2021年高考生物二輪復(fù)習(xí)專(zhuān)練：生物技術(shù)實(shí)踐

1、2021年高考生物二輪復(fù)習(xí)專(zhuān)練第9頁(yè)共45頁(yè)【知識(shí)網(wǎng)絡(luò)】水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽捷構(gòu)嚴(yán) 消毒和滅菌巡_ 計(jì)算f稱(chēng)址亠溶化亠滅菌培養(yǎng)技術(shù)流桎 倒平板一接種亠培養(yǎng)"以尿索作為唯一氮培養(yǎng)荃特點(diǎn)漁的選擇培養(yǎng)總尿索分解菌的分 稀釋涂布平板法和計(jì)數(shù)方法 離與計(jì)數(shù)實(shí)駿顯微鏡直接計(jì)數(shù)法" 以纖維索作為唯一竽養(yǎng)劇點(diǎn)剛果紅染色法孕色方法緲?biāo)鞣峙恋姆蛛x實(shí)於希用水蒸氣蒸懾法丄竺利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物-嫌理 芳香油攜帶出來(lái)水中蒸懈、水上姦詡、水氣蒸懈 鮮玫瑰花+淸水水蒸氣蒸懈f油 水混合物加入NaJ分離油層 加人髦Na£如除水竺玫瑰油分類(lèi)微牛物培養(yǎng)微牛物利用玫瑰榊油 的提取卿制作利啊_

2、酵母誦微牛.物發(fā)Will r 優(yōu)品方法<«皮帝油的提取胡蘿卜素 的提取需嚴(yán)J觸菌做生物腦乳制作利用的 毗鐵 主要徽牛物"泡菜制作利用的金刪必曲9方法壓郴法通過(guò)機(jī)械加氐 提取出果皮中的 芳香油步曝石灰水浸池-漂洗*榨過(guò)濾i靜賢F悅k過(guò)濾f橘皮油擲一胡蘿卜索不溶于水.易溶于石油 歴等冇機(jī)溶劑萃取法IO力袪鑒定胡蘿卜粉碎十干燥*萃取* 過(guò)濾一濃縮-胡歲卜索紙層析法知識(shí)點(diǎn)一.微生物的營(yíng)養(yǎng)1. 微生物的營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要素來(lái)源功能碳源無(wú)機(jī)碳源CO2> NaHCCh、CaCO3 等含碳無(wú)機(jī) 物 構(gòu)成細(xì)胞和合成一些代謝產(chǎn)物 有些既是碳源又是異養(yǎng)微生物的能源有機(jī)碳源糖、脂肪、蛋白質(zhì)、有

3、機(jī)酸、石油、花生粉餅等營(yíng)養(yǎng)要素來(lái)源功能氮無(wú)機(jī)氮源NH3、彼鹽、硝酸鹽、N2等合成蛋白質(zhì)、核酸及含源有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白陳、核酸、尿素、氨基酸氮的代謝產(chǎn)物營(yíng)養(yǎng)要素來(lái)源功能生長(zhǎng)因子（特維生素、氨基酸、堿酶和核酸的組成成分姝營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)）基參與代謝過(guò)程中的酶促反應(yīng)水和無(wú)機(jī)機(jī)鹽外界攝入水不僅是優(yōu)良溶劑而且可維持生物大分子的穩(wěn)泄；無(wú)機(jī)鹽是細(xì)胞內(nèi)的成分和調(diào)肖物質(zhì)等2 培養(yǎng)基種類(lèi)及用途劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)物理半固體培養(yǎng)基加凝固觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類(lèi)鑒定性質(zhì)固體培養(yǎng)基劑，如瓊脂微生物分離、鑒左、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途化學(xué)天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工

4、業(yè)生產(chǎn)成分合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確（用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成）分類(lèi)、鑒定劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化 學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要微生 物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微 生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特立微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霍 菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡 萄球菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入髙濃度的食鹽）用途鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，任培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類(lèi)的微生物，如可用伊紅一美藍(lán) 培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌 （若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）3微生物的分離與計(jì)數(shù)（1）上壤中分解尿素的細(xì)菌的分離： 篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選。

5、 過(guò)程：丄壤取樣-樣品的稀釋T微生物的培養(yǎng)與觀察。（2）分解纖維素的微生物的分離： 原理:廠纖維素酶（復(fù)合酶）一|a.纖維素（'1酶心氣纖維一糠葡萄糖昔酶剛果紅纖維素纖維素分解菌紅色復(fù)厶物纖維索酶紅色消失、 色復(fù)冃物出現(xiàn)透明圈即：可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。 流程：丄壤取樣-選擇培養(yǎng)-梯度稀釋-涂布平板-挑選菌落。（3）鑒左方法：鑒泄分解尿素的細(xì)菌含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基-細(xì)菌-指示劑變紅，則該菌能分解尿素鑒定纖維素分解菌剛果紅纖維素分解菌 爲(wèi)需r紅色出現(xiàn)透明圈（4）計(jì)數(shù)方法: 顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：利用特左細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球汁數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一泄容積樣品中的細(xì)菌

6、數(shù)疑。該方法不能區(qū)分細(xì)菌的死活。 間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）:常用稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法的理論依據(jù)是：當(dāng)樣品的稀釋度足夠髙時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落即代表一個(gè)活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行汁數(shù)，每個(gè)稀釋倍數(shù)涂布3個(gè)平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值?！咎貏e提醒】消毒和火菌的區(qū)別條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死 物體表而或 內(nèi)部部分微 生物煮沸消毒法一般物品巴氏消毒法不耐高溫的液體化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源等條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍滅菌強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽泡和抱子灼燒滅菌接種工具干熱滅菌玻璃器皿、金屬

