地中海貧血(改)

1、背景 地中海貧血：于1925年由Cooley和Lee首先描述，最早發(fā)現(xiàn)于地中海區(qū)域，當(dāng)時(shí)稱為地中海貧血，國(guó)外亦稱海洋性貧血.實(shí)際上，本病遍布世界各地，以地中海地區(qū)、中非洲、亞洲、南太平洋地區(qū)發(fā)病較多.在我國(guó)以廣東、廣西、云南、貴州、四川為多。中國(guó)南方中國(guó)南方和和地貧的人群攜帶率地貧的人群攜帶率地區(qū)攜帶率（） 地貧 地貧廣州8.532.54廣西14.956.78四川1.922.18貴州-5.40臺(tái)灣4.201.10香港5.023.41 v 全球最大的單基因遺傳病之一；全球最大的單基因遺傳病之一；v 地中海沿岸、東南亞為高發(fā)地區(qū)；地中海沿岸、東南亞為高發(fā)地區(qū)；v 據(jù)統(tǒng)計(jì)世界上有據(jù)統(tǒng)計(jì)世界上有3.5

2、3.5億億人攜帶地貧基因，全球每年有人攜帶地貧基因，全球每年有1010萬(wàn)萬(wàn)重重型地貧患兒出生型地貧患兒出生 ；v 中國(guó)地中海貧血基因攜帶率為中國(guó)地中海貧血基因攜帶率為1%-23%1%-23%，貴州（，貴州（ 地貧）地貧）基基因攜帶率為因攜帶率為5.4%5.4%11v 發(fā)病主要集中在發(fā)病主要集中在長(zhǎng)江以南省份，廣東、廣西、四川和貴州長(zhǎng)江以南省份，廣東、廣西、四川和貴州發(fā)病率較高。發(fā)病率較高。流行病學(xué)流行病學(xué)貴州貴州（ 地貧）地貧）基因攜帶率基因攜帶率為為5.4%11貴州少數(shù)民族地區(qū)p地中海貧血的分子流行病學(xué)研究 喻芳， 鐘春捌， 周強(qiáng)等 中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志2010年12月第27卷第6期Chin

3、J Med Genet，December 2010V0127No6目錄目錄1 1、概述、概述2 2、地貧檢測(cè)及意義、地貧檢測(cè)及意義 報(bào)告單解讀報(bào)告單解讀定義定義 地中海貧血（海洋性貧血）：地中海貧血（海洋性貧血）：是由于珠蛋白基因的缺陷使是由于珠蛋白基因的缺陷使珠蛋白肽鏈合成減少或不能合成，導(dǎo)致紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白的珠蛋白肽鏈合成減少或不能合成，導(dǎo)致紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白的組成成分改變，引起慢性溶血性貧血。組成成分改變，引起慢性溶血性貧血。 根據(jù)根據(jù)缺陷的珠蛋白基因缺陷的珠蛋白基因不同，主要將地中海貧血分為：不同，主要將地中海貧血分為： - -地貧和地貧和 - -地貧。地貧。第一部分第一部分 概述概述血

4、紅蛋白結(jié)構(gòu)珠蛋白鏈血紅素（含鐵原子）（、 ）HbA(22）：出生后至6個(gè)月逐漸升高至96-98%；HbA2(22）：出生后至6個(gè)月逐漸升高至2.5-3.5%HbF(22）：主要存在于胎兒血液中，出生后至6個(gè)月慢慢降低至0- 2%發(fā)病機(jī)制發(fā)病機(jī)制珠蛋白基因缺陷（缺失、突變）珠蛋白基因缺陷（缺失、突變）珠蛋白肽鏈合成障礙珠蛋白肽鏈合成障礙異常血紅蛋白（異常血紅蛋白（ - -鏈鏈/ /非非 - -鏈鏈 ）慢性溶血慢性溶血地中海貧血地中海貧血地貧與地貧與地貧地貧 正常人自父母雙方各繼承2個(gè)珠蛋白基因（/）合成足夠的珠蛋白鏈。 自父母雙方各繼承1個(gè)珠蛋白基因合成足夠的珠蛋白鏈。 由于珠蛋白基因的缺失或點(diǎn)

