需氧革蘭陽性桿菌及檢驗

1、革蘭陽性桿菌及檢驗革蘭陽性桿菌及檢驗革蘭陽性桿菌菌屬間的鑒別革蘭陽性桿菌菌屬間的鑒別 棒狀桿菌棒狀桿菌屬屬芽胞桿菌芽胞桿菌屬屬李斯特菌李斯特菌屬屬丹毒絲菌丹毒絲菌屬屬加特納菌加特納菌屬屬形態(tài)形態(tài)棒狀棒狀桿菌有芽桿菌有芽胞胞短桿、鏈短桿、鏈或絲狀或絲狀細(xì)桿或絲細(xì)桿或絲狀狀桿菌、多桿菌、多形性形性觸酶觸酶+ + + +- - -動力動力- -V V+ +- - -對氧對氧需氧，兼需氧，兼性厭氧性厭氧需氧，兼需氧，兼性厭氧性厭氧兼性厭氧兼性厭氧兼性厭氧兼性厭氧兼性厭氧兼性厭氧 V V：炭疽芽胞桿菌陰性，其它芽胞桿菌陽性。炭疽芽胞桿菌陰性，其它芽胞桿菌陽性。 第一節(jié)第一節(jié) 棒狀桿菌屬棒狀桿菌屬 棒狀桿

2、菌屬的共同特征棒狀桿菌屬的共同特征 1)革蘭陽性多形態(tài)桿菌革蘭陽性多形態(tài)桿菌2)無莢膜、無鞭毛、無芽胞無莢膜、無鞭毛、無芽胞3)細(xì)菌呈不規(guī)則柵欄狀排列細(xì)菌呈不規(guī)則柵欄狀排列4)需氧或兼性厭氧需氧或兼性厭氧5)觸酶試驗陽性觸酶試驗陽性6)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和血清學(xué)分析，證實與分枝細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和血清學(xué)分析，證實與分枝桿菌屬、奴卡氏菌屬有共同的成分。桿菌屬、奴卡氏菌屬有共同的成分。 一一白喉棒狀桿菌白喉棒狀桿菌 2021-12-2形態(tài)與染色形態(tài)與染色 細(xì)長彎曲、一細(xì)長彎曲、一端或兩端膨大端或兩端膨大的革蘭陽性桿的革蘭陽性桿菌。無莢膜、菌。無莢膜、無芽胞、無鞭無芽胞、無鞭毛、無菌毛。毛、無菌毛。細(xì)菌排列呈散細(xì)菌

3、排列呈散在在L L、V V、Y Y字形字形及不規(guī)則柵欄及不規(guī)則柵欄狀。狀。 用美藍(lán)、用美藍(lán)、NeisserNeisser法、法、AlbertAlbert法等染色法等染色時，在細(xì)菌的一時，在細(xì)菌的一端或兩端有濃染端或兩端有濃染的顆粒，此顆粒的顆粒，此顆粒與菌體著色不同與菌體著色不同，稱為，稱為異染顆粒異染顆粒，為本菌重要形，為本菌重要形態(tài)學(xué)特征，對鑒態(tài)學(xué)特征，對鑒別細(xì)菌有重要意別細(xì)菌有重要意義。義。 菌落特征菌落特征l血平板：灰白、狹窄血平板：灰白、狹窄溶血環(huán)。溶血環(huán)。l雞蛋斜面和血清斜面：雞蛋斜面和血清斜面：生長迅速，灰白色有生長迅速，灰白色有光澤菌落。光澤菌落。l亞碲酸鉀血平板：為亞碲酸鉀血

4、平板：為選擇培養(yǎng)基，菌落呈選擇培養(yǎng)基，菌落呈黑色。菌落分為重型、黑色。菌落分為重型、輕型或中間型。輕型或中間型。 標(biāo)本采集標(biāo)本采集l用無菌長棉拭子，從疑為假膜的邊緣用無菌長棉拭子，從疑為假膜的邊緣采集分泌物。采集分泌物。 l未見假膜的疑似患者或帶菌者可采集未見假膜的疑似患者或帶菌者可采集鼻咽部或扁桃體粘膜上的分泌物。鼻咽部或扁桃體粘膜上的分泌物。第二節(jié)第二節(jié) 需氧芽胞桿菌屬需氧芽胞桿菌屬 芽胞桿菌屬共同特點芽胞桿菌屬共同特點 1)1)絕大多數(shù)菌種在有氧條件下形成不大于絕大多數(shù)菌種在有氧條件下形成不大于菌體橫徑的芽胞菌體橫徑的芽胞2)2)除炭疽芽胞桿菌外均有動力和溶血能力除炭疽芽胞桿菌外均有動力

