BET-48G細(xì)菌內(nèi)毒素分析儀操作規(guī)程1

1、 天大天發(fā)BET-48G系列細(xì)菌內(nèi)毒素分析儀操作規(guī)程 1.儀器組成及開(kāi)機(jī) 1. 1儀器組成 細(xì)菌內(nèi)毒素測(cè)定儀主機(jī)、計(jì)算機(jī)、打印機(jī)、 EasyBET軟件。 1. 2 .試驗(yàn)環(huán)境要求 安裝在沒(méi)有明顯空氣流動(dòng)的潔凈的工作間， 無(wú)菌、無(wú)塵、低溫。 1. 3開(kāi)機(jī) 翻開(kāi)細(xì)菌內(nèi)毒素測(cè)定儀主機(jī)的電源開(kāi)關(guān)， 翻開(kāi)計(jì)算機(jī)，啟動(dòng)EasyBET軟件。 2 操作方法 2. 1軟件啟動(dòng)，雙擊軟件圖標(biāo)翻開(kāi)軟件，軟件首先搜索內(nèi)毒素測(cè)定儀，找到后顯示該儀器 的型號(hào)。如果儀器未聯(lián)機(jī)那么不能進(jìn)行檢測(cè)操作。 2. 1. 1用戶(hù)登錄 登錄過(guò)的用戶(hù)選好檢驗(yàn)員，輸入密碼，點(diǎn)擊確定即可進(jìn)入；沒(méi)登錄過(guò)的 用戶(hù)輸入檢驗(yàn)員名稱(chēng)，設(shè)置好密碼點(diǎn)擊【添

2、加新檢驗(yàn)員】即可進(jìn)入。 2. 1. 2進(jìn)入主畫(huà)面 待儀器右上角溫度顯示為 37 0.3 C時(shí)，即可進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)置和檢測(cè)。 MBS* ! 正莊M映Hl#中跟嘉己林! ICKf jRrt 暴 # g 沖更程 |剪補(bǔ)事MB月|財(cái)心內(nèi)竟蛔 2. 2標(biāo)準(zhǔn)曲線的可靠性試驗(yàn) 2. 2. 1標(biāo)準(zhǔn)品系列濃度溶液準(zhǔn)備 在進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)系列的制備時(shí)， 2至10倍的稀釋方法都可以 使用， 將細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水按等比例稀釋如 2倍稀釋?zhuān)?倍稀釋 等，制備成一個(gè)至少包含三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液， 例如，0.5、0.25、0.125、0.06、 0.03Eu/ml系列或5、1、0.2、0.04Eu/ml系列，每

3、個(gè)標(biāo)準(zhǔn)濃度在檢測(cè)時(shí)最少要做三個(gè)平 行管，稀釋步驟參照凝膠法標(biāo)準(zhǔn)品稀釋步驟。 2. 2 . 2檢測(cè)軟件設(shè)置 用鼠標(biāo)點(diǎn)擊【新試驗(yàn)】出現(xiàn)【試驗(yàn)設(shè)置向?qū)А慨?huà)面，首先填寫(xiě)鯊試 f IUIL 岷了期拍訝骨MT網(wǎng)站- :MsZi.xTlETr 圖1 -Iffl M| - 曹E嚴(yán)；囂琴 *阿阿K14尊K事甘智主行*另害1膈*- 劑批號(hào)、內(nèi)毒素批號(hào)、檢查用水批號(hào)，選中【做新標(biāo)準(zhǔn)曲線】 ，填寫(xiě)初始濃度、稀釋梯度、 濃度點(diǎn)數(shù)、平行管數(shù)，然后用鼠標(biāo)點(diǎn)擊【自動(dòng)設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線】 ，在表格中出現(xiàn)所設(shè)置的數(shù)據(jù)。 鼠標(biāo)點(diǎn)擊【陰陽(yáng)性對(duì)照】畫(huà)面，選中【陰性對(duì)照】 ，填寫(xiě)平行管數(shù)， 鼠標(biāo)點(diǎn)擊【試管位置選擇】，點(diǎn)擊【自動(dòng)選擇】后點(diǎn)擊【開(kāi)