5、突變，肽鏈合成障礙導(dǎo)致發(fā)病。地中海貧血的致病原理 鏈和非鏈的比例失衡 -地中海貧血：主要由于珠蛋白基因缺失、少數(shù)點(diǎn)突變-珠蛋白基因-珠蛋白基因缺陷-珠蛋白基因 /珠蛋白表達(dá)比例失衡珠蛋白表達(dá)過(guò)剩（4，HbBartS）胎兒缺氧貧血胎兒胎盤水腫宮內(nèi)死胎或出生前后死亡母體并發(fā)癥胎兒期（胎兒水腫綜合征）胎兒期（胎兒水腫綜合征）/珠蛋白比例失衡 珠蛋白表達(dá)過(guò)剩（4，HbH）出生后（出生后（HbH?。┎。o(wú)效紅細(xì)胞生成溶血貧血黃疸、肝脾腫大促紅細(xì)胞生成素升高骨髓增生骨骼變形與骨質(zhì)稀少輸血鐵吸收增加鐵超載與鐵沉寂器官損傷地中海貧血的致病原理 鏈和非鏈的比例失衡 人體總共有4個(gè)基因（1和2各兩個(gè)），按照珠蛋白

6、基因缺失程度，-地貧可分為以下基因型：l靜止型a-地中海貧血（-a/aa）（aa/aaT）： 病變非常輕微，與普通人無(wú)異，易被忽略l 標(biāo)準(zhǔn)型a-地中海貧血（-/aa）（-a/-a）：病變較輕微，與普通人無(wú)異，易被忽略lHbH?。?/-a）（-/aaT）：紅細(xì)胞細(xì)胞易被溶破，而發(fā)生慢性溶血性貧血l Hb Barts胎兒水腫?。?/-）：胎兒嚴(yán)重缺氧，溶血，全身水腫，死胎或出生后死亡地中海貧血的致病原理 鏈和非鏈的比例失衡 -地中海貧血：主要由于主要由于珠蛋白基因點(diǎn)突變、少數(shù)缺失。由于鏈合成不足，多余的-鏈沉積形成包涵體，包涵體破壞紅細(xì)胞造成溶血與無(wú)效造血。-珠蛋白基因缺陷/珠蛋白比例失衡 珠蛋白

7、表達(dá)過(guò)剩（包涵體）無(wú)效紅細(xì)胞生成溶血貧血黃疸、肝脾腫大促紅細(xì)胞生成素升高骨髓增生骨骼變形與骨質(zhì)稀少輸血鐵吸收增加鐵超載與鐵沉寂器官損傷-珠蛋白基因 前紅細(xì)胞破壞增長(zhǎng)人體總共有2個(gè)基因，地貧的臨床癥狀與基因突變的關(guān)系:地中海貧血的致病原理 鏈和非鏈的比例失衡 l 靜止型-地中海貧血 ：病變非常輕微，與普通人無(wú)異，易被忽略l 輕型-地中海貧血 ：病變非常輕微，與普通人無(wú)異，易被忽略l 中間型-地中海貧血：輕度與重度之間l 重型-地中海貧血：生后幾個(gè)月后開(kāi)始貧血，逐漸加重，表情呆滯，發(fā)育不良，肝脾腫大，要靠不斷輸血維持生命，未經(jīng)治療一般3-5歲死亡。重型重型 - -地貧（地貧（CooleyCoole

8、y） 自幼起病（自幼起?。? 1歲內(nèi)）；歲內(nèi)）；n 進(jìn)行性加重貧血，面色蒼白，黃疸；進(jìn)行性加重貧血，面色蒼白，黃疸；n 肝脾腫大，腹部肝脾腫大，腹部 膨隆；膨?。籲 面容：顴骨隆起，眼距增寬，鼻梁低平；面容：顴骨隆起，眼距增寬，鼻梁低平；n 體格發(fā)育落后，智力發(fā)育遲滯。體格發(fā)育落后，智力發(fā)育遲滯。重型-地貧貧血骨骼畸形多臟器損傷thalassemia 組織供氧不足，功能衰退，危機(jī)生命 促進(jìn)機(jī)體造血組織缺氧損傷 消化系統(tǒng)過(guò)度吸收鐵 鐵過(guò)度沉淀引起這些器官功能衰竭而死亡 骨髓過(guò)度造血骨板變薄，骨質(zhì)疏松 骨骼畸形，特殊面容地中海貧血危害地中海貧血的治療僅能依靠輸血維持生命，即使進(jìn)行骨髓移植，不但花費(fèi)

