人用單克隆抗體質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則-DrugFutur0001

1、人用單克隆抗體質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則-DrugFutur本要點(diǎn)適用于供治療的體內(nèi)診斷用的利用雜交瘤技術(shù)制備的 單克隆抗體，適用于在人體內(nèi)應(yīng)用的利用重復(fù) DNA技術(shù)制備的基因工程抗 體一、雜交瘤技術(shù)制備的單克隆抗體(一)雜交瘤細(xì)胞1.親本細(xì)胞(1)骨髓瘤細(xì)胞SP2/0或其他適宜的骨髓瘤細(xì)胞系。應(yīng)為不合成或不分泌免疫球蛋 白鏈型，具有符合骨髓瘤細(xì)胞的染色體特點(diǎn)，并有明確的來(lái)源歷史及符合 要求的儲(chǔ)存條件。(2)免疫親代細(xì)胞經(jīng)抗原免疫的鼠脾B淋巴細(xì)胞或外周血B淋巴細(xì)胞。應(yīng)有明確的免疫原先源、性質(zhì)及動(dòng)物種系，免疫原詳細(xì)的制備過(guò)程。 適宜的免疫方案及免疫淋巴細(xì)胞制備的方法。2 .細(xì)胞融合與克隆化采納適宜的方

2、法進(jìn)行融合、選擇及克隆化。3 .雜交瘤細(xì)胞檢定(1)抗體分泌穩(wěn)固性連續(xù)克隆化后抗體陽(yáng)性率達(dá)100%,經(jīng)體外連續(xù)傳代3個(gè)月以上和 反復(fù)凍存、復(fù)蘇，細(xì)胞系能保持穩(wěn)固分泌特異性抗體。(2)細(xì)胞核學(xué)特點(diǎn)檢查細(xì)胞分裂中期染色體，應(yīng)符合雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)。4 .鼠源病毒檢查按附錄要求檢測(cè)鼠源病毒。5 .支原體檢查按現(xiàn)行中國(guó)藥典生物制品無(wú)菌試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行。6 .無(wú)菌試驗(yàn)按現(xiàn)行中國(guó)藥典生物制品無(wú)菌試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行。（二）單克隆抗體的檢定1 .免疫球蛋白類(lèi)及亞類(lèi)用免疫雙擴(kuò)散法或其他適宜的方法測(cè)定。2 .親和力用可靠、準(zhǔn)確的方法測(cè)定單克隆抗體（以下簡(jiǎn)稱(chēng)為單抗）的親和常 數(shù)或相對(duì)親和力。一樣情形下，關(guān)于免疫原為可溶性的單抗，

3、測(cè)其親和常 數(shù)，關(guān)于免疫原為顆粒性抗原的單抗，測(cè)其相對(duì)親和力。3 .特異性測(cè)定單抗對(duì)靶抗原的特異性；對(duì)多株單抗識(shí)別的抗原決定簇進(jìn)行有 關(guān)性分析。4 .交叉反應(yīng)按附錄要求。免疫組織化學(xué)法測(cè)定單抗與人體組織交叉反應(yīng)，用冰凍及石蠟包埋 的各種正常臟器組織測(cè)定。來(lái)源于腫瘤有關(guān)抗原的單抗應(yīng)進(jìn)行與各種腫瘤 組織的交叉反應(yīng)試驗(yàn)。5 .效價(jià)測(cè)定用適宜方法測(cè)定。（三）其他原材料1 .細(xì)胞培養(yǎng)用小牛血清支原體檢測(cè)應(yīng)為陰性。經(jīng)小量試驗(yàn)適于雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。2 .培養(yǎng)液應(yīng)有培養(yǎng)液來(lái)源，質(zhì)量指標(biāo)。3 .化學(xué)試劑規(guī)格應(yīng)達(dá)到分析純以上。二、基因工程抗體參考人用重組DNA制品質(zhì)量操縱技術(shù)指導(dǎo)原則和本指導(dǎo)原則 中的有關(guān)要求進(jìn)行。

