12生物技術(shù)在園藝植物育種中的應(yīng)用

1、第十二章第十二章 生物技術(shù)在園藝植物生物技術(shù)在園藝植物育種中的應(yīng)用育種中的應(yīng)用 第一節(jié)第一節(jié) 細(xì)胞和組織培養(yǎng)在植物育種中的應(yīng)用細(xì)胞和組織培養(yǎng)在植物育種中的應(yīng)用 第二節(jié)第二節(jié) 原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細(xì)胞雜交的意義原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細(xì)胞雜交的意義 第三節(jié)第三節(jié) 基因工程在植物育種中的應(yīng)用基因工程在植物育種中的應(yīng)用 第四節(jié)第四節(jié) 分子標(biāo)記的特點(diǎn)分子標(biāo)記的特點(diǎn) 第十二章第十二章 生物技術(shù)在園藝植物生物技術(shù)在園藝植物育種中的應(yīng)用育種中的應(yīng)用 生物技術(shù)（生物技術(shù)（biotechnologybiotechnology）又稱生物工程）又稱生物工程 （bioengineeringbioengineering），是以生命

2、科學(xué)為基礎(chǔ)，是以生命科學(xué)為基礎(chǔ)，利用生物體的特性和功能，設(shè)計(jì)、構(gòu)建具有利用生物體的特性和功能，設(shè)計(jì)、構(gòu)建具有預(yù)期性狀的新物種、新品種、新品系，以及預(yù)期性狀的新物種、新品種、新品系，以及與工程原理相結(jié)合，進(jìn)行加工生產(chǎn)，為社會(huì)與工程原理相結(jié)合，進(jìn)行加工生產(chǎn)，為社會(huì)提供商品和服務(wù)的綜合技術(shù)體系。提供商品和服務(wù)的綜合技術(shù)體系。 第十二章第十二章 生物技術(shù)在園藝植物生物技術(shù)在園藝植物育種中的應(yīng)用育種中的應(yīng)用 通常所說的通常所說的細(xì)胞工程、基因工程、酶細(xì)胞工程、基因工程、酶工程、發(fā)酵工程、生化工程和蛋白質(zhì)工程工程、發(fā)酵工程、生化工程和蛋白質(zhì)工程等均屬生物技術(shù)范疇。等均屬生物技術(shù)范疇。 本章主要介紹細(xì)胞和組

3、織培養(yǎng)在園藝本章主要介紹細(xì)胞和組織培養(yǎng)在園藝植物育種中的應(yīng)用。并簡(jiǎn)介原生質(zhì)體培養(yǎng)植物育種中的應(yīng)用。并簡(jiǎn)介原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細(xì)胞雜交、基因工程和分子標(biāo)記在育與體細(xì)胞雜交、基因工程和分子標(biāo)記在育種中的意義。種中的意義。 第一節(jié)第一節(jié) 細(xì)胞和組織培養(yǎng)在植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)在植物育種中的應(yīng)用育種中的應(yīng)用 廣義的植物組織細(xì)胞培養(yǎng)廣義的植物組織細(xì)胞培養(yǎng)（plant tissue or cell culture）是指將植物體的各種結(jié)構(gòu)是指將植物體的各種結(jié)構(gòu)（外植體外植體）放在離體的、無菌的人工環(huán)境）放在離體的、無菌的人工環(huán)境中讓其生長(zhǎng)發(fā)育的方法。因此組織培養(yǎng)也中讓其生長(zhǎng)發(fā)育的方法。因此組織培養(yǎng)也叫離體培養(yǎng)叫離體