5、和溶血能力3)3)非抗酸性非抗酸性4)4)營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長良營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長良好好 一一炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌 2021-12-2形態(tài)與染色形態(tài)與染色 為致病菌中最大的革蘭陽性桿菌，兩端齊平為致病菌中最大的革蘭陽性桿菌，兩端齊平或凹陷，呈竹節(jié)狀，單個或呈短鏈狀排列?；虬枷?，呈竹節(jié)狀，單個或呈短鏈狀排列。 無鞭毛，形成芽胞，有毒菌株可形成莢膜。無鞭毛，形成芽胞，有毒菌株可形成莢膜。 人工培養(yǎng)或在外界環(huán)境中易產(chǎn)生芽胞，在人工培養(yǎng)或在外界環(huán)境中易產(chǎn)生芽胞，在活體或完整未經(jīng)解剖的尸體內(nèi)不形成芽胞，所活體或完整未經(jīng)解剖的尸體內(nèi)不形成芽胞，所以以炭疽病尸體嚴(yán)禁解剖炭疽病尸

6、體嚴(yán)禁解剖。炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌 2021-12-2培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 l需氧或兼性厭氧。需氧或兼性厭氧。l營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基上生長良好。營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基上生長良好。 2021-12-2菌落特征菌落特征l普通瓊脂平板：菌落扁平、粗糙，不透明灰白色，普通瓊脂平板：菌落扁平、粗糙，不透明灰白色，無光澤，邊緣不整齊，在低倍鏡下可見到菌落邊緣無光澤，邊緣不整齊，在低倍鏡下可見到菌落邊緣呈呈卷發(fā)狀卷發(fā)狀。 l血液瓊脂平板：培養(yǎng)血液瓊脂平板：培養(yǎng)12121515h h，菌落周圍菌落周圍無溶血環(huán)無溶血環(huán)，18182424h h后可有后可有輕微溶血輕微溶血，而其他需氧芽胞桿菌大多，而其他需氧芽

7、胞桿菌大多數(shù)溶血明顯而快速。數(shù)溶血明顯而快速。l液體培養(yǎng)基中呈絮狀生長液體培養(yǎng)基中呈絮狀生長l明膠培養(yǎng)基中呈倒置的杉樹明膠培養(yǎng)基中呈倒置的杉樹l有毒株在有毒株在NaHCONaHCO3 3培養(yǎng)基中形成莢膜，菌落呈粘液狀，培養(yǎng)基中形成莢膜，菌落呈粘液狀，有拉絲。有拉絲。 有毒株有毒株在在NaHCONaHCO3 3血瓊脂平板上置血瓊脂平板上置5%5%COCO2 2環(huán)境中培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)18182424h h，可產(chǎn)生莢膜，菌落由可產(chǎn)生莢膜，菌落由粗糙型變?yōu)榇植谛妥優(yōu)檎骋盒驼骋盒?，而呈現(xiàn)半圓形，突起，而呈現(xiàn)半圓形，突起，有光澤的菌落。以接種針挑取時有光澤的菌落。以接種針挑取時呈拉絲狀呈拉絲狀，此為鑒別菌落

8、要點，而無毒株則形成粗糙此為鑒別菌落要點，而無毒株則形成粗糙型菌落。型菌落。 標(biāo)本采集標(biāo)本采集l標(biāo)本采集標(biāo)本采集病人血液、痰、糞便、滲出液、腦脊液等。病人血液、痰、糞便、滲出液、腦脊液等。死亡病畜標(biāo)本：死亡病畜標(biāo)本：死于敗血癥的動物，嚴(yán)禁宰殺、死于敗血癥的動物，嚴(yán)禁宰殺、解剖解剖，可在消毒皮膚后割取耳朵、舌尖、采集，可在消毒皮膚后割取耳朵、舌尖、采集少量血液。少量血液。污染物品：皮革、獸毛、土壤等。污染物品：皮革、獸毛、土壤等。l標(biāo)本處理標(biāo)本處理：無雜菌污染標(biāo)本直接接種，有雜菌：無雜菌污染標(biāo)本直接接種，有雜菌污染標(biāo)本先加熱殺死繁殖體和雜菌再接種。污染標(biāo)本先加熱殺死繁殖體和雜菌再接種。已處理標(biāo)本

