巴西蜂膠和中國蜂膠對比檢測報告

1、巴西蜂膠和中國蜂膠比照檢測報告*蜂產(chǎn)品研究中心2021年11月20日一、 樣品來源及描述1 巴西蜂膠：Bioessens1：綠色蜂膠，塊狀;Bioessens2：棕綠色，塊狀;Bioessens3：棕色，塊狀。2 中國蜂膠：深棕色，塊狀。二、樣品處理將蜂膠至于4冰箱中8小時，然后用粉碎機將其粉碎成20目顆粒，塑料袋密封至于冰箱中備用。三、測定方法1提取率的測定方法參考GBT242832021標(biāo)準(zhǔn)測定。具體如下：稱量乙醇不溶物質(zhì)量，用減量法計算其占樣品質(zhì)量的百分比。a) 乙醇: 分析純95%;b) 定量濾紙。a) 天平(感量)；b) 100ml燒杯；c) 電熱鼓風(fēng)枯燥箱；d) 超聲波儀；e) 玻

2、璃漏斗60nm；f) 玻璃棒；g) 250ml錐形瓶；h) 稱量瓶70mm×35mm；i) 枯燥皿。1.4方法步驟：準(zhǔn)確稱取經(jīng)過粉碎處理的四種蜂膠樣品各5g稱準(zhǔn)至，分別置于100ml燒杯中，加適量95%乙醇，放入超聲波儀中超聲，使樣品溶解，將上清液倒入事先枯燥稱重過的濾紙及玻璃漏斗過濾到錐形瓶中，反復(fù)數(shù)次，直至完全溶解，再用少量乙醇洗滌100ml燒杯及濾紙兩次。然后將殘渣及濾紙與玻璃漏斗在50下枯燥至恒重。在相同條件下作平行試驗。按式1計算： X1=m1-m2/m1×100% (1)式中：X1樣品中乙醇提取物含量，%； m1樣品質(zhì)量，單位為克g； m2殘渣質(zhì)量，單位為克g；

3、 平行試驗允許誤差不超過1.5%，取三次測定的平均值。2總黃酮的測定方法參考GBT242832021標(biāo)準(zhǔn)測定。具體如下：a) 聚酰胺粉100目；b) ，加甲醇溶解并定容至100ml，即得50g/ml；c) 乙醇：分析純95%；d) 甲醇：分析純95%；a) UV75IGD紫外/可見光分光光度計(上海分析儀器廠)；b) 層析?。?50mm長×15mm內(nèi)徑，具活塞、砂芯、抽氣嘴、圓底燒瓶;c) 容量瓶：10ml；d) 移液器：100l1000l；e) 移液管：1ml5ml；f) 玻璃蒸發(fā)皿：90mm。a) 試樣處理：稱取蜂膠乙醇提取物于容量瓶中，用乙醇定容至100ml，搖勻后，超聲提取2

4、0min，放置，用移液管吸取上清液1ml于玻璃蒸發(fā)皿中，參加5ml乙醇及1g聚酰胺粉，用玻璃棒混勻吸附，于60水浴上揮去乙醇，然后轉(zhuǎn)入關(guān)閉活塞的層析柱中。量取20ml苯液，清洗玻璃蒸發(fā)皿再將苯液轉(zhuǎn)入層析柱中，分3次完成。15min后開啟層析柱活塞，棄去苯液并關(guān)閉層析柱活塞，取下圓底燒瓶，將25ml容量瓶裝于層析柱下方。量取20ml甲醇，分3次清洗玻璃蒸發(fā)皿，再將甲醇轉(zhuǎn)入層析柱中，15min后開啟層析柱活塞將黃酮洗脫于25ml容量瓶中，用甲醇定容至25ml。此液置1cm比色皿中于波長360nm測定吸收值。同時以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。b)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線：分別吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1.0、2.

5、0、3.0、4.0、5.0ml于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，置1cm比色皿中于波長360nm測定吸收值，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，計算回歸方程。按式2計算： X2= 2式中：X2試樣中總黃酮的含量，單位為毫克/每百克mg/100g;A由標(biāo)準(zhǔn)曲線算得被測液中黃酮量，單位為微克g;V2試樣定容總體積，單位為毫升ml；V1吸取的上清液體積，單位為毫升ml；m3試樣質(zhì)量，單位為克g。計算結(jié)果保存二位有效數(shù)字。3抗氧化測定方法a) DPPH90%，Sigma生產(chǎn);b) 甲醇:分析純95%;UV75IGD紫外/可見光分光光度計(上海分析儀器廠)。a) 配置濃度均為1mg/ml的四種蜂膠的甲醇溶液：準(zhǔn)確稱

6、取蜂膠提取物于容量瓶中，用甲醇定容至100ml待用。b) 配制濃度為的DPPH溶液：準(zhǔn)確稱取 DPPH試劑，用甲醇溶解并定容至100ml待用。c) 分光光度法評價不同蜂膠對DPPH·自由基的去除作用:參考larrauri1和yokozawa2的方法進(jìn)行改進(jìn)。四種蜂膠溶液1mg/ml,參加0.025mg/ml的DPPH甲醇溶液4ml，室溫下避光放置30min后于517nm處測定吸光值。在相同條件下作平行試驗。DPPH·的去除率通過下式計算：去除率= (A0-A)/A0×100式中： A0空白試劑吸光值；A不同梯度溶液吸光值。四、結(jié)果1 巴西蜂膠與中國蜂膠的乙醇提取率

7、樣品提取率中國蜂膠57.77%Bioessens159.42%Bioessens255.64%Bioessens360.08%2巴西蜂膠與中國蜂膠的總黃酮含量樣品總黃酮含量%中國蜂膠bioessens1bioessens2bioessens33巴西蜂膠和中國蜂膠對DPPH自由基的去除率去除率% mL mL0.25 mL中國蜂膠Bioessens1Bioessens2Bioessens3參考文獻(xiàn)：1. Larrauri J A,Sanchez Moreno C,Saura Calixto F.Effect of extracts from red and white grape pomace peelsJ.Agric Food Chem,1998,46:2143.2 Yokozawa T,Dong E,Natag