4、培養(yǎng)（culture in vitro）。 根尖、莖尖、葉原基、花原基、微管根尖、莖尖、葉原基、花原基、微管形成層、儲(chǔ)藏薄壁組織、胚乳等。形成層、儲(chǔ)藏薄壁組織、胚乳等。 一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 1.1.花粉、花藥、胚珠和子房培養(yǎng)花粉、花藥、胚珠和子房培養(yǎng) 根據(jù)胚珠和子房受精與否分為兩類：根據(jù)胚珠和子房受精與否分為兩類： 1 1）受精子房和胚珠的培養(yǎng)主要是）受精子房和胚珠的培養(yǎng)主要是 打打破種子的休眠和挽救胚的發(fā)育破種子的休眠和挽救胚的發(fā)育 ，如如核果類的桃杏育種中通過胚搶救進(jìn)核果類的桃杏育種中通過胚搶救進(jìn)行早熟品種的選育；行早熟品種的選育； 2 2）未受精子房、胚珠及花粉

5、、花藥）未受精子房、胚珠及花粉、花藥的培養(yǎng)主要為了的培養(yǎng)主要為了獲得單倍體獲得單倍體。 花粉、花花粉、花藥胚珠和藥胚珠和子房在離子房在離體條件下體條件下無菌培養(yǎng)，無菌培養(yǎng)，讓其進(jìn)一讓其進(jìn)一步發(fā)育形步發(fā)育形成幼苗的成幼苗的過程。過程。 一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 2.2.離體受精離體受精 也稱為植物也稱為植物體外受精，體外受精，離體受精主要解決遠(yuǎn)緣雜交不親和、離體受精主要解決遠(yuǎn)緣雜交不親和、 不孕和不結(jié)實(shí)。這項(xiàng)技術(shù)分為：不孕和不結(jié)實(shí)。這項(xiàng)技術(shù)分為： 是在人工條是在人工條件下使卵細(xì)件下使卵細(xì)胞受精形成胞受精形成合子，再將合子，再將合子離體培合子離體培養(yǎng)使之發(fā)育養(yǎng)使之發(fā)育成植株過程

6、。成植株過程。 1 1）花粉和子房（或胚珠）的收集）花粉和子房（或胚珠）的收集 子房的收集通常是把開花前一天的子房的收集通常是把開花前一天的花蕾取下，經(jīng)表面消毒，剝?nèi)セū换ɡ偃∠?，?jīng)表面消毒，剝?nèi)セū缓托廴?，保留子房及花萼，花萼的和雄蕊，保留子房及花萼，花萼的存在有助于提高種子的結(jié)實(shí)率。也存在有助于提高種子的結(jié)實(shí)率。也可以剝出胚珠培養(yǎng)?？梢詣兂雠咧榕囵B(yǎng)。 一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 2 2）花粉與卵細(xì)胞的體外受精）花粉與卵細(xì)胞的體外受精 A A、共培養(yǎng)法、共培養(yǎng)法 先將花粉撒于一個(gè)適宜于花先將花粉撒于一個(gè)適宜于花粉萌發(fā)的培養(yǎng)基上，再將胚珠置于撒播的粉萌發(fā)的培養(yǎng)基上，再將胚珠置

7、于撒播的花粉中間。花粉中間。 B B、人工受精法、人工受精法 將花粉撒在離體的子房或?qū)⒒ǚ廴鲈陔x體的子房或胚珠上，讓其受精。受精后的子房或胚珠胚珠上，讓其受精。受精后的子房或胚珠繼續(xù)培養(yǎng)可發(fā)育成成熟的種子。繼續(xù)培養(yǎng)可發(fā)育成成熟的種子。 一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 3.3.離體胚的培養(yǎng)離體胚的培養(yǎng) 植物的胚培養(yǎng)主要有兩種培養(yǎng)方式：植物的胚培養(yǎng)主要有兩種培養(yǎng)方式： 1 1）以幼胚為外植體誘導(dǎo)愈傷組織細(xì)胞，通）以幼胚為外植體誘導(dǎo)愈傷組織細(xì)胞，通過器官發(fā)生或胚胎發(fā)生產(chǎn)生再生植株；過器官發(fā)生或胚胎發(fā)生產(chǎn)生再生植株； 2 2）使發(fā)育完全的胚直接萌發(fā)，獲得完整的）使發(fā)育完全的胚直接萌發(fā)，獲