9、已處理標(biāo)本直接涂片直接涂片增菌培養(yǎng)增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)Ascoli試驗試驗革蘭染色革蘭染色莢膜染色莢膜染色初步報告初步報告血平板血平板戊烷脒瓊脂平板戊烷脒瓊脂平板可疑菌落可疑菌落菌落涂片菌落涂片染色鏡檢染色鏡檢鑒定試驗鑒定試驗肉湯培養(yǎng)肉湯培養(yǎng)動物實驗動物實驗動物死亡動物死亡分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)噬菌體裂解噬菌體裂解串珠試驗串珠試驗青霉素抑制試驗青霉素抑制試驗檢驗方法檢驗方法l在芽胞桿菌屬中，除蠟樣芽胞桿菌毒素對動物在芽胞桿菌屬中，除蠟樣芽胞桿菌毒素對動物有致病作用外，炭疽芽胞桿菌是唯一具有致病有致病作用外，炭疽芽胞桿菌是唯一具有致病力者。力者。 炭疽芽胞桿菌與其它需氧芽胞桿菌的鑒別炭疽芽胞桿菌與

10、其它需氧芽胞桿菌的鑒別 鑒別項目鑒別項目炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌枯草芽胞桿菌枯草芽胞桿菌蠟樣芽胞桿菌及其蠟樣芽胞桿菌及其它需氧芽胞桿菌它需氧芽胞桿菌形態(tài)形態(tài)菌體兩端平整或凹陷菌體兩端平整或凹陷兩端鈍圓兩端鈍圓兩端鈍圓兩端鈍圓莢膜莢膜+ +- - -動力動力- -+ + +菌落菌落有小突起，邊緣呈卷有小突起，邊緣呈卷發(fā)狀，粘稠菌落發(fā)狀，粘稠菌落鋸齒狀粗糙菌落鋸齒狀粗糙菌落蠟樣或粗糙不粘稠蠟樣或粗糙不粘稠菌落菌落肉湯肉湯絮狀沉淀，上層清晰絮狀沉淀，上層清晰均勻混濁有菌膜均勻混濁有菌膜均勻混濁有菌膜均勻混濁有菌膜AscoliAscoli+ +- - -溶血溶血不溶血或微溶血不溶血或微溶血+ + +串

11、珠試驗串珠試驗+ +- - -二二蠟樣芽胞桿菌蠟樣芽胞桿菌 形態(tài)與染色形態(tài)與染色 革蘭陽性大桿菌，兩革蘭陽性大桿菌，兩端較鈍、鏈桿狀，長短端較鈍、鏈桿狀，長短不一，有鞭毛，無莢膜不一，有鞭毛，無莢膜，可形成芽胞。，可形成芽胞。 2021-12-2培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 v 需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高。需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高。 v 普通瓊脂平板：可形成圓形普通瓊脂平板：可形成圓形、隆起、灰白色、不透明、隆起、灰白色、不透明、R R型型蠟滴樣蠟滴樣大菌落。大菌落。 v 血瓊脂平板：菌落呈淺灰色血瓊脂平板：菌落呈淺灰色，似毛玻璃狀，菌落周圍有，似毛玻璃狀，菌落周圍有或或溶血溶血。 第三節(jié)第三節(jié) 產(chǎn)

12、單核李斯特菌產(chǎn)單核李斯特菌 2021-12-2（一）形態(tài)與染色（一）形態(tài)與染色 革蘭陽性小桿菌，直或稍革蘭陽性小桿菌，直或稍彎，常呈彎，常呈V V字形成對排列，字形成對排列，有時呈絲狀，偶爾可見雙有時呈絲狀，偶爾可見雙球狀。球狀。 多數(shù)菌體一端較大，似棒多數(shù)菌體一端較大，似棒狀，易誤認(rèn)為是污染的類狀，易誤認(rèn)為是污染的類白喉棒狀桿菌；白喉棒狀桿菌； 又因菌體短小，三、五成又因菌體短小，三、五成鏈，并有鏈，并有溶血性，易與溶血性，易與鏈球菌混淆，用觸酶試驗鏈球菌混淆，用觸酶試驗加以區(qū)別。加以區(qū)別。 在在22222525環(huán)境中形成環(huán)境中形成4 4根鞭毛，故根鞭毛，故在在2525肉湯培養(yǎng)液中肉湯培養(yǎng)液

