近、細(xì)胞橋形成、胞質(zhì)滲透、細(xì)胞核融合幾個步驟。其中細(xì)胞橋形成是最關(guān)鍵的一步。13.花粉單倍體植株的鑒定方法有形態(tài)鑒定、細(xì)胞學(xué)鑒定、雜交鑒定、分子標(biāo)記鑒定。14.胚胎工程主

3、要是對哺乳類動物的胚胎進(jìn)行某種人為的工程技術(shù)操作，然后讓它繼續(xù)發(fā)育，獲得人們所需要的成體動物。15.人工誘導(dǎo)單倍體形成的方法包括：遠(yuǎn)緣雜交、延遲授粉、核置換、射線照射、花藥培養(yǎng)等。二、 單項選擇題（每題1分，共10分）1.人參皂甙粉是人參中重要的藥用成分，以前只能從人參中提取產(chǎn)量極低，因而價格昂貴。目前人參皂甙粉可以通過下列哪項技術(shù)迅速大量獲?。˙） A基因工程 B植物組織培養(yǎng) C植物體細(xì)胞雜交 D發(fā)酵工程 2.下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述不正確的是（C） A通過動物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白 B動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理，以使細(xì)胞分散 C細(xì)胞癌變都發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中 D目前使用的或

4、冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)的，以保持其正常核型3. 盡管各種合成培養(yǎng)基給動物細(xì)胞培養(yǎng)帶來極大方便，但許多實驗表明，單純使用合成培養(yǎng)基細(xì)胞的貼壁增殖效果常常不理想。因此，在使用時通常仍然需要加入一定量的 (C)A平衡鹽溶液      B. 瓊脂糖      C. 動物血清       D. 甘露醇 4.制備人工種子的關(guān)鍵是控制(A) A.胚狀體的同步發(fā)育 B.人工種皮的同步發(fā)育 C.胚狀體的

5、單獨發(fā)育 D.人工種皮的單獨發(fā)育 5.細(xì)胞融合中使用（C）方法可以在顯微鏡下直接定向誘導(dǎo)細(xì)胞融合。 A.仙臺病毒法 B.PEG誘導(dǎo) C.電融合誘導(dǎo)法 D.高Ca+和pH誘導(dǎo)法 6.中胚層來源的細(xì)胞在體外培養(yǎng)時一般表現(xiàn)為哪種形態(tài)（A）  A.成纖維細(xì)胞型細(xì)胞   B. 多形型細(xì)胞   C.上皮型細(xì)胞   D.游走型細(xì)胞    7.在每一代貼附生長細(xì)胞的生長過程中,哪一個時期的細(xì)胞數(shù)隨時間變化成倍增長,活力最佳,最適合進(jìn)行實驗研究（D） A.穩(wěn)定期    &#

6、160; B.衰亡期   C.潛伏期    D.對數(shù)生長期    8.以下哪種方法或技術(shù)適合進(jìn)行動物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)？（D）  A.懸滴培養(yǎng)法   B.培養(yǎng)瓶培養(yǎng)法  C.旋轉(zhuǎn)管培養(yǎng)法   D.多孔載體培養(yǎng)技術(shù) 9.單克隆抗體制備選擇親本時應(yīng)選擇（A）A.骨髓瘤細(xì)胞系和免疫動物屬于同一品系B.骨髓瘤細(xì)胞系和免疫動物屬于不同品系C.B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤屬細(xì)胞屬于不同品系D.B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞無親緣關(guān)系10. 下列關(guān)于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘

7、述，正確的是（D） A卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機(jī)物總量在不斷增加  B胚胎分割時需將原腸胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割    C胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點 D胚胎干細(xì)胞是一類未分化細(xì)胞，可從早期胚胎中分離獲取 三、 多項選擇（每題3份，共15分）1.由外植體或單個細(xì)胞形成愈傷組織一般要經(jīng)過三個步驟（ABD）A.啟動期 B.生長期C.分裂期 D.分化期 2.植物單細(xì)胞培養(yǎng)方法有（ABCD） A.平板培養(yǎng)法 B.看護(hù)培養(yǎng)與飼養(yǎng)層培養(yǎng)法 C.液體淺層靜置培養(yǎng)法 D.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)法 3.動物細(xì)胞培

