STP-V-計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案

1、STP-V-計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案 STP-7第1頁共6頁計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案 起草部門質(zhì)量部標(biāo)題計數(shù)培養(yǎng)基適用性 檢查驗證方案起草人日期審核人日期批準(zhǔn)人日期編號STP-V-原編號分 發(fā)部門質(zhì)量部目錄1 .驗證目的2 .參照標(biāo)準(zhǔn)3 .驗證項目4 .驗證小組及職責(zé)5 .合格標(biāo)準(zhǔn)6 .試驗材料：7 .菌液制備8 .菌液計數(shù)9 .適用性檢查10 .結(jié)論計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案 STP-V-第2頁共6頁1.驗證目的：細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗證的 目的是確認(rèn)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基適合細菌、霉菌及酵母菌數(shù)測

2、定。2.參照標(biāo)準(zhǔn):2010版中國藥典二部附錄 XI J微生物限度檢查法。3.驗證 項目：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查。4.驗證小組人員及職責(zé):4.1 驗證小組人員:小組人員職務(wù)姓名所在部門職務(wù)組長魏質(zhì)量部經(jīng)理組員錢質(zhì)量部質(zhì)量管理員組員袁質(zhì)量部檢驗員4.2 驗證人員職責(zé)及要求4.2.1 按驗證方案及相關(guān)文件實施驗證。4.2.2 認(rèn)真觀察并做好驗證原始記錄。4.2.3 對實施驗證的結(jié)果負責(zé)。4.3 驗證中各部門的職責(zé)4.3.1 驗證領(lǐng)導(dǎo)組職責(zé)4.3.1.1 制訂驗證總計劃，負責(zé)全公司驗證工作的管理4.3.1.2 確定驗證項目及驗證項目負責(zé)人。4.3.1.3 負責(zé)驗證方案的批準(zhǔn)工作

3、。4.3.1.4 負責(zé)驗證資料及結(jié)果的審核工作。4.3.1.5 負責(zé)驗證報告的批準(zhǔn)工作。4.3.2 驗證工作小組職責(zé)4.3.2.1 負責(zé)驗證方案的起草工作。4.3.2.2 參與驗證方案的討論、確認(rèn)工作。4.3.2.3 負責(zé)驗證方案的實施。4.3.2.4 負責(zé)驗證結(jié)果的分析、統(tǒng)計、報告工作。4.3.2.5 參與驗證結(jié)果的評價工作。計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案STP-7第3頁共6頁4.3,3.1負責(zé)公司驗證日常管理工作。4.3.3.2 負責(zé)驗證方案的審核工作。4.3.3.3 負責(zé)驗證過程中儀器、儀表、計量器具的校驗工作。4.3.3.4 負責(zé)檢驗儀器及檢驗方法的驗證。4.3.3.5 負責(zé)驗證中各項檢

4、測工作，提供驗證的檢驗記錄、檢驗報告，對驗證 過程中的各項檢驗工作負責(zé)。4.3.3.6 負責(zé)對驗證人員的培訓(xùn)、考核工作。4.3.3.7 負責(zé)驗證資料和報告的審核工作。4.3.3.8 負責(zé)驗證文件回收、歸檔管理工作。5 .合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致。6 .試驗材料：6.1. 被驗證產(chǎn)品：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基6.2. 儀器設(shè)備：6.2.1. SYQ-DSX-280B型手提式壓力蒸汽滅菌器6.2.2. SW-CJ-2A雙人凈化工作臺6.2.3. XSW-CJ-1A單人凈化操作臺6.2.4. HZMJ型霉

5、菌培養(yǎng)箱（23,28?）6.2.5. JC303-4 電熱恒溫培養(yǎng)箱（30,35?）6.2.6. 不銹鋼遠紅外烘箱6.2.7. 101-2A 電熱鼓風(fēng)干燥箱6.2.8. 波爐6.3. 驗證用培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂對照培養(yǎng)基計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案 STP-Y-第4頁共6頁玫瑰紅鈉瓊脂對照培養(yǎng)基酵母浸出粉陳葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基6.4. 驗證用菌株:（第代）驗證菌株 培養(yǎng)基 培養(yǎng)溫度 培養(yǎng)時間（小時）大腸埃希菌 營養(yǎng)肉湯30-35? 18-24金黃色葡萄球菌 營養(yǎng)肉湯30-35?1824枯草芽抱桿菌 營養(yǎng)肉湯30

6、35? 18-24白色念珠菌 改良馬丁培養(yǎng)基2328? 24-48黑曲霉菌 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基2328? 57（天）7 .菌液制備7.1. 接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、與枯草芽抱桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于30,35?培養(yǎng)18,24小時。取經(jīng)30,35?培養(yǎng)1824小時的大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、與枯草芽抱桿菌營養(yǎng)肉湯新鮮培養(yǎng)物1ml加入到9m10.9%無菌氯化鈉溶-6-7液中，10倍稀釋至1010約為50100cfu?m1的菌懸液備用。7.2. 接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中，于23,28?培養(yǎng)2448小時。取經(jīng)23,28?培養(yǎng)2448小時的白色念珠菌改良馬丁液

7、體培養(yǎng)物1ml加入到9ml0.9%-5無菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至10約為50100cfu?ml的菌懸液備用。7.3. 接種黑曲霉菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，于 23,28?培養(yǎng)5,7 天,加入3,5ml含0.05%(ml/ml)聚山梨脂80的0.9%無菌氯化鈉溶液，將抱子洗 脫。然后，用適宜方法吸出抱子懸液至無菌試管內(nèi)，用含 0.05%(ml/ml)聚山梨脂 80的0.9%無菌氯化鈉?§液制成每1ml含抱子數(shù)50,100cfu?ml的菌懸液備用。8.菌液計數(shù):(每種菌液接種2個平皿)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌與枯草芽抱桿菌分別取 1ml接種至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng) 基中，置3

8、0,35?培養(yǎng)48小時；白色念珠菌、黑曲霉分別取1ml接種至玫瑰紅鈉瓊 月旨培養(yǎng)基, 置23,28?培養(yǎng)72小時。菌落計數(shù)結(jié)果(2個平皿計數(shù)取平均值)見下表計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案 STP Y第5頁共6頁菌落計數(shù)結(jié)果(cfu?ml)-5-6-710稀釋10稀釋10稀釋試驗次數(shù)1 2 3 1 2 3 1 2 3大腸埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽抱桿菌白色念珠菌黑曲霉9 .適用性檢查：9.1. 取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽抱桿菌的菌液(50,100cfu/ml)各1ml,分別注入無菌平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，置30,35?培養(yǎng)48小時，計數(shù)；取

9、白色念珠菌、黑曲霉菌的菌 液(50,100cfu/ml)各1ml,分別注入無菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基， 每株試驗菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，置23,28?培養(yǎng)72小時，計數(shù)。9.2. 大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽抱桿菌的菌液(50,100cfu/ml)各1ml,分別注入無菌平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，置30,35?培養(yǎng)48小時，計數(shù)；取白色念珠菌、黑曲霉菌的 菌液(50,100cfu/ml)各1ml,分別注入無菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂對照培 養(yǎng)基，每株試驗菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，置23,28?培養(yǎng)72小時，計 數(shù)。9.3. 結(jié)果見附表10 .結(jié)論：計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案 STP Y第6頁共6頁附表1:計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗證記錄試驗時間年 月曰完成時間年 月曰供試品組對照培養(yǎng)基組回收率驗證菌