EMEA臨床試驗(yàn)用生物技術(shù)藥物病毒安全性評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則

1、欄目生物制品評(píng)價(jià) >>生物制品質(zhì)量控制標(biāo)題EMEA臨床試驗(yàn)用生物技術(shù)藥物病毒安全性評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則作者李敏羅建輝部門審評(píng)五部正文內(nèi)容EMEA臨床試驗(yàn)用生物技術(shù)藥物病毒安全性評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則譯自歐盟發(fā)布的guideline on virus safety evaluation ofbiotechnogical investigational medicinal products審評(píng)五部李敏羅建輝關(guān)鍵詞：病毒安全性臨床試驗(yàn)臨床試驗(yàn)研究用藥（IMPs）譯稿說明本文系國外指導(dǎo)原則的中文譯稿，翻譯自 2009年2月1日由歐盟頒布執(zhí)行的 "Guideline on virus safety

2、evaluation of biotechnogical investigationalmedicinal products，"意在向關(guān)注國內(nèi)外同類技術(shù)問題評(píng)價(jià)要求新動(dòng)向的業(yè)界人士提供一個(gè)信息，可作為國內(nèi)研究過程中科學(xué)技術(shù)相關(guān)層面的借鑒，但不代 表藥審中心出臺(tái)的生物技術(shù)類藥品指導(dǎo)原則。執(zhí)行概要本文件為臨床試驗(yàn)用生物制品病毒安全性提供科學(xué)性指導(dǎo)原則，該指導(dǎo)原則包括以下內(nèi)容:1）臨床前及臨床試驗(yàn)階段所應(yīng)完成病毒安全性評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)及其范圍。2）可作為參考內(nèi)容用于病毒安全性評(píng)價(jià)的內(nèi)部經(jīng)驗(yàn)的范圍。3）安全性評(píng)價(jià)中應(yīng)納入的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。1、簡介確保生物制品的病毒安全性是一個(gè)復(fù)雜的過程，可靠的IMP病毒

3、安全性評(píng)價(jià)是非常關(guān)鍵的。本指導(dǎo)原則為人用生物制品申報(bào)臨床時(shí)應(yīng)提交的病毒安全性研究數(shù)據(jù)及資料提供建議。本原則參考 ICH Q5A （見參考文獻(xiàn)）制定，ICH Q5A定義了藥品上市申請(qǐng)（MAA）時(shí)應(yīng)提供的研究數(shù)據(jù)。盡管 ICH Q5A并未提供專供臨床階 段用生物制品的相關(guān)指導(dǎo)原則，但其基本思想是恰當(dāng)?shù)那疫m用于本指導(dǎo)原則的。本指導(dǎo)原則提供了一種經(jīng)協(xié)約認(rèn)可的IMPs病毒安全性評(píng)價(jià)方法，同時(shí)適用于整個(gè)歐盟范圍內(nèi)的藥品制造商和監(jiān)管部門。本指導(dǎo)原則尤其有益于指導(dǎo)多 中心臨床研究，包括涉及多個(gè)國家參與的國際多中心臨床試驗(yàn)。2、范圍本指導(dǎo)原則適用于由按照 Q5A要求建立的人源或動(dòng)物源細(xì)胞庫經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)制備的人用生

4、物技術(shù)類 IMPs。許多IMPs源于已得到良好認(rèn)知的嚙齒動(dòng)物細(xì)胞系如CHO、NS0或SP2/0，但目前仍有一系列其它細(xì)胞系在使用和建立過程中， 對(duì)于這些細(xì)胞系應(yīng)該具體情況具體分析（case-by-case ）。本指導(dǎo)原則適用于單克隆抗體和包括重組亞單位疫苗在內(nèi)的DNA重組類IMPs的病毒安全性評(píng)價(jià)。本指導(dǎo)原則不適用于重組病毒或細(xì)菌類IMPs （復(fù)制型和非復(fù)制型）、減毒活疫苗或滅活疫苗的病毒安全性評(píng)價(jià)。來源于體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的IMPs亦不在本指導(dǎo)原則適用范圍內(nèi)。本指導(dǎo)原則概述了適用于臨床試驗(yàn)任一階段的IMPs病毒安全性要求。本指導(dǎo)原則不適用于僅用于臨床前研究的IMPs評(píng)價(jià)。ICH Q5A提供了

