臨床本科3溶貧檢測(cè)課件

1、臨床本科3溶貧檢測(cè) 第三節(jié)第三節(jié) 溶血性貧血檢測(cè)溶血性貧血檢測(cè)臨床本科3溶貧檢測(cè)溶血性貧血定義：溶血性貧血定義： 紅細(xì)胞的生存時(shí)間縮短紅細(xì)胞的生存時(shí)間縮短15152020天天以下，破壞速度超過(guò)骨髓的代償造以下，破壞速度超過(guò)骨髓的代償造血能力時(shí)，才出現(xiàn)貧血血能力時(shí)，才出現(xiàn)貧血發(fā)病機(jī)制分類：發(fā)病機(jī)制分類： RBCRBC內(nèi)在因素（遺傳性內(nèi)在因素（遺傳性/ /先天先天性）性） RBCRBC外在因素（獲得性）外在因素（獲得性）臨床本科3溶貧檢測(cè)free Hb(a2b2 tetramers)HbdimersHaptoglobin（Hp）haptoglobin-hemoglobincomplexkidney

2、slivermetHbbinds tohemopexin &albuminferriheme (Fe3+)globin臨床本科3溶貧檢測(cè)溶貧的臨床表現(xiàn)溶貧的臨床表現(xiàn) 急性：發(fā)熱、畏寒，可出現(xiàn)急性：發(fā)熱、畏寒，可出現(xiàn)HbHb尿，尿，腎功能改變腎功能改變 慢性：貧血、黃疸、脾腫大、免疫慢性：貧血、黃疸、脾腫大、免疫指標(biāo)異常，膽紅素代謝異常指標(biāo)異常，膽紅素代謝異常臨床本科3溶貧檢測(cè)紅細(xì)胞紅細(xì)胞破壞增多的依據(jù)破壞增多的依據(jù) RBCRBC壽命壽命1515天天 血片見(jiàn)血片見(jiàn)RBCRBC碎片碎片 血漿游離血漿游離HbHb增高（血管內(nèi)溶血）增高（血管內(nèi)溶血） HbHb尿檢測(cè)（），醬油色尿檢測(cè)（），醬油

3、色 尿含鐵血黃素試驗(yàn)（）尿含鐵血黃素試驗(yàn)（） 血清非結(jié)合膽紅素增高血清非結(jié)合膽紅素增高 尿膽原增高尿膽原增高 血清結(jié)合珠蛋白減低血清結(jié)合珠蛋白減低 血漿高鐵血紅素白蛋白檢測(cè)血漿高鐵血紅素白蛋白檢測(cè)臨床本科3溶貧檢測(cè)球形紅細(xì)胞球形紅細(xì)胞臨床本科3溶貧檢測(cè)破碎紅細(xì)胞、盔形紅細(xì)胞等破碎紅細(xì)胞、盔形紅細(xì)胞等臨床本科3溶貧檢測(cè)一、溶貧篩查試驗(yàn)一、溶貧篩查試驗(yàn)1 1、血漿游離血漿游離HbHb測(cè)定測(cè)定正常值：正常值：50mg/L50mg/L 意義：血管內(nèi)溶血的指征意義：血管內(nèi)溶血的指征臨床本科3溶貧檢測(cè)2 2、血清結(jié)合珠蛋白測(cè)定血清結(jié)合珠蛋白測(cè)定正常值：正常值：0.71.5g/L0.71.5g/L 各種溶血