7、用具等高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基及容器的火菌知識(shí)點(diǎn)二、酶的應(yīng)用1. 酶的存在與簡(jiǎn)單制作方法（1）陽(yáng)在生物體內(nèi)的存在（或分布）部位：酶是在生物體活細(xì)胞中合成的。多數(shù)酶在細(xì)胞內(nèi)直接參與生物化學(xué)反應(yīng)，少數(shù)的酶要分泌到細(xì)胞外發(fā) 揮作用。（2）酶的制備： 胞內(nèi)酶的制?。盒枰扑樯锝M織細(xì)胞，可用破碎儀、研磨器或勻漿器等機(jī)械將組織細(xì)胞破碎，使 酶從活細(xì)胞中釋放出來(lái)，進(jìn)入細(xì)胞外的溶液中，經(jīng)過(guò)濾、離心制備成粗酶液。 胞外酚的制備：對(duì)于唾液淀粉酶、胰蛋白酶等分泌到細(xì)胞外的酶，可以直接從動(dòng)物分泌物或細(xì)胞外 的組織間隙中提取。2. 酶活性（力）測(cè)左的一般原理和方法酶活性（力）的含義：酶的活性（力）是指酶催化一立化學(xué)反應(yīng)的能

8、力。（2）酶活性（力）測(cè)泄的一般原理和方法：酶的活性（力）通常以單位時(shí)間內(nèi)底物的消耗量或者在單位時(shí)間內(nèi) 產(chǎn)物的生成量來(lái)表示。3. 酶的活性及影響酶活性因素的實(shí)驗(yàn)探究（以果膠酶在生產(chǎn)中的應(yīng)用為例探究溫度或pH對(duì)果膠酶活性 的影響）（1）探究不同溫度（或pH）對(duì)酶活性的影響時(shí)，溫度（或pH）作為自變疑，通常通過(guò)設(shè)宜合理的梯度來(lái)確左 最適值，最適值是通過(guò)比較相同時(shí)間內(nèi)獲得的產(chǎn)量或效果來(lái)確左的。（2）在混合蘋(píng)果泥和果膠酶之前，要將蘋(píng)果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫（或同pH）處理，目的是 保證底物和酶在混合時(shí)的溫度（或pH）相同，避免蘋(píng)果泥與果膠酶混合時(shí)影響混合物的溫度（或pH）,從而影 響實(shí)驗(yàn)效果

9、。（3）果膠酶將果膠分解為小分子物質(zhì)，小分子物質(zhì)可以通過(guò)濾紙，因此蘋(píng)果汁的體積大小反映了果膠酶 催化分解果膠的能力。在不同的溫度和pH下，果膠酶的活性越大，蘋(píng)果汁的體積就越大。4. 探究不同種類(lèi)加酶洗衣粉的洗滌效果（1）實(shí)驗(yàn)原理：加酶洗衣粉的酶制劑有多種，包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶等。加入不同的 酶制劑，會(huì)制成用于不同污漬洗滌的加酶洗衣粉。復(fù)合酶洗衣粉加入的酶制劑種類(lèi)較多，對(duì)各種污漬都有較好的洗滌效果。（2）實(shí)驗(yàn)操作程序:步驟燒杯編號(hào)IIIIII注入自來(lái)水500 mL500 niL500 mL加入物質(zhì)（等雖:）奶漬布奶漬布奶漬布控制水溫37°C37°C37'

10、;C加入洗衣粉（等呈:）蛋白酶洗衣粉復(fù)合酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉玻璃棒攪拌（等速）5分鐘5分鐘5分鐘觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象5 固定化酶和固定化細(xì)胞的比較項(xiàng)目固定化酶固定化細(xì)胞常用方法化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法包埋法優(yōu)點(diǎn) 可反復(fù)使用； 有利于工藝的連續(xù)化、管道化，同時(shí)降低了生產(chǎn)成本 可以連續(xù)發(fā)酵，節(jié)約成本： 保持酶在細(xì)胞內(nèi)的原始狀況，增加了酶的穩(wěn)泄性；操作容易不足酶在固定化時(shí)活力有所損失：不適用于多酶反應(yīng)細(xì)胞膜、細(xì)胞壁會(huì)阻礙底物的滲透和擴(kuò)散，降低反應(yīng)效率知識(shí)點(diǎn)三、生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用1.運(yùn)用發(fā)酵加工食品的基本方法果酒果醋腐乳泡菜微生物類(lèi)型酵母菌（真菌）兼性厭氧菌醋酸桿菌（細(xì)菌）好氧細(xì)菌毛監(jiān)（真菌）好

11、氧菌乳酸菌（細(xì)菌）厭氧菌原理酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生灑精醋酸桿菌有氧呼吸產(chǎn)生醋酸毛霊代謝產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸控制條件前期有氧后期無(wú)氧，20C左右有氧，3（TC 35°C有氧，15°C18°C無(wú)氧，常溫挑選葡萄讓豆腐上長(zhǎng)選擇 原料稱(chēng)取 食鹽T修瓠洗配制沖洗岀毛霉滌.晾曬、鹽水切分成條£實(shí)驗(yàn)流程諸汁加鹽腌制狀或片狀泡菜鹽水酒粕發(fā)韶空果酒加鹵湯裝瓶I 加入調(diào)味料.裝壇 1醋酸發(fā)酵塑果醋密封腌制發(fā)酵1成品【特別提醒】 在泡菜的腌制過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，亞硝酸鹽在一泄條件下可轉(zhuǎn)化為能致癌、致畸和致突變的物 質(zhì)亞硝胺。 在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨

12、基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1荼基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合 形成玫瑰(紫)紅色染料，通過(guò)目測(cè)比較，可大致估算亞硝酸鹽的含量。2. 植物激素與組織培養(yǎng)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素在植物組織培養(yǎng)中的作用及特點(diǎn)：(1) 在生長(zhǎng)素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)。(2) 使用順序不同.結(jié)果不同，具體如下：使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂又分化同時(shí)使用分化頻率提高用量比例不同，結(jié)果也不同:,，才髙：利于根的分化.抑制芽的形成細(xì)盍為學(xué)蠡的比值低:利于芽的分化、抑制根的形成 '衣=丄 I適中：促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)3 植物芳

