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文檔簡介
1、選修三 現(xiàn)代生物科技專題 專題一 基因工程 說考綱說考綱分析考情明考向分析考情明考向 說基礎說基礎 課前預習讀教材課前預習讀教材 SHUO JI CHU 基基/礎礎/梳梳/理理 一、基因工程的概念及基本工具一、基因工程的概念及基本工具 DNA 重組重組 技術(shù)或技術(shù)或 技術(shù),是按照技術(shù),是按照1概念:概念:又叫做又叫做 基因拼接基因拼接 人們的意愿,把一種生物的某種基因提取出來,加以人們的意愿,把一種生物的某種基因提取出來,加以 修飾改造修飾改造 ,然后放到另一種生物的細胞里,然后放到另一種生物的細胞里, 定向定向 地改造生物的遺傳性狀。地改造生物的遺傳性狀。 四、蛋白質(zhì)工程四、蛋白質(zhì)工程 蛋白
2、質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎,關(guān)系作為基礎,通過通過 基因修飾基因修飾 或或 基因合成基因合成 ,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活需求。以滿足人類的生產(chǎn)和生活需求。也也就是說,蛋白質(zhì)工程是在就是說,蛋白質(zhì)工程是在 基因工程基因工程 的基礎上,延伸出來的第二代的基礎上,延伸出來的第二代基因工程,是包含多學科的綜合科技工程領(lǐng)域。基因工程,是包含多學科的綜合科技工程領(lǐng)域。 (1)蛋白質(zhì)工程的基礎:蛋白質(zhì)工程的基礎: 蛋白質(zhì)分子蛋白質(zhì)分子 的
3、結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系。功能的關(guān)系。 (2)蛋白質(zhì)工程的改造對象:改造蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)工程的改造對象:改造蛋白質(zhì)的 結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu) ,本質(zhì)上是,本質(zhì)上是改造控制該蛋白質(zhì)合成的改造控制該蛋白質(zhì)合成的 基因基因 的結(jié)構(gòu)。的結(jié)構(gòu)。 (3)蛋白質(zhì)工程的產(chǎn)物:產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)工程的產(chǎn)物:產(chǎn)生新的 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 。 說考點說考點 拓展延伸串知識拓展延伸串知識 SHUO KAO DIAN知知/識識/整整/合合 基因工程的基本工具基因工程的基本工具 1“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀”限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶限制酶) 一一 (1)存在:主要存在于原核生物中。存在:主要存在于原核生物中。
4、(2)特性:特性:一種限制酶識別一種特定的核苷酸序列,一種限制酶識別一種特定的核苷酸序列, 并且能在特并且能在特定的位點上切割定的位點上切割DNA。 (3)切割后末端的種類:切割后末端的種類:DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片片段末端通常有兩種形式段末端通常有兩種形式黏性末端和平末端黏性末端和平末端(如圖所示如圖所示)。當限制。當限制酶在它的識別序列的中軸線兩側(cè)將酶在它的識別序列的中軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時,產(chǎn)的兩條鏈分別切開時,產(chǎn)生的是黏性末端,而當限制酶在它的識別序列的中軸線處切開時,生的是黏性末端,而當限制酶在它的識別序列的中軸線處切開時,產(chǎn)生的是平末端