5、用于上市申請(qǐng)（MAA ）所需研究數(shù)據(jù)的要求。3、法規(guī)基礎(chǔ)歐盟的臨床試驗(yàn)受 指令2001/20/EC " （Directive 2001/20/EC ,參見參考文 獻(xiàn)）的監(jiān)控，保證臨床試驗(yàn)研究用藥按照GMP規(guī)范制造是各成員國應(yīng)擔(dān)負(fù)的責(zé)任，上述均是臨床試驗(yàn)研究用藥評(píng)價(jià)所要求的。4、指導(dǎo)原則正文4.1 一般原則生物技術(shù)類IMPs病毒安全性研究的目的是為證明一個(gè)可接受的、能保證 臨床受試者安全性的病毒安全性水平。一個(gè)獲證上市生物制品的病毒安全性由三種互補(bǔ)的途徑加以確保，包括：1）細(xì)胞系的篩選和檢測(cè)，其他人源或動(dòng)物源性原材料的篩選和病毒因子污染檢測(cè)；2）下游工藝清除感染性病毒能力的判定； 3）

6、在適宜的步驟進(jìn)行產(chǎn)品病毒污染的檢測(cè)（參見ICH Q5A ）。根據(jù)生物技術(shù)類IMP生產(chǎn)工藝及產(chǎn)品自身的性質(zhì)特點(diǎn)，可以預(yù)期會(huì)存在較 上市批準(zhǔn)要求簡化的臨床階段病毒安全性研究，這些簡化表現(xiàn)在：第一，生產(chǎn) 終點(diǎn)對(duì)生產(chǎn)細(xì)胞/收獲液（unprocessed bulk ）的病毒檢測(cè)（見 4.2.3部分）； 第二，病毒去除驗(yàn)證（見 4.2.4部分）。這種簡化程序僅適用于ICH Q5A定義 的類型A”或 類型B”的細(xì)胞系。內(nèi)部經(jīng)驗(yàn)（見 4.2.4部分）的提供也將有助于 病毒去除研究資料的簡化。除提供研究數(shù)據(jù)外，尚需提供以下包括下述幾個(gè)或全部要素的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：“田胞系的性質(zhì)和歷史；“田胞系特征的認(rèn)知程度； 生產(chǎn)中人

7、源和/或動(dòng)物源原材料的使用和控制情況； 潛在的產(chǎn)品暴露于外源污染的可能性； 生產(chǎn)商采用該細(xì)胞系進(jìn)行生產(chǎn)的經(jīng)驗(yàn)； 特定病毒去除工藝步驟的使用經(jīng)驗(yàn)； 已發(fā)表的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)。4.2 保證生物技術(shù)類IMPs的病毒安全性4.2.1 1細(xì)胞系認(rèn)證：病毒檢測(cè)臨床I期實(shí)驗(yàn)前應(yīng)按照 Q5A要求進(jìn)行主細(xì)胞庫（MCB ）病毒污染的檢測(cè)。工作細(xì)胞庫（WCB ）可能在臨床試驗(yàn)進(jìn)行期間才建立，因此，對(duì)一些早期 臨床使用的IMPs而言，使用當(dāng)時(shí) WCB尚未建立。一旦 WCB建立，第一代WCB應(yīng)按照ICH Q5A要求進(jìn)行檢測(cè)。然而，如果按照 4.2.3部分/表1要求進(jìn) 行收獲液的檢測(cè)，則不要求對(duì)達(dá)到體外細(xì)胞培養(yǎng)代次的細(xì)胞進(jìn)行病毒

8、安全性檢 測(cè)。由于目前所使用的大多數(shù)細(xì)胞系均含有內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒或病毒顆粒，且 這些逆轉(zhuǎn)錄病毒或病毒樣顆粒仍有可能在新的細(xì)胞系中出現(xiàn)，細(xì)胞檢測(cè)中對(duì)逆 轉(zhuǎn)錄病毒或病毒顆粒的存在應(yīng)予以特別關(guān)注。4.2.2 生物來源的原材料IMPs的病毒安全性需考慮用于生產(chǎn)的生物來源（尤其是人源或動(dòng)物源）的原材料的安全性。一種以風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估為基礎(chǔ)的原材料病毒安全性評(píng)估方法是可行 的，該風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估注重原材料的類型和來源，原材料的工藝條件及檢測(cè)，該類型 原材料在藥品生產(chǎn)中的應(yīng)用背景，收獲液的檢測(cè)（參見 4.2.3部分）。申報(bào)單位應(yīng)提供合適的關(guān)于生物源性原材料病毒安全性的資料。本部分參考了牛血清相關(guān)指導(dǎo)原則和盡可能降低動(dòng)物海綿

