抗生素類藥物分析沒有幻燈片標(biāo)題ppt課件

1、第十一章第一節(jié)第一節(jié) 概述概述抗生素的定義抗生素的定義 抗生素是細(xì)菌、放線菌和真抗生素是細(xì)菌、放線菌和真菌等微生物的代謝產(chǎn)物，對(duì)各種菌等微生物的代謝產(chǎn)物，對(duì)各種病原微生物有強(qiáng)大的抑制或殺滅病原微生物有強(qiáng)大的抑制或殺滅作用。作用。一一 抗生素藥物的特點(diǎn)抗生素藥物的特點(diǎn)生物發(fā)酵，生物發(fā)酵， 化學(xué)純化，精化學(xué)純化，精致，化學(xué)修飾等過程，最致，化學(xué)修飾等過程，最后制成制劑，構(gòu)造，組成后制成制劑，構(gòu)造，組成更復(fù)雜。更復(fù)雜。 化學(xué)純度低，有三多：同化學(xué)純度低，有三多：同系物多，異構(gòu)體多，降解物多。系物多，異構(gòu)體多，降解物多。發(fā)酵過程不易控制。消費(fèi)工藝發(fā)酵過程不易控制。消費(fèi)工藝復(fù)雜易受污染。分子構(gòu)造大多復(fù)雜

2、易受污染。分子構(gòu)造大多不穩(wěn)定，降解后療效下降、失不穩(wěn)定，降解后療效下降、失效或添加毒副作用。活性產(chǎn)物效或添加毒副作用?；钚援a(chǎn)物易發(fā)生變異。易發(fā)生變異。 發(fā)酵液中雜質(zhì)發(fā)酵液中雜質(zhì) 無機(jī)鹽、脂無機(jī)鹽、脂肪、各種蛋白質(zhì)、各種降解產(chǎn)肪、各種蛋白質(zhì)、各種降解產(chǎn)物、色素、熱原、毒性物質(zhì)物、色素、熱原、毒性物質(zhì) 檢查檢查 添加異常毒性、細(xì)菌內(nèi)添加異常毒性、細(xì)菌內(nèi)毒素、熱原、降壓物質(zhì)、無菌毒素、熱原、降壓物質(zhì)、無菌 二二 質(zhì)量分析的測(cè)定方法質(zhì)量分析的測(cè)定方法一生物學(xué)方法一生物學(xué)方法1 1 測(cè)定抗生素抑菌或殺菌的才干測(cè)定抗生素抑菌或殺菌的才干優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)1 1、與臨床效果一致、與臨床效果一致2 2、靈敏度高、靈敏度

3、高3 3、干擾物質(zhì)少、干擾物質(zhì)少缺陷缺陷1 1、操作繁瑣、操作繁瑣2 2、培育時(shí)間長(zhǎng)、培育時(shí)間長(zhǎng)2 2、測(cè)定誤差大、測(cè)定誤差大2 2化學(xué)及物理化學(xué)方法化學(xué)及物理化學(xué)方法以理化方法測(cè)定主藥含量以理化方法測(cè)定主藥含量?jī)?yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 1. 1. 準(zhǔn)確度高準(zhǔn)確度高2. 2. 簡(jiǎn)單、快速簡(jiǎn)單、快速1. 1. 不一定代表生物效價(jià)不一定代表生物效價(jià)缺陷缺陷2. 2. 易受雜質(zhì)干擾易受雜質(zhì)干擾三三 分類按構(gòu)造與性質(zhì)：分類按構(gòu)造與性質(zhì)： 內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、 四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、 氯霉素類、多肽類、抗腫瘤類氯霉素類、多肽類、抗腫瘤類 林可霉素類、其他抗生素類林可霉素類、

4、其他抗生素類NSCH3CH3COOHOHN1234567RCO母核（6-氨基青霉烷酸）第二節(jié)第二節(jié) 內(nèi)酰胺類抗生素內(nèi)酰胺類抗生素 青霉素類青霉素類頭孢菌素類頭孢菌素類7654321NONHSCH2R1COOH母核（7-氨基頭孢菌烷酸）RCOCONSOHNCOOHCH3CH3CH2青霉素青霉素青霉素G G、芐青霉素、芐青霉素NH2CONSOHNCOOHCH3CH3CH2氨芐西林氨芐西林氨芐青霉素氨芐青霉素阿莫西林阿莫西林羥氨芐青霉素羥氨芐青霉素NH2CONSOHNCOOHCH3CH3HOCH2C2H5 2NCH2CH2OOCNSOHNCOOHCH3CH3OCCH2NH2普魯卡因青霉素普魯卡因青霉

5、素頭孢氨芐NONHSCH3COOHOCNH2CH2頭孢拉定CH2NH2CONONHSCH3COOH頭孢羥氨芐NONHSCH3COOHOCNH2CH2HO頭孢噻吩鈉SCH2CONONHSCH2OCOCH3COONaNSOHNCOOKCH3CH3OCCH2一一 構(gòu)造與性質(zhì)構(gòu)造與性質(zhì)一羧基一羧基 酸性酸性NaNa與堿金屬與堿金屬(Na+(Na+、K+)K+)成鹽易溶于水成鹽易溶于水 與有機(jī)堿與有機(jī)堿( (普魯卡因普魯卡因) )成鹽難溶于水成鹽難溶于水 普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素C2H52NCH2CH2OOCNSOHNCOOHCH3CH3OCCH2NH2NSO1234567二手性二手性C C 旋光性

6、旋光性87654321NOS(5%(5%頭孢唑啉鈉溶液頭孢唑啉鈉溶液 18 182424) )20D 青霉素類青霉素類 C3 C5 C3 C5 C6C6頭孢菌素類頭孢菌素類 C6 C7 C6 C7 三共軛體系三共軛體系 UVUV青霉素類母核無明顯青霉素類母核無明顯UVUV，多數(shù)有苯環(huán)，多數(shù)有苯環(huán)取代基取代基頭孢菌素類頭孢菌素類 母核有共軛體系母核有共軛體系 NSONOS 青霉素鈉青霉素鈉UV7-20四四內(nèi)酰胺內(nèi)酰胺環(huán)環(huán) 枯燥純真時(shí)枯燥純真時(shí) - - 穩(wěn)定穩(wěn)定水溶液：水溶液： 不穩(wěn)定不穩(wěn)定 不穩(wěn)定不穩(wěn)定性要素性要素四元環(huán)張力大四元環(huán)張力大酰胺鍵易水解酰胺鍵易水解某些金屬離子某些金屬離子溫度溫度失

7、失效效降降解解青青霉霉素素類類酸酸、堿堿、青青霉霉素素酶酶某些氧化劑某些氧化劑例例青霉素的降解反響青霉素的降解反響青青霉霉素素青霉噻唑酸青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉素酶青霉酸青霉酸H2OpH2100青霉噻青霉噻唑?；u唑?；u胺酸胺酸NH2OH青霉烯酸青霉烯酸pH4青霉胺青霉胺CO2青霉醛青霉醛HgCl2失失效效降降解解頭頭孢孢菌菌素素類類酸酸、堿堿、胺胺類類內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺酶酶 二二 鑒別鑒別一呈色反響一呈色反響1. 1. 羥肟酸鐵反響羥肟酸鐵反響 -內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類NaOHNaOH HClNOHH內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類呈色呈色羥肟酸衍生物羥肟酸衍生物Fe3+/3Fe3+/3H+H+NSONSC