4、三、細(xì)胞庫(kù)的建立應(yīng)分別建立原始細(xì)胞庫(kù)、主細(xì)胞庫(kù)、工作細(xì)胞庫(kù)的三級(jí)治理細(xì)胞庫(kù)，一樣 情形下主細(xì)胞庫(kù)來(lái)自原始細(xì)胞庫(kù)、工作細(xì)胞庫(kù)來(lái)自主細(xì)胞庫(kù)。各級(jí)細(xì)胞庫(kù) 應(yīng)有詳細(xì)的制備過(guò)程、檢定情形及治理規(guī)定等。四、單抗生產(chǎn)包括用小鼠腹水法和細(xì)胞培養(yǎng)法制備。（一）小鼠腹水法1 .小鼠制備腹水必需使用合格的 SPF級(jí)BACB/C小鼠或BACB/C和瑞士 小鼠雜交子一代。2 .動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施應(yīng)有有關(guān)部門(mén)頒發(fā)的二級(jí)以上合格證。3 .腹水制備取適量擴(kuò)增培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞注射小鼠腹腔制備腹水，小鼠能夠預(yù) 先用液體石蠟或降植烷等處理。（二）細(xì)胞培養(yǎng)法能夠采納發(fā)酵罐培養(yǎng)，亦可用細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)收集上清液制備單克隆抗體。培養(yǎng)

5、基用無(wú)牛血清或低牛血清培養(yǎng)基，不能用 -內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素。（三）抗體純化可采納鹽析法、分子篩層析、離子交換親和層析等適宜的方法。1.盡可能選用一些不引起免疫球蛋白聚合、變性等的純化方法及 條件。2 .應(yīng)驗(yàn)證所用的純化方法能去除可能存在的非目標(biāo)產(chǎn)物污染，如不需要的免疫球蛋白分子、宿主 DNA、用于生產(chǎn)腹水抗體的刺激物、內(nèi) 毒素、其它熱原質(zhì)、培養(yǎng)液成分或?qū)游鲋龀龀煞值取? .應(yīng)驗(yàn)證所用的純化方法能有效的去除/滅活病毒。4 .連續(xù)產(chǎn)生的各批產(chǎn)品必須符合質(zhì)檢要求，批間具有良好的重復(fù)性。5 .純化后處理必要時(shí)對(duì)純化后抗體采納適宜方法進(jìn)行處理。（四）半成品、成品制備五、檢定包括原液（小鼠腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清

6、液、純化抗體）、半成品及成 品的檢定等。（一）物理化學(xué)檢測(cè)1 .外觀液體制劑應(yīng)為接近無(wú)色微帶乳光的澄清液體，不應(yīng)含有異物、渾濁 或搖不散的沉淀。2 . pH 值電位法測(cè)定3 .蛋白質(zhì)含量的測(cè)定用Lowry法或其它適宜的方法測(cè)定。4 .純度測(cè)定（1）電泳法用還原和非還原條件SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法。掃描后免疫球蛋 白含量應(yīng)達(dá)到95%以上，二聚體w 10%。（2） HPLC 法純度應(yīng)A 95%。（3）多聚體測(cè)定用FPLC或HPLC法，用適宜的分子篩層析，多聚體應(yīng)W 10%。5 . DNA含量測(cè)定用DNA分子雜交法。每一劑量殘余鼠骨髓 DNA含量不高于100Pg6 .水分產(chǎn)品如為凍干制品，應(yīng)進(jìn)行殘