4、時(shí)結(jié)合珠蛋白均可減低，嚴(yán)重血各種溶血時(shí)結(jié)合珠蛋白均可減低，嚴(yán)重血管內(nèi)溶血明顯減低，甚至測(cè)不出（血漿游管內(nèi)溶血明顯減低，甚至測(cè)不出（血漿游離血紅蛋白超過(guò)離血紅蛋白超過(guò)1.3g /L1.3g /L時(shí)）。時(shí)）。 巨幼細(xì)胞貧血、嚴(yán)重肝病、口服避孕藥、巨幼細(xì)胞貧血、嚴(yán)重肝病、口服避孕藥、先天性無(wú)結(jié)合珠蛋白血癥等減低或消失。先天性無(wú)結(jié)合珠蛋白血癥等減低或消失。 增高見(jiàn)于炎癥、感染、組織壞死、惡性腫增高見(jiàn)于炎癥、感染、組織壞死、惡性腫瘤、風(fēng)濕性疾病、口服避孕藥、類固醇激瘤、風(fēng)濕性疾病、口服避孕藥、類固醇激素治療。素治療。臨床本科3溶貧檢測(cè)3 3、血漿高鐵血紅素清蛋白檢測(cè)血漿高鐵血紅素清蛋白檢測(cè) 正常：正常：

5、 陰性陰性 嚴(yán)重血管內(nèi)溶血時(shí)呈陽(yáng)性嚴(yán)重血管內(nèi)溶血時(shí)呈陽(yáng)性4 4、RBCRBC壽命測(cè)定（最佳）壽命測(cè)定（最佳） 正常值：正常值：25322532天天5151CrCr同位素標(biāo)記，半衰期同位素標(biāo)記，半衰期1515天，天，說(shuō)明有溶血存在。說(shuō)明有溶血存在。臨床本科3溶貧檢測(cè)5 5、尿含鐵血黃素試驗(yàn)（尿含鐵血黃素試驗(yàn)（Rous test)Rous test) 正常值：陰性正常值：陰性 溶貧中陽(yáng)性只占溶貧中陽(yáng)性只占1020%1020%臨床本科3溶貧檢測(cè)臨床本科3溶貧檢測(cè)二、二、 紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn)紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn)1 1、RBCRBC滲透脆性試驗(yàn)滲透脆性試驗(yàn)檢測(cè)紅細(xì)胞在不同濃度檢測(cè)紅細(xì)胞在不同濃度低滲鹽水中

6、的抵抗力低滲鹽水中的抵抗力RBCRBC表面積表面積/RBC/RBC容積比值容積比值與與RBCRBC脆性成反比脆性成反比臨床本科3溶貧檢測(cè) 參考值：參考值： 開(kāi)始溶血開(kāi)始溶血0.42%0.46% (NaCl0.42%0.46% (NaCl液液) ) 完全溶血完全溶血0.28%0.32% (NaCl0.28%0.32% (NaCl液液) ) 意義：意義： 脆性增高脆性增高 遺傳性球形細(xì)胞增多癥遺傳性球形細(xì)胞增多癥 脆性減低脆性減低 地中海貧血、缺鐵性貧地中海貧血、缺鐵性貧血血臨床本科3溶貧檢測(cè)2 2、自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)、自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn) 正常人紅細(xì)胞經(jīng)孵育正常人紅細(xì)胞經(jīng)孵育48h48

7、h后，溶血率很低后，溶血率很低4.0%4.0%，加葡萄糖或，加葡萄糖或ATPATP后更低（后更低（0.6%75% 75% G6PDG6PD缺陷：定性（），半定量缺陷：定性（），半定量70%70%。臨床本科3溶貧檢測(cè)2 2、氰化物、氰化物- -抗壞血酸試驗(yàn)抗壞血酸試驗(yàn) 原理：略原理：略 結(jié)果：正常血液幾小時(shí)后變暗色結(jié)果：正常血液幾小時(shí)后變暗色 意義：意義：G6PDG6PD缺乏者血液變成棕色（巧克缺乏者血液變成棕色（巧克力色），純合子在力色），純合子在2h2h內(nèi)即變色，雜合子內(nèi)即變色，雜合子要要34h34h變化變化臨床本科3溶貧檢測(cè) 3 3、變性珠蛋白小體生成試驗(yàn)、變性珠蛋白小體生成試驗(yàn)受檢受檢R