8、OHNHOHH2NOH HClNSCHNHOFe3+3OH+Fe3+/3 紅、棕、褐紅、棕、褐NH2CONSOHNCOOHCH3CH3CH22.2.類似肽鍵的反響類似肽鍵的反響 茚三酮反響茚三酮反響 - -氨基氨基藍(lán)藍(lán)紫紫色色氨氨基基茚茚三三酮酮 -氨基、伯胺氨基、伯胺某些羥基胺類某些羥基胺類酮式酮式烯醇式烯醇式茚三酮茚三酮茚三酮茚三酮縮合縮合藍(lán)紫色藍(lán)紫色+H2OCNCH2RC OH2RCHH2NCOOH2OHCCOCOCOHNH2CCOCOCOCOHCNCCOCOCOCOHCHRNCCOCOCO CONH紫紫內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類堿堿性性酒酒石石酸酸銅銅 開環(huán)分解開環(huán)分解雙縮脲反響雙縮脲反響 -內(nèi)

9、酰胺類內(nèi)酰胺類2OHCONH2CuCOHNCCH3COONaCH3SNHNCH3CH3COONaCSNOHOHOOCH2NH2CH2HH藍(lán)紫色藍(lán)紫色3 3其他顯色反響其他顯色反響 與變色酸與變色酸- -硫酸反響硫酸反響青霉素青霉素 阿莫西林阿莫西林 氨芐西林氨芐西林活潑活潑“-CH2-HCHOCHSOH ”羰羰基基側(cè)側(cè)鏈鏈含含“分解分解變色酸變色酸顯色顯色NH2CONSOHNCOOHCH3CH3HOCH2 變變色色酸酸阿阿莫莫西西林林HCHOSOH150縮合縮合色色褐褐SO3HSO3HHOHOSO3HSO3HHOHOOHOHHO3SHO3SCHHCHO 縮合縮合與重氮苯磺酸反響與重氮苯磺酸反響

10、 頭孢哌酮頭孢哌酮橙橙黃黃色色重重氮氮苯苯磺磺酸酸 OHHC巧合巧合酚羥基酚羥基SNOHCONHCHCONHH5C2OONNOCOOHCH2SNNNNCH3NClNNaO3S OH巧合巧合NNNNCH3SNOHCONHCHCONHH5C2OONNOCOOHCH2SNNNaO3S與與H2SO4 - HNO3反響反響亮亮黃黃紅紅棕棕黃黃色色頭頭孢孢噻噻肟肟鈉鈉頭頭孢孢噻噻吩吩鈉鈉頭頭孢孢氨氨芐芐 HNOSOH頭孢菌素類頭孢菌素類二二 K+、Na+反響反響 焰色焰色鮮黃色鮮黃色 + 醋酸氧鈾鋅醋酸氧鈾鋅黃黃 Na+ 焰色焰色紫色紫色 + 0.1%四苯硼鈉四苯硼鈉 + Ac白白 K+與銅鹽反響與銅鹽反

11、響 CuSOHAc頭頭孢孢氨氨芐芐橄欖綠色橄欖綠色NaOH專屬反響專屬反響沉淀反響沉淀反響1. 1. 遇酸遇酸白白青青霉霉素素青青霉霉素素鈉鈉青青霉霉素素鉀鉀 H有機(jī)胺鹽反響有機(jī)胺鹽反響1 1重氮化重氮化 - - 巧合反響巧合反響 青霉素青霉素普魯卡因普魯卡因普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素 H重氮化重氮化- -巧合反響巧合反響紅紅 芳伯氨基芳伯氨基C2H5 2NCH2CH2OOCNSOHNCOOHCH3CH3OCH+C2H52CH2NH2H2NCOOCH2CH2N普魯卡因普魯卡因普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素NCH2CH2OOC2C2H5N+Cl-N2C2H5COOCH2CH2NNH2HClNaN

12、O2 2 2與三硝基苯酚反響與三硝基苯酚反響 三三硝硝基基苯苯酚酚二二芐芐基基乙乙二二胺胺芐芐星星青青霉霉素素NaOH二芐基乙二胺二芐基乙二胺三硝基苯酚三硝基苯酚H2OHOH-HCONSOHNCOOHCH3CH3CH2CH2NCH2CH2NHCH2OHNO2O2NNO2CH2NCH2CH2NHCH2光譜法光譜法三三1、 IR法法阿莫西林的紅外光譜圖阿莫西林的紅外光譜圖117401815 cmVOC116901710 cmVOC-內(nèi)酰胺環(huán)內(nèi)酰胺環(huán)酰胺酰胺青霉素青霉素2、 UV法法 樣品、分解產(chǎn)物樣品、分解產(chǎn)物A,Emin,max,%1cm1 光光譜譜圖圖nm339HA 苯苯唑唑青青霉霉烯烯酸酸苯

13、苯唑唑青青霉霉素素Cu2+頭孢氨芐頭孢氨芐 max = 262nm max = 262nm青霉素青霉素V鈉鈉 A280nm/A264nm = 1.301.50 取本品，加醋酸取本品，加醋酸- -醋酸鈉緩沖醋酸鈉緩沖溶液溶液pH3.8pH3.8，制成，制成50ug/ml50ug/ml的溶液，的溶液，取取10ml10ml，水浴加熱，以未加熱的共，水浴加熱，以未加熱的共試品為空白。測(cè)定，吸收度試品為空白。測(cè)定，吸收度0.60.6。NOCONHCH3NOSCH3CH3COONaNOCHCH3OCOCNHNCHHCCH3CH3SHCHCOOHCu2+pH3.8氯唑青霉素氯唑青霉素 341 0.682雙氯

14、青霉素雙氯青霉素 342 0.653苯唑青霉素苯唑青霉素 339 1.328max %1cm1E(nm) ml/g50 四色譜法四色譜法 對(duì)照品對(duì)照法對(duì)照品對(duì)照法1、 TLC法法和和斑斑點(diǎn)點(diǎn)顏顏色色比比較較供供試試品品對(duì)對(duì)照照品品相相同同條條件件fR2、 HPLC法法Rt比比較較供供試試品品對(duì)對(duì)照照品品相相同同條條件件特殊雜質(zhì)的檢查特殊雜質(zhì)的檢查一一 聚合物聚合物 中國(guó)藥典規(guī)定，頭包曲松，中國(guó)藥典規(guī)定，頭包曲松，哌酮，噻肟需檢查聚合物。用哌酮，噻肟需檢查聚合物。用HPLCHPLC，以他啶為例。，以他啶為例。 對(duì)照溶液的制備對(duì)照溶液的制備 取對(duì)照取對(duì)照品適量，精細(xì)稱定，加水制成品適量，精細(xì)稱定，

15、加水制成100ug/ml100ug/ml溶液，搖勻。溶液，搖勻。 測(cè)定法測(cè)定法 取對(duì)照品適量，取對(duì)照品適量，精細(xì)稱定，加水制成，精細(xì)稱定，加水制成，20ug/ml20ug/ml進(jìn)樣。含聚合物不得超越頭孢進(jìn)樣。含聚合物不得超越頭孢他定的他定的0.3%0.3%。 二有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體二有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體P273P273 頭孢氨芐中有關(guān)物質(zhì)的檢查頭孢氨芐中有關(guān)物質(zhì)的檢查反相反相TLCTLC法頭孢氨芐以青霉素鉀法頭孢氨芐以青霉素鉀為原料，經(jīng)氧化、擴(kuò)環(huán)、裂解得為原料，經(jīng)氧化、擴(kuò)環(huán)、裂解得7-7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸氨基去乙酰氧基頭孢烷酸7-ADCA7-ADCA，再與側(cè)鏈，再與側(cè)鏈a-a-苯甘氨酸縮合而成苯