7、余水分測(cè)定，其含量應(yīng)w3%。（二）生物學(xué)檢定1 .活性及效價(jià)測(cè)定用適宜方法進(jìn)行。2 .鼠源病毒檢定同上鼠源病毒檢查。3 .無(wú)菌試驗(yàn)同上無(wú)菌試驗(yàn)。4 .支原體檢定同上支原體檢定。5 .安全試驗(yàn)用小白鼠和豚鼠進(jìn)行試驗(yàn)。6 .熱原質(zhì)試驗(yàn)按照現(xiàn)行版中國(guó)藥典生物制品熱原質(zhì)試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行。采納家兔 法時(shí)，家兔注射劑量=（人用劑量/50） *20*家兔體重（kg）。也可用賞試劑 法，1mg/mL蛋白濃度不應(yīng)檢測(cè)出有凝集活性。7 .專(zhuān)門(mén)毒性實(shí)驗(yàn)（三）非免疫球蛋白雜質(zhì)分析包括來(lái)源于細(xì)胞基質(zhì)、培養(yǎng)基和下游工藝的有關(guān)雜質(zhì)，采納適當(dāng)?shù)?技術(shù)和方法進(jìn)行分析檢測(cè)。六、經(jīng)修飾的單克隆抗體為了提升單克隆抗體在治療和體內(nèi)診斷中的

8、作用，常用單抗與毒 素、藥物、放射性核素或其它物質(zhì)偶連形成免疫結(jié)合物，或在同一段多胎 鏈包含非免疫球蛋白和免疫球蛋白序列的嵌合重組蛋白來(lái)獲得。研究者除 對(duì)前面提到的有關(guān)未偶連單克隆抗體（未修飾單克隆抗體）的要求外，還 應(yīng)提供下列內(nèi)容：（一）免疫結(jié)合物的構(gòu)建應(yīng)提供構(gòu)建免疫結(jié)合物所用試劑和過(guò)程的詳細(xì)資料，包括：1.描述與單克隆抗體連接的成分如：毒素、藥物、酶及細(xì)胞因子， 包括：所有成分的來(lái)源、結(jié)構(gòu)、制法、純度及特點(diǎn)。2 .制備免疫結(jié)合物所用化學(xué)試劑的描述，如連接劑和螯合劑。 這些資料應(yīng)該包括試劑來(lái)源、制備方法，以及合成或純化時(shí)殘留雜質(zhì)的測(cè)定等內(nèi)容。還應(yīng)提供合成反應(yīng)途徑的圖解，以及與免疫結(jié)合物中所用

9、化學(xué) 試劑毒性有關(guān)資料。3 .在確定成品的標(biāo)準(zhǔn)時(shí)應(yīng)第一確定該原料與抗體的平均結(jié)合 率及每個(gè)抗體被結(jié)合部分的數(shù)量，并揭示免疫球蛋白置換數(shù)量、效力和穩(wěn) 固性間的關(guān)系。4 .用重組DNA技術(shù)制備的制品（如來(lái)源于轉(zhuǎn)染細(xì)胞系或微生 物培養(yǎng)基，嵌合的、易形的，互補(bǔ)決定區(qū)CDR接合的及單鏈Fv抗體, 以及重組免疫結(jié)合物）應(yīng)提供構(gòu)建和置備過(guò)程的全部資料。重組免疫結(jié)合 物的穩(wěn)固性應(yīng)認(rèn)真研究。因聚合物形成構(gòu)形改變或變性而減弱了特異免疫 反應(yīng)性（如通過(guò)重組Fvs形成"雙抗"）可能導(dǎo)致藥代動(dòng)力學(xué)的改變和/或與 非靶組織結(jié)合。（二）免疫結(jié)合物的純度1.應(yīng)采取專(zhuān)門(mén)措施保證抗體盡可能無(wú)外源免疫球蛋白或非