9、巨大，目前成功率也僅在70%左右。醫(yī)療費(fèi)用昂貴。 通過(guò)產(chǎn)前篩查，對(duì)篩查高風(fēng)險(xiǎn)的胎兒進(jìn)行產(chǎn)前診斷，以期淘汰重型地貧患兒是目前國(guó)際上公認(rèn)的預(yù)防地貧的最有效的途徑。 摘自實(shí)用產(chǎn)前診斷學(xué) 國(guó)內(nèi)外尚無(wú)有效的治療方法 重在預(yù)防第二部分第二部分 地貧檢測(cè)及意義地貧檢測(cè)及意義 地中海貧血的遺傳規(guī)律 常染色體隱性遺傳夫妻雙方均不帶地貧基因，則下一代不會(huì)出現(xiàn)地貧情況。若夫妻其中一方為地貧攜帶者，則下一代有1/2的機(jī)會(huì)為地貧攜帶者。若夫妻雙方均有地貧基因攜帶者，其下一代則有1/2攜帶地貧基因，1/4完全正常，1/4為重型地貧。要預(yù)防地貧，就要：找出同型地貧攜帶的夫妻目標(biāo)篩查人群：l 曾生育過(guò)重型或中間型-或-地中海

10、貧血患兒的夫婦。l 夫婦雙方均有-地貧基因攜帶者或地貧基因攜帶者。l 夫婦一方為地貧基因攜帶者或地貧基因攜帶者，配偶為地貧復(fù)合地貧基因攜帶者。 陽(yáng)性新生兒檢查 產(chǎn)前檢查與診斷 學(xué)齡群體篩查 婚前及孕前檢查 一級(jí)預(yù)防二級(jí)預(yù)防地中海貧血的三級(jí)預(yù)防 三級(jí)預(yù)防 血細(xì)胞分析（血常規(guī)） 紅細(xì)胞脆性試驗(yàn) 堿性血紅蛋白電泳篩查項(xiàng)目 地貧基因分型 地貧基因測(cè)序診斷項(xiàng)目地中海貧血檢測(cè)項(xiàng)目原理 小細(xì)胞低色素貧血，通過(guò)檢測(cè)紅細(xì)胞的體積與血紅蛋白量可初步篩選出異?；颊?優(yōu)點(diǎn) 價(jià)格便宜、容易開(kāi)展、靈敏度較高缺點(diǎn) 僅對(duì)中重度地貧提示有意義 特異性差，無(wú)法提示何種型別的地貧，且需要和缺鐵性貧血鑒別。定位 地貧初篩手段血細(xì)胞分

11、析血常規(guī) 血常規(guī)地貧指標(biāo) 指標(biāo)指標(biāo)陽(yáng)性結(jié)果陽(yáng)性結(jié)果意義意義平均紅細(xì)胞體積（MCV ) 82 fl提示小細(xì)胞低色素貧血平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH） 27 pg提示小細(xì)胞低色素貧血l 血常規(guī)對(duì)于小細(xì)胞低色素貧血的靈敏度較高，但特異性不高，缺鐵性貧血也是小細(xì)胞低色素貧血。l 血常規(guī)中有30%存在缺鐵性貧血。l 存在患者是地中海貧血合并缺鐵性貧血。堿性電泳地貧指標(biāo)指標(biāo)指標(biāo)陽(yáng)性結(jié)果陽(yáng)性結(jié)果意義意義 HBA2 2.5%（降低）提示標(biāo)準(zhǔn)-地貧 3.5% （升高）提示-地貧 HBF 升高提示-地貧或HPFH注：遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白增高癥(Hereditary persistence of fetal

12、hemoglobin,HPFH)。血紅蛋白成分分析綜合分析 結(jié)合血常規(guī)、脆性試驗(yàn)、血紅蛋白電泳、鏡檢血紅蛋白H包涵體HPLC（高效液相色譜法）對(duì)異常血紅蛋白帶進(jìn)行分析，給出綜合報(bào)告.原理優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)定位l 對(duì)各型地貧檢出率都較高（大于96%）l 可初步區(qū)分地貧型別，同時(shí)還可檢出異常血紅蛋白病，有詳細(xì)的建議與解釋，并提示下一步處理。不可確診且不確定基因型經(jīng)濟(jì)、便捷、最接近診斷的篩查項(xiàng)目血常規(guī)堿性電泳 通過(guò)PCR技術(shù)檢測(cè)出我國(guó)常見(jiàn)的17種地貧基因突變和3種常見(jiàn)的地貧基因缺失原理優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)定位地貧基因分型地中海貧血的最終確診方法l 最終確診的方法（100%）l 確定基因型l 物價(jià)較高l 價(jià)格比較貴l對(duì)少見(jiàn)