13、香油三種提取方法的比較提取方法實(shí)驗(yàn)原理方法步驟適用范圍水蒸氣蒸憾利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶岀來(lái)水蒸氣蒸鐳分離油層除水過(guò)濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨岀果皮中的芳香油石灰水浸泡、漂洗壓榨、過(guò)濾、靜置再次過(guò)濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機(jī)溶劑萃取使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油粉碎、干燥萃取、過(guò)濾濃縮適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中4. DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)(1) DNA的粗提取和鑒左： 基本原理：a. DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14 moFL的NaCl溶液中的溶解度最

14、低。b. DNA不溶于酒精溶液。c. DNA不被蛋白酶水解。d. DNA在水浴加熱條件下可被二苯胺染成藍(lán)色。 主要步驟：選取材料-破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液-去除濾液中的雜質(zhì)-DNA的析出與鑒左。 注意事項(xiàng)：兒選擇動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞比較容易破碎，選擇植物細(xì)胞時(shí)則要先溶解細(xì)胞膜(如加洗滌劑、研磨等)。b. 以鳥(niǎo)類(lèi)的紅細(xì)胞為材料時(shí)，需向血液中加入檸檬酸鈉抗凝。c. 二苯胺需現(xiàn)配現(xiàn)用。(2) PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用： 目的獲取大量的目的基因 原理雙鏈DNA的復(fù)制。 條件一需要DNA模板、引物(一般為單鏈DNA)、四種脫氧核昔酸、耐髙溫的DNA聚合酶和酶促 反應(yīng)所需的離子，同時(shí)還要控制溫度。 過(guò)程

15、：a. 變性：在95C時(shí)DNA解旋。b. 復(fù)性：在50C時(shí)引物與DNA單鏈結(jié)合。c. 延伸：在72C時(shí)合成DNA子鏈(兩個(gè)引物間的序列)。(3) 蛋白質(zhì)的提取和分離： 實(shí)驗(yàn)原理：依據(jù)蛋白質(zhì)的各種特性可以將不同種類(lèi)的蛋白質(zhì)分離。 常用方法：凝膠色譜法：根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。b.電泳：利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身大小、形狀的不同產(chǎn)生不同的遷移速度，由此將各種分子分離。C.蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒泄?！咎貏e提醒】 人和哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒(méi)有DNA,不適于作為DNA提取的材料，但卻是提 取血紅蛋白的理想材料。 凝膠

16、色譜柱的直徑大小不影響分離效果，但直徑過(guò)大會(huì)造成洗脫液體枳增大，樣品稀釋度增大；凝 膠色譜柱的髙度與分離度有關(guān)。 紅細(xì)胞洗滌過(guò)程中，洗滌三次后，上淸液仍有黃色，可增加洗滌次數(shù)，否則無(wú)法除去血漿蛋白：離 心時(shí)轉(zhuǎn)速要低，時(shí)間要短，否則白細(xì)胞等會(huì)一同沉淀，達(dá)不到分離效果。 血紅蛋白釋放過(guò)程中，蒸憾水的作用是漲破紅細(xì)胞，甲苯的作用主要是溶解細(xì)胞膜。知識(shí)點(diǎn)四、微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用1.微生物的營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要素來(lái)源功能碳源無(wú)機(jī)碳源CO" NaHCOs. CaCO等含碳無(wú)機(jī)物 構(gòu)成細(xì)胞中的物質(zhì)和一些代 謝產(chǎn)物： 既是碳源又是能源有機(jī)碳源糖類(lèi)、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石汕、花生粉餅等氮源無(wú)機(jī)氮源無(wú)機(jī)氮：NH3

17、、錢(qián)鹽、硝酸鹽、N2等將無(wú)機(jī)氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白丿凍、核酸、尿素、氨基酸合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物生長(zhǎng)因子維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的組成成分:參與代謝過(guò)程中的酶促反應(yīng)2微生物的純化培養(yǎng)的方法(1) 平板劃線法 通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表而連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表而 在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落。(2) 稀釋涂布平板法 將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行 在稀釋度足夠髙的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表而形成單 個(gè)的菌落。3. 測(cè)龍

18、微生物數(shù)量的方法(1) 直接計(jì)數(shù)法：常用的是顯微鏡直接計(jì)數(shù)。(2) 間接il數(shù)法：常用的是稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法?！咎貏e提示】(1)顯微鏡訃數(shù)法計(jì)算的細(xì)菌中包括死細(xì)菌。稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的是活菌數(shù)。(2) 稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目要低。知識(shí)點(diǎn)五、酶的應(yīng)用1.直接使用酶、I古I左化酶和固左化細(xì)胞直接使用酶固泄化酶固泄化細(xì)胞制作方法化學(xué)結(jié)合法固定化、物理吸附法固泄化包埋法固定法是否需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)否否是催化反應(yīng)單一或多種單一一系列反應(yīng)底物各種物質(zhì)(大分子、小分子)各種物質(zhì)(大分子、小分子)小分子物質(zhì)缺點(diǎn)對(duì)環(huán)境條件非常敏感，易 失活；難回收，成本髙， 影響產(chǎn)品質(zhì)量不利于催化一系列酶促反

19、應(yīng)反應(yīng)物不易與酶接 近，尤其是大分子物質(zhì)， 反應(yīng)效率下降優(yōu)點(diǎn)催化效率髙、耗能低、低污染 既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分藹； 可以重復(fù)利用成本低、操作容易2加酶洗衣粉的洗滌效果的探究(1) 判斷加酶洗衣粉洗滌效果的方法：可在洗滌后比較污物的殘留狀況，如已消失、顏色變淺、而積縮 小等。(2) 加酶洗衣粉的洗滌效果的探究方法：實(shí)驗(yàn)設(shè)訃遵循的原則是對(duì)照原則和單一變捲原則，如探究普通第11頁(yè)共45頁(yè)洗衣粉和加酶洗衣粉對(duì)衣物污漬的洗滌效果有何不同時(shí)，以控制洗衣粉的種類(lèi)為變量，其他條件完全一致： 同時(shí)，普通洗衣粉處理污物與加酶洗衣粉處理污物形成對(duì)照實(shí)驗(yàn)。（3）變量的分析和控制：影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素有