5、。產(chǎn)生的是平末端。 2“分子縫合針分子縫合針”DNA連接酶連接酶 種類種類 來源來源 功能特功能特性性 E. coli DNA連接酶連接酶 大腸桿菌大腸桿菌 T4DNA連接酶連接酶 T4噬菌體噬菌體 只能將雙鏈只能將雙鏈DNA片段互片段互 能縫合黏性末端和平能縫合黏性末端和平補的黏性末端之間的磷酸補的黏性末端之間的磷酸 末端,但連接平末端末端,但連接平末端二酯鍵連接起來二酯鍵連接起來 之間的效率較低之間的效率較低 都縫合磷酸二酯鍵,如圖:都縫合磷酸二酯鍵,如圖: 相同點相同點 3.“分子運輸車分子運輸車”載體載體 (1)載體具備的條件:能夠在宿主細胞中穩(wěn)定保存并大量復制;載體具備的條件:能夠在
6、宿主細胞中穩(wěn)定保存并大量復制;具有多個限制酶切點,供外源具有多個限制酶切點,供外源DNA插入;具有標記基因,以便進插入;具有標記基因,以便進行篩選。行篩選。 (2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌擬核立于細菌擬核DNA之外,并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀之外,并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。其他載體還有噬菌體的衍生物、動植物病毒。分子。其他載體還有噬菌體的衍生物、動植物病毒。 衡水模擬衡水模擬? ?下表關(guān)于基因工程中某些操作的下表關(guān)于基因工程中某些操作的跟蹤訓練跟蹤訓練1 ? ?2015名詞與其對應的內(nèi)容的組合中
7、,正確的是名詞與其對應的內(nèi)容的組合中,正確的是( ) 解析:解析:基因工程中的供體是提供目的基因的生物,基因工程中的供體是提供目的基因的生物,受體是接受受體是接受目的基因的生物,目的基因的生物,常用遺傳物質(zhì)少、常用遺傳物質(zhì)少、繁殖快、繁殖快、單細胞的原核生物單細胞的原核生物(如如大腸桿菌等大腸桿菌等)作為受體。實現(xiàn)基因工程中有關(guān)基因精確操作過程的作為受體。實現(xiàn)基因工程中有關(guān)基因精確操作過程的工具有切割工具有切割DNA的工具的工具(“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀”)限制性核酸內(nèi)切酶、限制性核酸內(nèi)切酶、DNA片段的連接工具片段的連接工具(“分子縫合針分子縫合針”) DNA連接酶和基因轉(zhuǎn)連接酶和基因轉(zhuǎn)移工具
8、移工具(“分子運輸車分子運輸車”)基因進入受體細胞的載體,常用的載基因進入受體細胞的載體,常用的載體有細菌的質(zhì)粒、體有細菌的質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒,其中,質(zhì)粒是噬菌體的衍生物、動植物病毒,其中,質(zhì)粒是最常用的載體。最常用的載體。 答案:答案:C 二二 基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 1目的基因的獲取目的基因的獲取 (1)從基因文庫中獲取目的基因:從基因文庫中獲取目的基因: 如從基因組文庫或如從基因組文庫或cDNA文庫文庫中獲取。中獲取。 (2)利用利用PCR技術(shù)擴增目的基因:利用技術(shù)擴增目的基因:利用DNA復制的原理在體復制的原理在體外特異性的復制某外特異性的復制某DN
9、A片段以獲得呈指數(shù)方式增加的目的基因。片段以獲得呈指數(shù)方式增加的目的基因。 (3)人工合成法:通過人工合成法:通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成。合成儀用化學方法直接人工合成。 2基因表達載體構(gòu)建基因表達載體構(gòu)建 (1)基因表達載體的組成,如圖所示?;虮磉_載體的組成,如圖所示。 (2)基因表達載體的構(gòu)建方法。基因表達載體的構(gòu)建方法。 3將目的基因?qū)胧荏w細胞將目的基因?qū)胧荏w細胞 4.目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定 特特 別別 提提 醒醒 (1)目的基因的插入位點不是隨意的:目的基因的插入位點不是隨意的: 基因表達需要啟動子與終基因表達需要啟動子與終止子的調(diào)控,所以目的基因應插