16、甘氨酸縮合而成。這兩種原料有能夠成為主要雜質(zhì)。這兩種原料有能夠成為主要雜質(zhì)。用茚三酮顯色，。用茚三酮顯色， a-a-苯甘氨酸和苯甘氨酸和7-ADCA7-ADCA斑點(diǎn)顯橙黃色。斑點(diǎn)顯橙黃色。 三雜質(zhì)吸收度的檢查三雜質(zhì)吸收度的檢查 青霉素鈉鉀：青霉素鈉鉀：取本品，加水，取本品，加水，1.80mg/ml1.80mg/ml。280nm280nm不得大于不得大于0.100.10，264nm264nm應(yīng)為應(yīng)為0.80-0.80-0.880.88。264nm264nm的吸收值用來控制青的吸收值用來控制青霉素鈉鉀的含量。霉素鈉鉀的含量。280nm280nm的吸的吸收用來控制雜質(zhì)。收用來控制雜質(zhì)。四、 含量測(cè)定

17、含量測(cè)定碘量法碘量法一一-內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類ChPChP利用其分子本身不耗費(fèi)碘，而降利用其分子本身不耗費(fèi)碘，而降解產(chǎn)物耗費(fèi)碘，用剩余碘量法測(cè)解產(chǎn)物耗費(fèi)碘，用剩余碘量法測(cè)定，以規(guī)范對(duì)比法計(jì)算。定，以規(guī)范對(duì)比法計(jì)算。 IINaOH頭頭孢孢菌菌素素族族青青霉霉素素族族水解水解 H1.1.原理原理水解產(chǎn)物水解產(chǎn)物 OSNaNaIOSNaI定量過量定量過量剩余剩余反響分兩步進(jìn)展：反響分兩步進(jìn)展：1. 1. 水解反響水解反響 ( (按化學(xué)計(jì)算量進(jìn)展按化學(xué)計(jì)算量進(jìn)展) )2. 2. 氧化氧化- -復(fù)原反響復(fù)原反響 ( (無固定的量關(guān)無固定的量關(guān)系，受溫度、系，受溫度、PHPH值和時(shí)間等要素影值和時(shí)間等要素影響

18、，應(yīng)嚴(yán)厲控制反響條件并采用規(guī)響，應(yīng)嚴(yán)厲控制反響條件并采用規(guī)范品平行對(duì)照測(cè)定范品平行對(duì)照測(cè)定) )NSCH3CH3COOHOHNRCORCOHHNCOONaCH3CH3SNCOONaI24+ 5H2O+ 2HClNaOHCCH3CH3SO3HCHNH2COOHCHNHCORCOOH2+2NaCl+8HI第一步第一步第二步第二步例例注射用普魯卡因青霉素注射用普魯卡因青霉素 含量測(cè)定含量測(cè)定 取裝量差別項(xiàng)藥典附錄取裝量差別項(xiàng)藥典附錄P7P7下的內(nèi)容物，精細(xì)稱取約下的內(nèi)容物，精細(xì)稱取約0.12g0.12g，置置100ml100ml量瓶中，加水使溶解并稀量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精細(xì)量取釋至

19、刻度，搖勻，精細(xì)量取5ml5ml，置碘瓶中，加置碘瓶中，加1mol/L1mol/L氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液1ml1ml放置放置2020分鐘，分鐘， 再加再加1mol/L1mol/L鹽酸溶液鹽酸溶液1ml1ml與醋與醋酸酸- -醋酸鈉緩沖液醋酸鈉緩沖液(pH4.5)5ml(pH4.5)5ml，精細(xì)，精細(xì)參與碘滴定液參與碘滴定液(0.01mol/L)15ml(0.01mol/L)15ml，密，密塞，搖勻，在塞，搖勻，在20202525暗處放置暗處放置2020分分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液鐘，用硫代硫酸鈉滴定液0.01mol/L0.01mol/L滴定，滴定，至近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液，繼續(xù)滴至近終點(diǎn)時(shí)加淀粉

20、指示液，繼續(xù)滴定并強(qiáng)力振搖，至藍(lán)色消逝；另精定并強(qiáng)力振搖，至藍(lán)色消逝；另精細(xì)量取供試品溶液細(xì)量取供試品溶液5ml5ml，置碘瓶中，置碘瓶中，加醋酸，加醋酸- -醋酸鈉緩沖液醋酸鈉緩沖液pH4.5pH4.55ml5ml，精細(xì)參與碘滴定液，精細(xì)參與碘滴定液0.01mol/L0.01mol/L15ml15ml，密塞，搖勻，密塞，搖勻，在暗處放置在暗處放置2020分鐘，用硫代硫酸分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液鈉滴定液0.01mol/L0.01mol/L滴定，滴定，作為空白。同時(shí)用青霉素鈉對(duì)照作為空白。同時(shí)用青霉素鈉對(duì)照品同法測(cè)定作對(duì)照，算出供試品品同法測(cè)定作對(duì)照，算出供試品的含量。的含量。V V樣樣空空V

21、V樣樣對(duì)照液對(duì)照液+ +緩沖液緩沖液+ +碘液碘液+ +回滴回滴+ +堿堿+ +酸酸+ +緩沖液緩沖液+ +碘液碘液+ +回滴回滴 V V對(duì)空對(duì)空V V對(duì)對(duì)供試液供試液+ +緩沖液緩沖液+ +碘液碘液+ +回滴回滴+ +堿堿+ +酸酸+ +緩沖液緩沖液+ +碘液碘液+ +回滴回滴2.2.方法方法 空白實(shí)驗(yàn)空白實(shí)驗(yàn)A A、消除樣品已降解產(chǎn)物的干擾、消除樣品已降解產(chǎn)物的干擾B B、消除樣品中其他耗費(fèi)碘的雜、消除樣品中其他耗費(fèi)碘的雜 質(zhì)的干擾質(zhì)的干擾C C、消除碘揮發(fā)呵斥的誤差、消除碘揮發(fā)呵斥的誤差 以未經(jīng)水解的樣品作空白測(cè)定以未經(jīng)水解的樣品作空白測(cè)定空白空白樣品樣品I2Na2S2O3I-I2 采用

22、規(guī)范品平行對(duì)照測(cè)定采用規(guī)范品平行對(duì)照測(cè)定A A、可消除溫度、可消除溫度、pHpH、操作、環(huán)、操作、環(huán) 境等條件的影響境等條件的影響B(tài) B、使本法測(cè)定結(jié)果與微生物檢定、使本法測(cè)定結(jié)果與微生物檢定 法一致法一致3.3.條件條件1 1弱酸性弱酸性 pH4.5 pH4.5堿堿 I2 IO3- + I- I2 IO3- + I-酸酸普魯卡因與碘在酸性條件普魯卡因與碘在酸性條件下會(huì)產(chǎn)生復(fù)鹽沉淀下會(huì)產(chǎn)生復(fù)鹽沉淀2 2溫度溫度 24 242626溫度溫度38 38 未水解的供試品亦耗費(fèi)碘未水解的供試品亦耗費(fèi)碘3 3水解時(shí)間水解時(shí)間以水解以水解2020分鐘后的耗碘量最大分鐘后的耗碘量最大4 4反響時(shí)間反響時(shí)間反

