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文檔簡介

1、從香煙對乳酸菌的影響看吸煙對消化功能的危害陳正怡孫斐陳子彧 輔導(dǎo)老師:孫艷芬程虹摘要:把不同濃度的香煙浸出液添加到乳酸菌培養(yǎng)基上,觀察乳酸菌的生長繁殖情況。經(jīng)過多次重復(fù)地實驗,發(fā)現(xiàn)香煙對乳酸菌的 生長有明顯的抑制作用,浸出液濃度越大,抑制作用越明顯。 一支香煙在100ml水中的浸出原液與乳酸菌稀釋液按1:1的比 例混合,可使90%左右的乳酸菌無法生長。由于乳酸菌是能 幫助消化的益生菌,對于維持消化道菌群平衡有著重要作用, 本實驗間接反映了吸煙對消化系統(tǒng)也有明顯的危害。關(guān)鍵詞:香煙乳酸菌消化一、問題的提出香煙對于呼吸系統(tǒng)的危害已經(jīng)人盡皆知, 但除了呼吸系統(tǒng)外,香 煙對身體的其它功能是不是也有明顯

2、的毒害作用呢?我想到了我的 一個常年吸煙的親戚,不僅因為吸煙把牙齒染黃了,而且吃得也不多。 他喜歡飯后一支煙,經(jīng)常說餓的時候抽支煙就覺得不覺得餓了, 感覺 很滿足。那么,香煙是不是對我們的消化功能有抑制作用呢?如果有 的話有沒有方法可以很形象地把危害顯示出來讓人警醒?在學(xué)習(xí)測量乳酸菌的活性的時候我突然想到, 乳酸菌是一種存在 于人類體內(nèi)的益生菌,能夠?qū)⑻妓衔锇l(fā)酵成乳酸,幫助消化,有 助人體腸臟的健康。由于廣譜和強力的抗菌素的廣泛應(yīng)用, 使人體腸 道內(nèi)以乳酸菌為主的益生菌遭受到嚴(yán)重破壞, 就會出現(xiàn)消化不良等一 系列的問題。那么,我們是不是也可以從香煙對乳酸菌的危害中,間 接了解香煙對于消化系

3、統(tǒng)的影響呢?二、實驗材料(1)試劑 改良TJA培養(yǎng)基(按 GB/T4789.35-2003 規(guī)定) 滅菌蒸餾水 某種品牌的香煙一包 某種品牌100ml裝脫脂酸奶一瓶(2)儀器恒溫培養(yǎng)箱;冰箱;架盤天平;滅菌培養(yǎng)皿若干;滅菌鑷子;錐 形瓶;試管;試管架;移液槍及槍頭;震蕩器。三、實驗步驟(1)配制改良TJA培養(yǎng)基1000毫升,分裝在三個大錐形瓶中配方如下:番茄汁酵母抽提液牛肉膏乳糖葡萄糖磷酸氫二鉀吐溫-80乙酸鈉瓊脂50 mL5g10 g20 g2g2 gl g5g15g最后加水定容至1000ml,測量pH6.8 士 0.2左右。另制備0.5%的瓊脂溶液以備覆蓋在TJA培養(yǎng)基表層。(2)制備不同

4、濃度的煙草浸出液 將單支煙在水中浸泡三小時,得到煙草浸出原液。 取10ml煙草浸出原液,加蒸餾水稀釋至 50ml,得到稀釋5 倍的煙草浸出液。 取5ml煙草浸出原液,加蒸餾水稀釋至 50ml,得到稀釋10 倍的煙草浸出液。(3) 將培養(yǎng)基和煙草浸出液分裝好后,與培養(yǎng)皿、試管一道在120 C條件下滅菌20 min。(4) 制備乳酸菌稀釋液 在超凈工作臺上,用移液槍吸取0.1ml脫脂酸奶,稀釋至10ml, 在震蕩器上震蕩均勻,得到10-2稀釋液。 取0.1ml 10-2稀釋液,稀釋至10ml,得到10-4稀釋液。 取0.1ml 10-4稀釋液,稀釋至10ml,得到10-6稀釋液。 取1ml 10-

5、6稀釋液,稀釋至10ml,得到10-7稀釋液。 取0.1ml 10-6稀釋液,稀釋至10ml,得到10-8稀釋液。(5) 預(yù)接種取酸奶原液和10-2、10-4、10-6、10-7、10-8倍的稀釋液各1ml, 分別注入各個培養(yǎng)皿內(nèi),做好標(biāo)記。待 TJA培養(yǎng)基冷卻至50 C左右 時,倒平板,轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使菌液與培養(yǎng)基混合均勻。待瓊脂凝固后, 翻轉(zhuǎn)平板,置36 C左右的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)三天,觀察乳酸菌菌落生長 狀態(tài)和數(shù)目,挑出能夠計數(shù)的平板。我們預(yù)接種顯示,原液一一10-6條件下乳酸菌在平板上生長都過 密,10-8太稀因此下一步實驗選用10-7倍的乳酸菌稀釋液。(6) 在每組培養(yǎng)皿上倒入以下幾種試劑,轉(zhuǎn)