10、入到啟動子與終止子之間的部位。止子的調(diào)控,所以目的基因應插入到啟動子與終止子之間的部位。 (2)基因工程操作過程中只有第三步基因工程操作過程中只有第三步(將目的基因?qū)胧荏w細胞將目的基因?qū)胧荏w細胞)沒有堿基互補配對現(xiàn)象,第一步存在逆轉(zhuǎn)錄法獲得沒有堿基互補配對現(xiàn)象,第一步存在逆轉(zhuǎn)錄法獲得DNA,第二步,第二步存在黏性末端連接現(xiàn)象,第四步檢測存在分子水平雜交方法。存在黏性末端連接現(xiàn)象,第四步檢測存在分子水平雜交方法。 跟蹤訓練跟蹤訓練2 浙江大學農(nóng)學院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn),一浙江大學農(nóng)學院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn),一種植物激素種植物激素油菜素內(nèi)酯能促進農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。油菜素內(nèi)酯能
11、促進農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后,用油菜素內(nèi)酯處理后,許多參與農(nóng)藥降解的基因許多參與農(nóng)藥降解的基因(如如P450基因和紅基因和紅霉素抗性基因霉素抗性基因)表達和酶活性都得到提高,在這些基因表達和酶活性都得到提高,在這些基因“指導指導”下下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無毒物合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無毒物質(zhì),有的則被直接排出體外。質(zhì),有的則被直接排出體外。某課題組進一步進行了如下的實驗操某課題組進一步進行了如下的實驗操作,請回答:作,請回答: (1)獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法有獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法有_。步步驟驟用用PC
12、R技技術(shù)術(shù) 擴擴增增 基基因因時時用用到到的的 耐耐高高 溫溫酶酶 通通常常是是指指_;步驟用到的酶有;步驟用到的酶有_。 (2)圖中導入重組質(zhì)粒的方法是圖中導入重組質(zhì)粒的方法是_, 在導入之前應用一定在導入之前應用一定濃度的濃度的_處理受體細菌。處理受體細菌。 (3)導入重組質(zhì)粒導入重組質(zhì)粒2以后,往往還需要進行檢測和篩選,可用以后,往往還需要進行檢測和篩選,可用_制成探針,檢測是否導入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入制成探針,檢測是否導入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入_可將含有目的基因的細胞篩選出來??蓪⒑心康幕虻募毎Y選出來。 (4)請你為該課題命名:請你為該課題命名:_。 解析:解析:進行基
13、因工程操作時,進行基因工程操作時,首先要獲取目的基因,首先要獲取目的基因,其方法有其方法有多種:多種:從從cDNA文庫中獲取,文庫中獲取,從基因組文庫中獲取、從基因組文庫中獲取、人工合成目的人工合成目的基因或基因或PCR合成等。在構(gòu)建基因表達載體的過程中,用到的工具合成等。在構(gòu)建基因表達載體的過程中,用到的工具酶有限制酶和酶有限制酶和DNA連接酶。圖中的受體是細菌細胞,故用轉(zhuǎn)化法連接酶。圖中的受體是細菌細胞,故用轉(zhuǎn)化法導入基因表達載體,導入后,需檢驗和篩選。從圖中可以看出,最導入基因表達載體,導入后,需檢驗和篩選。從圖中可以看出,最終是通過對照實驗來檢驗轉(zhuǎn)基因細菌對土壤中殘留農(nóng)藥的分解能終是通