8、得完整的植株。植株。 離體胚培養(yǎng)在植物育種中的應(yīng)用主要包括離體胚培養(yǎng)在植物育種中的應(yīng)用主要包括以下三個(gè)方面：以下三個(gè)方面： 一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 A A、克服遠(yuǎn)緣雜交不育；、克服遠(yuǎn)緣雜交不育； B B、促進(jìn)核果類植物胚的形成；、促進(jìn)核果類植物胚的形成； 核果類早熟品種的胚發(fā)育不健全、生活力不強(qiáng)，以早熟品種為母本與晚熟品種雜交，很難得到雜交后代。如果用幼胚離體培養(yǎng)就能得到雜交后代。 C C、打破種子的休眠期。、打破種子的休眠期。 許多植物的種子存在明顯的休眠期。由于種子結(jié)構(gòu)而存在的休眠可以用常規(guī)方法消除，而由于胚乳抑制物質(zhì)所引起的休眠只能通過胚的離體培養(yǎng)才能獲得理想的效果

9、。 一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用一、離體培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 4.4.組織和器官培養(yǎng)組織和器官培養(yǎng) 1 1）意義：）意義：優(yōu)良單系的快速繁殖；自交不親和系、優(yōu)良單系的快速繁殖；自交不親和系、雄性不育系的無性繁殖；無性繁殖園藝植物的脫雄性不育系的無性繁殖；無性繁殖園藝植物的脫毒與快繁；突變體的誘導(dǎo)與分離；進(jìn)行種質(zhì)資源毒與快繁；突變體的誘導(dǎo)與分離；進(jìn)行種質(zhì)資源長(zhǎng)期保存和長(zhǎng)距離運(yùn)輸。長(zhǎng)期保存和長(zhǎng)距離運(yùn)輸。 2 2）組織和器官培養(yǎng)的生物學(xué)基礎(chǔ)：）組織和器官培養(yǎng)的生物學(xué)基礎(chǔ)： 細(xì)胞的全能細(xì)胞的全能性和植物的再生能力。性和植物的再生能力。 3 3）組織和器官培養(yǎng)的基本過程：）組織和器官培養(yǎng)的基本過程： 外植體外植體-

10、脫分化脫分化-再分化。再分化。 二、培養(yǎng)條件二、培養(yǎng)條件 1.1.培養(yǎng)基成分培養(yǎng)基成分 1 1）無機(jī)成分）無機(jī)成分 大量元素：大量元素： N N、P P、K K、C C、H H、O O、CaCa、S S、MgMg。 微量元素：微量元素： CuCu、B B、MnMn、ZnZn、MoMo、FeFe。 2 2）有機(jī)成分：）有機(jī)成分： 糖類：糖類：蔗糖、葡萄糖。蔗糖、葡萄糖。 維生素：維生素：VB1VB1、VB6VB6、肌醇。、肌醇。 氨基酸氨基酸 堿基堿基 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 植物提取物植物提取物 瓊脂瓊脂 二、培養(yǎng)條件二、培養(yǎng)條件 2.2.環(huán)境條件環(huán)境條件 1 1）光）光 光強(qiáng)：光強(qiáng)：1000-

11、10000Lx 1000-10000Lx 光照時(shí)數(shù)：光照時(shí)數(shù)：9-169-16小時(shí)。小時(shí)。 光質(zhì)：光質(zhì)：日光燈。日光燈。 2 2）溫度：）溫度：一般25C 三、設(shè)施三、設(shè)施 1.1.準(zhǔn)備室準(zhǔn)備室 2.2.培養(yǎng)基配制及消毒室。培養(yǎng)基配制及消毒室。 三、設(shè)施三、設(shè)施 3.3.接種室接種室 4.4.培培養(yǎng)養(yǎng)室室 5.5.溫室溫室 四、基本設(shè)備四、基本設(shè)備 1.1.衡器與量具衡器與量具 2.2.玻璃器皿玻璃器皿 3.3.顯微鏡、解剖鏡顯微鏡、解剖鏡 4.4.滅菌鍋滅菌鍋 5.5.超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái) 6.6.培養(yǎng)架培養(yǎng)架 7.7.空調(diào)空調(diào) 8.8.日光燈日光燈 繼繼 代代 擴(kuò)擴(kuò) 繁繁 五、組織培養(yǎng)的一

