XX年檢驗(yàn)技師考試免疫學(xué)考點(diǎn)總結(jié)

1、XX 年檢驗(yàn)技師考試免疫學(xué)考點(diǎn)總結(jié)免疫學(xué)檢驗(yàn)是檢驗(yàn)技師考試的考點(diǎn)之一。為了方便考生更好的復(fù)習(xí)關(guān)于免疫學(xué)檢驗(yàn)的知識(shí)。 下面是為大家?guī)淼年P(guān)于免疫學(xué)檢驗(yàn)的知識(shí)，歡迎閱讀。0 、免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)。1 、免疫：是機(jī)體識(shí)別和排斥抗原性異物的一種生理功能2 、免疫防御 ( 對(duì)外 ); 免疫自穩(wěn) ( 防自身免疫病 ); 免疫監(jiān)視 ( 防腫瘤) 。3 、中樞免疫器官：骨髓、胸腺 ; 外周免疫器官： 淋巴結(jié)、脾臟 ( 最大) 、黏膜相關(guān)淋巴組織4 、B 細(xì)胞：通過識(shí)別膜免疫球蛋白來結(jié)合抗原， 介導(dǎo)體液免疫 ;B細(xì)胞受體 =BCR=mIg表面標(biāo)志：膜免疫球蛋白 (SmIg) 、Fc 受體、補(bǔ)體受

2、體、 EB病毒受體和小鼠紅細(xì)胞受體。成熟 B 細(xì)胞：CD19、CD20、CD21、CD22(成熟 B 細(xì)胞的 mIg 主要為 mIgM和 mIgD)同時(shí)檢測(cè) CD5分子，可分為 B1 細(xì)胞和 B2 細(xì)胞。B 細(xì)胞功能檢測(cè)方法：溶血空斑形成試驗(yàn) ( 體液免疫功能 ) 。5 、T 細(xì)胞：介導(dǎo)細(xì)胞免疫。共同表面標(biāo)志是 CD3(多鏈糖蛋白 );輔助 T 細(xì)胞的標(biāo)志是 CD4;殺傷 T 細(xì)胞的標(biāo)志是 CD8;T細(xì)胞受體 =TCR。T 細(xì)胞和 NK細(xì)胞的共同表面標(biāo)志是 CD2(綿羊紅細(xì)胞受體 ); CD3+CD4+CD8-= 輔助性 T 細(xì)胞 (Th)CD3+CD4-CD8+= 細(xì)胞毒性 T 細(xì)胞 (Tc

3、 或 CTL)(T 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn) )CD4+CD25+= 調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞 (Tr 或 Treg)T 細(xì)胞功能檢測(cè)：植物血凝素 (PHA)刀豆素 (CONA)刺激 T 細(xì)胞增殖。增殖試驗(yàn)有：形態(tài)法、核素法。T 細(xì)胞亞群的分離：親和板結(jié)合分離法，磁性微球分離法，熒光激活細(xì)胞分離儀分離法*E花環(huán)試驗(yàn)是通過檢測(cè)SRBC受體而對(duì) T 細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的一種試驗(yàn) ;6 、NK細(xì)胞：具有細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。直接殺傷靶細(xì)胞 ( 腫瘤細(xì)胞和病毒感染的細(xì)胞 )表面標(biāo)志： CD16(ADCC)、CD56。測(cè)定人 NK細(xì)胞活性的靶細(xì)胞多用 K562細(xì)胞株，而測(cè)定小鼠 NK 細(xì)胞活性則常采用 YAC-1細(xì)胞株。

4、7 、吞噬細(xì)胞包括：?jiǎn)魏?- 吞噬細(xì)胞系統(tǒng) (MPS，表面標(biāo)志 CD14，包括骨髓內(nèi)的前單核細(xì)胞、 外周血中的單核細(xì)胞和組織內(nèi)的巨噬細(xì)胞 )和中性粒細(xì)胞。 ( 表達(dá) MHC類分子 )8 、人成熟樹突狀細(xì)胞 (DC)( 專職抗原呈遞功能 ) ：表面標(biāo)志為9 、免疫球蛋白可分為分泌型 (sIg ，主要存在于體液中，具有抗體功能 ) 及膜型 (mIg ，作為抗原受體表達(dá)于 B 細(xì)胞表面，稱為膜表面免疫球蛋白 )10 、免疫球蛋白按含量多少排序： IgG>IgA>IgM>IgD>IgE 五類 ( 按重鏈恒定區(qū)抗原性 (CH)排序 )免疫球蛋白含量測(cè)定：?jiǎn)蜗颦h(huán)狀免疫擴(kuò)散法、免疫比

