東南大學(xué)臨床檢驗(yàn)三基問(wèn)答題

1、一般檢驗(yàn)1 . 手工顯微鏡計(jì)數(shù)紅細(xì)胞已不常用，但為什么仍然不能被淘汰？答：手工顯微鏡法是傳統(tǒng)的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)法，不需要特殊設(shè)備，但比儀器法費(fèi)時(shí)，現(xiàn)雖已不常用，但仍作為血液分析儀的校正。2 . 血沉測(cè)定的方法學(xué)評(píng)價(jià)。答：血沉測(cè)定方法有：1.手工法包括氏法、氏法等：氏法簡(jiǎn)便實(shí)用，ICSH 推薦為血沉測(cè)定的參比方法；氏法與氏法測(cè)定相關(guān)性較好，采用手指采血，用血量少，尤其適用于兒童，但易混入組織液，目前已很少使用。手工法只能測(cè)定血沉某個(gè)時(shí)刻的最終結(jié)果，特異性差，其應(yīng)用有很大的局限性。2.血沉儀可動(dòng)態(tài)記錄整個(gè)血沉過(guò)程的變化，描繪出紅細(xì)胞沉降的曲線，反映了不同疾病或疾病不同階段，血沉 3 個(gè)沉降階段所存在的差

2、異，為臨床分析血沉測(cè)定結(jié)果提供了新的手段。3 .白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)質(zhì)量控制應(yīng)注意哪些因素？答： 1.影響準(zhǔn)確性的因素：主要是細(xì)胞在涂片中分布不均和觀察者對(duì)細(xì)胞辨認(rèn)的差異；2.影響精確性的因素；3.影響涂片染色效果的因素；4.白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)的參考方法：EDTA-K2抗凝靜脈血，人工制成血涂片，以 Romanowsky液進(jìn)行染色，使用“城墻式”移動(dòng)法，油鏡下分類(lèi)計(jì)數(shù) 200 個(gè)白細(xì)胞。當(dāng)其他分類(lèi)法與此法作為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較時(shí)，需要 4 個(gè)熟練檢驗(yàn)人員對(duì)同一涂片各計(jì)數(shù)200 個(gè)白細(xì)胞（即總數(shù)為800 個(gè)細(xì)胞）后，求出平均值來(lái)作為給類(lèi)白細(xì)胞的靶值。4 .嗜酸性粒細(xì)胞升高的臨床意義？答：嗜酸性粒細(xì)胞增多是成人外

3、周血嗜酸性粒細(xì)胞0.5*109/L,見(jiàn)于：1.寄生蟲(chóng)??；2.變態(tài)反應(yīng)性疾病；3.皮膚??；4.血液??；5.某些惡性腫瘤；6.某些傳染??；7 .其他：風(fēng)濕性疾病、腺垂體功能減低癥等；8.高嗜酸性粒細(xì)胞綜合癥。8 .電阻抗法血液分析儀的檢測(cè)原理。答： 根據(jù)細(xì)胞相對(duì)非導(dǎo)電的性質(zhì)，懸浮在電解質(zhì)溶液中的血細(xì)胞顆粒在通過(guò)計(jì)數(shù)小孔時(shí)可引起電阻的變化，于是瞬間引起了電壓變化而出現(xiàn)一個(gè)脈沖信號(hào)。脈沖信號(hào)變化的程度取決于非導(dǎo)電性細(xì)胞體積的大小，細(xì)胞體積越大產(chǎn)生的脈沖振幅越高，記錄脈沖的數(shù)量就可測(cè)定細(xì)胞數(shù)量。這些脈沖信號(hào)經(jīng)過(guò)放大、闕值調(diào)節(jié)、甑別、整形、計(jì)數(shù)及自動(dòng)控制保護(hù)系統(tǒng)，最終可打印出數(shù)據(jù)報(bào)告。9 .血紅蛋白測(cè)定方

4、法及其方法學(xué)評(píng)價(jià)答：測(cè)定方法包括：1.氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法（HiCN ）為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)參考方法。操作簡(jiǎn)單、顯色快且結(jié)果穩(wěn)定可靠，可檢測(cè)除 SHb外的各種血紅蛋白。KCN有劇毒，且存在高白細(xì)胞和高球蛋白血癥可致試劑混濁，以及HbCO 轉(zhuǎn)化較慢等問(wèn)題。2.十二烷基硫酸鈉（SDS）血紅蛋白測(cè)定法可替代 HiCN法。SDS與Hb 作用（除SHb外），生成SDS-Hb棕紅色化合物，具吸收峰在 538nm, SDS可用 HiCN 法測(cè)定的抗凝血或溶血液，制備標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。本法操作簡(jiǎn)單，呈色穩(wěn)定，準(zhǔn)確性和精確性符合要求，且無(wú)公害，為次選方法。SDS 本身質(zhì)量差異較大，且破壞白細(xì)胞，不適用于同時(shí)有白細(xì)胞計(jì)數(shù)和H