10、免疫球 蛋白污染，因這些污染物質(zhì)在構(gòu)建免疫結(jié)合物過(guò)程中，能與核素、毒素或 藥物發(fā)生反應(yīng)。2 .應(yīng)規(guī)定最終產(chǎn)品中游離抗體或游離組分的限量。活性中間 體應(yīng)被滅活或去除。（三）免疫結(jié)合物的免疫反應(yīng)性，效力及穩(wěn)固性 毒素或藥物偶聯(lián)至抗體上會(huì)改變其中任一成分的活性。 1.應(yīng)采納適當(dāng)?shù)姆椒?；評(píng)估偶聯(lián)前后的免疫反應(yīng)性。3 .免疫結(jié)合物非免疫球蛋白成分的活性應(yīng)在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候用效 力試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行評(píng)估（例如，毒素、細(xì)胞因子或酶等），用于造影的放射性免 疫結(jié)合物除外。4 .免疫結(jié)合物構(gòu)建后，應(yīng)確定免疫反應(yīng)性變化的百分率限值， 并作為產(chǎn)品規(guī)格的組成部分。5 .應(yīng)通過(guò)在合并的人血清中37c無(wú)菌條件下孵育，來(lái)檢測(cè)免 疫結(jié)合物

11、在體外的穩(wěn)固性。如果所用抗凝劑可不能阻礙免疫結(jié)合物的穩(wěn)固 性，血漿能夠用來(lái)代替血清。通過(guò)規(guī)定間隔時(shí)刻分析樣品中完整免疫結(jié)合物及分解產(chǎn)物的濃度。應(yīng)詳細(xì)講明評(píng)估產(chǎn)品的穩(wěn)固性的條件及所用陰、陽(yáng) 對(duì)比。（四）與放射性核素偶聯(lián)單克隆抗體的專(zhuān)門(mén)咨詢(xún)題放免結(jié)合物應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)化的、嚴(yán)格操縱并通過(guò)驗(yàn)證的方法制備。應(yīng)建 立檢測(cè)游離同位素、結(jié)合單克隆抗體、標(biāo)記的非免疫球蛋白物質(zhì)的放射性 百分率的方法。1.放射性標(biāo)記單克隆抗體的初始研究用新藥申報(bào)包含連續(xù)3次放射標(biāo)記試生產(chǎn)的分析結(jié)果，應(yīng)證明所制備的產(chǎn)品未改變免疫特異性、無(wú)菌、 無(wú)熱原質(zhì)。放射性標(biāo)記試生產(chǎn)應(yīng)由在研究中對(duì)單克隆抗體進(jìn)行放射性標(biāo)記 及使用試劑的同一組人員進(jìn)行。2

12、 .制備免疫結(jié)合物時(shí)應(yīng)使用放射性藥品及同位素并應(yīng)提供其 無(wú)菌及無(wú)熱原質(zhì)的分析證書(shū)及橫向參比的信涵。3 .在標(biāo)記試生產(chǎn)過(guò)程中，應(yīng)測(cè)定最終產(chǎn)品中共價(jià)結(jié)合的和游 離的同位素的濃度，以及標(biāo)記試劑及其分解產(chǎn)物的殘留水平。4 .應(yīng)描述給每一個(gè)病人應(yīng)用前后進(jìn)行的質(zhì)控試驗(yàn)。5 .適當(dāng)?shù)臅r(shí)候，應(yīng)檢測(cè)免疫結(jié)合物形成膠體的情形，并對(duì)其 進(jìn)行限定。6 .有關(guān)單抗制備中放射性標(biāo)記物的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)參考國(guó)家關(guān)于放 射性藥品規(guī)定。七、產(chǎn)品穩(wěn)固性產(chǎn)品穩(wěn)固性應(yīng)滿(mǎn)足臨床方案制定的要求。加速穩(wěn)固性試驗(yàn)資料可作 為產(chǎn)品審批及標(biāo)定用，但不能代替實(shí)際的穩(wěn)固性資料。（一）應(yīng)制定穩(wěn)固性檢定規(guī)劃，包括在規(guī)定效期全過(guò)程中，每 間隔一定時(shí)刻進(jìn)行制品的物