23、響反響2020分鐘后，耗碘量隨時(shí)間分鐘后，耗碘量隨時(shí)間的的變化較小，可減小含量測(cè)定的變化較小，可減小含量測(cè)定的誤誤差。差。1 1靈敏度高靈敏度高樣品樣品 : : 碘碘 = 1 : 8 = 1 : 82 2反響條件、實(shí)驗(yàn)操作要求高反響條件、實(shí)驗(yàn)操作要求高V V對(duì)、對(duì)、V V對(duì)空對(duì)空V V樣、樣、V V樣空樣空1 1份含量份含量4I28I-4I28I-4.4.特點(diǎn)特點(diǎn)加試劑次序、反響時(shí)間、滴定速度一樣加試劑次序、反響時(shí)間、滴定速度一樣%WWVVVV對(duì)對(duì)照照品品）（）（含含量量樣樣對(duì)對(duì)對(duì)對(duì)對(duì)對(duì)空空樣樣樣樣空空 5.5.計(jì)算計(jì)算 原料原料降解產(chǎn)物或雜質(zhì)可耗費(fèi)碘而影響降解產(chǎn)物或雜質(zhì)可耗費(fèi)碘而影響測(cè)定，因

24、此用未經(jīng)水解的樣品做測(cè)定，因此用未經(jīng)水解的樣品做空白。碘量法是青霉素族的經(jīng)典空白。碘量法是青霉素族的經(jīng)典的測(cè)定方法。的測(cè)定方法。 1.1. 原理原理SHROH 青霉素族青霉素族水解水解HgRS ）（ChP ChP 青霉素族青霉素族 Hg .pH二電位配位滴定法汞量法二電位配位滴定法汞量法2.2.方法方法 總總樣樣VNOHgHNONaOH 醋酸鹽緩沖液醋酸鹽緩沖液pH4.6滴定滴定水解水解 降降空空醋醋酸酸鹽鹽緩緩沖沖液液VNOHg pH4.6滴定滴定樣樣品品 以未經(jīng)水解的樣品作空白測(cè)定以未經(jīng)水解的樣品作空白測(cè)定例例 苯唑西林鈉苯唑西林鈉 含量測(cè)定含量測(cè)定 取本品約取本品約50mg50mg，精細(xì)

25、，精細(xì)稱定，加水稱定，加水5ml5ml溶解后，加溶解后，加1mol/L1mol/L氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液5ml5ml，搖勻，放置，搖勻，放置1515分鐘，加分鐘，加1mol/L1mol/L硝酸溶液硝酸溶液5ml5ml，醋，醋酸鹽緩沖液酸鹽緩沖液(pH4.6)20ml(pH4.6)20ml及水及水20ml20ml，搖勻，搖勻，照電位滴定法照電位滴定法( (附錄附錄 A), A),用鉑電極為指示電極，汞用鉑電極為指示電極，汞- -硫酸亞硫酸亞汞電極為參比電極，在汞電極為參比電極，在35354040，用硝酸汞滴定液，用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)(0.02mol/L)緩緩慢滴定，慢滴定，控制

26、滴定過程約為控制滴定過程約為1515分鐘，分鐘，不計(jì)第一個(gè)等當(dāng)點(diǎn)，計(jì)算第二個(gè)不計(jì)第一個(gè)等當(dāng)點(diǎn)，計(jì)算第二個(gè)等當(dāng)點(diǎn)時(shí)耗費(fèi)滴定液的量。每等當(dāng)點(diǎn)時(shí)耗費(fèi)滴定液的量。每1ml1ml硝酸汞滴定液硝酸汞滴定液(0.02mol/L)(0.02mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于8.029mg8.029mg的總苯唑西林的總苯唑西林( (按按C19H19N3O5SC19H19N3O5S計(jì)算計(jì)算) )。另取本品約另取本品約0.5g0.5g，精細(xì)稱定，加，精細(xì)稱定，加水與上述醋酸鹽緩沖液各水與上述醋酸鹽緩沖液各25ml25ml，振搖使完全溶解，在室溫下，立振搖使完全溶解，在室溫下，立刻用硝酸汞滴定液刻用硝酸汞滴定液(0.02mol

27、/L)(0.02mol/L)滴定，終點(diǎn)判別方法同上。滴定，終點(diǎn)判別方法同上。每每1ml1ml硝酸汞滴定液硝酸汞滴定液0.02mol/L0.02mol/L相當(dāng)于相當(dāng)于8.029mg8.029mg的的降解物按降解物按C19H19N3O5SC19H19N3O5S計(jì)算計(jì)算?？偙竭蛭髁值陌俜趾颗c降?？偙竭蛭髁值陌俜趾颗c降解物的百分含量之差值即為苯解物的百分含量之差值即為苯唑西林的含量。唑西林的含量。3 3、討論、討論1 1水解必需完全水解必需完全2 2空白實(shí)驗(yàn)空白實(shí)驗(yàn) 消除已降解產(chǎn)消除已降解產(chǎn)物干擾物干擾4 4優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 不需規(guī)范品不需規(guī)范品2 2反響摩爾比反響摩爾比 1 : 11 : 1%WFTV%

28、WFTV% 空空空空樣樣樣樣含含量量%FTWVWV% ）（含量含量空空空空樣樣樣樣4 4、計(jì)算、計(jì)算1 1原理原理青青霉霉烯烯酸酸硫硫醇醇汞汞鹽鹽青青霉霉素素族族 HgCl咪唑咪唑nmmax ChP ChP 青霉素族青霉素族三可見三可見-紫外分光光度法紫外分光光度法1、硫醇汞鹽法、硫醇汞鹽法HgClCH3CH3COONaSNHCONCH2NHCOCH3NSOHNCOONaCH3CH3OCCH2NHCOCH3 HgCl咪唑咪唑nmmax 2 2方法方法對(duì)照品法對(duì)照品法%WWAA%對(duì)對(duì)照照品品樣樣標(biāo)標(biāo)標(biāo)標(biāo)樣樣 計(jì)算計(jì)算標(biāo)標(biāo)樣樣咪咪唑唑硼硼酸酸緩緩沖沖液液標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)液液供供試試液液AAHgCl 2pH

29、 9pH 9例例 氨芐西林鈉氨芐西林鈉 含量測(cè)定含量測(cè)定( (參考教材參考教材277)277) 取本品約取本品約60mg 60mg 置置100ml100ml量瓶中，量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精細(xì)加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精細(xì)量取量取5ml5ml，置另一，置另一100ml100ml量瓶中，加水量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，再精細(xì)量取稀釋至刻度，搖勻，再精細(xì)量取5ml5ml，置置25ml25ml量瓶中，加硼酸緩沖液量瓶中，加硼酸緩沖液2.5ml2.5ml與與醋酐的乙腈溶液醋酐的乙腈溶液1501500.25ml0.25ml，放，放置置5min5min后，加咪唑溶液至刻度，搖勻，后，加咪唑