4、始檢測(cè)】 ，程序設(shè)置完畢, 該文件存在【檢品管理中心】的標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)，該標(biāo)準(zhǔn)曲線以【鯊試劑批號(hào)】 +【內(nèi)毒素批號(hào)】 +【當(dāng)前時(shí)間】作為文件名存盤(pán)，也可在畫(huà)面底列【保存文件名】處改動(dòng)，自行輸入名稱(chēng)， 但要事先建好該文件夾。 出現(xiàn)如下畫(huà)面: ZE7EARM-#4E!ZIS i :(S *開(kāi)叫 EF S端A K 的- U,EM，E II 雄 m印內(nèi)內(nèi)#5； - X t34 忐iz c= 圖5 該文件存在【檢品管理中心】的標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)。該標(biāo)準(zhǔn)曲線以【鯊試劑批號(hào)】 +【內(nèi)毒素 批號(hào)】+【當(dāng)前時(shí)間】作為文件名存盤(pán)，也可在畫(huà)面底列【保存文件名】處改動(dòng)，自行輸入 名稱(chēng)，但要事先建好該文件夾。 2. 2. 3試驗(yàn)檢

5、測(cè) 2.2.3.1 溶解分狀裝鯊試劑 根據(jù)用量溶解鯊試劑，如使用多支鯊試劑，將溶解的鯊試劑 混合在一起，分裝到無(wú)熱原的儀器專(zhuān)用檢測(cè)管內(nèi)，每支檢測(cè)管內(nèi) 0.1ml 要求沒(méi)有氣泡。 2.2.3.2 加樣取稀釋好的內(nèi)毒素系列濃度溶液，根據(jù)所設(shè)定管數(shù)分別參加有鯊試劑的小 試管中0.1ml ,注意加樣前應(yīng)混合溶液 30秒，且每個(gè)濃度點(diǎn)加樣前應(yīng)更換加樣頭。另取細(xì) 菌內(nèi)毒素檢查用水做陰性對(duì)照。 LEk LCDD 記景 也1 林二&歇 批號(hào) 福程伯斯附恫內(nèi) fW KE收垣 i 3.眄塞標(biāo) 2眄章標(biāo)惟 ir- 1 日眄章標(biāo)佐 p 125- IP 125 p. Cffi23 |p.35 pn 1 P a

6、圖3 圖4 當(dāng)?shù)姆_(kāi)檢二立件 ,，標(biāo)雁曲 tns.Tja._n I ooma LCD 責(zé) 加 F IBK 、 手 jguitm 財(cái)蜒.r 險(xiǎn)互 X I5t 柄 內(nèi) | j=：- 水 |由D3KI .DL 1 IQ LIM 有雁割攜 7 LgT-i+bLflC+tLflC*2+dLs|C*3 pEOD 菱空白？MS : 2.2.3.3 檢測(cè)每個(gè)濃度點(diǎn)在加完樣后應(yīng)立即用封口膜封口，放入細(xì)菌內(nèi)毒素測(cè)定儀設(shè)定 位置，儀器自動(dòng)開(kāi)始檢測(cè)。 待標(biāo)準(zhǔn)曲線最后一個(gè)濃度的 ODf直超過(guò)預(yù)設(shè)值后，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊【手 動(dòng)停止檢測(cè)】，停止數(shù)據(jù)采集。點(diǎn)擊標(biāo)準(zhǔn)曲線坐標(biāo)畫(huà)面，生成并儲(chǔ)存標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出相關(guān) 系數(shù)。 2.2.3.4

