發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu)系統(tǒng)及使用

1、發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu)系統(tǒng)及使用W28生活 是一位睿智的長(zhǎng)者，生活是一位博 學(xué)的老師，它常常春風(fēng)化雨，潤(rùn)物 無聲地為我們指點(diǎn)迷津，給我們?nèi)?生的啟迪。不要吝惜自己的愛，敞 開自己的胸懷，多多給予，你會(huì)發(fā) 現(xiàn)，你也已經(jīng)沐浴在了愛河里。實(shí) 驗(yàn)十五發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu)系統(tǒng)及使用方 法歐陽(yáng)歌谷(2021.02.01)、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?. 了解發(fā)酵罐(氣升式.攪拌式)的幾大系統(tǒng)組成，即空氣系 統(tǒng)、蒸汽系統(tǒng)、補(bǔ)料系統(tǒng)、逬出料系統(tǒng)、溫度系統(tǒng)、在線控制系統(tǒng)。2. 掌握發(fā)酵罐空消的具體方法及步驟3. 掌握發(fā)酵罐進(jìn)料及實(shí)消的具體方法及步驟4. 掌握發(fā)酵罐各系統(tǒng)的控制操作方法二、實(shí)驗(yàn)原理：歐陽(yáng)歌谷創(chuàng)編2021年2月11. 蒸汽系統(tǒng)：三路

2、進(jìn)汽空氣管路.補(bǔ)料管路.罐體）2. 溫度系統(tǒng)：（1）夾套升溫：蒸汽通入夾套。（2）夾套降溫：冷水通入夾套，下進(jìn)水，上出水。（3）發(fā)酵過程自動(dòng)控溫系統(tǒng)：熱電偶控溫，馬達(dá)循環(huán)，只能加熱， 發(fā)酵設(shè)定溫度低于室溫時(shí)，由夾套進(jìn)冷水降溫。3. 空氣系統(tǒng)：取氣一空壓機(jī)：往復(fù)式油泵獲得高脈沖的壓縮空氣粗過濾器：由沙布包裹棉花壓實(shí)成塊狀疊加制得，作用是去除部 分細(xì)菌及大部分灰塵（貯氣罐）：空壓機(jī)壓縮使氣體溫度升高，經(jīng)貯氣使氣體保溫殺 菌；壓縮空氣中有油污.水滴，且壓力不穩(wěn)，有一定的脈沖作 用，會(huì)沖翻后面的過濾介質(zhì)，貯氣后可使油滴重力沉降，減小脈 沖。（冷卻塔）：有降溫并穩(wěn)定作用，同時(shí)經(jīng)旋風(fēng)分離器進(jìn)行氣液分 離（

3、絲網(wǎng)分離器）：通過附著作用，逐步累積沉降而分離5微米以上 的微粒其作用介質(zhì)為銅絲網(wǎng)（加溫器）：對(duì)壓縮空氣升溫，除濕，使?jié)穸冗_(dá)50%-60%總過濾器：紗布包裹棉花加活性炭顆粒，逐層壓緊而成。分過濾器：平板式纖維，中間為玻璃纖維或絲棉，下面放水閥應(yīng)歐陽(yáng)歌谷創(chuàng)編2021年2月1適時(shí)打開放出油、水，再用壓縮空氣控干。種子罐或發(fā)酵罐4. 補(bǔ)料系統(tǒng)：補(bǔ)培養(yǎng)基.消泡劑、酸堿等。5. 在線控制系統(tǒng)：熱電偶（溫度探關(guān)）、溶氧探頭、pH探頭 （后二者實(shí)消時(shí)才安裝，為不可再生探頭，有限定使用次數(shù)，pH探頭使用前要先校準(zhǔn)）、控制柜、數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)。6. 進(jìn)出料系統(tǒng)：進(jìn)料（接種）、出料（取樣口）。7蒸汽過濾器：在蒸汽進(jìn)入

4、空氣系統(tǒng)時(shí)應(yīng)用，以免蒸汽中攜帶的 雜質(zhì)顆粒堵塞分過濾器微孔。三、方法與步驟：（源則：1.通蒸汽前先關(guān)閉所有閥門。2粗過濾器不空消也不實(shí)消，要定期處理，所以必須關(guān)閉通向粗 過濾器的閥門。3. 活蒸汽，滅過頭，即尾汽不能關(guān)死，要保證有活蒸汽放出，但 不能太大，以免分壓。4. 罐體排汽排汽，并保持罐內(nèi)正壓。5空氣過濾系統(tǒng)只空消，不實(shí)消，以免罐中物料沖入過濾器內(nèi)。 但空消一結(jié)束，即要通入無菌空氣吹干管路并保壓，避免染菌。6.進(jìn)蒸汽時(shí)順著蒸汽管路開閥門，結(jié)束時(shí)逆著進(jìn)路關(guān)閥門，先開 尾閥后開主閥，結(jié)束時(shí)先關(guān)主閥后關(guān)尾閥。8.蒸汽一停，即由無菌空氣充入保持罐內(nèi)正壓。2021年2月1（-）空消：歐陽(yáng)歌谷創(chuàng)編