14、過對照實驗來檢驗轉(zhuǎn)基因細菌對土壤中殘留農(nóng)藥的分解能力。力。 答案:答案:(1)從從cDNA文庫中獲取、從基因組文庫中獲取、人工文庫中獲取、從基因組文庫中獲取、人工合成目的基因或合成目的基因或PCR合成合成(任選其中兩項即可任選其中兩項即可) TaqDNA聚合酶聚合酶 限制酶和限制酶和DNA連接酶連接酶 (2)轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化法 氯化鈣溶液氯化鈣溶液 (3)紅霉素抗性基因紅霉素抗性基因 紅霉素紅霉素 (4)探究油菜素內(nèi)酯能否促進土壤中農(nóng)藥的分解探究油菜素內(nèi)酯能否促進土壤中農(nóng)藥的分解 基因工程的應用和蛋白質(zhì)工程基因工程的應用和蛋白質(zhì)工程 1乳腺生物反應器與工程菌生產(chǎn)藥物的比較乳腺生物反應器與工程菌生產(chǎn)藥
15、物的比較 三三 (1)概念概念 乳腺生物反應器是指將外源基因在哺乳動物的乳腺中特異乳腺生物反應器是指將外源基因在哺乳動物的乳腺中特異表達,利用動物的乳腺組織生產(chǎn)藥物蛋白。表達,利用動物的乳腺組織生產(chǎn)藥物蛋白。 工程菌是指用基因工程的方法,工程菌是指用基因工程的方法,使外源基因得到高效表達的使外源基因得到高效表達的菌類細胞株系。菌類細胞株系。 (2)兩者的區(qū)別兩者的區(qū)別 2.基因治療與基因診斷基因治療與基因診斷 特特 別別 提提 醒醒 (1)并非所有個體都可作為乳腺生物反應器:并非所有個體都可作為乳腺生物反應器:操作成功的應該是操作成功的應該是雌性個體,個體本身的繁殖速度較高,泌乳量、蛋白含量等
16、都是應雌性個體,個體本身的繁殖速度較高,泌乳量、蛋白含量等都是應該考慮的因素。該考慮的因素。 (2)基因治療后,基因治療后,缺陷基因沒有改變,缺陷基因沒有改變,基因治療是把正常基因?qū)Щ蛑委熓前颜;驅(qū)胧荏w細胞中,以表達正常產(chǎn)物從而治療疾病,對原來細胞中存在入受體細胞中,以表達正常產(chǎn)物從而治療疾病,對原來細胞中存在缺陷的基因沒有清除或改變。缺陷的基因沒有清除或改變。 3基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較 蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎上延伸出蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎上延伸出聯(lián)系聯(lián)系 來的第二代基因工程。對現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改來的第二代基因工程。對現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白
17、質(zhì),必須通過基因修飾造或制造新的蛋白質(zhì),必須通過基因修飾或基因合成實現(xiàn)或基因合成實現(xiàn) 跟蹤訓練跟蹤訓練3 基因敲除主要是應用基因敲除主要是應用DNA同源重組原理。將同源同源重組原理。將同源DNA片段片段導入受體細胞,使同源導入受體細胞,使同源DNA片段在原有位置替代了靶基因片段,片段在原有位置替代了靶基因片段,從而達到基因敲除的目的。從而達到基因敲除的目的?;蚯贸瓤梢允怯猛蛔兓蚧蚱渌蚯贸瓤梢允怯猛蛔兓蚧蚱渌蚯贸鄳恼;?,也可以用正常基因敲除相應的突變基因。因敲除相應的正?;颍部梢杂谜;蚯贸鄳耐蛔兓?。下列有關(guān)基因敲除說法正確的是下列有關(guān)基因敲除說法正確的是
18、( ) A基因敲除實際上是刪除某個基因,從而達到使該基因基因敲除實際上是刪除某個基因,從而達到使該基因“沉沉默默”的目的的目的 B利用基因敲除技術(shù),不能修復細胞中的病變基因利用基因敲除技術(shù),不能修復細胞中的病變基因 C基因敲除可定向改變生物體的某一基因基因敲除可定向改變生物體的某一基因 D從理論上分析,利用基因敲除技術(shù)可治療先天性愚型從理論上分析,利用基因敲除技術(shù)可治療先天性愚型 解析:解析:由題意知基因敲除實際上是替換了某個基因,由題意知基因敲除實際上是替換了某個基因,從而達到從而達到使該基因使該基因“沉默沉默”的目的,的目的,A錯誤。錯誤?;蚯贸瓤梢允怯猛蛔兓蚧蚯贸瓤梢允怯猛蛔兓?/p>