8、BCRBC乙酰苯肼乙酰苯肼 作活體染色（甲基紫）作活體染色（甲基紫） 373712h12h 有變性珠蛋白小體，則膜上形成紫黑色顆粒有變性珠蛋白小體，則膜上形成紫黑色顆粒下一張 G6PDG6PD缺乏致缺乏致GSHGSH減少，高鐵減少，高鐵HbHb增增多，形成多，形成HeinzHeinz小體小體臨床本科3溶貧檢測(cè)體外活體染色后，光鏡下體外活體染色后，光鏡下發(fā)現(xiàn)的發(fā)現(xiàn)的12m12m顆粒狀顆粒狀折光小體。折光小體。 結(jié)果：正常人結(jié)果：正常人30%30%意義：意義：見(jiàn)于不穩(wěn)定血紅蛋見(jiàn)于不穩(wěn)定血紅蛋白病、白病、G6PDG6PD缺陷癥和缺陷癥和芳香族苯胺或硝基類化芳香族苯胺或硝基類化合物中毒所致的溶貧。合物

9、中毒所致的溶貧。臨床本科3溶貧檢測(cè) 4 4、G6PD PKG6PD PK活性測(cè)定活性測(cè)定臨床本科3溶貧檢測(cè) 四、珠蛋白生成異常試驗(yàn)四、珠蛋白生成異常試驗(yàn) 包括血紅蛋白電泳、包括血紅蛋白電泳、 HbFHbF定量測(cè)定（堿定量測(cè)定（堿變性試驗(yàn)）等變性試驗(yàn)）等臨床本科3溶貧檢測(cè)五、免疫性溶血的檢驗(yàn)五、免疫性溶血的檢驗(yàn)1 1、抗人球蛋白試驗(yàn)（、抗人球蛋白試驗(yàn)（Coombs testCoombs test）直接法、間接法直接法、間接法臨床本科3溶貧檢測(cè)直接抗人球蛋白試驗(yàn)（直接抗人球蛋白試驗(yàn)（DAGTDAGT） 測(cè)測(cè)RBCRBC表面結(jié)合的抗體（更重要，價(jià)表面結(jié)合的抗體（更重要，價(jià)值高）值高）受檢者受檢者RB

10、CRBC懸液懸液+ +等量抗人球蛋白試劑等量抗人球蛋白試劑 低速離心后觀察凝集低速離心后觀察凝集 3737，15min15min 臨床本科3溶貧檢測(cè) 間接法（間接法（IAGTIAGT）：）： 測(cè)游離特異的抗體（先使測(cè)游離特異的抗體（先使RBCRBC致敏，致敏，再與抗人球蛋白血清結(jié)合）再與抗人球蛋白血清結(jié)合）臨床本科3溶貧檢測(cè)Coombs testCoombs test臨床意義臨床意義 正常人抗人球蛋白試驗(yàn)直接、間接均陰性正常人抗人球蛋白試驗(yàn)直接、間接均陰性 自身免疫性溶血性貧血（溫抗體型自身免疫性溶血性貧血（溫抗體型 3737條條件下作用最強(qiáng)件下作用最強(qiáng) IgGIgG）,( ,(冷抗體型冷抗體

11、型 4 4條件條件下進(jìn)行試驗(yàn)下進(jìn)行試驗(yàn) IgM)IgM) 新生兒同種免疫溶血病、新生兒同種免疫溶血病、SLESLE、RARA、HDHD、NHL NHL 可陽(yáng)性?？申?yáng)性。 臨床本科3溶貧檢測(cè) 2 2、冷熱溶血試驗(yàn)、冷熱溶血試驗(yàn) 檢測(cè)補(bǔ)體依賴性冷熱溶血素檢測(cè)補(bǔ)體依賴性冷熱溶血素 存在存在D-LD-L雙向抗體，則（雙向抗體，則（+ +） 正常為（正常為（- -），（），（+ +）見(jiàn)于）見(jiàn)于PNHPNH 3 3、冷凝集素試驗(yàn)、冷凝集素試驗(yàn)參考值：效價(jià)參考值：效價(jià)1:401:40 意義：意義：AIHA AIHA 臨床本科3溶貧檢測(cè)六、六、PNHPNH相關(guān)檢測(cè)相關(guān)檢測(cè) 屬于紅細(xì)胞膜缺陷，慢性血管內(nèi)溶血屬于