20、水溫、水量、水質(zhì)、洗衣粉的用量、衣物的 材質(zhì)、衣物大小、浸泡時(shí)間、洗滌的方式和洗滌的時(shí)間等。在選擇適宜的變量作為探究課題的時(shí)候，應(yīng)注 意切合實(shí)際，如選擇水溫時(shí)，我們可以選擇一年中冬季、春季、秋季和夏季的實(shí)際常溫5°C. 15°C、25°C和 35°C進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。知識(shí)點(diǎn)六、植物有效成分的提取不同物質(zhì)的提取分離方法提取方法方法步驟適用范圍水蒸氣蒸憾水蒸氣蒸餾、分離油層、除水過(guò)濾適用于提取玫魂汕、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法石灰水浸泡、漂洗、壓榨、過(guò)濾、靜置、再次過(guò)濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機(jī)溶劑萃取粉碎、干燥、萃取、過(guò)濾、濃縮適用范囤廣，要求原料

21、的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中高頻考點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)和利用例1.（2019全國(guó)卷III-37）回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問(wèn)題。（1） 在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白腺以葡萄糖”或“NaNCh"）。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)肖培養(yǎng)基的pH,其原因是°硝化細(xì)菌在沒(méi)有礦源的培養(yǎng)基上 （填“能夠”或“不能“）生長(zhǎng)，原因是.（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板 （填“倒置"或“正置”）。（3）單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是o（4）有些使用后的

22、培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過(guò)處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物?！敬鸢浮浚?）蛋白腺 不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的最適pH不冋 能夠第10頁(yè)共45頁(yè)硝化細(xì)菌可以利用空氣中的C02作為碳源倒置<3）在一左的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)宦的菌落特征（4）滅菌【解析】<1）葡萄糖只能為細(xì)菌提供碳源，硝酸鈉為細(xì)菌提供無(wú)機(jī)鹽，而蛋白腺既可以為細(xì)菌碳源，也可以為 細(xì)菌提供氮源；由于不同的細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的最適宜pH是不同的，因此制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)的細(xì)菌的 不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH：硝化細(xì)菌屬于化能自養(yǎng)型微生物，苴可以利用氨氧化釋放的能屋將空氣中的二氧 化碳固立為有機(jī)物，因此硝化細(xì)菌可以在無(wú)

23、碳培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將平板倒宜培養(yǎng)，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，適成污染。（3）由于每一大類(lèi)微生物都有其獨(dú)特的細(xì)胞形態(tài)，因而其菌落形態(tài)特征也各異，因此根據(jù)菌落的形態(tài)、 大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物。（4）有些使用后的培養(yǎng)基丟棄前一左要進(jìn)行火菌處理，以免污染環(huán)境?！九e一反三】（2018全國(guó)卷II）在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過(guò)消毒和火菌來(lái)避免雜菌的污染。 回答下列問(wèn)題：在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具（填“可以"或'不可以J放入干熱火菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或髙溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方

24、法的優(yōu)點(diǎn)是（3）密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能、在照射前，適量噴灑，可強(qiáng)化消毒效果。（4）水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)（填“氯氣I乙醇“或嘀鐳酸鉀“）消毒的。（5）某同學(xué)在使用高壓蒸汽火菌鍋時(shí)，若圧力達(dá)到設(shè)左要求，而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是>【解析】（1）能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器川1（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等可以放入熱 滅菌箱中進(jìn)行丁熱火菌。（2）煮沸消毒法即在100 C煮沸56 mm可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽抱：巴氏 消毒法即在7075 °C煮30 min或在80 9煮15 mm,可以殺死微生物，并且保證營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不被破壞

25、。因此， 與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法的優(yōu)點(diǎn)是在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng) 養(yǎng)物質(zhì)損失較少。（3）|大 1紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前， 適量噴灑消毒液，可強(qiáng)化消毒效果。（4）通常乙醇消毒是75%的灑精，有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來(lái) 水：髙鐳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無(wú)法使用：因此水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)氯氣消毒 的。（5）采用髙壓蒸汽火菌時(shí)，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將苴中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未 將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會(huì)出現(xiàn)斥力達(dá)到設(shè)怎要求，而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象。【答案】可以（2）在

26、達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少（3）破壞DNA結(jié)構(gòu) 消毒液（4）氯氣（5）未將鍋內(nèi)冷空氣排盡【變式探究】空氣中的微生物在重力等作用下，可以一泄程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室 空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下： 配制培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白陳、NaCk X、H：0）： 制作無(wú)菌平板； 設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作； 將各組平板置于37 °C恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)訃各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉?wèn)題：該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于。若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是（2）步驟中,實(shí)驗(yàn)組的操作是（3）若在某次調(diào)查中

27、，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上岀現(xiàn)了 6個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了現(xiàn)象。若將30（即36-6）個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法（填"正確”或"不正確”）?！窘馕觥浚?）牛肉膏和蛋白陳中均含有氮元素，因此微生物所需的氮來(lái)源于牛肉膏和蛋白淼。若要完成 步驟，需要進(jìn)行倒平板操作，用到的是固體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中要有瓊脂。（2）該實(shí)驗(yàn)的空白對(duì)照組為 不進(jìn)行處理的無(wú)菌平板，實(shí)驗(yàn)組的操作為將各無(wú)菌平板分別放宜在教室不同高度的位置上，開(kāi)蓋址露一段 時(shí)間，且時(shí)間應(yīng)相同。（3）若空白對(duì)照組的平板上出現(xiàn)了菌落，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)過(guò)程中岀現(xiàn)了污染現(xiàn)象

28、。空白對(duì)照 組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)變量不唯一，不能確定實(shí)驗(yàn)組平板上的菌落是否僅由教室內(nèi)不 同高度空氣中的微生物形成，因此不能求出實(shí)驗(yàn)組的菌落平均數(shù)?！敬鸢浮浚?）牛肉膏、蛋白陳瓊脂（2）將務(wù)實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同髙度的位置上，開(kāi)蓋址露一段時(shí)間（3）污染不正確【變式探究】空氣中的微生物在重力等作用下，可以一泄程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室 空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下： 配制培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白陳、NaCl、X、H2O）： 制作無(wú)菌平板： 設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作； 將各組平板置于37°C恒