9、樣腦組織病變傳播風(fēng)險(xiǎn)”的指導(dǎo)原則（見參考文獻(xiàn)）。4.2.3 收獲液的病毒檢測(cè)與所處的臨床試驗(yàn)階段無關(guān)，每批用于臨床試驗(yàn)的收獲液均應(yīng)按照Q5A的要求進(jìn)行檢測(cè)。如果適用，檢測(cè)樣本應(yīng)包括細(xì)胞，且檢測(cè)應(yīng)包括采用體外法和基于PCR原理方法進(jìn)行的外源病毒因子和逆轉(zhuǎn)錄病毒樣顆粒的評(píng)價(jià)。CHO細(xì)胞系來源的原液無需進(jìn)行更多的檢測(cè)。對(duì)于NS0或Sp2/0細(xì)胞系進(jìn)行的生產(chǎn)，應(yīng)進(jìn)行一次性的感染性逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測(cè)，如果存在生產(chǎn)用細(xì)胞系的重大變更（如生產(chǎn)規(guī)模），則應(yīng)重新進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)于采用其他種類細(xì)胞系進(jìn)行的生產(chǎn)，需進(jìn)行一次性的感染性逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測(cè)和體內(nèi)法病毒檢測(cè)（根據(jù)ICH Q5A 3.2.3部分），如果存在生產(chǎn)用細(xì)胞系的

10、重大變更（如生產(chǎn)規(guī)模），則應(yīng)重新進(jìn)行檢測(cè)。這些檢測(cè)要求見表 1。如果細(xì)胞系適于鼠細(xì)小病毒（ MMV）的生長，則應(yīng)考慮 MMV的檢測(cè)。在進(jìn)行收獲液檢測(cè)時(shí)，應(yīng)結(jié)合細(xì)胞系來源和生產(chǎn)用原材料的病毒安全性（參見4.2.2部分）進(jìn)行考慮。如果應(yīng)用了人源或動(dòng)物源的原材料如牛血清，則可能會(huì)要求更多的特殊因子檢測(cè)。表1.收獲液的檢測(cè)要求體外法檢測(cè)感染性逆轉(zhuǎn)錄病 毒檢測(cè)*體內(nèi)法檢測(cè)*CHO細(xì)胞系需要，所有批次 收獲液§無需無需NS0和 Sp2/0需要，所有批次 收獲液§需要，給定規(guī)模卜 的一次性檢測(cè)無需其他類型 細(xì)胞系需要，所有批次 收獲液§需要，給定規(guī)模卜 的一次性檢測(cè)需要，給定規(guī)

11、模卜 的一次性檢測(cè)*如果可能，檢測(cè)樣品應(yīng)包括細(xì)胞或細(xì)胞碎片以進(jìn)行細(xì)胞相關(guān)病毒檢測(cè)。對(duì)于灌注式細(xì)胞培養(yǎng)，生產(chǎn)商應(yīng)確定并證明最適合的樣品（含細(xì)胞的樣品）收集步驟，收集超出批量生產(chǎn)代次的細(xì)胞檢測(cè)樣品也是可行的；在上述情況下，應(yīng)證明采用分析方法的合理性；如果已有敏感度更高的方法可表明感性逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測(cè)結(jié)果為陰性，則感染性逆轉(zhuǎn)錄病毒的檢測(cè)可省略。雙需在研發(fā)的特定階段對(duì)前三批原液進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒的檢測(cè)（如果制備批次不足三批，也可用更少批次）。4.2.4 病毒清除（virus reduction ）驗(yàn)證病毒清除驗(yàn)證的目的有兩個(gè)，首先，進(jìn)行可被視為有效滅活/去除病毒工藝步驟的特征描述和評(píng)價(jià)； 其