5、b 測(cè)定的血細(xì)胞分析儀上使用。3.疊氮高鐵血紅蛋白（HiN3）測(cè)定法與HiCN測(cè)定法相似的優(yōu)點(diǎn)，顯色快而穩(wěn)定，試劑毒性?xún)H為HiCN 的 1/7， 但存在公害問(wèn)題。4.堿羥血紅蛋白（ AHD575） 測(cè)定法，試劑簡(jiǎn)單，不含有毒劑，呈色穩(wěn)定，可用氯化血紅素作標(biāo)準(zhǔn)品。但此法在血液分析儀中應(yīng)用受限。5.多參數(shù)血液分析儀測(cè)Hb 已逐漸取代手工法，操作簡(jiǎn)單、快速，同時(shí)可以獲得多項(xiàng)紅細(xì)胞的參數(shù)。其測(cè)定原理多采用HiCN 法，但由于各型號(hào)儀器使用的溶血?jiǎng)┎煌?，形成Hb 的衍生物不同。儀器要經(jīng)過(guò)HiCN 標(biāo)準(zhǔn)液校正后，才能進(jìn)行Hb 測(cè)定。10 網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)的臨床意義答：1.判斷骨髓增生能力，判斷貧血類(lèi)型：增多

6、，表示骨髓造血功能旺盛。常見(jiàn)于溶血性貧血（尤其急性溶血）、急性失血；造成恢復(fù)期可見(jiàn)Ret 短暫和迅速增高，是骨髓功能恢復(fù)較敏感的指標(biāo)。減少，表示骨髓造血功能低下，見(jiàn)于冉障，溶貧、自身免疫性溶貧危象。典型再障，網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)常低于0.005，網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值低于15*109/L ，為其診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。2 .評(píng)價(jià)療效，判斷病情變化：Ret是貧血患者隨訪檢查的項(xiàng)目之一。3 .骨髓移植后監(jiān)測(cè)骨髓造血恢復(fù)。8 .血沉變化的臨床意義。答：1.生理性增快：女性高于男性。婦女經(jīng)期、妊娠3 個(gè)月以上，以及老年人血沉常增快。2.病理性增快：各種炎癥：感染是血沉加快的最常見(jiàn)原因，如急性細(xì)菌性感染；結(jié)核病、結(jié)締組織炎癥

7、、風(fēng)濕熱等慢性炎癥于活動(dòng)期血沉增快，病情好轉(zhuǎn)時(shí)血沉減慢，故血沉（ESR）可動(dòng)態(tài)觀察病情變化。組織損傷及壞死：見(jiàn)于較大圍組織損傷或手術(shù)創(chuàng)傷。心肌梗死時(shí)血沉增快，而心絞痛時(shí)血沉多正常，可作為兩者鑒別指標(biāo)。惡性腫瘤血沉增快，而良性腫瘤血沉多正常。高球蛋白血癥。貧血。高膽固醇血癥。3.血沉減慢。臨床意義較小，主要見(jiàn)于紅細(xì)胞明顯增多、纖維蛋白原含量嚴(yán)重減低時(shí)。血沉是較為常用而缺乏特異性的指標(biāo)，血沉常作為疾病是否活動(dòng)的檢測(cè)指標(biāo)。9 .簡(jiǎn)述中性粒細(xì)胞病理變化的臨床意義。答：中性粒細(xì)胞增多指分葉核粒細(xì)胞超過(guò)70%,絕對(duì)值7*109/L。急性感染或炎癥是最常見(jiàn)的原因，以中性粒細(xì)胞為主。尤其是化膿性球菌感染。其增

