結(jié)核分枝桿菌抗原及其在結(jié)核病診斷中的研究進(jìn)展

1、結(jié)核分枝桿菌抗原及其在結(jié)核病診斷中的研究進(jìn)展王 霖(昆明市第三人民醫(yī)院<昆明結(jié)核病防治院>云南昆明650301)【中圖分類號(hào)】r825.2【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】a【文章編號(hào)】1672-5085 ( 2013 ) 28-0079-02【摘要】木文選取2011年5月一2012年5月由某地肺科醫(yī)院、結(jié)核病防治機(jī) 構(gòu)等提供的臨床上確認(rèn)為結(jié)核病和非結(jié)核病患者，以及從社會(huì)上招募而來(lái)的健康 志愿者，共計(jì)720例作為研究對(duì)象。采用結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白來(lái)對(duì)結(jié)核病診 斷進(jìn)行研究。研究結(jié)果顯示，菌陰性肺結(jié)核敏感度為66.3%,菌陽(yáng)性肺結(jié)核敏感 度為69.9%,肺外結(jié)核病敏感度為75.4%,結(jié)核

2、總敏感度為70.6%o對(duì)于特異度， 健康人群為68.4%,結(jié)核病以外的其他肺部疾病患者為79.1%,結(jié)核總敏感度為 71.6%0因此木文得出，在臨床結(jié)核病診斷中，采用結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白診 斷結(jié)核病具有良好應(yīng)用價(jià)值，值得在今后大力推廣?！娟P(guān)鍵詞】結(jié)核分枝桿菌抗原 結(jié)核病 診斷research progress of mycobacterium tuberculosis antigen in the diagnosis of tuberculosis【abstract】this paper chooses in 2011 may - 2012 may by clinical chest hos

3、pital, a tb institutions control provides confirmed to the patients with tuberculosis and non tuberculosis, and healthy volunteers recruited from the society, a total of 720 cases as the object of study. to study the diagnosis of tuberculosis by mycobacterium tuberculosis spec 訐 ic protein. the resu

4、lts show, smear n egative pulm on ary tuberculosis sen sitivity was 66.3%, pulm on ary tuberculosis sen sitivity was 69.9%, extrapulmonary tuberculosis tuberculosis sensitivity was 75.4%, sensitivity was 70.6%. for specificity, healthy population was 68.4%, other lung diseases other than tuberculosi

5、s tuberculosis was 79.1%, sensitivity was 71.6%. therefore, in this paper, in the clinical diagnosis of tuberculosis, the specificity of diagnosis of tuberculosis mycobacterium tuberculosis protein has good application value in the future, is worth promoting.【keywords mycobacterium tuberculosis tube

6、rculosis diagnosis據(jù)全球統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，大約有1/3的人都感染有結(jié)核分枝桿菌，并且每 年將會(huì)有約200萬(wàn)人死于結(jié)核病。我國(guó)在第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查的相關(guān) 報(bào)告顯示，我國(guó)每年結(jié)核病的患病人數(shù)大約為130萬(wàn)人，在全球發(fā)病率中我國(guó)位 居第2,占14.3%,并口在15歲以上的患病率為每10萬(wàn)人有459人。在全球 控制結(jié)核病中，如何以最快、最準(zhǔn)確的方法對(duì)結(jié)核病進(jìn)行診斷是首要解決問(wèn)題。 本文通過(guò)運(yùn)用結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白抗體診斷試劑盒對(duì)結(jié)核病患者進(jìn)行結(jié)核 分枝桿菌特異性蛋白抗體檢測(cè)，探討其所蘊(yùn)含的價(jià)值，從而為臨床結(jié)核病的診斷 提供有效參考?，F(xiàn)將具體研究結(jié)果報(bào)告如下：1資料與方法1.1

7、 一般資料 本文選取2011年5月一2012年5月由某地肺科醫(yī)院、結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)等提供的臨床上確認(rèn)為結(jié)核病和非結(jié)核病患者，以及從社會(huì)上招 募而來(lái)的健康志愿者，共計(jì)720例作為研究對(duì)象。其中，肺結(jié)核患者有364例, 包括菌陰肺結(jié)核患者178例、菌陽(yáng)肺結(jié)核患者186例，且男性為227例、女性為 137例，他們的平均年齡為60.5歲。非結(jié)核病患者有254例，其中肺外結(jié)核患者 有187例（男性患者為96例，女性患者為91例，他們的平均年齡為55.8歲）, 其他肺部疾病患者為67例（男性患者為36例，女性患者為31例，他們的平均 年齡為67.3歲）。入選的健康志愿者共有158例，其中男性志愿者91例，女