5、濁法。11 、免疫球蛋白的同種型抗原決定簇位于恒定區(qū) (CH、CL)12 、抗體由漿細(xì)胞產(chǎn)生?？贵w分子上 VH和 VL(高變區(qū) ) 是抗原結(jié)合部位。13 、IgG：血清中含量最高的免疫球蛋白 (IgG1 最高 ) ，血液和細(xì)胞外液中的主要抗體。 也是再次免疫應(yīng)答的主要抗體， 是唯一能通過胎盤的抗體，大多數(shù)抗菌抗體、抗病毒抗體是 IgG，某些自身抗體及超敏型抗體是 IgG，免疫學(xué)檢測(cè)中第二抗體也以 IgG 為主。14 、IgA ：分血清型 ( 單體存在 ) 及分泌型 ; 分泌型 IgA(sIgA) 為二聚體，性能穩(wěn)定，主要存在于胃腸道、 支氣管分泌液、初乳、唾液、淚液中，局部濃度高，是參與黏膜局

6、部免疫的主要抗體。15 、IgM：為五聚體，主要存在于血液中，是 Ig 中分子量最大的( 又稱巨球蛋白 ) 。個(gè)體發(fā)育最早合成和分泌的抗體。 抗原刺激后體液免疫應(yīng)答中最先產(chǎn)生的抗體， 感染過程中血清 IgM 水平升高，說明近期感染。新生兒臍血中若 IgM 增高，提示有宮內(nèi)感染。16 、IgE：為單體結(jié)構(gòu)，正常人血清中含量最低。 IgE 為親細(xì)胞抗體，介導(dǎo)型超敏反應(yīng)。 特異性過敏反應(yīng)和寄生蟲早期感染患者血清中可升高。17 、補(bǔ)體：具有酶樣活性的球蛋白 ( 肝細(xì)胞、巨噬細(xì)胞產(chǎn)生 );激活途徑主要有三種：經(jīng)典途徑( 以結(jié)合抗原后的IgG 或 IgM 類抗體為主要激活劑 ( 雙鏈 DNA)，C1C9全

7、部參與 ) 、替代途徑 ( 病原微生物細(xì)胞壁成分 ( 脂多糖 ) 直接激活補(bǔ)體 C3，然后完成 C5C9的激活過程 ) 、MBL途徑 ( 由急性炎癥期產(chǎn)生的甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)與病原體結(jié)合后啟動(dòng)激活 ) 。18 、補(bǔ)體系統(tǒng)中 C3 含量最多， C2含量最少。19 、滅活：加熱 5630 分鐘，補(bǔ)體喪失活性20 、補(bǔ)體清除免疫復(fù)合物的方式：吞噬調(diào)理 ; 免疫粘附 ; 免疫復(fù)合物抑制。21 、完全抗原 =反應(yīng)原性 +免疫原性。半抗原 =反應(yīng)原性 ( 無免疫原性 )22 、抗原抗體結(jié)合力 ( 分子間引力 ) ：靜電吸引、范德華力、氫鍵、疏水作用力 ( 最強(qiáng) )23 、抗原抗體反應(yīng)的四大特點(diǎn)：特

8、異性、可逆性、比例性、階段性 ; 受反應(yīng)條件 ( 如溫度、 pH、電解質(zhì)、抗原抗體比例等 ) 的影響。24 、抗體過量前帶 ; 抗原過量后帶 ( 鉤狀效應(yīng) )25 、抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè)階段：第一階段為抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合的階段，此階段反應(yīng)快，僅需幾秒至幾分鐘，但不出現(xiàn)可見反應(yīng) ; 第二階段為可見反應(yīng)階段，此階段反應(yīng)慢，往往需要數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)。26 、顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng)?？扇苄钥乖霈F(xiàn)沉淀反應(yīng)。單價(jià)抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。27 、木瓜酶水解 IgG 為 2Fab+Fc;胃蛋白酶水解 IgG 為F(ab)2+nFc 。28 、最常用于免疫動(dòng)物的佐劑是弗氏佐劑，弗氏佐劑分為弗氏

9、完全佐劑 ( 弗氏不完全佐劑加卡介苗 ) 和弗氏不完全佐劑兩種。29 、R(兔子 ) 型抗血清是用家兔及其他動(dòng)物免疫產(chǎn)生的抗體， 抗原抗體反應(yīng)比例合適范圍較寬，適于作診斷試劑。H(馬) 型抗血清是用馬等大動(dòng)物免疫獲得的抗體，抗原抗體反應(yīng)比例合適范圍較窄，一般用作免疫治療。30 、抗血清常見保存條件： 2-8 保存 ; 冷凍保存 ( 最常用 ); 真空干燥保存 (5-10 年) 。31 、雜交瘤細(xì)胞放入液氮 (-196 ) 前，需要逐步降溫。復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，從液氮罐內(nèi)取出凍存管，立即浸入 37水浴。32 、凝集反應(yīng)分為兩個(gè)階段： 抗原抗體的特異性結(jié)合 ; 出現(xiàn)可見的顆粒凝聚。33 、直接凝集反應(yīng)的原