5、先開啟蒸汽發(fā)生器，自有蒸汽產(chǎn)生并排掉管路中冷凝水后，按以 下步驟進(jìn)行：1.先關(guān)閉所有閥門，檢查處是否關(guān)緊密封，打開罐上方排氣口。2蒸汽先進(jìn)空氣系統(tǒng)，蒸汽一蒸汽過濾器-分過濾器，無論蒸汽 走到哪一路得先放尾閥，放出冷凝水，排掉冷空氣，待有蒸汽沖 出后調(diào)小，打開主閥。3. 再進(jìn)罐體：由主路進(jìn)罐，然后通入取料管路，再入補(bǔ)料系統(tǒng) （兩邊）O4. 罐壓升至0.12Mpa（此時(shí)控制系統(tǒng)中溫度讀數(shù)約為120°C左右） 時(shí)開始計(jì)時(shí)，保溫保壓，30分鐘。保壓方式：（1）調(diào)節(jié)主汽路進(jìn)汽閥門控制進(jìn)汽量；（2）調(diào)節(jié)排 氣排氣量大小或尾閥放汽量。5結(jié)束空消：（1）逆著蒸汽逬路關(guān)，先關(guān)近罐閥。（2）同時(shí)準(zhǔn) 備好

6、壓縮空氣確保蒸汽一停即充入無菌壓縮空氣以維持空氣系統(tǒng) 及罐內(nèi)的正壓。近罐空氣閥的尾閥要一直微開啟。注意：空消前應(yīng)檢查夾套中是否殘留了冷水，若有，影響罐體升 溫，須自?shī)A套出水將水放出。（三）進(jìn)料及升溫1、調(diào)大排氣排氣量，至罐壓掉零，開啟逬料口，加料。裝上溶 氧探頭及pH探頭。2夾套升溫：蒸汽由夾套蒸汽管路進(jìn)入夾套進(jìn)行升溫（有表壓可讀出進(jìn)入夾套 的氣壓），溫度可由控制廁板上讀出，升至90°C,關(guān)閉夾套蒸歐陽(yáng)歌谷創(chuàng)編2021年2月1*升溫目的：冷的物料和罐體中直接沖入蒸汽，極易產(chǎn)生大量冷凝 水而使培養(yǎng)基中水分過大；另外，對(duì)淀粉質(zhì)的物料，則直接通入 蒸汽很容易使物料結(jié)球不溶，表面糊化結(jié)團(tuán)，影

7、響滅菌效果；升 溫還可以利于淀粉質(zhì)原料液化。*說明：（1）培養(yǎng)基配制肘，考慮實(shí)消時(shí)會(huì)產(chǎn)生水分，因此，若考 慮用7升的裝液量（10升罐），則加液量應(yīng)為6升左右，其余物料 按7升需量稱量。裝料系數(shù)一般為70%。（2）通蒸汽對(duì)夾套升溫 時(shí)，必須排空夾套內(nèi)水（可用蒸汽沖出），但可微開啟出水閥門 適當(dāng)減壓，避免夾套內(nèi)壓力過大。（四）實(shí)消:1.關(guān)閉氣路入罐閥，主汽路進(jìn)汽-補(bǔ)料進(jìn)汽（方法同空消）- 罐壓升至0.12Mpa （121 °C），保壓.保溫30分鐘-實(shí)消結(jié)束。（五）冷卻接種：蒸汽關(guān)閉的同時(shí)，即通入壓縮空氣（罐壓表頭掉至0.05MPa時(shí)接 入無菌空氣）一夾套通入自來水冷卻（下進(jìn)水，上出水閥

8、門，送 水排水）-冷卻至約32°C-接種（放大排氣出氣量，至表頭掉 零，開啟接種口，火圈接種）一接種后擰緊接種口，將排氣閥調(diào) 小，接上玻璃轉(zhuǎn)子流量計(jì)，使流量計(jì)讀數(shù)在8.0左右，同時(shí)保持 罐壓0.06Mpa-在控制系統(tǒng)中設(shè)定好發(fā)酵溫度一保溫保壓發(fā)酵 24hr（六）數(shù)據(jù)采集、取樣、放罐數(shù)據(jù)采集：系統(tǒng)自動(dòng)采集，每2分鐘采集一組數(shù)據(jù)并存貯，包歐陽(yáng)歌谷創(chuàng)編2021年2月1 括：溫度、溶氧、pH、等,系統(tǒng)可自動(dòng)給出有關(guān)曲線。同時(shí)由值 班者每20分鐘記錄一次，準(zhǔn)確填表，獲取數(shù)據(jù)制作過程曲線。中間取樣：每取樣前，將取樣蒸汽滅菌半小時(shí)-棄去始放出的 樣液約10毫升，再用無菌空容器取樣約100毫升-無菌

9、封存一取 樣再滅菌30分鐘-樣液冷藏待測(cè)。（具體步驟見電腦桌面文件） 放罐：調(diào)節(jié)無菌空氣量放罐，方法同取樣。（七）罐體清洗放罐后，加大排氣，使表壓掉零，取出各探頭，加蓋，由進(jìn)料口 加入凈水關(guān)好，罐內(nèi)升壓，放罐，如此重復(fù)兩次。*取樣操作步驟：（1）須提樣前半小時(shí)，開啟蒸汽發(fā)生器，送入蒸汽，幵啟閥門1, 2,蒸汽滅菌。（2）半小時(shí)后，關(guān)閥門1,立即開啟閥門3,先放棄部分培養(yǎng) 液，再取樣100ml左右至滅菌三角瓶中（標(biāo)注好取樣日期、時(shí) 間、取樣人），冷藏備測(cè)。（3）關(guān)閉閥門3,開啟閥門1,半小時(shí)后關(guān)閉閥門2,再關(guān)閥門lo注意：1.溶氧儀調(diào)節(jié)方法：待系統(tǒng)溫度穩(wěn)定后，調(diào)零-轉(zhuǎn)至“測(cè)量”，調(diào)“斜率”旋鈕，至讀數(shù) 值為1