12、般程序五、組織培養(yǎng)的一般程序 母液母液 配制配制包括大量元素、微量元素、肌醇、有機(jī)物、鐵鹽、包括大量元素、微量元素、肌醇、有機(jī)物、鐵鹽、維生素、生長(zhǎng)素母液等，根據(jù)要求多種或單獨(dú)使用維生素、生長(zhǎng)素母液等，根據(jù)要求多種或單獨(dú)使用 接種前切取莖尖或枝段，進(jìn)接種前切取莖尖或枝段，進(jìn)選取無選取無行表面消毒，無菌條件水洗行表面消毒，無菌條件水洗-選材選材 病蟲害、病蟲害、調(diào)調(diào)稀稀消毒劑浸泡消毒劑浸泡-水洗水洗-吸干。吸干。 后后大大由由定定田田試試釋釋粗壯枝、粗壯枝、至至，芽（活芽（活植植，管管繼代是接種后再分繼代是接種后再分滅滅加加體）膜體）膜。逐逐到到菌菌割接到新培養(yǎng)基上；割接到新培養(yǎng)基上；瓊瓊封冷藏

13、封冷藏溫溫步步在無在無脂脂數(shù)量增多謂增殖；數(shù)量增多謂增殖；室室適適（2-3） 菌條菌條長(zhǎng)出葉和根為再生。長(zhǎng)出葉和根為再生。 應(yīng)應(yīng)到到件下件下用接用接制培制培 種針種針繼代增殖繼代增殖 煉苗煉苗 接種接種 養(yǎng)基養(yǎng)基 取材取材再生培養(yǎng)再生培養(yǎng) 移栽移栽 料插料插入培入培 pHpH5.6-5.8 5.6-5.8 第二節(jié)第二節(jié) 原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細(xì)胞雜交的意義雜交的意義 植物原生質(zhì)體培養(yǎng)：植物原生質(zhì)體培養(yǎng)：是指將植是指將植物細(xì)胞去壁后，放在無菌條件下，物細(xì)胞去壁后，放在無菌條件下，使其進(jìn)一步生長(zhǎng)發(fā)育的技術(shù)。使其進(jìn)一步生長(zhǎng)發(fā)育的技術(shù)。 體細(xì)胞雜交：體細(xì)胞雜交：是在離體條件下是在離體條件

14、下將同一物種或不同物種的原生質(zhì)體將同一物種或不同物種的原生質(zhì)體融合，培養(yǎng)并獲得雜種細(xì)胞的再生融合，培養(yǎng)并獲得雜種細(xì)胞的再生植株。植株。 被去掉被去掉細(xì)胞壁細(xì)胞壁的具有的具有生活力生活力的裸細(xì)的裸細(xì)胞。胞。 第二節(jié)第二節(jié) 原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細(xì)胞雜交的意義雜交的意義 TakebeTakebe（19711971）首次利用煙草葉片分離）首次利用煙草葉片分離原生質(zhì)體，并培養(yǎng)獲得再生植株，至今已原生質(zhì)體，并培養(yǎng)獲得再生植株，至今已有有280280余種植物原生質(zhì)體再生植株問世。余種植物原生質(zhì)體再生植株問世。19721972年年CarlsonCarlson獲得第一株煙草體細(xì)胞雜種獲得第一株煙