30、溶液至刻度，搖勻，置置6060水浴水浴中，加熱中，加熱30min30min，取出冷卻，照分，取出冷卻，照分光光度法附錄光光度法附錄 A A ，在，在325nm325nm的波優(yōu)點(diǎn)測(cè)定吸收度；另取的波優(yōu)點(diǎn)測(cè)定吸收度；另取氨芐西林三水合物規(guī)范品，按同氨芐西林三水合物規(guī)范品，按同法測(cè)定，計(jì)算，即得。法測(cè)定，計(jì)算，即得。 3 3討論討論 咪唑催化的水解產(chǎn)率高，咪唑催化的水解產(chǎn)率高， 硫醇汞鹽穩(wěn)定硫醇汞鹽穩(wěn)定3h3hb. b. 側(cè)鏈有側(cè)鏈有-NH2-NH2時(shí)，需加醋酐先時(shí)，需加醋酐先 將其乙?；蟛鸥砂l(fā)生上述反響將其乙?；蟛鸥砂l(fā)生上述反響NSOHNCOOCH3CH3OCCH2NH2NaNSOHNCOON

31、aCH3CH3OCCH2NHCOCH3 OCHCH pH94 4特點(diǎn)特點(diǎn)A A、簡(jiǎn)便快速、簡(jiǎn)便快速B B、用規(guī)范品對(duì)照，重現(xiàn)性良、用規(guī)范品對(duì)照，重現(xiàn)性良 好，好，RSD1%RSD1%nmCupHA 青青霉霉烯烯酸酸青青霉霉素素族族水解水解穩(wěn)定劑穩(wěn)定劑青霉素族青霉素族2 2、酸水解法銅鹽法、酸水解法銅鹽法1 1原理原理CH2COCONHHCCH3CH3CCOOHCCNHSHCONSOHNCOOHCH3CH3CH2 pHACu 2 2方法方法標(biāo)標(biāo)樣樣枸枸櫞櫞酸酸硫硫酸酸銅銅標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)液液供供試試液液AAnmA 3203 3特點(diǎn)特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)條件隨各藥物穩(wěn)定性不同而定實(shí)驗(yàn)條件隨各藥物穩(wěn)定性不同而定規(guī)范品對(duì)照

32、法規(guī)范品對(duì)照法%WWAA標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品品含含量量樣樣標(biāo)標(biāo)標(biāo)標(biāo)樣樣 4 4計(jì)算計(jì)算Fe3+/3H+紅色紅色-內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類NaOH HClNOHH內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類羥羥肟肟酸酸衍衍生生物物3 3、羥肟酸比色法、羥肟酸比色法特點(diǎn)特點(diǎn) 快速、高效、靈敏快速、高效、靈敏 專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好一法多用鑒別、檢查、含測(cè)一法多用鑒別、檢查、含測(cè)五、生物樣品中五、生物樣品中B-B-內(nèi)酰胺類抗生素分析內(nèi)酰胺類抗生素分析人血漿中阿莫西林濃度測(cè)定人血漿中阿莫西林濃度測(cè)定C18C18，第三節(jié)第三節(jié) 氨基糖苷類抗生素氨基糖苷類抗生素苷苷苷苷元元糖糖縮縮合合 氨氨基基糖糖苷苷苷苷元元氨氨基基糖糖縮縮合合 鏈霉

33、素鏈霉素 雙氫鏈霉素雙氫鏈霉素新霉素新霉素 卡那霉素卡那霉素慶大霉素慶大霉素 巴龍霉素巴龍霉素鏈霉胍 + 鏈霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺 苷元苷元糖糖鏈霉雙糖胺鏈霉雙糖胺鏈霉素鏈霉素NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3鏈霉胍鏈霉胍鏈霉糖鏈霉糖N-N-甲基甲基-L-L-葡萄糖胺葡萄糖胺NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3鏈霉胍鏈霉胍鏈霉糖鏈霉糖N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺 糖糖 苷元苷元絳紅糖胺絳紅糖胺 + 脫氧鏈霉胺脫氧鏈霉胺 + 加洛糖胺加洛糖胺 糖糖 慶大霉

34、素慶大霉素ROC R1R2HNNH2OOHH2NNH2OOOHNHCH3OHCH3絳紅糖胺絳紅糖胺紫素胺紫素胺2-2-脫氧鏈霉胺脫氧鏈霉胺加洛糖胺加洛糖胺N-N-甲基甲基-3-3-去氧去氧-4-4-甲甲基戊糖胺基戊糖胺慶大霉素慶大霉素C C復(fù)合物復(fù)合物 慶大霉素慶大霉素C1 R=H R1C1 R=H R1、R2=CH3R2=CH3 慶大霉素慶大霉素C2 R=R2=H C2 R=R2=H R1=CH3R1=CH3 慶大霉素慶大霉素C1a RC1a R、R1R1、R2=HR2=H 慶大霉素慶大霉素C2a R=CH3 R1= C2a R=CH3 R1= R2=H R2=H 慶大霉素慶大霉素C2b R

35、=R1=H R2=CH3C2b R=R1=H R2=CH3一、 構(gòu)造與性質(zhì)構(gòu)造與性質(zhì)鏈霉素鏈霉素 3 3個(gè)個(gè)慶大霉素慶大霉素 5 5個(gè)個(gè)堿性中心堿性中心一堿性與溶解性一堿性與溶解性多與硫酸成鹽多與硫酸成鹽溶解性：水溶性溶解性：水溶性鏈霉素鏈霉素 pH5 pH57.57.5慶大霉素慶大霉素 pH2 pH212 12 穩(wěn)定穩(wěn)定UV四四三穩(wěn)定性與鏈霉素水解產(chǎn)物反響三穩(wěn)定性與鏈霉素水解產(chǎn)物反響旋光性旋光性二二NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3坂口反響坂口反響N-N-甲基葡萄甲基葡萄糖胺反響糖胺反響麥芽酚反響麥芽酚反響藍(lán)藍(lán)紫紫色色慶慶大大霉

36、霉素素鏈鏈霉霉素素茚茚三三酮酮二、鑒別二、鑒別一茚三酮反響一茚三酮反響 羥基胺構(gòu)造羥基胺構(gòu)造取慶大霉素取慶大霉素5mg5mg水水1ml1ml，0.1%0.1%茚三酮的水茚三酮的水飽和正丁醇溶液飽和正丁醇溶液1ml,1ml,吡啶吡啶0.5ml,0.5ml,水浴加水浴加熱熱5min,5min,顯紫色。顯紫色。二二MolischMolisch實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)具有五碳糖或六碳糖構(gòu)造的氨具有五碳糖或六碳糖構(gòu)造的氨基糖苷類抗生素經(jīng)酸水解后，基糖苷類抗生素經(jīng)酸水解后，在鹽酸或硫酸作用下脫水，成在鹽酸或硫酸作用下脫水，成糠醛五碳或羥甲基糠醛糠醛五碳或羥甲基糠醛六碳糖。這些產(chǎn)物遇六碳糖。這些產(chǎn)物遇a-a-萘酚萘酚或蒽酮

37、成色?；蜉焱缮?。甲甲基基葡葡萄萄糖糖胺胺慶慶大大霉霉素素鏈鏈霉霉素素水水解解 N乙酰丙酮乙酰丙酮OH-OH-吡咯衍生物吡咯衍生物對(duì)二甲氨基苯甲醛對(duì)二甲氨基苯甲醛H+H+紅色紅色Elson-MorganElson-Morgan反響反響三三 N-N-甲基葡萄糖胺反響甲基葡萄糖胺反響NHCH3NHNHNH C NH2HOOHOHNHCH2NOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNCH3COCH3HHOCH2CHOH3(縮合縮合)323COCHCOCHCH OHHHH3CH3CCHNNCOCH3CH3COCH3CH3N紅色紅色對(duì)二甲氨基苯甲醛對(duì)二甲氨基苯甲醛H+NCH3COCH3HHOCH2CH