19、因或其它基因敲除相應的正?;颍蚱渌蚯贸鄳恼;颍部梢杂谜;蚯贸鄳耐灰部梢杂谜;蚯贸鄳耐蛔兓?,可定向改變生物體的某一基因,變基因,可定向改變生物體的某一基因,B錯誤,錯誤,C正確。先天性正確。先天性愚型是染色體異常引起的遺傳病,不能用基因敲除治療,愚型是染色體異常引起的遺傳病,不能用基因敲除治療,D錯誤。錯誤。 答案:答案:C 說案例說案例 劃分題型找規(guī)律劃分題型找規(guī)律 SHUO AN LI 解答基因操作程序的有關(guān)問題解答基因操作程序的有關(guān)問題 一要分辨限制酶的種類及識別序列和切割位點:一要分辨限制酶的種類及識別序列和切割位點: 在切割目的基在切割目的基一一 因
20、和運載體時,一般用同一種限制酶切割,也可用不同的限制酶切因和運載體時,一般用同一種限制酶切割,也可用不同的限制酶切割,但兩種限制酶切割后必需產(chǎn)生相同的黏性末端。割,但兩種限制酶切割后必需產(chǎn)生相同的黏性末端。 二要找出標記基因、目的基因及其插入位點:一般來說,質(zhì)粒二要找出標記基因、目的基因及其插入位點:一般來說,質(zhì)粒中至少有一個標記基因,如抗生素抗性基因。明確目的基因的插入中至少有一個標記基因,如抗生素抗性基因。明確目的基因的插入位點是在標記基因內(nèi)部還是標記基因之外。位點是在標記基因內(nèi)部還是標記基因之外。 三要分析目的基因插入質(zhì)粒后是否破壞了標記基因:三要分析目的基因插入質(zhì)粒后是否破壞了標記基因
21、:如果質(zhì)粒如果質(zhì)粒中有一個標記基因,中有一個標記基因,插入后一般不破壞標記基因;插入后一般不破壞標記基因;如果質(zhì)粒中有兩如果質(zhì)粒中有兩個標記基因,個標記基因,則需看標記基因中是否有插入位點,則需看標記基因中是否有插入位點,如果某一標記基如果某一標記基因中有插入位點,則目的基因插入質(zhì)粒后該標記基因被破壞。因中有插入位點,則目的基因插入質(zhì)粒后該標記基因被破壞。 四要理清判斷目的基因是否導入受體細胞的方法:四要理清判斷目的基因是否導入受體細胞的方法:一般用含有一般用含有某種抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)受體菌。某種抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)受體菌。如果有兩種抗生素基因,如果有兩種抗生素基因,還需判還需判斷用哪一種抗生素
22、來判斷。斷用哪一種抗生素來判斷。 例例1 科學家從預期人的生長激素的功能出發(fā),推測相應的脫科學家從預期人的生長激素的功能出發(fā),推測相應的脫氧核苷酸序列,并人工合成了雙鏈氧核苷酸序列,并人工合成了雙鏈DNA片段,片段,獲得雙鏈獲得雙鏈DNA。科??茖W家將人的生長激素基因與大腸桿菌的質(zhì)粒進行重組,學家將人的生長激素基因與大腸桿菌的質(zhì)粒進行重組,并成功地在并成功地在大大腸腸桿桿菌菌中中得得以以表表 達達。已已知知限限制制 酶酶的的識識別別序序 列列和和切切點點是是G GATCC,限制酶限制酶的識別序列和切點是的識別序列和切點是 GATC。據(jù)圖據(jù)圖回答:回答: (1)構(gòu)建基因表達載體時,必須有構(gòu)建基因
23、表達載體時,必須有_、目的基因、終止、目的基因、終止子以及子以及_。 (2)為了精確地獲取圖中的目的基因,應用為了精確地獲取圖中的目的基因,應用_切割質(zhì)粒,切割質(zhì)粒,用用_切割目的基因。切割目的基因。 (3)將基因表達載體導入細菌將基因表達載體導入細菌B之前,要將細菌之前,要將細菌B放入一定濃放入一定濃度的度的_溶液中處理,溶液中處理,使之成為感受態(tài)的細菌。使之成為感受態(tài)的細菌。 人的基因之所人的基因之所以能與大腸桿菌的質(zhì)粒進行重組并發(fā)揮其功能,以能與大腸桿菌的質(zhì)粒進行重組并發(fā)揮其功能, 是因為二者的空間是因為二者的空間結(jié)構(gòu)都是結(jié)構(gòu)都是_。 (4)人人體體 的的生生 長長激激素素 基基因因 能