8、高程度與病原體種類(lèi)、感染部位和程度以及機(jī)體的反應(yīng)性等有關(guān)。廣泛組織損傷或壞死和急性溶血，如嚴(yán)重?zé)齻?、心肌梗死等均可?jiàn)白細(xì)胞增多，以中性粒細(xì)胞為主。急性失血，白細(xì)胞迅速增多，以中性粒細(xì)胞為主。急性中毒。惡性月中瘤、 白血病， 急性白血病以幼稚白血病細(xì)胞增多為主。慢性白血病以成熟的白血病細(xì)胞增高為主。10 .為什么血細(xì)胞分析儀對(duì)白細(xì)胞的分類(lèi)結(jié)果只能作為篩檢試驗(yàn)？答：1.三分群血液分析儀用電阻抗法的原理，依據(jù)白細(xì)胞體積的大小，人為的將白細(xì)胞分成三群，這種分類(lèi)不夠準(zhǔn)確。2.五分類(lèi)的血細(xì)胞分析儀聯(lián)合應(yīng)用光學(xué)和電學(xué)等技術(shù)的儀器，檢測(cè)同一血細(xì)胞的體積、細(xì)胞核形狀及胞質(zhì)中顆粒，在綜合分析后做出白細(xì)胞分類(lèi)，這種

9、檢測(cè)分類(lèi)，這種檢測(cè)分類(lèi)法雖然較電阻抗法高，但仍不能滿(mǎn)足臨床檢出異常細(xì)胞的需要。3.各類(lèi)型的血液分析儀尚不具有識(shí)別紅細(xì)胞、白細(xì)胞核、血小板的能力，仍不能檢出白細(xì)胞形態(tài)的病理性變化，特別是對(duì)幼稚細(xì)胞的檢測(cè)。而顯微鏡能根據(jù)血細(xì)胞與染色液特異性的結(jié)合，根據(jù)血涂片上細(xì)胞的體積、細(xì)胞核形狀及胞質(zhì)中顆粒等著況，進(jìn)行綜合分析并能識(shí)別異常和幼稚細(xì)胞，因此，血細(xì)胞分析儀只能作為健康人血液一般檢驗(yàn)的篩檢之用。11 .尿常規(guī)分析的臨床價(jià)值。答：1.泌尿系統(tǒng)疾病的診斷與療效觀察。泌尿系統(tǒng)的炎癥、結(jié)石、腫瘤、血管病變及腎移植術(shù)后發(fā)生排異反應(yīng)時(shí)，各種病變產(chǎn)物直接進(jìn)入尿中，引起尿液成分變化，因此尿液分析是泌尿系統(tǒng)疾病診斷與療

10、效觀察的首選項(xiàng)目。2.其他系統(tǒng)疾病的診斷。 尿液來(lái)自血液，其成分又與機(jī)體代有密切關(guān)系，故任何系統(tǒng)疾病的病變影響血液成分改變時(shí)，均能引起尿液成分的變化，因此可通過(guò)尿液分析協(xié)助臨床診斷。 3.安全用藥的監(jiān)護(hù)。某些藥物如慶大霉素、卡那霉素、多黏菌素B 與磺胺類(lèi)藥等?？梢鹉I損害，故用藥前及用藥過(guò)程中需觀察尿液的變化，以確保用藥安全。4.職業(yè)病的輔助診斷。鉛、鎘、鉍、汞等均可引起腎損害，尿中此類(lèi)重金屬排出量增多，對(duì)職業(yè)病的診斷及預(yù)防有一定意義。12 .糞便隱血試驗(yàn)的臨床意義。答： 糞便隱血試驗(yàn)對(duì)消化道出血的診斷有重要價(jià)值。消化性潰瘍、藥物致胃黏膜損傷（如服用阿司匹林、吲哚美辛、糖皮質(zhì)激素等）、腸結(jié)核、

11、Crohn 病、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲(chóng)病及胃癌、結(jié)腸癌等消化道腫瘤時(shí)，糞便隱血試驗(yàn)均常陽(yáng)性。故須結(jié)合臨床其他資料進(jìn)行鑒別診斷。在消化性潰瘍時(shí)，陽(yáng)性率為4070%，呈間斷性陽(yáng)性。消化性潰瘍治療后，當(dāng)糞便外觀正常時(shí)，隱血試驗(yàn)陽(yáng)性仍可持續(xù)57 天，此后如出血完全停止，隱血試驗(yàn)即可轉(zhuǎn)陰。消化道癌癥時(shí)，陽(yáng)性率可達(dá)95%， 呈持續(xù)陽(yáng)性，故糞便隱血試驗(yàn)常作為消化道惡性腫瘤診斷的一個(gè)篩選指標(biāo)。尤其對(duì)中老年人早期發(fā)現(xiàn)消化道惡性腫瘤有重要價(jià)值。此外在流行性出血熱患者的糞便中隱血試驗(yàn)也有84%的陽(yáng)性率，可作為該病的重要佐證。13 .尿 HCG 的檢測(cè)原理、答：在纖維素膜的特定位置，分別包被單抗鼠IgG 抗體（