7、 試驗(yàn)報(bào)告打印 點(diǎn)擊【報(bào)告打印預(yù)覽】，在報(bào)告打印預(yù)覽畫(huà)面點(diǎn)擊【打印】即可。 圖6 2. 3供試品干擾預(yù)試驗(yàn) 2. 3. 1供試品溶液制備：將供試品溶液用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水稀釋成所選擇的系列濃度， 同時(shí)制備系列濃度的供試品陽(yáng)性管和陽(yáng)性管， 供試品陽(yáng)性管外加內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品濃度和陽(yáng)性管 標(biāo)準(zhǔn)品濃度相同，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為所選用標(biāo)準(zhǔn)曲線的中間濃度。 2. 3. 2檢測(cè)軟件設(shè)置 用鼠標(biāo)點(diǎn)擊【新實(shí)驗(yàn)】出現(xiàn)試驗(yàn)向?qū)М?huà)面，首先填寫(xiě)鯊試劑批號(hào)、 內(nèi)毒素批號(hào)、檢查用水批號(hào)，點(diǎn)擊【供試品設(shè)置】 ，選擇供試品名稱(chēng)，所做供試品管的稀釋 倍數(shù)；填寫(xiě)供試品批號(hào)、 稀釋倍數(shù)所選擇的系列濃度最小稀釋倍數(shù) 、平行管數(shù)。選中【回 收率管】

8、，填寫(xiě)外加內(nèi)毒素濃度、供試品稀釋組數(shù)、稀釋梯度，點(diǎn)擊自動(dòng)設(shè)置，在表格中 出現(xiàn)所設(shè)置數(shù)據(jù)，例如【稀釋倍數(shù)】為 10;【供試品稀釋梯度】為 2;【供試品稀釋組數(shù)】為 4。那表格顯示供試品10 , 20, 40, 80四個(gè)稀釋倍數(shù)下回收率管及供試品管的試驗(yàn)設(shè)置。如 測(cè)定單一濃度的試驗(yàn)，【供試品稀釋組數(shù)】填寫(xiě)【1】。 圖7 鼠標(biāo)點(diǎn)擊【陰陽(yáng)性對(duì)照】畫(huà)面，選中【陰性對(duì)照】 ，填寫(xiě)平行管數(shù)，選中【陽(yáng)性對(duì)照】，填寫(xiě) 平行管數(shù)。鼠標(biāo)點(diǎn)擊【試管位置選擇】 ，點(diǎn)擊【自動(dòng)選擇】后點(diǎn)擊【開(kāi)始檢測(cè)】 ，程序設(shè)置 完畢。文件存在所選的【供試品名稱(chēng)】目錄下，以【供試品批號(hào) +當(dāng)前時(shí)間】為該試驗(yàn)文件 名。標(biāo)準(zhǔn)曲線試驗(yàn)可以和供試

9、品試驗(yàn)一同進(jìn)行，在軟件設(shè)置時(shí)，進(jìn)入新試驗(yàn)畫(huà)面后，首先按 照標(biāo)準(zhǔn)曲線試驗(yàn)設(shè)置2.2.2 ，再進(jìn)入供試品設(shè)置2.3.2 。 2.3.3試驗(yàn)檢測(cè) 根據(jù)用量溶解鯊試劑，如使用多只鯊試劑將溶解的鯊試劑混合在一起， 分裝到無(wú)熱原的儀器專(zhuān)用檢測(cè)管內(nèi)，每只檢測(cè)管內(nèi) 0.1ml 要求沒(méi)有氣泡。取稀釋好的供 試品系列濃度溶液、供試品陽(yáng)性系列溶液、陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品溶液，根據(jù)所設(shè)定平行管數(shù)分別參加 有鯊試劑的小試管中 0.2ml 沒(méi)有氣泡，注意加樣前應(yīng)混合溶液 30秒，且每個(gè)濃度點(diǎn)加樣 前應(yīng)更換加樣頭。另取細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水做陰性對(duì)照， 每個(gè)濃度點(diǎn)在加完樣后應(yīng)立即用封 口膜封口，放入分析儀設(shè)定位置，儀器自動(dòng)開(kāi)始檢測(cè)。試驗(yàn)完

