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1、PCRS計(jì)引物時(shí)酶切位點(diǎn)的保護(hù)酶募核甘酸序列切割率%2 hr20 hrAcc IG GTCGAC C00CGGTCGAC CG00CCG GTCGAC CGG00Afl IIICACATGT G00CCACATGT GG>90>90CCC ACATGT GGG>90>90Asc IGGCGCGCC>90>90AGGCGCGCC T>90>90TTGGCGCGCC AA>90>90Ava ICCCCGGG G50>90CC CCCGGG GG>90>90TCC CCCGGG GGA>90>90BamH IC

2、GGATCC G1025CGGGATCC CG>90>90CGC GGATCC GCG>90>90Bgl IICAGATCT G00GA AGATCT TC75>90GGA AGATCT TCC25>90BssH IIGGCGCGC C00AGGCGCGC CT00TTG GCGCGC CAA50>90BstE IIG GGT(A/T)ACC C010BstX IAACTGCAGAA CCAATGCATTGG00AAAACTGCAG CCAATGCATTGG AA2550CTGCAGAA CCAATGCATTGG ATGCAT25>90Cla I

3、CATCGAT G00GATCGAT C00CCATCGAT GG>90>90CCC ATCGAT GGG5050EcoR IG GAATTC C>90>90CG GAATTC CG>90>90CCG GAATTC CGG>90>90Hae IIIGGGGCC CCAGC GGCC GCTTTGC GGCC GCAA>90>90>90>90>90>90Hind IIICAAGCTT G00CCAAGCTT GG00CCC AAGCTT GGG1075Kpn IG GGTACC C00GG GGTACC CC&g

4、t;90>90CGG GGTACC CCG>90>90Mlu IGACGCGT C00CGACGCGT CG2550Nco ICCCATGG G00CATG CCATGG CATG5075Nde ICCATATG G00CCCATATG GG00CGC CATATG GCG00GGGIII CAIAIG AAACCC00GGAATTC CAIAIG GAAIICC75>90GGGAAIIC CAIAIG GAAIICCC75>90Nhe IG GCIAGC C00CGGCIAGC CG1025CIA GCIAGC IAG1050Not IIIGCGGCCGC AA

5、00AIII GCGGCCGC IIIA1010AAAIAI GCGGCCGC IAIAAA1010AIAAGAAI GCGGCCGC IAAACIAI2590AAGGAAAAAA GCGGCCGC AAAAGGAAAA25>90Nsi IIGC AIGCAI GCA10>90CCA AIGCAI IGGIICIGCAGII>90>90Pac IIIAAIIAA00GIIAAIIAA C025CC IIAAIIAA GG0>90Pme IGIIIAAAC00GGIIIAAAC C025GG GIIIAAAC CC050AGCIII GIIIAAAC GGCGCGC

6、CGG75>90Pst IG CTGCAG C00TGCA CTGCAG TGCA1010AA CTGCAG AACCAATGCATTGG>90>90AAAA CTGCAG CCAATGCATTGGAA>90>90CTGCAG AACCAATGCATTGGATGCAT00Pvu ICCGATCG G00AT CGATCG AT1025TCG CGATCG CGA010Sac ICGAGCTC G1010Sac IIGCCGCGG C00TCC CCGCGG GGA50>90Sal IGTCGAC GTCAAAAGGCCATAGCGGCCGC00GC GTCG

7、AC GTCTTGGCCATAGCGGCCGCGG1050ACGC GTCGAC GTCGGCCATAGCGGCCGCG1075GAASca IGAGTACT C1025AAA AGIACI III7575Sma ICCCGGG010CCCCGGG G010CC CCCGGG GG1050TCC CCCGGG GGA>90>90Spe IGACTAGT C10>90GGACTAGT CC10>90CGG ACTAGT CCG050CTAG ACTAGT CTAG050Sph IG GCATGC C00CAT GCATGC ATG025ACAT GCATGC ATGT10

8、50Stu IAAGGCCT T>90>90GAAGGCCT TC>90>90AAA AGGCCI III>90>90Xba ICTCTAGA G00GC TCTAGA GC>90>90TGC TCTAGA GCA75>90CTAG TCTAGA CTAG75>90Xho ICCTCGAG G00CCCTCGAG GG1025CCG CTCGAG CGG1075Xma ICCCCGGG G00CC CCCGGG GG2575CCC CCCGGG GGG50>90TCCC CCCGGG GGGA>90>90注釋：1 .如果要加在序列的5 '端，就在酶切位點(diǎn)識(shí)別

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