12、對(duì)照線），單抗人HCG抗體（測(cè)定線），呈上下排列，另外，試帶上還含有均勻分布膠體金標(biāo)記人B -HCG單抗、膠體金標(biāo)記的鼠IgG 抗原。檢測(cè)時(shí)因?qū)游饔媚蛞褐械腍CG 與膠體金標(biāo)記人B-HCG單抗結(jié)合，移至測(cè)定線，形成金標(biāo)記B -HCG單抗一B -HCG抗原一單抗人 HCG 抗體的雙抗體夾心式復(fù)合物，測(cè)定線呈紫紅色。同時(shí)， 金標(biāo)記鼠IgG抗原隨尿上行至單抗鼠IgG 抗體，形成金標(biāo)記鼠IgG 抗原與單抗鼠IgG 抗體復(fù)合物，對(duì)照線呈紫紅色。血液學(xué)檢驗(yàn)1 . 簡(jiǎn)述血細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中形態(tài)演變規(guī)律答：胞體由大到小，但原始細(xì)胞比阜幼粒細(xì)胞小，巨核細(xì)胞由小到大，核漿比例由大到?。话擞纱蟮叫?，成熟紅細(xì)胞核消失

13、；核形由圓到凹陷到分葉，有的細(xì)胞可不分葉；核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)由細(xì)致疏松到粗糙緊密，核染色質(zhì)顏色由淡紫色到深紫色；核膜由不明顯到明顯；核仁由顯著可見(jiàn)到無(wú)，胞質(zhì)量由少到多，胞質(zhì)顏色由藍(lán)到紅或由深藍(lán)到淺藍(lán)；胞質(zhì)顆粒由無(wú)到有；紅細(xì)胞在成熟過(guò)程中，胞質(zhì)不會(huì)顆粒。2 . 再障的骨髓病理學(xué)特點(diǎn)答； 骨髓增生減退，造血組織與脂肪組織容積百分比降低，脂肪細(xì)胞與基質(zhì)增多。粒細(xì)胞、紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞均減少，淋巴細(xì)胞增多。間質(zhì)漿細(xì)胞、肥大細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞等非造血細(xì)胞增多，并可有間質(zhì)水腫、出血甚至液性脂肪壞死。3 .再障的診斷標(biāo)準(zhǔn)答：1.全血細(xì)胞減少，網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值減少；2.一般無(wú)肝脾腫大；3.骨髓至少1個(gè)部位增生減低或重度減

14、低，骨髓小粒非造血細(xì)胞增多；4.除外引起全血細(xì)胞減少的其他疾病，如PNH、 MDS-RA 急性造血功能停滯；5.一般抗貧血藥物治療無(wú)效。4 .溶血性貧血的共性改變答： 1.一般貧血實(shí)驗(yàn)室表現(xiàn)，正常細(xì)胞性貧血，網(wǎng)織紅細(xì)胞一般增高，血片中有特殊形態(tài)的紅細(xì)胞，類(lèi)白血病反應(yīng)。骨髓有核細(xì)胞顯著增多，粒紅比例倒置。2.血紅蛋白的釋放。3.膽紅素代異常。4.紅細(xì)胞壽命縮短。5 .慢性粒細(xì)胞白血病與骨髓纖維化的鑒別答：1.發(fā)熱：慢，常見(jiàn)疾病期；骨，不常見(jiàn)。2.貧血：慢，明顯；骨，不一致。3.脾腫大：慢，更明顯；骨，明顯。4.異性紅細(xì)胞：慢，不明顯；骨，明顯，見(jiàn)淚滴紅細(xì)胞。5.WBC 計(jì)數(shù)： 慢， 增多； 骨，

15、 正常， 減少或減增多。6.有核紅細(xì)胞：慢，無(wú)或少見(jiàn)；骨，常見(jiàn)。7.NAP:慢，降低或0,急變可增高；骨，正常，增多或減少。8.骨髓涂片：慢，以中幼、晚幼、桿狀粒細(xì)胞增殖為主；骨，多為干抽。 9.骨髓活檢：慢，粒系增殖與脂肪組織取代一致；骨，為纖維組織取代，有新骨髓組織形成、巨核細(xì)胞增多。10.Ph 染色體：慢，90%陽(yáng)性；骨，陰性。11.BCR/ABL 融合基因：慢，陽(yáng)性；骨，陰性。6 .凝血過(guò)程的三個(gè)階段答：第一階段：血液凝血活酶的形成；第二階段：凝血酶形成；第三階段：纖維蛋白的形成。第一階段有源性和外源性凝血系統(tǒng)兩個(gè)途徑。外源性凝血系統(tǒng)是由于血管壁和組織損傷后釋放因子田， 因子即，鈣離子