13、理化學(xué)完整性試驗(yàn) （如斷裂或聚合），效力試驗(yàn), 無(wú)菌試驗(yàn)，以及水分、pH和防腐劑的穩(wěn)固性測(cè)定。（二）確保制品生物活性的穩(wěn)固性試驗(yàn)（例如定量體外效率試 驗(yàn)）應(yīng)包括廠內(nèi)參比品。如可能在試驗(yàn)的全過(guò)程中只使用一批試驗(yàn)抗原 （如: 純化的抗原、細(xì)胞或組織）。應(yīng)用定量效力試驗(yàn)使對(duì)生物活性進(jìn)行有意義的 比較成為可能。（三）加速穩(wěn)固性試驗(yàn)，既將制品儲(chǔ)存在溫度高于常規(guī)儲(chǔ)存溫 度后的穩(wěn)固性試驗(yàn)，可能有助于鑒定及建立穩(wěn)固性指示試驗(yàn)。表示穩(wěn)固性 的特定參數(shù)應(yīng)通過(guò)對(duì)每一批制品用趨向分析方法進(jìn)行監(jiān)測(cè)。八、臨床前研究由于生產(chǎn)條件或配方的改變可引起制品生物活性的明顯變化。因 此，建議在臨床前研究中所使用的單抗應(yīng)與臨床試驗(yàn)中擬

14、使用的單抗的生 產(chǎn)工藝一致。（一）交叉反應(yīng)性試驗(yàn)當(dāng)相同或有關(guān)抗原決定簇在人的非預(yù)定的細(xì)胞或靶組織表達(dá)時(shí)，可 觀看到抗體與它們結(jié)合。非靶組織結(jié)合可能具有嚴(yán)峻后果，專(zhuān)門(mén)是使用藥 理活性抗體或細(xì)胞毒性免疫結(jié)合物時(shí)。因此，一樣在I期臨床試驗(yàn)前應(yīng)通 過(guò)用人組織或細(xì)胞進(jìn)行交叉反應(yīng)性或非靶組織結(jié)合的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。關(guān)于雙 特異性抗體，除檢測(cè)雙特異性產(chǎn)品外，還應(yīng)對(duì)每株親本抗體進(jìn)行逐個(gè)評(píng)估。1 .檢測(cè)交叉反應(yīng)性的體外試驗(yàn)?zāi)壳?，用人?xì)胞或組織進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)及免疫組織化學(xué)技術(shù)檢 測(cè)，應(yīng)使用有效的并被確認(rèn)的新技術(shù)（參照 1. 2. 4）。2 .測(cè)定交叉反應(yīng)性的體內(nèi)試驗(yàn)當(dāng)有適當(dāng)模型時(shí)，單克隆抗體與非靶人組織的交叉反應(yīng)性應(yīng)

15、在動(dòng)物 中進(jìn)行一次綜合的體內(nèi)試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果，專(zhuān)門(mén)是對(duì)具有溶細(xì)胞性的免疫結(jié) 合物或具有ADCC活性的抗體，通常要求進(jìn)行更廣泛的臨床前試驗(yàn)，包括 用一種以上動(dòng)物超劑量及重復(fù)劑量進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)。設(shè)計(jì)臨床試驗(yàn)時(shí)應(yīng)考慮 對(duì)非靶組織的定位。（二）臨床前藥理學(xué)和毒性試驗(yàn)1 .設(shè)計(jì)單克隆抗體臨床前安全試驗(yàn)是為了推測(cè)在人體中可能的毒 性評(píng)估在人體中潛在不良反應(yīng)副作用的可能性和嚴(yán)峻程度，并可能確定安全 初始劑量和逐步提升劑量。有關(guān)單克隆抗體的臨床前試驗(yàn)，包括免疫原性、 穩(wěn)固性、組織交叉反應(yīng)性和效應(yīng)功能。2 .動(dòng)物毒理學(xué)研究當(dāng)設(shè)計(jì)單克隆抗體的毒理學(xué)試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)考慮如下：(1)若被試樣品為未偶聯(lián)抗體，且無(wú)合適的動(dòng)物模型或