10、成后，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊【手動(dòng)停止 檢測(cè)】，停止數(shù)據(jù)采集。在【標(biāo)準(zhǔn)曲線】處選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線后，計(jì)算機(jī)自動(dòng)計(jì)算出結(jié)果。 2. 3. 4試驗(yàn)報(bào)告打?。菏髽?biāo)點(diǎn)擊【報(bào)告打印預(yù)覽】 ，在報(bào)告打印預(yù)覽畫(huà)面點(diǎn)擊【打印】即 可。 2.4供試品檢查測(cè)定 2.4.1供試品溶液制備 根據(jù)干擾預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，將供試品稀釋到無(wú)干擾濃度，同時(shí)制備該濃 度的供試品陽(yáng)性溶液和陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品溶液， 供試品陽(yáng)性溶液外加內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品濃度和陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn) 品濃度相同，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為所選用標(biāo)準(zhǔn)曲線的中間濃度。 2.4.2檢測(cè)軟件設(shè)置 點(diǎn)擊【新試驗(yàn)】出現(xiàn)試驗(yàn)向?qū)М?huà)面，首先填寫(xiě)賞試劑批號(hào)、內(nèi)毒素 批號(hào)、檢查用水批號(hào)，點(diǎn)擊【供試品設(shè)置】 ，選擇供試品名稱(chēng)，所做供試品管

11、的稀釋倍數(shù)； 填寫(xiě)供試品批號(hào)、稀釋倍數(shù)平行管數(shù)。選中【回收率管】 ，填寫(xiě)外加內(nèi)毒素濃度、供試品 稀釋組數(shù)、【供試品稀釋組數(shù)】填寫(xiě)“ 1。，點(diǎn)擊自動(dòng)設(shè)置，在表格中出現(xiàn)所設(shè)置數(shù)據(jù)。如果 有兩個(gè)或兩個(gè)以上批號(hào)供試品同時(shí)檢測(cè)， 在第一個(gè)批號(hào)設(shè)置完成后，更改供試品批號(hào)，點(diǎn)擊 自動(dòng)設(shè)置，重復(fù)以上步驟至所有批號(hào)供試品設(shè)置完成。 如果有兩個(gè)或兩個(gè)以上不同供試品同 時(shí)檢測(cè)，在第一個(gè)批號(hào)設(shè)置完成后，更改供試品名稱(chēng)、批號(hào)、稀釋倍數(shù)，點(diǎn)擊自動(dòng)設(shè)置，重 復(fù)以上步驟至所有供試品設(shè)置完成。鼠標(biāo)點(diǎn)擊【陰陽(yáng)性對(duì)照】畫(huà)面，選中【陰性對(duì)照】 ，填 寫(xiě)平行管數(shù)，選中【陽(yáng)性對(duì)照】，填寫(xiě)平行管數(shù)。鼠標(biāo)點(diǎn)擊【試管位置選擇】 ，點(diǎn)擊【自動(dòng)

12、選擇】后點(diǎn)擊【開(kāi)始檢測(cè)】，程序設(shè)置完畢。文件存在最后設(shè)置的【供試品名稱(chēng)】目錄下， 以【供試品批號(hào)+當(dāng)前時(shí)間】為該試驗(yàn)文件名。 圖8 2.4.3試驗(yàn)檢測(cè) 2.4.3.1 溶解分裝鯊試劑 根據(jù)用量溶解鯊試劑，將溶解的鯊試劑混合在一起，分裝到無(wú) 熱原的儀器專(zhuān)用檢測(cè)管內(nèi)，每只檢測(cè)管內(nèi) 0.1ml 沒(méi)有氣泡。 2.4.3.2 加樣 取稀釋好的供試品溶液、供試品陽(yáng)性溶液、陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品溶液，根據(jù)所設(shè)定 平行管數(shù)分別參加有鯊試劑的小試管中 0.1ml或0.2ml 沒(méi)有氣泡，注意加樣前應(yīng)混合溶 液30秒，且每個(gè)濃度加樣前應(yīng)更換加樣頭。另取細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水做陰性對(duì)照。 2.4.3.3 檢測(cè)每個(gè)供試品在加完樣后應(yīng)立