8、性 志愿者67例，他們的平均年齡為30.2歲。在這些研究對(duì)象中，他們都沒(méi)有免疫 系統(tǒng)疾病史，并口在近3個(gè)月之內(nèi)也沒(méi)有使用過(guò)免疫抑制劑。1.2方法1.2.1儀器配置本研究所使用的儀器為2：第一，結(jié)核分支桿菌特異 性蛋白抗體檢測(cè)試劑盒，第二，酶標(biāo)儀，由芬蘭雷勃公司提供，型號(hào)為mk3型。1.2.2細(xì)菌及抗體提取檢測(cè) 在經(jīng)過(guò)改良的羅氏培養(yǎng)基中對(duì)結(jié)核分枝桿 菌進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng)，然后收集菌體。按照試劑盒提供的相關(guān)說(shuō)明書(shū)來(lái)對(duì)結(jié)核分枝桿 菌特異性蛋白抗體進(jìn)行檢測(cè)。1.2.3結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白抗體陽(yáng)性判定臨界值 本文對(duì)720例患 者的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分別統(tǒng)計(jì)，最終確定結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白抗體陽(yáng)性判定的 臨界值為0

9、.373,只要是人于0.373的都判定為陽(yáng)性。1.2.4檢測(cè)方法 本研究中的720例研究對(duì)象都要對(duì)其進(jìn)行結(jié)核分枝桿 菌特異性蛋白抗體檢測(cè)。2結(jié)果2.1結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白抗體檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表1。通過(guò)表1的研究結(jié)果顯示，在對(duì)720例患者進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌特異 性蛋白抗體檢測(cè)后得出，菌陰性肺結(jié)核敏感度為66.3% (118/178),菌陽(yáng)性肺結(jié)核 敏感度為69.9% (130/186),肺外結(jié)核病敏感度為75.4% (141/187),結(jié)核總敏感度 為70.6%(389/551)o對(duì)于特異度，健康人群為68.4%(108/158),結(jié)核病以外的其 他肺部疾病患者為79.1%(53/67),結(jié)核總敏感

10、度為71.6%(161/225)o3討論當(dāng)前醫(yī)學(xué)界對(duì)于結(jié)核分枝桿菌的診斷中，主要采用三種方法，分別為細(xì) 菌學(xué)檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)和分子生物學(xué)檢測(cè)。第一，細(xì)菌學(xué)檢測(cè)。這種方法包括細(xì) 菌培養(yǎng)鑒定法等，是對(duì)結(jié)核病進(jìn)行檢驗(yàn)的金標(biāo)準(zhǔn)3。但是該方法具有耗時(shí)長(zhǎng)、 靈敏度不高等缺點(diǎn)。伴隨當(dāng)前科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，一些列的細(xì)菌學(xué)快速檢測(cè)系 統(tǒng)營(yíng)運(yùn)而生，如液體培養(yǎng)基系、全自動(dòng)分枝桿菌檢測(cè)系統(tǒng)等。第二，血清學(xué)檢測(cè)。 該方法包括酶聯(lián)免疫吸附法、斑點(diǎn)金標(biāo)免疫滲濾法、結(jié)明法等。血清學(xué)檢測(cè)雖然 特異性較高，檢測(cè)時(shí)間較短，但是如果僅運(yùn)用單一抗原進(jìn)行診斷，其效果不佳。 因此可以用多種結(jié)核抗原聯(lián)合檢測(cè)，提高結(jié)核病診斷檢測(cè)的靈敏度。第三

11、，分子 生物學(xué)檢測(cè)。該方法包括結(jié)核分枝桿菌dna擴(kuò)增法、實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反 應(yīng)技術(shù)、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性檢測(cè)、dna探針技術(shù)以及生物芯片檢測(cè)等4。 分子生物學(xué)檢測(cè)具有耗時(shí)短，靈敏度和特異度均較高等優(yōu)點(diǎn)，是目前臨床上的理 想診斷方法。實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌培養(yǎng)證明，結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白相對(duì)分子質(zhì)量可達(dá) 27000,由于其屬于由結(jié)核分枝桿菌分泌到細(xì)菌體外的蛋白抗原，而蛋白抗原僅 存于致病的結(jié)核分枝桿菌中，不存于其他非致病性的分支桿菌。正是基于此，在 特異度極高的結(jié)核分枝桿菌蛋白抗原蛋白基礎(chǔ)上研制的結(jié)核分枝桿菌蛋白抗原 檢測(cè)試劑盒對(duì)結(jié)核病檢測(cè)過(guò)程中表現(xiàn)出的敏感度和特異度尤為突出。根據(jù)本文的 研究結(jié)果顯示，菌陰性肺結(jié)核敏感度為66.3%,菌陽(yáng)性肺結(jié)核敏感度為69.9%, 肺外結(jié)核病敏感度為75.4%,結(jié)核總敏感度為70.6%。對(duì)于特異度，健康人群為 68.4%,結(jié)核病以外的其他肺部疾病患者為79.1%,結(jié)核總敏感度為71.6%。實(shí)驗(yàn) 得出的敏感度和特異度值都高于臨床的預(yù)測(cè)值。因此本文得出，在臨床結(jié)核病診 斷中，采用結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白診斷結(jié)核病具有良好應(yīng)用價(jià)值，值得在今后 大力推廣。參考文獻(xiàn)1陳保文，王國(guó)治,沈小兵，蘇城組織胞漿菌病和結(jié)核病的實(shí)驗(yàn)