15、草體細(xì)胞雜種植株以來，原生質(zhì)體融合技術(shù)在不斷完善植株以來，原生質(zhì)體融合技術(shù)在不斷完善和發(fā)展。和發(fā)展。 原生質(zhì)體融合克服了植物種屬間生殖障原生質(zhì)體融合克服了植物種屬間生殖障礙，為新種質(zhì)的創(chuàng)造提供了一條有效途徑。礙，為新種質(zhì)的創(chuàng)造提供了一條有效途徑。 一、原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交的步驟一、原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交的步驟 1.1.原生質(zhì)體分離原生質(zhì)體分離 輕度干旱（或離心）處理造成輕度干旱（或離心）處理造成質(zhì)壁分離質(zhì)壁分離；利用果膠酶；利用果膠酶（纖維素酶、半纖維素酶、蝸牛酶）等（纖維素酶、半纖維素酶、蝸牛酶）等酶解細(xì)胞壁酶解細(xì)胞壁；再；再利用離心沉淀法（漂浮法、洗滴法）等分離利用離心沉淀法（漂浮法

16、、洗滴法）等分離純化原生質(zhì)純化原生質(zhì)體體；應(yīng)用形態(tài)鑒定（活性染色、熒光染料活性染色）等；應(yīng)用形態(tài)鑒定（活性染色、熒光染料活性染色）等方法方法測(cè)定活力測(cè)定活力。 由于原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁，在由于原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁，在 培養(yǎng)基組分（如鈣和培養(yǎng)基組分（如鈣和培養(yǎng)基中培養(yǎng)基中保持一定的滲透壓保持一定的滲透壓極極碳源水平）要求嚴(yán)格。碳源水平）要求嚴(yán)格。 為重要。常用的培養(yǎng)基有：為重要。常用的培養(yǎng)基有：MS、2.2.原生質(zhì)體培養(yǎng)原生質(zhì)體培養(yǎng) N-T、B5等。等。 原生質(zhì)體移植在培養(yǎng)基上原生質(zhì)體移植在培養(yǎng)基上1-3d再生新壁再生新壁（體積增加，由體積增加，由圓形變?yōu)槁褕A形圓形變?yōu)槁褕A形）；新壁形成后，細(xì)胞分裂

17、；新壁形成后，細(xì)胞分裂形成愈傷組形成愈傷組織或胚狀體，織或胚狀體，進(jìn)一步培養(yǎng)和處理可進(jìn)一步培養(yǎng)和處理可發(fā)育成為完整植株。發(fā)育成為完整植株。 一、原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交的步驟一、原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交的步驟 3.3.體細(xì)胞雜交體細(xì)胞雜交 1 1）原生質(zhì)體融合）原生質(zhì)體融合 主要方式有：主要方式有：PEGPEG法、電融合法、電融合法、高法、高pH-pH-高濃度鈣離子法、高濃度鈣離子法、NaNONaNO3 3法等；法等； 2 2）雜種細(xì)胞篩選）雜種細(xì)胞篩選 目前主要采用突變細(xì)胞遺傳目前主要采用突變細(xì)胞遺傳互補(bǔ)選擇法、營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)選擇法和原生質(zhì)體特性差互補(bǔ)選擇法、營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)選擇法和原生質(zhì)體特性差異選擇法

18、；異選擇法； 3 3）體細(xì)胞雜種植株鑒定）體細(xì)胞雜種植株鑒定 主要方法有形態(tài)學(xué)方主要方法有形態(tài)學(xué)方法、細(xì)胞學(xué)（染色體）方法，同工酶法和分子標(biāo)法、細(xì)胞學(xué)（染色體）方法，同工酶法和分子標(biāo)記法等。記法等。 二、原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交的應(yīng)用二、原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交的應(yīng)用 原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交在育種中的主要應(yīng)用原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交在育種中的主要應(yīng)用包括：包括： 1.1.獲得新品種獲得新品種 原生質(zhì)體融合不僅包括核基因重原生質(zhì)體融合不僅包括核基因重組，也涉及核外遺傳的線粒體和葉綠體重組；組，也涉及核外遺傳的線粒體和葉綠體重組； 2.2.創(chuàng)造新種質(zhì)創(chuàng)造新種質(zhì) 原生質(zhì)體融合可獲得無性遠(yuǎn)緣雜原生質(zhì)