12、次，進(jìn)行病毒/病毒樣顆粒去除總體水平的定量分析， 如內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒。需綜合細(xì)胞系的性質(zhì)、生物源性原材料的應(yīng)用情況 和可有效滅活/去除病毒工藝步驟的性質(zhì)，按照具體情況具體分析的方法進(jìn)行病 毒清除驗(yàn)證。跳出生產(chǎn)細(xì)胞系的直接病毒檢測(cè)結(jié)果來看，囿于病毒檢測(cè)方法的局限性，IMP依然存在潛在的由原始細(xì)胞或生產(chǎn)細(xì)胞培養(yǎng)過程中由生物源性原材料帶來的未知病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)。因而，即便在不使用生物源性原材料且細(xì)胞系已經(jīng)全面檢測(cè)的情況下，仍應(yīng)進(jìn)行IMP下游生產(chǎn)工藝病毒滅活/去除效果的評(píng)價(jià)。病毒清除驗(yàn)證應(yīng)在臨床試驗(yàn)開始前進(jìn)行。潛在的病毒可能是有包膜病毒或無包膜病毒，病毒清除研究應(yīng)包括有包膜病毒和小型的無包膜病毒，最

13、好為細(xì)小病毒。特別指出，必須可證明所有已知收獲液中存在的病毒或病毒顆粒均可被下游生產(chǎn)工藝有效滅活 /去除。B型細(xì)胞（參見 Q5A定義）含有內(nèi)源性逆轉(zhuǎn) 錄病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒樣顆粒， 故在病毒滅活/去除驗(yàn)證中應(yīng)采用逆轉(zhuǎn)錄病毒證明 收獲液中存在的顆?？杀煌耆宄１M管下述的耐用性研究（如工藝參數(shù)對(duì)病毒清除的影響）并非所有情況下均要求進(jìn)行，但病毒清除研究仍需按照 Q5A的原則進(jìn)行。需對(duì)有病毒清除作用 的產(chǎn)品純化步驟進(jìn)行描述，評(píng)定這些步驟的滅活/去除潛在病毒污染物的能力時(shí) 需考慮生產(chǎn)細(xì)胞系的病毒安全性（如，內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄污染物的類型和水平）， 生產(chǎn)過程中人源和動(dòng)物源性原材料的使用和可能的污染水平。人用藥物委

14、員會(huì)（CHMP ）在病毒驗(yàn)證研究指導(dǎo)原則注解 ”中也提供了詳細(xì)有用的信息。鼓勵(lì)對(duì)一步以上的生產(chǎn)用工藝進(jìn)行病毒清除效果研究，同時(shí)，至少應(yīng)進(jìn)行兩個(gè)互補(bǔ)步驟（Orthogonal steps ）的評(píng)定?；パa(bǔ)步驟是指利用了不同作用機(jī)制進(jìn)行的病毒滅活/去除的工藝步驟，有效步驟標(biāo)準(zhǔn)見病毒驗(yàn)證研究指導(dǎo)原則注解”中的描述。不需要對(duì)預(yù)期沒有明顯病毒清除效果的工藝步驟進(jìn)行研究。有效病毒清除步驟的可重復(fù)性應(yīng)通過至少兩次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)予以證明。在驗(yàn)證研究進(jìn)行過程中，一旦生產(chǎn)條件可獲知，則應(yīng)在研究中采用相應(yīng)的工藝參數(shù)限度（如，最差狀況）。然而，在工藝研發(fā)過程中，新生產(chǎn)工藝往往缺少對(duì)較差狀況限度的定義，在這種情況下，如果生產(chǎn)商

15、可以證明采用的設(shè)定 點(diǎn)可代表實(shí)際生產(chǎn)過程中的條件，則這樣的設(shè)定點(diǎn)也是合理的。可支持上述研究簡化的情況喊口果可以證明某一步驟可有效清除包括小的無包膜病毒（如細(xì)小病毒）在內(nèi)的廣譜病毒，則僅進(jìn)行單一步驟病毒滅活 /去除步驟的研究可能即為充分的。然而, 對(duì)于B型細(xì)胞，為證實(shí)存在充分的逆轉(zhuǎn)錄病毒去除能力，通常需要對(duì)多于一步 的工藝進(jìn)行評(píng)價(jià)。特定下游生產(chǎn)工藝步驟的前期應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)。在生產(chǎn)商采用已建立并經(jīng)鑒定的生產(chǎn)工藝生產(chǎn)同類產(chǎn)品時(shí)，由于采用的生產(chǎn)工藝相同，其它品種的病毒清除研究數(shù) 據(jù)可能適用于新產(chǎn)品的申報(bào)。通常，為采用該類型工藝步驟的數(shù)據(jù)，需對(duì)工藝步驟進(jìn)行謹(jǐn)慎的評(píng)估，包 括影響病毒清除工藝參數(shù)的全面研究。如果