29、溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)汁各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于。若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是（2）步驟中，實(shí)驗(yàn)組的操作是。（3）若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了 6個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中岀現(xiàn)了現(xiàn)象。若將30（即366）個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法（填“正確'或“不正確）【解析】（1）牛肉膏和蛋白腺中均含有氮元素，因此微生物所需的氮來(lái)源于牛肉膏和蛋白腺。若要完成 步驟，需要進(jìn)行倒平板操作，用到的是固體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中要有瓊脂。（2）該實(shí)驗(yàn)的空白對(duì)照組為 不進(jìn)行處理

30、的無(wú)菌平板，實(shí)驗(yàn)組的操作為將各無(wú)菌平板分別放置在教室不同髙度的位宜上，開(kāi)蓋址露相同 時(shí)間。（3）若空白對(duì)照組的平板上出現(xiàn)了菌落，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象?？瞻讓?duì)照組的一個(gè)平板上 岀現(xiàn)了6個(gè)菌落，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)變量不唯一，不能確定實(shí)驗(yàn)組平板上的菌落是否僅由教室內(nèi)不同髙度空氣中的 微生物形成，因此不能求出實(shí)驗(yàn)組的菌落平均數(shù)?！敬鸢浮浚?）牛肉膏、蛋白腺瓊脂（2）將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放宜在教室不同髙度的位置上,開(kāi)蓋暴露 一段時(shí)間（3）污染不正確【變式探究】為了調(diào)査某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)左了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì) 菌分離等工作。回答下列問(wèn)題：（1）該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)

31、菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是:然后，將ImL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液：經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此 可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。（2）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是O（3）示意圖A和B中，表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜垃培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜苣培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速

32、度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提髙的利用率?！窘馕觥浚?）在涂布接種前，隨機(jī)選取若T火菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平 板火菌是否介格，不能留有雜菌。ImL水稀釋100倍之后的0.1 mL中3個(gè)平板菌落的平均數(shù)為38, 1 L等 于1 000 niL,貝IJ1L水中含有38x10x100x1 000=3.8x106 （2）用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)， 接種環(huán)通過(guò)灼燒滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，從上一次劃線末端開(kāi)始劃線，目的是將聚集的菌體逐步 稀釋以便獲得單個(gè)菌落。（3）稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果應(yīng)為圖氏（4

33、）振蕩可以使細(xì)菌分散，更 有利于細(xì)菌利用培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且可以使培養(yǎng)液中的溶解氧增多?！敬鸢浮浚?）檢測(cè)培養(yǎng)基平板火菌是否合格3.8x107（2）灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落（3）B （4）溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)高頻考點(diǎn)二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用例2. （2019江蘇卷9）下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是A. 利用乳酸菌制作酸奶過(guò)程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵B. 家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵C. 果醋制作過(guò)程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果灑制作過(guò)程中情況相反D. 毛監(jiān)主要通過(guò)產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵【答案】B【解析】乳酸菌是一種嚴(yán)格的厭氧菌，有氧氣存在時(shí)，英

34、發(fā)酵會(huì)受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶 的過(guò)程中，應(yīng)一致處于密閉狀態(tài)，否則會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵失敗，A錯(cuò)誤：家庭制作果酒、果醋與腐乳過(guò)程中所用 的菌種均來(lái)源于自然環(huán)境，有多種微生物參與發(fā)酵過(guò)程，因此均不是純種發(fā)酵，B正確：果醋制作過(guò)程中， 醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和水，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸 降低：果灑制作過(guò)程中，酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳與灑精，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化破 濃度的增加，溶液的pH逐漸降低，因此果灑、果醋制作過(guò)程中溶液的pH都是逐漸降低，C錯(cuò)誤；毛雪主 要通過(guò)產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶參與腐乳發(fā)酵，D錯(cuò)誤?！九e一反三】（2018江蘇卷，16）某

35、高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進(jìn)行匍萄灑主發(fā)酵過(guò)程的研究，下列敘 述錯(cuò)誤的是（）第18頁(yè)共45頁(yè)A. 夏季生產(chǎn)果灑時(shí)，常需對(duì)罐體進(jìn)行降溫處理B. 乙醇為揮發(fā)性物質(zhì)，故發(fā)酵過(guò)程中空氣的進(jìn)氣量不宜太大C. 正常發(fā)酵過(guò)程中罐內(nèi)的壓力不會(huì)低于大氣壓D. 可以通過(guò)監(jiān)測(cè)發(fā)酵過(guò)程中殘余糖的濃度來(lái)決泄何時(shí)終止發(fā)酵【答案】B【解析】根據(jù)以上分析已知，果酒發(fā)酵的適宜溫度為18°C25C,因此夏季生產(chǎn)果酒時(shí)，常需對(duì)罐體進(jìn) 行降溫處理，A正確：乙醇是酵母菌無(wú)氧呼吸的產(chǎn)物，因此分解過(guò)程中不需要通入空氣，B錯(cuò)誤；無(wú)氧呼吸 產(chǎn)生了二氧化碳，但是沒(méi)有消耗氧氣，因此發(fā)酵罐中的氣斥不會(huì)低于大氣壓，C正確：匍萄灑發(fā)酵的原料是

36、糖類(lèi)，因此可以通過(guò)監(jiān)測(cè)發(fā)酵過(guò)程中殘余糖的濃度來(lái)決立何時(shí)終止發(fā)酵，D正確?！咀兪教骄俊颗莶耸俏覈?guó)的傳統(tǒng)食品之一，但制作過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對(duì)人體健康有潛在危害，某 興趣小組準(zhǔn)備參加“科技創(chuàng)新大賽“，査閱資料得到下圖。亞硝酸鹽A A6 5 4 3 2 1 0值 PH403530252015101JJ4T乳4發(fā)酵時(shí)間（d）（1）制作泡菜時(shí)，泡菜壇一般用水密封，目的是。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有O（2）據(jù)上圖，與第3天相比，第8天后的泡菜更適于食用，因?yàn)楹笳? pH呈下降趨勢(shì)，原因是該小組得到一株“優(yōu)選"乳酸菌（亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌髙5倍），擬參照資料的實(shí)驗(yàn)方案和食鹽濃度（4%10