13、的基因型不能確診，需要結(jié)合電泳、血常規(guī)綜合分析地中海貧血診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”地中海貧血基因分型指標(biāo)地貧類型 檢測(cè)基因 基因型 意義-地貧-地中海貧血1基因 -SEA缺失兩個(gè)基因-地中海貧血2基因 3.7（右側(cè)缺失）4.2（左側(cè)缺失）缺失一個(gè)基因-地貧17個(gè)基因位點(diǎn)XXX位點(diǎn)基因突變純合子、雜合子結(jié)果為：未檢測(cè)到缺失或突變提示患者沒(méi)有常見(jiàn)的提示患者沒(méi)有常見(jiàn)的17種種 - -地貧基因突變、地貧基因突變、3種最常見(jiàn)的種最常見(jiàn)的 - -地貧基因缺失以及地貧基因缺失以及3個(gè)個(gè)最常見(jiàn)的最常見(jiàn)的 - -地貧基因突變位點(diǎn)。單并不排除存在其他類型的缺失和突變。地貧基因突變位點(diǎn)。單并不排除存在其他類型的缺失和突變。提

14、示為中、重度提示為中、重度 - -地貧地貧結(jié)果提示：基因突變，高度懷疑結(jié)果提示：基因突變，高度懷疑*位點(diǎn)突變基因純合位點(diǎn)突變基因純合子子結(jié)果為：基因缺失，結(jié)果為：基因缺失， - -地貧地貧1 1基因雜合子基因雜合子 - -/- -/ 建議配偶進(jìn)行地貧檢測(cè)，若攜帶基因相同，則進(jìn)行地貧的建議配偶進(jìn)行地貧檢測(cè)，若攜帶基因相同，則進(jìn)行地貧的產(chǎn)前檢測(cè)。產(chǎn)前檢測(cè)。提示標(biāo)準(zhǔn)型提示標(biāo)準(zhǔn)型 - -地貧攜帶者地貧攜帶者提示提示HbH病病結(jié)果為：結(jié)果為：1、基因缺失，、基因缺失， - -地貧地貧1基因雜合子（基因雜合子（- -/ ）和基因）和基因 缺失（缺失（3.7型），型）， - -地貧地貧2基因雜合子（基因雜合

15、子（- / / ）；）； 2、基因缺失、基因缺失, - -地貧地貧1基因雜合子（基因雜合子（- -/ ）和基因缺失）和基因缺失 （4.2型），型）， - -地貧地貧2基因雜合子（基因雜合子（- / / ）。）。 - -地貧攜帶地貧攜帶結(jié)果為：基因突變，結(jié)果為：基因突變，* * * *位點(diǎn)突變基因雜合子。位點(diǎn)突變基因雜合子。HbA23.5% 地貧表型 陽(yáng)性缺失型地貧基因診斷；突變型地貧RDB確診高風(fēng)險(xiǎn)夫婦 孕早期絨毛、中期羊水、晚期臍帶血做胎兒基因診斷 DNA測(cè)序血紅蛋白分析VARIANT-II MCV 80fl血細(xì)胞自動(dòng)分析儀地貧表型 陽(yáng)性17種 地貧基因突變RDBHbA22.5%地貧篩查流程

16、地貧篩查流程項(xiàng)目名稱項(xiàng)目名稱檢測(cè)方法檢測(cè)方法樣本樣本/ /樣樣本量本量 保存穩(wěn)定性保存穩(wěn)定性標(biāo)準(zhǔn)收標(biāo)準(zhǔn)收費(fèi)費(fèi)( (￥) )室溫室溫 冷藏冷藏 冷凍冷凍血紅蛋白成份分析（紅細(xì)胞孵育脆性試血紅蛋白成份分析（紅細(xì)胞孵育脆性試驗(yàn)驗(yàn)MDSTMDST、MCVMCV、RDWRDW、RBCRBC、HGBHGB、HbAHbA、HbFHbF、HbA2HbA2、血紅蛋白、血紅蛋白H H包涵體、異常血包涵體、異常血紅蛋白帶）紅蛋白帶） 電泳電泳法高效法高效液液相色譜（相色譜（HPLCHPLC）抗凝全血抗凝全血 3-53-5ml ml （EDTAEDTA抗凝）抗凝）8h8h7 7天天禁止禁止134 134 G-6-P-DG-6-P-D缺陷篩查缺陷篩查+ +紅細(xì)胞孵育滲透脆性紅細(xì)胞孵育滲透脆性試驗(yàn)試驗(yàn) （地貧初篩）（地貧初篩） 比色法比色法抗凝全血抗凝全血3.03.0ml ml (EDTA(EDTA抗抗凝凝) )8h8h 1 1天天 禁止禁止35.535.5地貧基因分型全套地貧基因分型全套 基因診斷基因診斷抗凝全血抗凝全血 2.0ml2.0ml（1 1：9 9枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉抗