第四部分淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù)PPT課件

1、第四部分第四部分 : :淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù)淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù)1.進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)2.嘗試植物激素的應(yīng)用嘗試植物激素的應(yīng)用實(shí)驗?zāi)康膶?shí)驗?zāi)康? 通過必修課的學(xué)習(xí)，我們已經(jīng)了解到大通過必修課的學(xué)習(xí)，我們已經(jīng)了解到大多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。那么，多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。那么，有沒有不用種子來培育植物的方法呢？有沒有不用種子來培育植物的方法呢？ 組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)營養(yǎng)繁殖營養(yǎng)繁殖扦插扦插嫁接嫁接壓條壓條 無性無性繁殖繁殖組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織，如葉、組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織，如葉、芽、莖、根、花瓣或花粉等，在無菌條件下芽、莖、根、花瓣或花粉等，在無菌條件下接種

2、在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上，給予一定接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上，給予一定的溫度和光照，使之產(chǎn)生愈傷組織，或進(jìn)而的溫度和光照，使之產(chǎn)生愈傷組織，或進(jìn)而生根發(fā)芽。生根發(fā)芽。一、組織培養(yǎng)概述一、組織培養(yǎng)概述1.概念概念2、植物組織培養(yǎng)的原理是什么？、植物組織培養(yǎng)的原理是什么？植物細(xì)胞具有全能性，即生物體的細(xì)胞，植物細(xì)胞具有全能性，即生物體的細(xì)胞，具有使后代細(xì)胞形成完整個體的能力。具有使后代細(xì)胞形成完整個體的能力。3.植物組織培養(yǎng)的基本過程植物組織培養(yǎng)的基本過程: 離體器官、 組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 植物組織培養(yǎng)過程示意圖植物組織培養(yǎng)過程示意圖 2、上面的示意圖中還有什么

3、地方不夠完善的？、上面的示意圖中還有什么地方不夠完善的？沒有進(jìn)行沒有進(jìn)行滅菌滅菌處理，試管也沒有做密封等。處理，試管也沒有做密封等。4.植物組織培養(yǎng)條件植物組織培養(yǎng)條件 含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適、適時光照等。時光照等。生長素生長素/細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素 高高 利于根和愈傷組織形成利于根和愈傷組織形成適中適中 有利于根芽的分化有利于根芽的分化低低 有利于芽的形成有利于芽的形成二、菊花的組織培養(yǎng)二、菊花的組織培養(yǎng)(一一)設(shè)備及用品設(shè)備及用品1. 100ml三角瓶或大口培養(yǎng)瓶三角瓶或大口培養(yǎng)瓶 2

4、. 鑷子鑷子 3. 超凈臺超凈臺 4. 滅菌鍋滅菌鍋 5.封口膜和橡皮圈封口膜和橡皮圈 6. 有棉球的廣口瓶有棉球的廣口瓶 7. 酒精酒精燈燈 8.三角漏斗三角漏斗 9.培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿(二二)材料材料1.MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基(用于配置發(fā)芽和生根培養(yǎng)基用于配置發(fā)芽和生根培養(yǎng)基)2.奈乙酸奈乙酸用少量用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解溶液溶解,芐基腺嘌呤芐基腺嘌呤用少量用少量0.1mol/LHCL溶解溶解3.發(fā)芽培養(yǎng)基發(fā)芽培養(yǎng)基(滅菌滅菌)4.生根培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基(滅菌滅菌)制備制備MS固體固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基外植體消毒外植體消毒 接種接種 生芽生芽栽栽 培培實(shí)驗過程實(shí)驗過程 移移 栽栽教材用的是無菌培