37、%）,探究與普通乳酸菌相比用"優(yōu)選''乳酸菌制作泡菜過(guò)程中亞硝酸鹽含量的高低.并確左第15頁(yè)共45頁(yè)其最適條件。請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表，并推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論?！窘馕觥浚?）制作泡菜時(shí)，泡菜壇要選擇密封性好的容器，一般用水密封，以創(chuàng)適無(wú)氧環(huán)境，有利于乳 酸菌發(fā)酵，防止蔬菜腐爛。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有丙酮酸、H和少量ATP。（2）第3天時(shí)，泡菜中亞 硝酸鹽含量達(dá)到最高，在第8天后的泡菜中，亞硝酸鹽含量降到最低，故第8天后的泡菜更適于食用。乳 酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生的乳酸會(huì)導(dǎo)致pH下降。（3）設(shè)計(jì)的記錄表中要包含乳酸菌類(lèi)型、食鹽濃度和發(fā)酵時(shí)間等自 變量，因變量為亞硝酸鹽的含量。

38、通過(guò)相互對(duì)照確宦用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過(guò)程中亞硝酸鹽含量的高低, 并確定最適發(fā)酵條件?！敬鸢浮浚?）創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵丙酮酸、H（少呈ATP） （2）亞硝酸鹽含量低乳酸菌 無(wú)氧呼吸產(chǎn)生了乳酸 （3）兩種乳酸菌在泡菜腌制過(guò)程中亞硝酸鹽含量變化表【舉一反三】某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含 有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)M(jìn)行梯度稀釋的理由是（2）推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有和。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出的菌落作為候選菌。（3）乳酸菌

39、在一20 °C長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一泄量的（填“蒸餡水“、“甘汕“或“碳酸鈣“）。【解析】（1）分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)@樣既可避免雜菌污染， 又可將乳酸菌分散成單個(gè)細(xì)胞，以便在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。（2）乳酸的積累影響乳酸菌的增殖，加入 碳酸鈣可以中和乳酸菌代謝（無(wú)氧呼吸）過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸，另外，乳酸和碳酸鈣反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致碳酸鈣分解 形成透明圈，有利于乳酸菌的鑒別和分離。（3）對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在3mL 的甘汕瓶中，裝入1 mL甘油后滅菌。將1 niL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在一20 *

40、C 的冷凍箱中保存?！敬鸢浮浚?）無(wú)菌水泡菜濾液中菌的濃度髙，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落（2）鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸（或酸）具有透明圈（3）甘油高頻考點(diǎn)三植物組織培養(yǎng)例3、（2019江蘇卷 10）下列關(guān)于DNA粗提取與鑒泄的敘述，錯(cuò)誤的是A. 用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近B. DNA析出過(guò)程中，攪拌操作要輕柔以防DNA斷裂C. 預(yù)冷的乙醇可用來(lái)進(jìn)一步純化粗提的DNAD. 用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行水浴加熱【答案】A【解析】兔屬于哺乳動(dòng)物，英紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核及各種細(xì)胞器，提取不到DNA,而雞屬于鳥(niǎo)類(lèi)，其紅 細(xì)胞內(nèi)含有細(xì)胞核與冬種細(xì)胞器，DNA含量較多，A錯(cuò)誤；DNA分子

41、從細(xì)胞中被釋放出來(lái)且除去蛋白后是 非常容易斷裂的，如果太過(guò)劇烈的攪拌，DNA鏈可能會(huì)被破環(huán)，因此輕柔攪拌的目的是為了獲得較完整的 DNA分子，B正確：在冷的95%灑精溶液中DNA的溶解度最低DNA的沉淀雖最大。如果用熱的95%酒 精會(huì)提高DNA的溶解度，不能完全使DNA沉淀，C正確；將析出的DNA溶解在2 moFL的NaCl溶液中， 加入二苯胺試劑后需要水浴加熱才會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確?！九e一反三】（2018江蘇卷，17）關(guān)于還原糖、蛋白質(zhì)和DNA的鑒泄實(shí)驗(yàn)，下列敘述正確的是（）A. 在甘蔗莖的組織樣液中加入雙縮腺試劑，溫水浴后液體由藍(lán)色變成磚紅色B. 在大豆種子勻漿液中加入斐林試劑，液體由藍(lán)色變

42、成紫色C. 提取DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽，充分研磨，過(guò)濾并棄去濾液D. 將DNA粗提物溶解在2moL'LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑，沸水浴后液體由無(wú)色變成藍(lán)色【答案】D【解析】甘蔗莖的組織樣液富含蔗糖，而蔗糖屬于非還原糖，且不能用斐林試劑檢測(cè)，A錯(cuò)誤：大豆 種子中富含蛋白質(zhì)，先后加入雙縮姝試劑A液和B液搖勻后，液體由藍(lán)色變?yōu)樽仙?，B錯(cuò)誤：提取DNA 時(shí)，在切碎的洋蔥中加入適量的洗滌劑和食鹽，充分研磨，過(guò)濾并棄去濾紙上的粘稠物，留下濾液，C錯(cuò)誤： 將DNA粗提物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑并水浴加熱，溶液由無(wú)色變?yōu)樗{(lán)色，D正確。【舉一反三】（2

43、018江蘇卷，8）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥冇種過(guò)程 的示意圖，下列敘述正確的是（）A. 為了防止微生物污染，過(guò)程所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30minB. 過(guò)程的培養(yǎng)基中需添加較髙濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化C. 過(guò)程逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體D. 過(guò)程應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上【答案】C【解析】植物組織培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)該在無(wú)菌的條件下進(jìn)行，因此過(guò)程所用的花藥需在70%乙醇中浸泡 lOinin,以防止雜菌污染，A錯(cuò)誤；過(guò)程的培養(yǎng)基中需添加比值適中的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素，以利于形成 愈傷組織，B錯(cuò)誤；過(guò)程得到的植株是經(jīng)過(guò)花藥離體培養(yǎng)和