38、OH3 鏈霉糖特有反鏈霉糖特有反響響鏈鏈霉霉糖糖鏈鏈霉霉素素 OH麥麥芽芽酚酚紫紫紅紅色色 3FeH+分子重排分子重排四麥芽酚四麥芽酚MaltolMaltol反響反響NH C NH2HOOHOHNHCH2NOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHNHNHCH3H2O NaOHOOOHCH3OOCH3Fe3+H+OFe33+/紫紅紫紅麥芽酚麥芽酚鏈霉胍特有反響鏈霉胍特有反響橙橙紅紅羥羥基基喹喹啉啉鏈鏈霉霉胍胍鏈鏈霉霉素素次次溴溴酸酸鈉鈉 8OH或或-萘酚萘酚NOH8-8-羥基喹啉羥基喹啉坂口反響坂口反響五五 - -萘酚萘酚OHONBrRNHCO NH六六 24SO反響反響白白 BaSOSO

39、BaH+八光譜法八光譜法 IRIR法法慶大霉素?zé)o慶大霉素?zé)oUVUV吸收吸收nmmax 鏈鏈霉霉素素七七 TLCTLC法法UVUV法法 方法方法 TLCTLC中的對(duì)照品法中的對(duì)照品法 BPBP1. 1. 來源來源 反響中間體反響中間體三、特殊雜質(zhì)檢查及組分分析一鏈霉素中鏈霉素一鏈霉素中鏈霉素B甘露甘露糖鏈霉素雜質(zhì)糖鏈霉素雜質(zhì)二硫酸奈替米星中有關(guān)物二硫酸奈替米星中有關(guān)物質(zhì)的檢查略質(zhì)的檢查略對(duì)微生物的活性無明顯差別對(duì)微生物的活性無明顯差別毒副作用和耐藥性不同毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同發(fā)酵菌種不同工藝差別工藝差別C C組分比例組分比例不一致不一致規(guī)定控制各組分的相對(duì)百分含量規(guī)定控制各組分的相對(duì)百

40、分含量ChPUSPBPJP三慶大霉素三慶大霉素C C組分的測(cè)定組分的測(cè)定 .pH吲吲哚哚衍衍生生物物巰巰基基醋醋酸酸鄰鄰苯苯二二醛醛氨氨基基max = 330nmmax = 330nm衍生化原理衍生化原理 1.1.1-1-烷基硫代烷基硫代-2-2-烷基烷基異吲哚衍生物異吲哚衍生物RNH2+HSCH2COOHOH-CHOCHONRSCH2COOH 規(guī)定規(guī)定 C1 2550% C1 2550% C1a 1540% C1a 1540% C2a +C2 2050% C2a +C2 2050%AAAAA%ACCCCiiaa 3. 3. 計(jì)算計(jì)算 峰面積歸一化法峰面積歸一化法2.2.方法方法 RPRPHP

41、LCHPLC四硫酸鹽測(cè)定四硫酸鹽測(cè)定 EDTAEDTA絡(luò)合滴定法絡(luò)合滴定法四、含量測(cè)定鏈霉素、慶大霉素微生物檢定法本法系利用抗生素在瓊脂培育基內(nèi)的分散作用量反響平行線原理的設(shè)計(jì)，比較規(guī)范品與供試品兩者對(duì)接種的實(shí)驗(yàn)菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，以測(cè)定供試品效價(jià)的一種方法。血清中慶大霉素的血清中慶大霉素的HPLCHPLC法法 血漿樣品的預(yù)處置血漿樣品的預(yù)處置 離子對(duì)色譜法的目的：離子對(duì)色譜法的目的： 除去氨基酸、肽、胺的干擾除去氨基酸、肽、胺的干擾 選用選用OPAOPA為熒光衍生化試劑為熒光衍生化試劑 采用柱后衍生化法采用柱后衍生化法 2CH3NRR3HOHCONH2OOHOHOOHR2R1第四節(jié)第四節(jié) 四

42、環(huán)素類抗生素四環(huán)素類抗生素ABCD2CH3NRR3HOHCONH2OOHOHOOHR2R11234567891011122CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HO四環(huán)素四環(huán)素TCTCtetracyclinetetracycline2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HOCl金霉素金霉素 (CTC) chlortetracycline(CTC) chlortetracycline氯四環(huán)氯四環(huán)素素2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HOOH土霉素土霉素 (OTC) oxytetracycline氧四環(huán)素氧四環(huán)素2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3OH多

43、西環(huán)素多西環(huán)素 (DOTC) doxycycline(DOTC) doxycycline脫氧土霉素脫氧土霉素美他環(huán)素美他環(huán)素METCMETC metacyclinemetacyclineHOHCONH2OOHOHOOHN CH3 2OHCH22CH3NRR3HOHCONH2OOHOHOOHR2R1一、 構(gòu)造與性質(zhì)構(gòu)造與性質(zhì)1.1.與酸、堿均能成鹽與酸、堿均能成鹽2.2. 強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中溶解度強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中溶解度 酚羥基、烯醇型羥基酚羥基、烯醇型羥基 弱酸性弱酸性二甲胺基二甲胺基 弱堿性弱堿性一酸堿性與溶解度一酸堿性與溶解度 兩性兩性具有吸濕性，多含結(jié)晶水具有吸濕性，多含結(jié)晶水與金屬離子生成有色配位

44、化合物與金屬離子生成有色配位化合物Ca2+ Mg2+ Fe3+ Al3+ Ca2+ Mg2+ Fe3+ Al3+ UVUV三三pH3 7.5 pH3 7.5 熒光熒光 二旋光性二旋光性四與金屬離子絡(luò)合四與金屬離子絡(luò)合HOHOCaOOOOHOHOO1.1.差向異構(gòu)化差向異構(gòu)化差差向向金金霉霉素素差差向向四四環(huán)環(huán)素素金金霉霉素素四四環(huán)環(huán)素素 pH淡黃淡黃黑黑藍(lán)色熒光藍(lán)色熒光五不穩(wěn)定性五不穩(wěn)定性O(shè)HCONH2OOHOHOOHCH3HCH3 2NHO差向四環(huán)素差向四環(huán)素2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HO2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHR2R1HO土霉素、多西環(huán)素不易差向異構(gòu)

45、化土霉素、多西環(huán)素不易差向異構(gòu)化1 1酸性下降解酸性下降解脫脫水水金金霉霉素素脫脫水水四四環(huán)環(huán)素素金金霉霉素素四四環(huán)環(huán)素素 pHmax = 445nmmax = 435nm橙黃色橙黃色2. 2. 降解反響降解反響2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HON CH3 2HOHCONH2OOHOOHCH3OH脫水四環(huán)素脫水四環(huán)素2CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HOpH26pH26TCOHCONH2OOHOHOOHCH3HCH3 2NHOETCN CH3 2HOHCONH2OOHOOHCH3OHATCN2CH3OHCONH2OOHOHOHOCH3HEATCpH2pH22 2