16、可提供多于一個(gè)產(chǎn)品關(guān)于該步驟的 研究數(shù)據(jù)，則這些產(chǎn)品在該步驟的病毒清除效率應(yīng)是可比的。新產(chǎn)品和已確立 產(chǎn)品該特定工藝步驟前的生產(chǎn)工藝也應(yīng)采用相似的策略。應(yīng)提供前期內(nèi)部數(shù)據(jù)可用于新產(chǎn)品的依據(jù)。例如，只有當(dāng)特定工藝步驟前 所得到的中間產(chǎn)物有相似的生化性質(zhì)且為采用相同的純化工藝得到時(shí)，該工藝 步驟病毒清除數(shù)據(jù)才可能作為參考數(shù)據(jù)。生產(chǎn)商應(yīng)對(duì)作為借鑒數(shù)據(jù)用的工藝步 驟進(jìn)行工藝步驟關(guān)鍵分析和各自中間產(chǎn)物的組份分析。例如，對(duì)于過濾步驟， 包括過濾的類型、單位過濾面積的上樣量、流速、壓力和病毒過濾步驟中間產(chǎn) 物的成分；對(duì)于層析步驟，包括層析參數(shù)如柱床高度、上樣量、緩沖液成分、 中間產(chǎn)物成分和線性流速。此外，新

17、產(chǎn)品可能包含前期產(chǎn)品不含有的新成分，故需考慮這些成分對(duì)病毒清除效果的影響。提供的分析應(yīng)足夠證明在兩種情況 下，已建立的工藝步驟在滅活 /去除病毒污染方面有相似的能力。如果工藝步驟的比較數(shù)據(jù)沒有足夠的信服力，或不能夠足以排除產(chǎn)品本身特定滅活 /去除潛在病毒能力的影響，則應(yīng)采用適宜的病毒進(jìn)行至少一次研究以確保該工藝步驟可以達(dá)到預(yù)期效果。如果工藝的生產(chǎn)性能是明顯不同的，如采用相同的設(shè)備得到了不同的層析圖譜，則如上述，對(duì)該步驟應(yīng)按照Q5A進(jìn)行驗(yàn)證研究。發(fā)表的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)有助于說明某工藝步驟病毒滅活/去除的可能性，并可能為其作用機(jī)理提供一定的線索，這些因素將促進(jìn)對(duì)關(guān)鍵工藝參數(shù)的探索和有待驗(yàn)證步驟最差狀況下工

18、藝參數(shù)限度的設(shè)定。盡管如此，病毒清除可能依賴于多種工藝參數(shù)和中間產(chǎn)物的具體組份。特定產(chǎn)品在引用已發(fā)表的病毒清除影響要素時(shí)，需要提供大量的關(guān)于工藝一致性、中間產(chǎn)物一致性的證明，且應(yīng)確定產(chǎn)品具體的工藝參數(shù)未影響病毒的清除效果。此外，工藝被賦予的清除能力可能僅針對(duì)選定的病毒（如層析步驟），因此，需對(duì)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行謹(jǐn)慎地評(píng)估。鑒于早期研發(fā)階段使用層析柱的專用性和生產(chǎn)批次的有限性，對(duì)IMPs生產(chǎn)來說，特定層析柱的再使用研究和清潔研究通常是不必要的。然而，一旦在IMPs生產(chǎn)中多次重復(fù)使用層析柱，則需要在病毒清除能力研究中考慮開展該項(xiàng)研究。病毒清除的驗(yàn)證IMPs生產(chǎn)的早期臨床階段（如 I期）研究數(shù)據(jù)可能應(yīng)用于