13、中運動活潑運動活潑；而在；而在3737時僅形成時僅形成1 1根鞭毛，根鞭毛，動力緩慢動力緩慢。 2021-12-2（二）培養(yǎng)特性（二）培養(yǎng)特性v 需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高。需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高。4 44545均均能生長，最適溫度能生長，最適溫度30303737。因在。因在44能生長，故能生長，故可進(jìn)行可進(jìn)行冷增菌冷增菌。 v 初時菌落極小似初時菌落極小似露珠狀露珠狀、光滑透明，通過側(cè)光、光滑透明，通過側(cè)光微顯藍(lán)綠色，微顯藍(lán)綠色，3737培養(yǎng)數(shù)日，菌落增大變成灰暗，培養(yǎng)數(shù)日，菌落增大變成灰暗，血平板上的菌落有狹窄的血平板上的菌落有狹窄的溶血環(huán)。溶血環(huán)。 第四節(jié)第四節(jié) 紅斑丹毒絲菌紅斑

14、丹毒絲菌 2021-12-2（一）形態(tài)與染色（一）形態(tài)與染色 革蘭陽性桿菌，單個革蘭陽性桿菌，單個或形成短鏈狀，粗糙型菌落或形成短鏈狀，粗糙型菌落形成長絲狀。無鞭毛，無莢形成長絲狀。無鞭毛，無莢膜，無芽胞。膜，無芽胞。 （二）培養(yǎng)特性（二）培養(yǎng)特性 厭氧或微需氧菌。初次分離需在厭氧厭氧或微需氧菌。初次分離需在厭氧環(huán)境中培養(yǎng)，傳代后在有氧條件下也能環(huán)境中培養(yǎng)，傳代后在有氧條件下也能生長。生長。二致病性二致病性 紅斑丹毒牡菌為紅斑丹毒絲菌病的病原紅斑丹毒牡菌為紅斑丹毒絲菌病的病原體。體。 主要發(fā)生在魚類、家畜、家禽和兔類，主要發(fā)生在魚類、家畜、家禽和兔類，人類也感染發(fā)病。人類也感染發(fā)病。 人接觸動

15、物或其產(chǎn)品經(jīng)皮膚損傷而引起人接觸動物或其產(chǎn)品經(jīng)皮膚損傷而引起類丹毒。以局部感染為主，繼而發(fā)展成淋巴類丹毒。以局部感染為主，繼而發(fā)展成淋巴管炎，可轉(zhuǎn)變成關(guān)節(jié)炎。也可引起急性敗血管炎，可轉(zhuǎn)變成關(guān)節(jié)炎。也可引起急性敗血癥或心內(nèi)膜炎。癥或心內(nèi)膜炎。第五節(jié)第五節(jié) 陰道加特納菌陰道加特納菌 （一）形態(tài)與染色（一）形態(tài)與染色 本菌革蘭染色本菌革蘭染色視菌株和菌齡不視菌株和菌齡不同而異。本菌具同而異。本菌具有多形性，兩端有多形性，兩端鈍圓，無鞭毛，鈍圓，無鞭毛，無莢膜，無芽胞無莢膜，無芽胞。 2021-12-2（二）培養(yǎng)特性（二）培養(yǎng)特性v 兼性厭氧菌，營養(yǎng)要求較高，在一般營兼性厭氧菌，營養(yǎng)要求較高，在一般營

16、養(yǎng)瓊脂平板上不生長。養(yǎng)瓊脂平板上不生長。 v 在含在含5%5%人血瓊脂平板上置人血瓊脂平板上置5%5%COCO2 2，35353737培養(yǎng)培養(yǎng)2424h h后，形成針尖大小菌落；經(jīng)后，形成針尖大小菌落；經(jīng)4848h h后形成后形成溶血、圓形、光滑不透明的溶血、圓形、光滑不透明的菌落。菌落。 二致病性二致病性l 陰道加特納菌和厭氧菌在陰道內(nèi)過度陰道加特納菌和厭氧菌在陰道內(nèi)過度生長，造成陰道正常菌群微生態(tài)平衡失生長，造成陰道正常菌群微生態(tài)平衡失調(diào)，而引起非特異細(xì)菌性陰道病（調(diào)，而引起非特異細(xì)菌性陰道?。˙VBV）。）。l 可導(dǎo)致婦產(chǎn)科多種嚴(yán)重并發(fā)癥。如子可導(dǎo)致婦產(chǎn)科多種嚴(yán)重并發(fā)癥。如子宮全切術(shù)后感染、絨毛膜炎等。宮全切術(shù)后感染、絨毛膜炎等