16、無(wú)攜帶有 關(guān)抗原的動(dòng)物，且與人組織交叉反應(yīng)性試驗(yàn)明顯陰性，則毒理學(xué)試驗(yàn)不是 必須的。(2)動(dòng)物體內(nèi)有關(guān)抗原的性質(zhì)與人體內(nèi)有關(guān)抗原的生物學(xué)分 布、功能及結(jié)構(gòu)應(yīng)具有可比性。然而，關(guān)于所用的動(dòng)物模型，不必要求對(duì) 單克隆抗體的抗原密度或親和力絕對(duì)相等。例如，結(jié)合力差異可通過(guò)增加 劑量或服藥頻率來(lái)補(bǔ)償。應(yīng)鑒定動(dòng)物和人之間存在的抗原數(shù)，單克隆抗體 的抗原親和力或?qū)慰寺】贵w結(jié)合的細(xì)胞應(yīng)答反應(yīng)等方面存在的差異。這 能夠更精確的推斷人用的安全初始劑量，并評(píng)估安全范疇。(3)對(duì)單克隆抗體通常不要求進(jìn)行常規(guī)誘變性的評(píng)估。(4)擬給育齡婦女反復(fù)或長(zhǎng)期使用的產(chǎn)品，應(yīng)該用適當(dāng)?shù)膭?dòng) 物模型進(jìn)行反復(fù)的深入的研究包括致畸試驗(yàn)

17、。3.藥效學(xué)和動(dòng)物藥代動(dòng)力學(xué)(1)當(dāng)有動(dòng)物模型時(shí)，則應(yīng)盡可能證明藥理學(xué)效應(yīng)與劑量的依靠 性，以及有效劑量的范疇，能夠更好地推測(cè)治療指數(shù)；當(dāng)無(wú)適合動(dòng)物模型 時(shí)，則應(yīng)盡可能以人外周血、組織器官等進(jìn)行體外藥效學(xué)研究。當(dāng)有動(dòng)物 模型時(shí)，藥代動(dòng)力學(xué)的有關(guān)資料(生物學(xué)分布，半衰期等)能夠從動(dòng)物模 型中得到；當(dāng)無(wú)適合動(dòng)物模型時(shí)，動(dòng)物藥代動(dòng)力學(xué)能夠考慮不做，加大臨 床試驗(yàn)時(shí)藥代動(dòng)力學(xué)方面的監(jiān)控。(2)下列方面能夠指導(dǎo)藥代動(dòng)力學(xué)幾藥效學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物種類(lèi)的 選擇：最好選擇與人有交叉反應(yīng)或相同靶抗原的動(dòng)物模型來(lái)進(jìn)行試驗(yàn)。 關(guān)于僅抗人而未在動(dòng)物模型中表達(dá)的人抗原或外源抗原(細(xì)菌，病毒等) 的未偶聯(lián)單克隆抗體，能夠不必用缺

18、乏靶抗原的動(dòng)物做試驗(yàn)。當(dāng)有抗原結(jié)合資料表明靈長(zhǎng)類(lèi)為最有關(guān)種屬時(shí)，則對(duì)未偶聯(lián)的單 克隆抗體的試驗(yàn)采納非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物是適宜的。應(yīng)對(duì)使用正常嚙齒類(lèi)動(dòng)物和鼠異源移植模型精確推測(cè)單克隆抗體在人體的藥代動(dòng)力學(xué)行為的可能性進(jìn)行嚴(yán)格評(píng)估。異源移植模型對(duì)評(píng)估 單克隆抗體與人體內(nèi)腫瘤結(jié)合的能力更有意義。(3)鼠源抗體關(guān)于小鼠為非免疫原性物質(zhì)，但在人體內(nèi)具免 疫原性，這就使得在鼠內(nèi)所得的重復(fù)劑量結(jié)果難以推至擬在人體內(nèi)使用的 重復(fù)劑量。使用完全人源的、嵌合的或"人源化的"單克隆抗體將顯現(xiàn)相應(yīng)的 咨詢(xún)題，在這種情形下用嚙齒類(lèi)動(dòng)物進(jìn)行重復(fù)劑量的研究意義不大。4.用免疫結(jié)合物進(jìn)行的臨床體內(nèi)研究(1)應(yīng)在