46、堿性下降解堿性下降解異異四四環(huán)環(huán)素素四四環(huán)環(huán)素素 OH熒光熒光HOHCONH2OOHOHOOHCH3ON CH3 2二、 鑒別實(shí)驗(yàn)鑒別實(shí)驗(yàn)H2SO4H2SO4反響反響一一黃色黃色朱紅色朱紅色綠綠藍(lán)藍(lán)深紫色深紫色鹽酸多西環(huán)素鹽酸多西環(huán)素鹽酸土霉素鹽酸土霉素鹽酸金霉素鹽酸金霉素鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素 SOHFeCl3FeCl3反響反響二二褐色褐色橙褐色橙褐色深褐色深褐色紅棕色紅棕色鹽酸多西環(huán)素鹽酸多西環(huán)素鹽酸土霉素鹽酸土霉素鹽酸金霉素鹽酸金霉素鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素 FeClEDTA EDTA 抑制痕量金屬呵斥的抑制痕量金屬呵斥的 拖尾景象拖尾景象三三 TLC法正相分配薄層法正相分配薄層 色譜色譜四H

47、PLC 4- 4-差向四環(huán)素差向四環(huán)素ETCETC 脫水四環(huán)素脫水四環(huán)素ATCATC 差向脫水四環(huán)素差向脫水四環(huán)素EATCEATC 鹽酸金霉素鹽酸金霉素CTCCTC 有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)一一HPLCHPLC法法20002000版版規(guī)范品對(duì)照法規(guī)范品對(duì)照法三、特殊雜質(zhì)的檢查 鹽酸四環(huán)素吸收度吸收度二二nmmax 、鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素CTC).(Anm 控控制制雜質(zhì)吸收度雜質(zhì)吸收度EATCATC.Anm、控制控制 異異四四環(huán)環(huán)素素控控制制 .Anm 注注射射用用四、 含量測(cè)定含量測(cè)定 ChP、USPHPLCHPLC法外標(biāo)法法外標(biāo)法系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn) 1. 1. 防護(hù)柱防護(hù)柱2. 2. 預(yù)試

48、溶液預(yù)試溶液4-4-差向脫水四環(huán)素差向脫水四環(huán)素四環(huán)素四環(huán)素3. RSD2.0%3. RSD2.0%90.tR 01.tR .RJP JP 比色法規(guī)范曲線法比色法規(guī)范曲線法標(biāo)標(biāo)nmHCl.dHCl.dA 標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)液液標(biāo)標(biāo)調(diào)調(diào)零零標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)液液空空樣樣nmHCl.dHCl.dA 供供試試液液樣樣調(diào)調(diào)零零供供試試液液空空原理原理脫脫水水四四環(huán)環(huán)素素四四環(huán)環(huán)素素 pH1. 1. 熟習(xí)抗生素類藥物分析的特點(diǎn)及其熟習(xí)抗生素類藥物分析的特點(diǎn)及其常規(guī)檢驗(yàn)工程。了解抗生素類藥物的分常規(guī)檢驗(yàn)工程。了解抗生素類藥物的分析現(xiàn)狀，熟習(xí)生物學(xué)法與物理化學(xué)法測(cè)析現(xiàn)狀，熟習(xí)生物學(xué)法與物理化學(xué)法測(cè)定效價(jià)的原理及優(yōu)缺陷。定效價(jià)的

49、原理及優(yōu)缺陷。2. 2. 掌握掌握內(nèi)酰胺類抗生素的構(gòu)造、內(nèi)酰胺類抗生素的構(gòu)造、 性質(zhì)、鑒別及含量測(cè)定。性質(zhì)、鑒別及含量測(cè)定。第十一章第十一章 復(fù)習(xí)內(nèi)容復(fù)習(xí)內(nèi)容3. 3. 掌握氨基糖苷類抗生素的構(gòu)造、掌握氨基糖苷類抗生素的構(gòu)造、性性 質(zhì)及鑒別，了解其檢查及含量質(zhì)及鑒別，了解其檢查及含量測(cè)定測(cè)定4. 4. 掌握四環(huán)素類抗生素的構(gòu)造及掌握四環(huán)素類抗生素的構(gòu)造及性質(zhì)，了解其鑒別、檢查及含量性質(zhì)，了解其鑒別、檢查及含量測(cè)定測(cè)定5. 5. 了解抗生素類藥物的質(zhì)量調(diào)查了解抗生素類藥物的質(zhì)量調(diào)查方法方法以下哪個(gè)藥物會(huì)發(fā)生羥肟酸以下哪個(gè)藥物會(huì)發(fā)生羥肟酸 鐵反響鐵反響 A. A. 青霉素青霉素 B. B. 慶大霉

50、素慶大霉素 C. C. 紅霉素紅霉素 D. D. 鏈霉素鏈霉素 E. E. 維生素維生素C C 中國(guó)藥典中國(guó)藥典(2019(2019年版年版) )測(cè)定頭測(cè)定頭 孢菌素類藥物的含量時(shí)，多數(shù)采用的孢菌素類藥物的含量時(shí)，多數(shù)采用的方法是方法是 A. A. 微生物法微生物法 B. B. 碘量法碘量法 C. C. 汞量法汞量法 D. D. 正相高效液相色譜法正相高效液相色譜法 E. E. 反相高效液相色譜法反相高效液相色譜法屬于屬于- -內(nèi)酰胺類的抗生素藥物內(nèi)酰胺類的抗生素藥物有有 A. A. 青霉素青霉素 B. B. 紅霉素紅霉素 C. C. 頭孢菌素頭孢菌素D. D. 慶大霉素慶大霉素 E. E.

51、四環(huán)素四環(huán)素能和茚三酮發(fā)生呈色反響的物質(zhì)有能和茚三酮發(fā)生呈色反響的物質(zhì)有 A A鏈霉素鏈霉素 B B慶大霉素慶大霉素 C C土霉素土霉素 D D氨基酸氨基酸 E E苯巴比妥苯巴比妥青霉素類藥物可用下面哪些方法測(cè)定青霉素類藥物可用下面哪些方法測(cè)定 A. A. 三氯化鐵比色法三氯化鐵比色法 B. B. 汞量法汞量法 C. C. 碘量法碘量法 D. D. 硫醇汞鹽法硫醇汞鹽法 E. E. 酸性染料比色法酸性染料比色法能發(fā)生重氮化一巧合反響的抗生素能發(fā)生重氮化一巧合反響的抗生素類藥物是類藥物是 A. A. 青霉素青霉素 B. B. 慶大霉素慶大霉素 芐星青霉素芐星青霉素 鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素E. E.

52、 普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素以下反響可適用的藥物以下反響可適用的藥物 A. A. 青霉素青霉素 B. B. 鏈霉素鏈霉素 C. C. 兩者均能兩者均能 D. D. 兩者均不能兩者均不能KoberKober反響反響羥肟酸鐵反響羥肟酸鐵反響坂口反響坂口反響NN甲基葡萄糖胺反響甲基葡萄糖胺反響在酸性溶液中水解在酸性溶液中水解D DA AB BB BC C可以鑒別的藥物是可以鑒別的藥物是 A. A. 鏈霉素鏈霉素 B. B. 慶大霉素慶大霉素 C. C. 兩者均可兩者均可 D. D. 兩者均不可兩者均不可用用KoberKober反響反響用坂口反響用坂口反響 用麥芽酚反響用麥芽酚反響用三氯化鐵反響用三