5、養(yǎng)幼苗教材用的是無菌培養(yǎng)幼苗 生根生根(三三)步驟步驟1.取外植體取外植體超凈臺上將超凈臺上將無菌無菌幼苗切段幼苗切段,每段每段至少至少1張葉片張葉片2.生芽培養(yǎng)生芽培養(yǎng)生芽培養(yǎng)基中生芽培養(yǎng)基中,放入放入1-3段切段段切段(莖部插入培養(yǎng)基莖部插入培養(yǎng)基,蓋上封口蓋上封口膜膜.日光燈下日光燈下保持保持1825的溫度培養(yǎng)的溫度培養(yǎng),每天光照不少于每天光照不少于14.5h3.生根培養(yǎng)生根培養(yǎng)23周后周后,將叢狀苗在無菌條件下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中將叢狀苗在無菌條件下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中,在在上述條件下繼續(xù)培養(yǎng)上述條件下繼續(xù)培養(yǎng).4.適應(yīng)鍛煉適應(yīng)鍛煉將苗轉(zhuǎn)移至草炭土或蛭石中將苗轉(zhuǎn)移至草炭土或蛭石中,用玻璃罩或塑

6、料布保持用玻璃罩或塑料布保持80以上的濕度以上的濕度,23天后打開減低濕度進(jìn)行鍛煉天后打開減低濕度進(jìn)行鍛煉,直到將罩全直到將罩全部打開處于自然濕度下為止部打開處于自然濕度下為止5.定植定植將苗轉(zhuǎn)移到土中培養(yǎng)將苗轉(zhuǎn)移到土中培養(yǎng)6.自然生長的莖進(jìn)行組織培養(yǎng)方法自然生長的莖進(jìn)行組織培養(yǎng)方法:70乙醇乙醇中浸中浸泡泡10分鐘分鐘5次氯次氯酸鈉溶酸鈉溶液中浸液中浸泡泡5min5次氯次氯酸鈉溶酸鈉溶液中浸液中浸泡泡5min超凈超凈臺上臺上用無用無菌水菌水清洗清洗將莖將莖移至移至生芽生芽培養(yǎng)培養(yǎng)基中基中1.1.廣泛應(yīng)用于果樹和花卉的快速繁殖。廣泛應(yīng)用于果樹和花卉的快速繁殖。2.2.借助于組織培養(yǎng)生產(chǎn)借助于組

7、織培養(yǎng)生產(chǎn)人工種子（如圖）人工種子（如圖），解決某些作物品種繁殖力差、結(jié)子困難或解決某些作物品種繁殖力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題。發(fā)芽率低等問題。3.3.生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素、和生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素、和殺蟲劑等。例如：紫杉醇，生物堿、紫草殺蟲劑等。例如：紫杉醇，生物堿、紫草素等。素等。4.4.轉(zhuǎn)基因植物的培育轉(zhuǎn)基因植物的培育5.5. 去病毒植株去病毒植株6.6.花藥離體培養(yǎng)花藥離體培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用1、外植體帶菌、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔、環(huán)境不清潔污染途

8、徑污染途徑1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、次氯酸、外植體的消毒（酒精、次氯酸鈉）鈉）3、接種的無菌操作（酒精、酒精、接種的無菌操作（酒精、酒精燈燈灼燒）灼燒）4、無菌箱中的培養(yǎng)；、無菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。段時間。在整個操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境的？在整個操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境的？MS固體培養(yǎng)基成分及比例固體培養(yǎng)基成分及比例為什么要配制培養(yǎng)基母液？為什么要配制培養(yǎng)基母液？ MS培養(yǎng)基含有十幾多種化合物，配制培養(yǎng)基含有十幾多種化合物，配制不方便也難稱量準(zhǔn)確，可將培養(yǎng)基中的各種不方便也難稱量準(zhǔn)確，可將培養(yǎng)基中的各種成分?jǐn)U大一定倍數(shù)分別稱量，配成濃縮液，成分?jǐn)U大一定倍數(shù)分別稱量，配成濃縮液，這種濃縮液叫做培養(yǎng)基母液。這種濃縮液叫做培養(yǎng)基母液。 植物組織培養(yǎng)過程中，為什么用人工合成植物組織培養(yǎng)過程中，為什么用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素？的激素，而不用植物中存在的天然激素？ 答：植物中存在分解天然植物激素的酶，答：植物中存在分解天