13、即用封口膜封口，放入細(xì)菌內(nèi)毒素測(cè)定儀設(shè)定 位置，儀器自動(dòng)開(kāi)始檢測(cè)。試驗(yàn)完成后，點(diǎn)擊【手動(dòng)停止檢測(cè)】 ，停止數(shù)據(jù)采集。在【標(biāo)準(zhǔn) 曲線】處選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線后，計(jì)算機(jī)自動(dòng)計(jì)算出結(jié)果。 2.4.4 試驗(yàn)報(bào)告打印 用鼠標(biāo)點(diǎn)擊【報(bào)告打印預(yù)覽】，在報(bào)告打印預(yù)覽畫(huà)面點(diǎn)擊【打印】 即可。 2.5 多任務(wù)同時(shí)工作 EasyBET檢測(cè)軟件內(nèi)毒素分析儀檢測(cè)孔位足夠時(shí)， 可以同時(shí)進(jìn)行多 個(gè)試驗(yàn)。在一個(gè)試驗(yàn)完成設(shè)置后，可以重新開(kāi)始另一個(gè)試驗(yàn)的設(shè)置。在試驗(yàn)運(yùn)行過(guò)程中 ，還 可以翻開(kāi)以前的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析查看。 2. 6儀器參數(shù)設(shè)置 在主畫(huà)面中點(diǎn)擊右上角的儀器溫度顯示圖片， 進(jìn)入儀器設(shè)置畫(huà)面， 在 該畫(huà)面中還可以對(duì)儀器作 3Q認(rèn)

14、證等試驗(yàn)，如圖 9所示，選擇儀器型號(hào)和通信端口，如果該 兩項(xiàng)的內(nèi)容錯(cuò)誤將無(wú)法進(jìn)行試驗(yàn)。 根據(jù)所檢測(cè)的供試品的顏色決定選擇檢測(cè)波長(zhǎng)， 如果為無(wú) 色透明的供試品選擇 450nm如果供試品帶有黃色可以選擇 660nm,消除供試品顏色對(duì)檢測(cè) 的干擾。 璀役翳型號(hào) |CnL T IBETTE | 朋口皿 -| 狎*聳;暴皓Win祝 p IM 心.二1 圖9 2.7 觀察分析反響曲線 在試驗(yàn)的過(guò)程中和試驗(yàn)結(jié)束后數(shù)據(jù)分析時(shí)可以觀察每一個(gè)試管 的反響曲線，圖10中的反響曲線為內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品的正常反響曲線，如果供試品中存在的干 擾成分未被排除，它的反響曲線必定有所變化， 該軟件提供了多種曲線顯示分析方法， 其中 反響速率法可以區(qū)別出供試品中是否有葡聚糖。 另外，根據(jù)使用的不同鯊試劑， 要適當(dāng)調(diào)整 顯示幅度、零化期時(shí)間、預(yù)設(shè) OD直，以適應(yīng)該種鯊試劑的反響特性。 3、儀器維護(hù)保養(yǎng) 3. 1試管檢測(cè)器的維護(hù)保養(yǎng) 測(cè)定儀主機(jī)的試管檢測(cè)器是整個(gè)設(shè)備的關(guān)鍵， 保證檢測(cè)孔內(nèi)清潔至關(guān)重要，防止塵土落 入，應(yīng)及時(shí)將防塵蓋蓋好，如果有異物落入孔中應(yīng)小心將其取出，防止賭塞光電檢測(cè)孔。 3. 2玻璃實(shí)驗(yàn)器材除熱原的可靠方法 a 將玻璃實(shí)驗(yàn)器材試管、吸頭等放入重銘酸鉀濃硫酸洗液中浸泡 4個(gè)小時(shí)以上。 b 取出實(shí)驗(yàn)器材用蒸e留水反復(fù)沖洗 8遍， c 用“三效熱原滅火劑水溶液浸泡 12個(gè)小時(shí)或在超