19、體融合可獲得無性遠(yuǎn)緣雜種植株，創(chuàng)造新型物種；種植株，創(chuàng)造新型物種； 3.3.轉(zhuǎn)移有利性狀和克服遠(yuǎn)緣雜交障礙轉(zhuǎn)移有利性狀和克服遠(yuǎn)緣雜交障礙 將親緣關(guān)將親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的一些有利性狀轉(zhuǎn)移到栽培種中；系較遠(yuǎn)的一些有利性狀轉(zhuǎn)移到栽培種中； 4.4.作為基因工程的良好受體及進(jìn)行突變體篩選的作為基因工程的良好受體及進(jìn)行突變體篩選的優(yōu)良原始材料。優(yōu)良原始材料。 葡萄與柴胡的科間體細(xì)胞雜交葡萄與柴胡的科間體細(xì)胞雜交 第三節(jié)第三節(jié) 基因工程在植物育種基因工程在植物育種 中的應(yīng)用中的應(yīng)用 基因工程基因工程是指在體外將核酸分子插入病是指在體外將核酸分子插入病毒、質(zhì)?；蚱渌d體分子，構(gòu)成遺傳物質(zhì)毒、質(zhì)?；蚱渌d體分子，構(gòu)

20、成遺傳物質(zhì)的新組合，并使之參入到原先沒有這類分的新組合，并使之參入到原先沒有這類分子的寄主細(xì)胞內(nèi)，并能持續(xù)穩(wěn)定的繁殖。子的寄主細(xì)胞內(nèi)，并能持續(xù)穩(wěn)定的繁殖。 在植物育種中基因工程的應(yīng)用主要是通在植物育種中基因工程的應(yīng)用主要是通過對(duì)有重要經(jīng)濟(jì)意義的目的基因的分離、過對(duì)有重要經(jīng)濟(jì)意義的目的基因的分離、改造、利用，培育出具有改良的重要經(jīng)濟(jì)改造、利用，培育出具有改良的重要經(jīng)濟(jì)性狀的工程植株，以及具有生物反應(yīng)器功性狀的工程植株，以及具有生物反應(yīng)器功能的工程植株。能的工程植株。 第三節(jié)第三節(jié) 基因工程在植物育種基因工程在植物育種 中的應(yīng)用中的應(yīng)用 基因工程概括起來包括以下內(nèi)容：基因工程概括起來包括以下內(nèi)容：

21、 從復(fù)雜的生物體基因組中，分離出帶有從復(fù)雜的生物體基因組中，分離出帶有目的基因的目的基因的DNADNA片段；片段； 在體外把帶有目的基因的外源在體外把帶有目的基因的外源DNADNA片段連片段連接到能夠自我復(fù)制的并具有選擇標(biāo)記的接到能夠自我復(fù)制的并具有選擇標(biāo)記的載體分子上，形成重組載體分子上，形成重組DNADNA分子；分子； 將重組將重組DNADNA分子轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞分子轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞（又稱寄主細(xì)胞），并與之一起增殖；（又稱寄主細(xì)胞），并與之一起增殖； 第三節(jié)第三節(jié) 基因工程在植物育種基因工程在植物育種 中的應(yīng)用中的應(yīng)用 從大量的細(xì)胞繁殖群體中，篩選出獲得從大量的細(xì)胞繁殖群體中，篩選出獲得了重組了重組DNADNA分子的受體細(xì)胞克?。环肿拥氖荏w細(xì)胞克??； 從這些篩選出來的受體細(xì)胞克隆，提取從這些篩選出來的受體細(xì)胞克隆，提取出已經(jīng)得到擴(kuò)增的目的基因，供進(jìn)一步出已經(jīng)得到擴(kuò)增的目的基因，供進(jìn)一步分析研究使用；分析研究使用； 將目的基因克隆到表達(dá)載體上，導(dǎo)入寄將目的基因克隆到表達(dá)載體上，導(dǎo)入寄主細(xì)胞，使之在新的遺