12、紅細(xì)胞膜缺陷，慢性血管內(nèi)溶血PNHPNH不同時(shí)間尿樣不同時(shí)間尿樣臨床本科3溶貧檢測(cè)1 1、酸化溶血試驗(yàn)（、酸化溶血試驗(yàn)（Ham testHam test） 特異性高，是國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的特異性高，是國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的PNHPNH確診試確診試驗(yàn)驗(yàn) 利用補(bǔ)體在弱酸性環(huán)境中激活，并攻擊利用補(bǔ)體在弱酸性環(huán)境中激活，并攻擊RBCRBC膜，致溶血膜，致溶血 。 正常人陰性，正常人陰性，PNHPNH陽(yáng)性。陽(yáng)性。臨床本科3溶貧檢測(cè) 2 2、蔗糖溶血試驗(yàn)、蔗糖溶血試驗(yàn) 特異性敏感性均不如特異性敏感性均不如HamHam試驗(yàn)，僅試驗(yàn)，僅做篩選。做篩選。 參考值：陰性參考值：陰性 3 3、蛇毒因子溶血試驗(yàn)、蛇毒因子溶血試驗(yàn) 特異

13、檢測(cè)特異檢測(cè)PNHPNH臨床本科3溶貧檢測(cè)第四節(jié)第四節(jié) 血型鑒定與交叉配血血型鑒定與交叉配血臨床本科3溶貧檢測(cè) 血型定義：血型定義： 紅細(xì)胞系紅細(xì)胞系統(tǒng)血型：統(tǒng)血型：臨床本科3溶貧檢測(cè)一、ABO系統(tǒng)與臨床意義 1 1、分型原則分型原則 根據(jù)紅細(xì)胞膜上含有抗原和血根據(jù)紅細(xì)胞膜上含有抗原和血漿中含有相應(yīng)抗體分為漿中含有相應(yīng)抗體分為A A、B B、ABAB、OO四型四型 血型（表型）紅細(xì)胞上抗原血型（表型）紅細(xì)胞上抗原 血漿中抗體血漿中抗體 基因型基因型 A A 抗抗B AA、AO B B 抗抗A BB、BO O 無(wú)無(wú) 抗抗A、 抗抗B、抗、抗AB OO AB A、B 無(wú)無(wú) AB 臨床本科3溶貧檢測(cè)

14、臨床本科3溶貧檢測(cè)父母的血型與子女的血型關(guān)系父母的血型與子女的血型關(guān)系 臨床本科3溶貧檢測(cè)2、抗原 A A、B B抗原（含抗原（含H H抗原）在胚胎期已抗原）在胚胎期已形成，出生時(shí)抗原性不強(qiáng)，故胎形成，出生時(shí)抗原性不強(qiáng)，故胎兒、新生兒定血型時(shí)凝集性差。兒、新生兒定血型時(shí)凝集性差。血型抗原終生不變血型抗原終生不變。H H抗原屬分泌抗原屬分泌型物質(zhì)，存在各組織中，以唾液型物質(zhì)，存在各組織中，以唾液為多，可輔助鑒定為多，可輔助鑒定ABOABO血型血型。臨床本科3溶貧檢測(cè)3、抗體 抗抗A A、 抗抗B B、抗、抗ABAB屬屬IgG IgG 或或IgMIgM型，天型，天然性抗體以然性抗體以IgMIgM為