10、理是細(xì)菌、螺旋體和紅細(xì)胞等顆粒性抗原，在適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì) (0.85%氯化鈉 ) 參與下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集。抗原 =凝集原，抗體 =凝集素。34 、玻片凝集試驗(yàn)：主要用于抗原的定性分析， AB0血型的測(cè)定。試管凝集試驗(yàn)：肥達(dá)氏試驗(yàn)、外斐試驗(yàn)、輸血交叉配血試驗(yàn);35 、紅細(xì)胞包被抗原，用以檢測(cè)抗體的血凝反應(yīng)，稱為正向間接血凝反應(yīng) (PHA)。紅細(xì)胞包被抗體，用以檢測(cè)抗原的血凝反應(yīng)，稱為反向間接血凝反應(yīng) (RPHA)。36 、間接血凝抑制試驗(yàn)：可用于檢測(cè)抗體、自身抗體、變態(tài)反應(yīng)性抗體，也可測(cè)定抗原。37 、金黃色葡萄球菌 A蛋白 (SPA)38 、血凝試驗(yàn)可在微量滴定板或試管中進(jìn)行， 將標(biāo)本

11、倍比稀釋，一般為 1:64 ，同時(shí)設(shè)不含標(biāo)本的稀釋液為對(duì)照孔。凡紅細(xì)胞沉積于孔底，集中呈一圓點(diǎn)的為不凝集。 如紅細(xì)胞凝集，則分布于孔底周圍。39 、明膠凝集試驗(yàn) ( 間接 ) ：HIV-1 抗體和抗精子抗體檢測(cè)40 、抗球蛋白試驗(yàn)，又稱 Coombs試驗(yàn)，是檢測(cè)抗紅細(xì)胞不完全抗體的一種很有用的方法。 包括直接 Coombs試驗(yàn) ( 檢測(cè)紅細(xì)胞上的不完全抗體 ) 和間接 Coombs試驗(yàn) ( 游離在血清中的不完全抗體 )41 、沉淀反應(yīng)分兩個(gè)階段：第一階段為抗原抗體發(fā)生特異性結(jié)合，幾秒到幾十秒即可完成，出現(xiàn)可溶性小的復(fù)合物，肉眼不可見。第二階段為形成可見的免疫復(fù)合物， 約需幾十分鐘到數(shù)小時(shí)才能完

12、成，如沉淀線、沉淀環(huán)。42 、免疫比濁：最適 pH為 6.5 8.5 ，磷酸鹽緩沖液。43 、對(duì)流免疫電泳：抗體流向負(fù)極，抗原流向正極44 、免疫固定電泳也用予尿液中本 - 周蛋白的檢測(cè)及、 分型，腦脊液中寡克隆蛋白的檢測(cè)及分型。45 、RIA( 放免 ) 核素 (125 ) 標(biāo)記抗原，競(jìng)爭(zhēng)抑制 ( 標(biāo)記抗原和非標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)限量抗體 );IRMA( 免疫放射 ) 核素標(biāo)記抗體，非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合( 過量標(biāo)記抗體，反應(yīng)速率比RIA 快，靈敏度明顯高于RIA。)RIA可以測(cè)定大分子和小分子抗原，但I(xiàn)RMA則只能測(cè)定至少有兩個(gè)抗原決定簇的抗原。46 、常用的熒光素有：異硫氰酸 (FITC) 黃綠色，最常用

13、; 四乙基羅丹明 (RB200)橘紅色 ; 四甲基異硫氰酸羅丹明 (TRITC) 橙紅色 ; 藻紅蛋白 (R-RE) 橙色。其他：銪 (Eu3+)47 、熒光標(biāo)記蛋白的常用方法：攪拌法和透析法。熒光抗體效價(jià)鑒定：抗原含量為 1g/L 時(shí)，抗體效價(jià) >1：1648 、時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定 (TRFIA) 以鑭系元素 ( 如：銪) 化合物為熒光標(biāo)記物。49 、偏振免疫測(cè)定的偏振波長(zhǎng)是 485nm(藍(lán)光) 。50 、辣根過氧化物酶 (HRP)：底物 (1) 鄰苯二胺 (OPD)，(2) 四甲基聯(lián)苯胺 (TMB)ELISA中應(yīng)用最廣泛的底物。堿性磷酸酶 (ALP) ：底物：對(duì) - 硝基苯磷酸脂 (p-NPP)- 半乳糖苷酶 ( -Gal) ：底物： 4- 甲基傘酮基 -R-D 半乳糖苷(4-MUU)51 、異相法：先分離，后測(cè)定 ; 均相法：不分離，直接測(cè)。52 、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA) ：必要的試劑：固相的抗原或抗體 ; 酶標(biāo)記的抗原或抗體 ; 酶反應(yīng)的底物?？乖瓬y(cè)定：蛋白大分子抗原用得最多的是雙抗體夾心法(HBsAg)。只有單個(gè)抗原決定簇的小分子，則使用競(jìng)爭(zhēng)抑制法?？贵w測(cè)定：通常使用間接法 (HCV、HIV) 、雙抗原夾心法 (HBsAb)、競(jìng)爭(zhēng)法 (HBcAb、HBeAb)和捕獲法 (IgM) 等* 待測(cè)孔最后顯示的顏色深淺與標(biāo)本中的待