6、動均勻: 對照組:TJA培養(yǎng)基+1ml 10-7乳酸菌稀釋液; 煙草原液:TJA培養(yǎng)基+1ml 10-7乳酸菌稀釋液+1ml煙草原 液; 稀釋5倍的煙草浸出液:TJA培養(yǎng)基+1ml 10-7乳酸菌稀釋液 +1ml稀釋5倍的煙草液; 稀釋10倍的煙草浸出液:TJA培養(yǎng)基+1ml 10-7乳酸菌稀釋液 +1ml稀釋10倍煙草液;(7) 待待瓊脂凝固后,澆上一層瓊脂隔離空氣。翻轉(zhuǎn)平板,置36 C左右的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)三天,觀察各組乳酸菌菌落生長狀態(tài)和數(shù)目,進(jìn)行比較,得出結(jié)論。(8)為了增加結(jié)果的科學(xué)性,隨機抽取平板上的 5個菌落做過 氧化氫酶檢測,并用革蘭氏染色觀察細(xì)菌的形態(tài),以確定平板上生長 的是乳酸

7、菌。四、實驗結(jié)果(1)培養(yǎng)皿底為黃色,上面生長的菌落濕潤微白色,邊緣不是 很整齊,像一團(tuán)團(tuán)小棉絮。從菌落的特點上可初步確定生長的是乳酸 菌。(2)菌落中挑出的細(xì)菌過氧化氫酶陰性,革蘭氏染色的照片如下圖所示:從圖中可以看出,細(xì)菌經(jīng)染色后呈紫色桿狀,革蘭氏染色陽性, 符合乳酸菌的特點。綜合菌落的特點、過氧化氫酶檢測結(jié)果和染色鏡 檢,可以確定生長的是乳酸桿菌,沒有被雜菌污染,可以通過菌落計 數(shù)來計算乳酸桿菌的數(shù)目。(3)不同組乳酸菌生長情況如下表:乳酸菌稀釋倍數(shù)煙草原液稀釋5倍的煙草液稀釋10倍煙草液對照菌落數(shù)23113無法計數(shù)無法計數(shù)乳酸菌減少10-7菌落數(shù)乳酸菌減少2.3 X10811.3 X1

8、0892.3%202X10867.3%62.3%略有減少989.8 X0893.3%無法計數(shù)略有減少無法計數(shù)從上圖中可很清楚地看到,隨著煙草濃度的增加,乳酸菌的數(shù)目 要急劇下降。稀釋10-7倍的乳酸菌,在對照組平板中都密集得無法計 數(shù)。在稀釋了 10倍的煙草浸出液組,乳酸菌雖然仍然不方便計數(shù), 但是看上去已經(jīng)明顯比對照組要疏松。在稀釋了5倍的煙草浸出液里,菌落的數(shù)量已經(jīng)少到可以計數(shù)了,與酸奶瓶標(biāo)注每毫升含有 3X 109數(shù)目的乳酸菌相比,計算出來乳酸菌的減少比例在 60%左右。而 加煙草原液組里,僅有不到10%的乳酸菌幸存。從這些這些圖片和數(shù)據(jù)中不難看出,煙草的確會對乳酸菌的生長 有明顯的抑制

9、作用,而且濃度越高,危害越大。五、結(jié)果分析人體的消化道中存在大量的益生菌,這些益生菌在消化道內(nèi)大量 繁衍可促進(jìn)并提高人體的全身免疫能力,保持腸內(nèi) PH值穩(wěn)定,促進(jìn) 新陳代謝和維生素B族的合成,幫助消化吸收,提高人體腸道對微 量元素的吸收能力,建起微生態(tài)壁壘。如果這種平衡被打破,消化功 能就會受到損害。我們的實驗結(jié)果顯示,香煙燃燒前的浸泡產(chǎn)物就可以對益生菌群 中的乳酸菌產(chǎn)生明顯的毒害作用。那么香煙在燃燒后會產(chǎn)生一氧化 碳、二氧化碳、尼古丁、焦油、氮氧化物等更有害物質(zhì),如果被吸入 口腔,再被唾沫溶解從而進(jìn)入消化道,該給消化系統(tǒng)內(nèi)的益生菌帶來 多大的災(zāi)難就不難想象了。長久以往,消化系統(tǒng)內(nèi)的菌群平衡被打破, 就可能加重胃潰瘍、慢性胃炎的發(fā)病概率。六、心得體會(1)從這個小實驗中,我不僅了解了香煙在另一方面的危害, 更學(xué)到了設(shè)計實驗的一種思路?,F(xiàn)實生活中的許多疑問是不一定能夠 通過直接實驗得到的,比如說手機究竟對人是否有害,是不可能在人 身上很快得到答案。這個小課題也是如是此,我們不可能用人來做這 個實驗,用動物做實驗也不能很快得出結(jié)論,但當(dāng)我們

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