8、養(yǎng)室，無論細(xì)胞種類和供體的年齡如何，在細(xì)胞的全生長過程中大致都要經(jīng)過三個主要階段（ABC） A.原代培養(yǎng)期 B.傳代期 C.衰退期 D.穩(wěn)定期 4.干細(xì)胞從所具有的分化功能上分為（ABC） A.單能干細(xì)胞 B.多能干細(xì)胞 C.全能干細(xì)胞 D.胚胎干細(xì)胞 5.動物多倍體育種的方法有（ABC） A.溫度休克法 B.水靜壓法 C.細(xì)胞松弛素B D.秋水仙素四、 簡答題(共35分)1. 二級生物安全適用于處理什么材料，具體要求有哪些（8分）答：適用于：（1）來自于來自于靈長類動物的材料和細(xì)胞系(2)接觸過靈長類的病毒或被其轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系 (3)含有支原體的細(xì)胞系。要求：（1） 所有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作

9、都應(yīng)使用垂直層流生物安全小室；（2） 所有污染物都應(yīng)放入裝滿蒸餾水的防漏的不銹鋼桶中；（3） 大的塑料器皿蓋緊后放入高壓消毒袋中進(jìn)行高壓消毒；（4） 在處理或沖洗用過的器皿前，應(yīng)先進(jìn)行高壓消毒；（5） 進(jìn)行操作時要帶乳膠手套。2. 原生質(zhì)體分離的方法有哪些，各有何優(yōu)缺點（6分）答：（1）機(jī)械法 優(yōu)點：可避免酶制劑對原生質(zhì)體的破壞。 缺點：獲得完整原生質(zhì)體的數(shù)量少，使用此法的植物種類有限。（2）酶解法 優(yōu)點：可獲得大量原生質(zhì)體，條件溫和，原生質(zhì)體完整性好，幾乎所有植物都可用此法。 缺點：影響原生質(zhì)體的活力。3. 植物組織培養(yǎng)的基本步驟（6分）答：（1）培養(yǎng)材料的采集 （2）培養(yǎng)材料的消毒 （3）

10、制備外植體 （4）接種和培養(yǎng) （5）根的誘導(dǎo) （6）組織苗的練苗移栽 4.細(xì)胞系和細(xì)胞株的鑒定指標(biāo)及方法（8分） 答：鑒定指標(biāo)：（1）純度：分析以何種細(xì)胞為主，所占比例為多少，混雜有哪些其他細(xì)胞。 （2）細(xì)胞生物學(xué)特征：細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色體組型、生長曲線、分裂指數(shù)、倍增時間是否與來源細(xì)胞一致。 （3）穩(wěn)定性：傳代過程中細(xì)胞學(xué)特征是否發(fā)生變化。 （4）污染情況：檢查是否有微生物或其他細(xì)胞系的污染。 鑒定方法：細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察；繪制生長曲線，計算分裂指數(shù)；染色體組型和帶型分析；同工酶譜檢測4. 植物細(xì)胞固定化的方法及特點答：吸附法：利用固體吸附劑將細(xì)胞吸附在其表面而使細(xì)胞固定化的方法。包埋法：將細(xì)

11、胞包埋在多孔載體內(nèi)部而制成固定化細(xì)胞的方法。特點：（1）由于載體的保護(hù)作用，減小剪切力作用，提高細(xì)胞存活率和穩(wěn)定性。 （2）細(xì)胞束縛在一定空間內(nèi)，不易聚集成團(tuán)，促進(jìn)代謝產(chǎn)物的分散。 （3）可簡便地在不同培養(yǎng)階段更換不同的培養(yǎng)液。 （4）固定化植物細(xì)胞可連續(xù)反復(fù)使用，可縮短生產(chǎn)周期，提高生產(chǎn)效率。 （5）容易與培養(yǎng)液分離，有利于產(chǎn)品的分離純化，提高產(chǎn)品的質(zhì)量。五、 綜合分析題（15分）植物單細(xì)胞培養(yǎng)的程序及各步中應(yīng)注意的事項答：1.建立細(xì)胞株（1） 材料準(zhǔn)備a. 確定植物種類品種b. 選擇單細(xì)胞或愈傷組織或葉肉、下胚軸等c. 借助酶處理：酶的種類、濃度、處理時間都對材料有一定影響（2） 制備細(xì)胞懸浮液a. 培養(yǎng)基成分篩選b. 懸浮培養(yǎng)，振蕩次數(shù)為8090次/minc. 用200300目鋼網(wǎng)過濾盒離心