19、后續(xù)臨床中，然而，IMP研發(fā)過程中可能會(huì)引入較大的生產(chǎn)變更，必須考慮這些變更可能會(huì)直接或間接（由評(píng)價(jià)工藝步驟外的其它變更引起）影響病毒的清除能力。因此,一旦已有的數(shù)據(jù)無法反映后續(xù)臨床試驗(yàn)中使用的IMP生產(chǎn)狀況時(shí)，必需在開始下一階段臨床前進(jìn)行再評(píng)價(jià)。根據(jù)引入變更的類型，應(yīng)重新考慮病毒的選取，在必要的情況下，應(yīng)增加使用病毒的類型以提供可信的工藝清除病毒能力研究結(jié)果。即便在晚期擴(kuò)大的臨床試驗(yàn)（III期）中不需要按照Q5A指導(dǎo)原則進(jìn)行完整的驗(yàn)證，生產(chǎn)商應(yīng)證明所選用方法的合理性，其中應(yīng)包括對(duì)模型病毒和已經(jīng)評(píng)估工藝步驟的考慮。一旦最終生產(chǎn)和純化工藝建立后，應(yīng)按照Q5A進(jìn)行全面的病毒驗(yàn)證研究。4.2.5 分

20、析方法的描述和定性在起始原材料、中間產(chǎn)物病毒檢測(cè)或生產(chǎn)工藝病毒清除能力評(píng)估過程中可采用不同類型的分析方法。病毒檢測(cè)方法包括廣泛的基于多種指示細(xì)胞系細(xì)胞病變效應(yīng)（cpe）和紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)的體外法檢測(cè)、體內(nèi)法檢測(cè)和特定病毒檢測(cè)（如采用PCR方法）。針對(duì)逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測(cè)，可以采用透射電子顯微鏡 （TEM）, 不同細(xì)胞系的共培養(yǎng)和逆轉(zhuǎn)錄酶活性檢測(cè)（如可采用熒光產(chǎn)物增強(qiáng)逆轉(zhuǎn)錄酶活性檢測(cè)法（PERT ）。不依賴于臨床試驗(yàn)的階段，無論定性的還是定量的病毒檢測(cè)分析方法均應(yīng)進(jìn)行方法適用性的驗(yàn)證?；旧希琁CH Q5A第3.2章推薦的病毒檢測(cè)和鑒定方法”和第4章收獲液的病毒檢測(cè)”中的要求均為適用的。為清晰地理解分析

21、方法且明確其是如何被控制的，應(yīng)提供足夠詳細(xì)的分析步驟的描述，包括試劑、方法對(duì)照、檢測(cè)步驟和認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)，如果采用了概略步驟描述，在相應(yīng)處注明參考 文獻(xiàn)。針對(duì)用于細(xì)胞庫、其它起始生產(chǎn)原材料和收獲液病毒檢測(cè)的檢測(cè)方法，應(yīng)以表格的形式提供這些檢測(cè)方法的鑒定/驗(yàn)證結(jié)果概述，如采用適宜陽性/陰性對(duì)照確定的特異性、敏感性、定量限和檢測(cè)限等數(shù)值。無需提供關(guān)于這些檢測(cè)方 法的完整方法學(xué)鑒定報(bào)告，但仍需準(zhǔn)備好這些報(bào)告以備需要時(shí)提交。針對(duì)用于病毒清除研究的分析方法，應(yīng)提供完整的細(xì)節(jié)描述以證明該方法用于（模型）病毒顆粒定量是合適的，描述應(yīng)包括關(guān)于定量限的判定、特異性 的判定、方法固有的變異度、緩沖液 /基質(zhì)對(duì)病毒感染力

22、的干擾、可能影響選用 模型病毒對(duì)指示細(xì)胞感染能力的產(chǎn)品及緩沖液的細(xì)胞毒性分析等。4.3 病毒安全性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估除提供產(chǎn)品的病毒安全性數(shù)據(jù)及其推算結(jié)果外，在臨床試驗(yàn)注冊(cè)時(shí)還應(yīng)提供病毒安全性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，4.1、4.2.1和4.2.4節(jié)所提及的因素應(yīng)作為病毒安全性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的首要考慮要素。與 Q5A 一致，細(xì)胞系病毒因子檢測(cè)、所有人源或動(dòng) 物源性原材料的病毒因子檢測(cè)、病毒清除驗(yàn)證、在生產(chǎn)工藝適宜步驟中對(duì)產(chǎn)品 進(jìn)行感染性病毒污染排除的檢測(cè)均應(yīng)作為風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的考慮部分。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估應(yīng)包括每劑量中病毒顆粒數(shù)量的估計(jì)（參見ICH Q5A附錄5）,且應(yīng)包含對(duì)所有生產(chǎn)工藝步驟的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。特殊情況下，在對(duì)臨床試驗(yàn)病毒安全性綜合