44、秋水仙素處理的，因此可篩選獲得純合的二倍 體，C正確；過(guò)程獲得的植株可以進(jìn)行光合作用了，因此培養(yǎng)基中不需要加入蔗糖，D錯(cuò)誤?！咀兪教骄俊繛榱双@得植物次生代謝產(chǎn)物，先用植物外植體獲得愈傷組織，然后在液體培養(yǎng)基中懸浮 培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1) 外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱(chēng)為o(2) 在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如下圖所示。細(xì)胞干重在12 d后下降的原因有;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是、e810121416時(shí)間(d)(3) 多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng)處理， 會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目，壓片前常用纖維素酶

45、和酶解離愈傷 組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后，觀察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞，合理的解釋是(4) 為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物，生產(chǎn)中采用植物細(xì)胞的固定化技術(shù)，其原理與酵母細(xì)胞固左化類(lèi)似。 下列說(shuō)法正確的有(填序號(hào))。選取旺盛生長(zhǎng)的愈傷組織細(xì)胞包埋必須在光照條件下培養(yǎng)培養(yǎng)過(guò)程中需通空氣固左化 后植物細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變慢【解析】本題考查植物組織培養(yǎng)、誘導(dǎo)染色體加倍、有絲分裂、細(xì)胞的固定化技術(shù)。(1)外植體在人工、 無(wú)菌條件下，經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。(2)由圖廉糖濃度下降可知，外植體離體培養(yǎng)過(guò)程中需要消耗蔗糖， 12天后蔗糖濃度較低：pH下降會(huì)影響酶的活性，愈傷組織細(xì)胞對(duì)物質(zhì)的合成少于分解，細(xì)胞干

46、重下降。植 物組織培養(yǎng)過(guò)程中，臟糖既能維持一立的滲透壓，又能提供植物細(xì)胞生命活動(dòng)必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(能量)。(3) 一宦濃度的秋水仙素或低溫都可抑制紡錘體的形成，使子染色體不能移向兩極，從而使細(xì)胞中染色體數(shù)目 加倍。植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，可通過(guò)纖維素酶、果膠酶破壞細(xì)胞壁，從而使愈傷組織細(xì) 胞分離。在用秋水仙素或低溫處理后，會(huì)岀現(xiàn)染色體為2n、4n、8n等的細(xì)胞，4n的細(xì)胞在有絲分裂后期著 絲點(diǎn)分裂，染色體數(shù)目加倍至8n： 8n的細(xì)胞在有絲分裂中期能淸晰看出8n條染色體。（4）為了更好地獲得 次生代謝產(chǎn)物，應(yīng)選用生長(zhǎng)旺盛的愈傷組織細(xì)胞。愈傷組織不能進(jìn)行光合作用，因此要通入無(wú)菌空氣確保

47、英正常的生命活動(dòng)。細(xì)胞的固泄化通常使用包埋法，由于包埋材料的影響，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的擴(kuò)散都受到 一定的限制，所以固泄化細(xì)胞生長(zhǎng)速度會(huì)變慢?！敬鸢浮浚?）脫分化（2）裁糖濃度下降，pH降低 提供能源 調(diào)巧滲透壓（3）秋水仙素（低溫）果膠 經(jīng)加倍到4n的細(xì)胞處于有絲分裂后期 經(jīng)加倍到8n的細(xì)胞處于有絲分裂中 期（4）®【變式探究】用多倍體育種的方法培育三倍體無(wú)子西瓜，每年都要制種，很麻煩。某活動(dòng)小組同學(xué)們， 想到了利用植物組織培養(yǎng)的方法來(lái)解決此難題。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。（1）離體的組織和細(xì)胞，對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對(duì)特殊，需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的一種培養(yǎng)基是，其主要成分包括：

48、大量元素、微量元素、有機(jī)物，還常常需要添加:對(duì)培養(yǎng)基要進(jìn)行滅菌。（2）選取合適的外植體作為實(shí)驗(yàn)材料，接種前還要對(duì)英進(jìn)行處理。為提高組織培養(yǎng)成功率，常選擇的材料做外植體。（3）如果外植體選取的材料為莖段，插入培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意。培養(yǎng)一段時(shí)間后，會(huì)通過(guò)形成愈傷組織，愈傷組織的特點(diǎn)是【解析】（1）植物組織培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基為MS固體培養(yǎng)基，苴主要成分包括大量元素、微呈元素、有 機(jī)物和植物激素。為了防止雜菌污染，配制好的培養(yǎng)基要采用高壓蒸汽火菌法進(jìn)行火菌。（2）為了防止外植 體上的雜菌污染，接種前要對(duì)其進(jìn)行消毒處理。由于材料的年齡影響培養(yǎng)的成功率，因此通常選擇幼嫩的 材料做外植體。（3）利用莖段做外植體，插

49、入培養(yǎng)基時(shí)要注意不要倒插，否則不易形成愈傷組織。愈傷組織 是外植體通過(guò)脫分化形成的，其特點(diǎn)是排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞?！敬鸢浮浚?）MS固體培養(yǎng)基植物激素髙壓蒸汽（2）消毒幼嫩（或答分裂能力強(qiáng)，分化程度低）（3）不能倒插脫分化排列疏松、髙度液泡化的薄壁細(xì)胞高頻考點(diǎn)四酶的應(yīng)用例4、（2019江蘇卷13）下列關(guān)于加酶洗滌劑的敘述，錯(cuò)誤的是（）A. 加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶B. 用加酶洗滌劑能減少洗滌時(shí)間并廿約用水C. 含纖維素酶洗滌劑可以洗滌印花棉織物D. 加酶洗衣粉中的蛋白酶是相對(duì)耐髙溫的【答案】A【解析】加酶洗衣粉中應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶，A錯(cuò)渓：加酶洗