15、主，免疫性以為主，免疫性以IgGIgG為主（如輸血、妊娠后）。為主（如輸血、妊娠后）。O O血型血清內(nèi)抗體屬血型血清內(nèi)抗體屬IgGIgG。新生兒溶血。新生兒溶血與與IgGIgG有關(guān)。有關(guān)?？贵w也終生不變抗體也終生不變 抗抗A、抗、抗B在生后在生后3-6月才開(kāi)始產(chǎn)生月才開(kāi)始產(chǎn)生,5-6歲達(dá)高峰，故嬰幼兒定血型時(shí)，歲達(dá)高峰，故嬰幼兒定血型時(shí)，抗體效價(jià)低，抗原位點(diǎn)少，易誤定抗體效價(jià)低，抗原位點(diǎn)少，易誤定臨床本科3溶貧檢測(cè) ABO亞型 亞型是指屬同一血型抗原，但抗亞型是指屬同一血型抗原，但抗原結(jié)構(gòu)或抗原位點(diǎn)數(shù)有一定差異。原結(jié)構(gòu)或抗原位點(diǎn)數(shù)有一定差異。 最多見(jiàn)的最有意義亞型是最多見(jiàn)的最有意義亞型是A A

16、型中的型中的A1A1、A2 A2 （A1AA1A、A1B A1B 、A2B)A2B)。 A2BA2B含有含有A1A1抗體。抗體。 凡在血型鑒定過(guò)程中出現(xiàn)不明顯凡在血型鑒定過(guò)程中出現(xiàn)不明顯或可疑結(jié)果時(shí)應(yīng)做亞型鑒定?；蚩梢山Y(jié)果時(shí)應(yīng)做亞型鑒定。臨床本科3溶貧檢測(cè)4、血型鑒定臨床本科3溶貧檢測(cè)正向直接定型正向直接定型： 用已知抗體血清檢查紅細(xì)胞的抗原用已知抗體血清檢查紅細(xì)胞的抗原反轉(zhuǎn)定型反轉(zhuǎn)定型： 用已知血型的紅細(xì)胞檢查血清中抗用已知血型的紅細(xì)胞檢查血清中抗體體 正定型正定型 反定型反定型抗抗A A 抗抗B B 抗抗ABAB A A細(xì)胞細(xì)胞 B B細(xì)胞細(xì)胞 O O細(xì)胞細(xì)胞 + - + - + - +

17、- - + - A A - -+ + + + + - - - - B B + + + - - - AB - + + - O 血血 型型臨床本科3溶貧檢測(cè)三、交叉配血、輸血原則 1 1、交叉配血、交叉配血主側(cè)交叉配血：主側(cè)交叉配血：次側(cè)交叉配血次側(cè)交叉配血: :：臨床本科3溶貧檢測(cè) 2、輸血原則 輸血前復(fù)查血型，輸血前復(fù)查血型， 做交叉配血做交叉配血; ;輸同型輸同型 血，多個(gè)不同血源血，多個(gè)不同血源 間互相交叉配血間互相交叉配血; ; 嚴(yán)格掌握輸血指征嚴(yán)格掌握輸血指征; ; 提倡成分輸血提倡成分輸血 臨床本科3溶貧檢測(cè) 意義輸血；輸血；輔助診斷新生輔助診斷新生兒溶血病；兒溶血?。黄鞴僖浦?；器官移植；遺傳分析；遺傳分析；其他其他臨床本科3溶貧檢測(cè)二、Rh系統(tǒng)與臨床意義 19001900年發(fā)現(xiàn)年發(fā)現(xiàn)ABOABO血型，血型，19401940年發(fā)現(xiàn)年發(fā)現(xiàn)RhRh血型血型 ?？乖锌乖蠧 c D E eC c D E e五種五種 ，一般以，一般以D D定型定型。含有含有D D抗原的紅細(xì)胞稱為抗原的紅細(xì)胞稱為RhRh陽(yáng)性陽(yáng)性，不含不含D D抗原的為抗原的為RhRh陰性陰性. .我國(guó)人群漢族我國(guó)人群漢族RhRh（+ +