24、能在在細細 菌菌體體內(nèi)內(nèi) 成成功功表表 達達是是 因因為為_。 (5)將得到的大腸桿菌將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,能夠生長的,說明已導入了上,能夠生長的,說明已導入了_,反之則沒有導入。,反之則沒有導入。 【解析】【解析】 (1)構(gòu)建基因表達載體時,構(gòu)建基因表達載體時,必須有啟動子、必須有啟動子、目的基因、目的基因、終止子以及標記基因。終止子以及標記基因。(2)根據(jù)圖示分析可知目的基因插在了質(zhì)粒中根據(jù)圖示分析可知目的基因插在了質(zhì)粒中含抗四環(huán)素基因的部位,含抗四環(huán)素基因的部位,而該位置有限制酶而該位置有限制酶 和和的識別位點,的識別位點,
25、但但限制酶限制酶會同時在會同時在Gene 和和處切開,因此在構(gòu)建基因表達載體處切開,因此在構(gòu)建基因表達載體過程中,過程中,應用限制酶應用限制酶切割質(zhì)粒;切割質(zhì)粒;而目的基因的兩側(cè)均含有能被限而目的基因的兩側(cè)均含有能被限制酶制酶識別的堿基序列,識別的堿基序列,所以用限制酶所以用限制酶切割目的基因,切割目的基因,能夠露出能夠露出兩端的黏性末端。因此,為了精確地獲取圖中的目的基因,應分別兩端的黏性末端。因此,為了精確地獲取圖中的目的基因,應分別用限制酶用限制酶和限制酶和限制酶切割質(zhì)粒和目的基因。切割質(zhì)粒和目的基因。(3)將基因表達載體導將基因表達載體導入細菌入細菌B之前,要將細菌之前,要將細菌B放入
26、一定濃度的放入一定濃度的CaCl2溶液中處理,溶液中處理, 能與大腸桿菌的能與大腸桿菌的DNA分子進行重組,是因為人的基因與大腸桿菌分子進行重組,是因為人的基因與大腸桿菌DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同。分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同?!敬鸢浮俊敬鸢浮?(1)啟動子啟動子 標記基因標記基因 (2)限制酶限制酶 限制酶限制酶 (3)CaCl2 規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu) (4)共用一套共用一套(遺傳遺傳)密碼子密碼子 (5)質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒質(zhì)粒或重組質(zhì)粒 關(guān)注科技發(fā)展方向,解答基因工程相關(guān)綜合題關(guān)注科技發(fā)展方向,解答基因工程相關(guān)綜合題 山東卷山東卷? ?人組織纖溶酶原激活物人組織纖溶酶原激活物(htPA)是
27、一種重要是一種重要例例2 ? ?2014二二 的藥用蛋白,可在轉(zhuǎn)的藥用蛋白,可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下:基因母羊的羊乳中獲得。流程如下: (1)htPA基因與載體用基因與載體用_切割后,通過切割后,通過DNA連接酶連連接酶連接,以構(gòu)建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞接,以構(gòu)建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA,可采用,可采用_技術(shù)。技術(shù)。 (2)為獲取更多的卵為獲取更多的卵(母母)細胞,要對供體母羊注射促性腺激素,細胞,要對供體母羊注射促性腺激素,使其使其_。采集的精子需要經(jīng)過。采集的精子需要經(jīng)過_,才具備受精能力。,才具備受精能力。 (3)將重組表達載體導入受精卵常用的方法是將重組表達載體導入受精卵常用的方法是_。為了。為了獲得母羊,移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行獲得母羊,移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行_。利用胚胎分割
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