53、氯化鐵反響用茚三酮反響用茚三酮反響DAADC問題問題 A. A. 茚三酮反響茚三酮反響 B. B. 麥芽酚反響麥芽酚反響 C. C. 坂口反響坂口反響 D. FeC13D. FeC13反響反響 E. E. 羥肟酸鐵反響羥肟酸鐵反響頭孢唑林鈉頭孢唑林鈉金霉素金霉素 鏈霉素鏈霉素慶大霉素慶大霉素 青霉素青霉素EDEAABC四環(huán)素在酸性條件下的降解產(chǎn)物四環(huán)素在酸性條件下的降解產(chǎn)物是是 A. A. 差向四環(huán)素差向四環(huán)素 B. B. 脫水四環(huán)素脫水四環(huán)素 C. C. 異四環(huán)素異四環(huán)素 D. D. 去甲四環(huán)素去甲四環(huán)素 E. E. 去甲氧四環(huán)素去甲氧四環(huán)素課 件 素 材NSOHNCOOKCH3CH3OCC

54、H2酸性酸性構(gòu)造與性質(zhì)構(gòu)造與性質(zhì)一、NaNa與堿金屬與堿金屬(Na+(Na+、K+)K+)成鹽成鹽 一羧基一羧基 易溶于水易溶于水 與有機(jī)堿與有機(jī)堿(普魯卡因普魯卡因)成鹽成鹽 難溶于水難溶于水普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素C2H52NCH2CH2OOCNSOHNCOOHCH3CH3OCCH2NH2NSO1234567二手性C 87654321NOS(5%頭孢唑啉鈉溶液頭孢唑啉鈉溶液 1824)20D 頭孢菌素類頭孢菌素類 C6 C7青霉素類青霉素類 C3 C5 C6 旋光性旋光性 三共軛體系 NSO頭孢菌素類頭孢菌素類 母核有共軛體系母核有共軛體系 青霉素類青霉素類 母核無明顯母核無明顯UV

55、多數(shù)有苯環(huán)取代基多數(shù)有苯環(huán)取代基 NOS UV青霉素鈉青霉素鈉UV7-20四內(nèi)酰胺環(huán) 水溶液水溶液 不穩(wěn)定不穩(wěn)定 枯燥純真枯燥純真 穩(wěn)定穩(wěn)定 不穩(wěn)定不穩(wěn)定性要素性要素四元環(huán)張力大四元環(huán)張力大 酰胺鍵易水解酰胺鍵易水解 某些金屬離子某些金屬離子溫度溫度失失效效降降解解青青霉霉素素類類酸酸、堿堿、青青霉霉素素酶酶某些氧化劑某些氧化劑例例青霉素的降解反響青霉素的降解反響青青霉霉素素青霉噻唑酸青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉素酶青霉酸青霉酸H2OpH2100青霉噻唑青霉噻唑?；u胺酸?；u胺酸NH2OH青霉烯酸青霉烯酸pH4青霉胺青霉胺CO2青霉醛青霉醛HgCl2失效失效降解降解頭孢菌素類頭孢菌素類

56、酸、堿、胺類酸、堿、胺類內(nèi)酰胺酶內(nèi)酰胺酶 (頭孢噻吩鈉水溶液頭孢噻吩鈉水溶液2524h失活失活8%)二、二、K+、Na+反響反響一一鑒別鑒別 焰色焰色鮮黃色鮮黃色 + 醋酸氧鈾鋅醋酸氧鈾鋅黃黃 Na+ 焰色焰色紫色紫色 + 0.1%四苯硼鈉四苯硼鈉 + Ac白白 K+二呈色反響二呈色反響1. 羥肟酸鐵反響羥肟酸鐵反響 -內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類NaOH HClNOHH內(nèi)內(nèi)酰酰胺胺類類呈色呈色羥肟酸衍生物羥肟酸衍生物Fe3+/3H+NSONSCOHNHOHH2NOH HClNSCHNHOFe3+3OH+Fe3+/3 紅、棕、褐紅、棕、褐例：ChP(2000)頭孢哌酮鑒別 取本品10mg，加水2ml與鹽酸

57、羥胺溶液取34.8%鹽酸羥胺溶液1份，醋酸鈉-氫氧化鈉溶液1份，乙醇4份3ml，振搖溶解后，放置5min，加酸性硫酸鐵銨試液1ml，搖勻，顯紅棕色。2、 與與H2SO4 - HNO3反響反響藍(lán)綠色藍(lán)綠色紅棕紅棕黃色黃色頭孢噻啶頭孢噻啶頭孢噻吩鈉頭孢噻吩鈉頭孢氨芐頭孢氨芐 HNOSOH頭孢菌素類頭孢菌素類NH2CONSOHNCOOHCH3CH3CH23. 茚三酮反響茚三酮反響藍(lán)藍(lán)紫紫色色氨氨基基茚茚三三酮酮 -氨基、伯胺氨基、伯胺某些羥基胺類某些羥基胺類酮式酮式烯醇式烯醇式茚三酮茚三酮茚三酮茚三酮縮合縮合藍(lán)紫色藍(lán)紫色+H2OCNCH2RC OH2RCHH2NCOOH2OHCCOCOCOHNH2C

58、COCOCOCOHCNCCOCOCOCOHCHRNCCOCOCO4. 雙縮脲反響雙縮脲反響-內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類 CONH紫紫內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類堿性酒石酸銅堿性酒石酸銅 開環(huán)分解開環(huán)分解2OHCONH2CuCOHNCCH3COONaCH3SNHNCH3CH3COONaCSNOHOHOOCH2NH2CH2HH藍(lán)紫色藍(lán)紫色5. 與變色酸與變色酸-硫酸反響硫酸反響活潑活潑“-CH2-青霉素青霉素阿莫西林阿莫西林氨芐西林氨芐西林HCHOCHSOH ”羰羰基基側(cè)側(cè)鏈鏈含含“分解分解變色酸變色酸顯色顯色 變變色色酸酸阿阿莫莫西西林林HCHOSOH150縮合縮合NH2CONSOHNCOOHCH3CH3HOCH2色

59、色褐褐SO3HSO3HHOHOSO3HSO3HHOHOOHOHHO3SHO3SCHHCHO 縮合縮合6. 與重氮苯磺酸反響與重氮苯磺酸反響橙橙黃黃色色重重氮氮苯苯磺磺酸酸 OHHC巧合巧合酚羥基酚羥基頭孢哌酮頭孢哌酮SNOHCONHCHCONHH5C2OONNOCOOHCH2SNNNNCH3NClNNaO3S OH巧合巧合NNNNCH3SNOHCONHCHCONHH5C2OONNOCOOHCH2SNNNaO3S7. 與銅鹽反響與銅鹽反響 CuSOHAc頭孢氨芐頭孢氨芐橄欖綠色橄欖綠色NaOH專屬反響專屬反響三沉淀反響三沉淀反響1. 遇酸遇酸白白青青霉霉素素青青霉霉素素鈉鈉青青霉霉素素鉀鉀 H2

60、. 有機(jī)胺鹽反響有機(jī)胺鹽反響1重氮化重氮化 - 巧合反響巧合反響 青霉素青霉素普魯卡因普魯卡因普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素 H重氮化重氮化-巧合反響巧合反響紅紅 芳伯氨基芳伯氨基C2H52NCH2CH2OOCNSOHNCOOHCH3CH3OCH+C2H52CH2NH2H2NCOOCH2CH2N普魯卡因普魯卡因普魯卡因青霉素普魯卡因青霉素NCH2CH2OOC2C2H5N+Cl-N2C2H5COOCH2CH2NNH2HClNaNO2 2與三硝基苯酚反響與三硝基苯酚反響 三硝基苯酚三硝基苯酚二芐基乙二胺二芐基乙二胺芐星青霉素芐星青霉素NaOH二芐基乙二胺二芐基乙二胺三硝基苯酚三硝基苯酚H2OHOH-