19、體內(nèi)試驗(yàn)免疫結(jié)合物的穩(wěn)固性應(yīng)測(cè)定免疫結(jié)合物中每個(gè)組分在動(dòng)物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)和組織分 布，同時(shí)與未偶聯(lián)抗體的分布相比較。不同組分的靶組織和他們能引起的潛在的毒性應(yīng)被證實(shí)。(2)由于免疫結(jié)合物可能被降解或作用位點(diǎn)的活性不是單克 隆抗體與靶抗原結(jié)合的結(jié)果，應(yīng)對(duì)含有放射性核素、毒素或藥物的免疫結(jié) 合物進(jìn)行動(dòng)物毒性實(shí)驗(yàn)，盡管該種動(dòng)物不存在靶抗原。按照免疫結(jié)合物組 分的性質(zhì)和其偶聯(lián)的穩(wěn)固性，對(duì)組分分別進(jìn)行試驗(yàn)是有道理的。應(yīng)充分描 述每個(gè)組分的毒性情形、副反應(yīng)的發(fā)生和嚴(yán)峻程度。所得結(jié)果應(yīng)與結(jié)合物 穩(wěn)固性試驗(yàn)緊密有關(guān)。如可能，應(yīng)用具有有關(guān)靶抗原或疾病模型動(dòng)物體內(nèi) 進(jìn)行免疫結(jié)合物試驗(yàn)，如果不存在靶抗原陽(yáng)性動(dòng)物就在

20、嚙齒類(lèi)動(dòng)物體內(nèi)進(jìn) 行。游離毒素或核素的毒性試驗(yàn)可在不同類(lèi)動(dòng)物中進(jìn)行。(3)關(guān)于放射性核素的免疫結(jié)合物：動(dòng)物生物分布的資料可被用于對(duì)初始人用劑量的評(píng)估。如可能，表達(dá)靶抗原的動(dòng)物模型更有可能發(fā)覺(jué)抗原 "減少"或帶有 在生物分布和/或毒性方面表現(xiàn)意外抗原的組織。異源移植模型能夠組織定位和抗原非特異放射性免疫結(jié)合物分 布咨詢(xún)題，但對(duì)確定一樣組織交叉反應(yīng)范疇沒(méi)有關(guān)心。應(yīng)研究適宜的動(dòng)物數(shù)量以用一個(gè)可同意的變異系數(shù)(通常小于20%)對(duì)放射性劑量進(jìn)行評(píng)估。關(guān)于使用放射性總量的新陳代謝和測(cè)定從早到晚清除期時(shí)刻點(diǎn) 的適當(dāng)數(shù)值應(yīng)有完整運(yùn)算。放射性免疫結(jié)合物應(yīng)通過(guò)在血清或血漿中孵育檢測(cè)體外穩(wěn)固性。 應(yīng)建立方法來(lái)評(píng)估游離表位，偶聯(lián)單克隆抗體，標(biāo)記的非單克隆抗體三種 中每成分存在的放射性百分比。講明：對(duì)局部外用和制備體外診斷試劑盒單克隆抗體要求參照上述有關(guān)部 分執(zhí)行，但其生產(chǎn)條件、小鼠清潔級(jí)別、抗體純度和安全試驗(yàn)可按照實(shí)際 需要降低或減少要求。附錄：鼠源性病毒檢測(cè)1.被檢病毒人用鼠源性單抗制品中可能含有潛在污染的病毒見(jiàn)下表。組病母受阻礙動(dòng)物I出血熱病毒大鼠，小鼠I淋巴細(xì)胞脈絡(luò)從腦膜炎LcM （ LCMV大鼠I3型呼腸孤病毒（RE