50、衣粉 含斷制劑，酶具有髙效性，故可以肖約洗滌時(shí)間，B正確：棉織物的主要成分是纖維素，纖維素酶可以使織 物更蓬松，有利于洗去污漬，C正確：科學(xué)家通過(guò)基因工程生產(chǎn)出了耐酸、耐堿、忍受表而活性劑和較高溫 度的酶，制作加酶洗衣粉，D正確。故選A,【舉一反三】（2018江蘇髙考）（多選）下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述，錯(cuò)誤的是（）A. 洗衣粉中添加的酶通常是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來(lái)B. 洗衣粉中的蛋白酶通常會(huì)將添加的其他酶迅速分解C. 在50 °C熱水中用加酶洗衣粉洗衣時(shí)，英中的酶會(huì)迅速失活D. 加酶洗衣粉受潮后重新晾T保存，不會(huì)影響其中酶的活性【解析】加酶洗衣粉中的酶是科學(xué)家通過(guò)基因工程生產(chǎn)的，即利用

51、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、微生物發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn) 的，A項(xiàng)正確；加酶洗衣粉中的酶通過(guò)特殊的化學(xué)物質(zhì)層層包裹，與洗衣粉的其他成分隔離，所以洗衣粉 中的蛋白酶不會(huì)將其他的酶迅速分解,B項(xiàng)錯(cuò)誤:加酶洗衣粉中的酶是科學(xué)家通過(guò)基因工程生產(chǎn)的能夠耐酸、 耐堿、忍受表而活性劑和較高溫度的酶，故在50 C熱水中酶不會(huì)迅速失活，C項(xiàng)錯(cuò)誤：加卿洗衣粉中的酶 通過(guò)特殊的化學(xué)物質(zhì)包裹，這些隔離層遇到水后，就會(huì)很快溶解，包裹在苴中的酶就能迅速發(fā)揮催化作用， 所以加酶洗衣粉受潮后，其中酶的活性會(huì)受到影響，D項(xiàng)錯(cuò)渓?！敬鸢浮緽CD【變式探究】回答與果膠、淀粉等提取和利用有關(guān)的問(wèn)題：某植物富含果膠、淀粉、蛋白質(zhì)和纖維素成分。某小組開(kāi)展了該植物

52、綜合利用的研究。（1）果膠提取工藝研究結(jié)果表明，原料先經(jīng)過(guò)一段時(shí)間沸水漂洗的果膠得率（提取得到的果膠占原料質(zhì)量的百分率）顯著高于常溫水漂洗的果膠得率，最主要原因是沸水漂洗（A.有助于淸洗雜質(zhì)和去除可溶性糖B.使植物組織變得松散C.使有關(guān)酶失活D.有利細(xì)胞破裂和原料粉碎制漿）。（2）在淀粉分離生產(chǎn)工藝研究中，為促進(jìn)淀粉絮凝沉降，添加生物絮凝劑（乳酸菌菌液），其菌株起重要作用。為了消除絮凝劑中的雜菌，通常將生產(chǎn)上使用的菌液，采用，進(jìn)行單菌落分離，然后將苴，并進(jìn)行特性鑒泄，篩選得到純的菌株。（3）在用以上提取過(guò)果膠和淀粉后的剩渣加工飲料工藝研究中，將剩渣制成的汁液經(jīng)蛋白酶和纖維素酶徹底酶解處理后，發(fā)

53、現(xiàn)仍存在渾濁和沉淀問(wèn)題?？商砑邮构z徹底分解成半乳糖醛酸，再添加，以解決汁液渾濁和沉淀問(wèn)題。（4）在建立和優(yōu)化固定化酶反應(yīng)器連續(xù)生產(chǎn)工藝研究中，通常要分析汁液中各種成分的濃度和所用酶的 活性，然后主要優(yōu)化各固泄化酶反應(yīng)器中的（答岀2點(diǎn)即可）、反應(yīng)液pH和酶反應(yīng)時(shí)間等因素。其中，酶反應(yīng)時(shí)間可通過(guò)來(lái)調(diào)節(jié)?！窘馕觥浚?）煮沸可使酶失去活性，原料先經(jīng)過(guò)一段時(shí)間沸水漂洗的果膠得率（提取得到的果膠占原料質(zhì) 量的百分率）顯著髙于常溫水漂洗的果膠得率，最主要原因是沸水漂洗可使有關(guān)酶失活。（2）通常采用劃線分 離法（或涂布分離法）進(jìn)行單菌落分離，然后將英擴(kuò)大培養(yǎng)，并進(jìn)行特性鑒宦。（3）果膠酶和果膠甲酯酶可使果

54、膠徹底分解成半乳糖醛酸，再添加淀粉酶使淀粉分解，以解決汁液渾濁和沉淀問(wèn)題。（4）固定化酶就是將水 溶性的酶用物理或化學(xué)的方法固宦在某種介質(zhì)（如石英砂）上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。常用 方法有吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法等。在建立和優(yōu)化固定化酶反應(yīng)器連續(xù)生產(chǎn)工藝研究中，主要優(yōu)化各固怎化酶 反應(yīng)器中的固定化酶的量、反應(yīng)液溫度、反應(yīng)液pH和酶反應(yīng)時(shí)間等因素。其中，酶反應(yīng)時(shí)間可通過(guò)控制反 應(yīng)器液體流量來(lái)調(diào)【答案】（1）C （2戊ij線分離法（或涂布分離法）擴(kuò)大培養(yǎng)（3）果膠酶和果膠甲酯酶淀粉酶使淀粉分解（4）固立化酶的雖:、反應(yīng)液溫度控制反應(yīng)器液體流量（或 體積）1. （2019江蘇卷9）下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是A. 利用乳酸菌制作酸奶過(guò)程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵B. 家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵C. 果醋制作過(guò)程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果灑制作過(guò)程中情況相反D. 毛監(jiān)主要通過(guò)產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵【答案】B【解析】乳酸菌是一種嚴(yán)格的厭氧菌，有氧氣存在時(shí)，英發(fā)酵會(huì)受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶 的過(guò)程中，應(yīng)一致處于密閉狀態(tài)，否則會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵失敗，A錯(cuò)誤；家庭制作果酒、果醋與腐乳過(guò)程中所用 的菌種均來(lái)源于自然環(huán)境，有多種微生物參與發(fā)酵過(guò)程，因此均不是純種