23、評(píng)估時(shí)，進(jìn)行臨床參數(shù)（如適應(yīng)癥，給藥劑量，人群暴露量、研究持續(xù)時(shí)間和病人免疫狀態(tài)）的權(quán)衡也是合 理的。在這種情況下，需注意 I、II、III期臨床試驗(yàn)過程中一些參數(shù)是會(huì)發(fā)生改 變的。臨床參數(shù)不應(yīng)作為病毒安全性評(píng)估的決定因素，但其可能影響從病毒安 全性角度出發(fā)對(duì)臨床試驗(yàn)審批的最終結(jié)論。每種情況均應(yīng)具體情況具體分析。4.4 研發(fā)階段病毒安全性的再評(píng)價(jià)IMP研發(fā)過程中經(jīng)常引入工藝變更，且這些變更可能影響前期已確定的病毒安全性評(píng)價(jià)結(jié)果。一旦在病毒安全性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估已完成的工藝步驟引入了變更，生產(chǎn)商應(yīng)做相應(yīng)記錄。針對(duì)每次變更均應(yīng)考慮是否需要進(jìn)行病毒安全性風(fēng)險(xiǎn)的再評(píng)價(jià)。在某些情況下，可以明確引入的變更對(duì)病毒安

24、全性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)無影響，但如果該變更將帶來明確影響或其影響無法確定時(shí)，則需進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的再評(píng)價(jià)，且進(jìn)行必要的適當(dāng)?shù)脑囼?yàn)研究，這種情況下，應(yīng)考慮涉及保證病毒安全性 的所有因素。對(duì)于需要進(jìn)行病毒清除驗(yàn)證研究的變更，可參照 4.2.4.2部分再驗(yàn)證”的相 關(guān)要求。4.5 臨床試驗(yàn)注冊(cè)文件的格式應(yīng)認(rèn)真并清晰地提交確保病毒安全性的完整程序資料，如果存在任何與本指導(dǎo)原則提出的最低限度要求的偏差，均應(yīng)提供合理的依據(jù)。注冊(cè)文件格式與關(guān)于人用藥物臨床試驗(yàn)注冊(cè)的要求、重大變更通告和臨床試驗(yàn)終止公告的指導(dǎo)原則要求一致，應(yīng)包括一種特定的附件，例如附件2:附錄2.1.A, 2.1.A.2 ,外源試劑安全性評(píng)估，專門的 TS

25、E風(fēng)險(xiǎn)因素?cái)?shù)據(jù)，生物技術(shù)類IMPs和其它外源試劑的病毒安全性等。應(yīng)在附件中進(jìn)行所有數(shù)據(jù)的匯總，在借助盡量少主文件闡釋內(nèi)容的情況下仍保持本部分的獨(dú)立性和完整性。在需要的情況下，應(yīng)提供包括細(xì)胞系檢測(cè)和病毒清除研究原始數(shù)據(jù)的完整報(bào)告，確保評(píng)價(jià)過程中對(duì)IMP病毒安全性的最清晰理解。部分報(bào)告中的原始數(shù)據(jù)可有合同實(shí)驗(yàn)室或國際實(shí)驗(yàn)室提供。當(dāng)申請(qǐng)人使用前期的內(nèi)部研究數(shù)據(jù)時(shí)（如，來源于其他產(chǎn)品的數(shù)據(jù)），應(yīng)提供額外的文件，該文件內(nèi)容應(yīng)保證能夠進(jìn)行內(nèi)部數(shù)據(jù)的評(píng)價(jià)，并可證明內(nèi)部數(shù)據(jù)用于新產(chǎn)品的合理性或支持性。作為病毒安全性文件的一般性考慮，提交的信息應(yīng)考慮到申請(qǐng)人注意事項(xiàng)第2B卷，第II部分V:病毒文件”中陳述的項(xiàng)目

26、內(nèi)容。參考文獻(xiàn)（技術(shù)的和/或法規(guī)的）Directive 2001/20/EC of the European Parliament and of the Council of 4April 2001 on the approximation of the laws, regulations andadministrative provisions of the Member States relating to theimplementation of good clinical practice in the conduct of clinical trialson medicinal pr

27、oducts for human useICH Q5A: ICH harmonised tripartite guideline on Viral safety evaluationof biotechnology products derived from cell lines of human or animaloriginCHMP Note for guidance on virus validation studies: the design,contribution and interpretation ofstudies validating the inactivation and removal of vi