16、形成復(fù)合物，促使因子X(jué)活 化，然后形成凝血活酶。源性凝血系統(tǒng)是通過(guò)固相和液相激活因子刈， 然后是DC -Vffl-Ca-PF3復(fù)合物形成，從而促使因子X(jué)活化，形成凝血活酶。7 .如何早期診斷DIC。答： 1.存在可引起DIC 的病因，如感染、創(chuàng)傷、腫瘤等。2.有兩種以上的下列臨床表現(xiàn)：反復(fù)、嚴(yán)重或廣泛的出血；不明原因或難以糾正的休克；出現(xiàn)反映肺、腦、肝、腎等器官栓塞的癥狀和體征；原來(lái)疾病不可解釋的溶血現(xiàn)象。3.實(shí)驗(yàn)室檢查符合以下表現(xiàn)：PLT 減少或進(jìn)行性下降，F(xiàn)g 含量減少，3P 試驗(yàn)陽(yáng)性或D-二聚體升高。PT縮短或較正常對(duì)照線延長(zhǎng) 3s以上。8 .骨髓檢查的適應(yīng)證答：1.外周血細(xì)胞數(shù)量、成分

17、、形態(tài)異常。2.不明原因的發(fā)熱、肝腫大、脾腫大、淋巴結(jié)腫大。3.不明原因的骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、黃疸、紫癜、血沉明顯加快。 4.惡性血液病化療后的療效觀察。5.其他：骨髓細(xì)胞培養(yǎng)、微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)檢驗(yàn)等。9 紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血的鑒別答： 1.細(xì)胞形態(tài)：紅，類(lèi)巨幼紅細(xì)胞；巨，典型巨幼紅細(xì)胞。2.細(xì)胞大?。杭t，大小相差懸殊；巨，大而比較一致。3.核質(zhì)發(fā)育：紅，質(zhì)落后于核/核落后于質(zhì)；巨，核落后于質(zhì)。4.核染色質(zhì)：紅，粗細(xì)不均，排列紊亂；巨，細(xì)致，排列疏松。5.副幼紅細(xì)胞變：紅，明顯；巨，極少見(jiàn)。6.有核紅細(xì)胞PAS反應(yīng)：紅，陽(yáng)性；巨，陰性。7.早期幼粒細(xì)胞增生：紅，多見(jiàn)；巨，極少見(jiàn)。8

18、.巨核細(xì)胞減少：紅，明顯；巨，不明顯。10 .血小板在止血過(guò)程中的作用答： 1.PLT 能維持正常管壁的完整性，使其通透性減低。2.通過(guò)黏附、聚集和釋放反應(yīng)在創(chuàng)口處形成PLT 栓子。 3.釋放各種PLT 因子參與血液凝固，其中PF3最重要。4.釋放止血物質(zhì)TXA2,使PLT進(jìn)一步收縮。5.釋放PLT收縮蛋白，使血塊收縮，有利于止血。11 .何為白血病M4 型，其亞型如何劃分？答： M4 為粒單核細(xì)胞型血病，按粒細(xì)胞、單核細(xì)胞的比例，形態(tài)不同分為四個(gè)亞型：1.M4a：以原始及阜幼粒細(xì)胞白血病增長(zhǎng)生為主。單核細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞總數(shù)>20% (NEC)02.M4b:以原、幼單核細(xì)胞增生為主，原粒細(xì)胞

19、+早幼粒細(xì)胞20% (NEC)。3.M4c：具有粒系又單核系特征的原始細(xì)胞>30% (NEC)。4.M4Eo：除上述特征外，還有顆粒粗大且圓、著色較深的嗜酸性粒細(xì)胞，占 530%。12.何為造血干細(xì)胞？具備哪些特征？答：是一種具有自身復(fù)制能力的細(xì)胞，必須具備：1.有分裂能力：一個(gè)干細(xì)胞經(jīng)過(guò)一個(gè)細(xì)胞周期活動(dòng)后可生成兩個(gè)與分裂前性質(zhì)相同的干細(xì)胞，這就是干細(xì)胞自身復(fù)制的特性。由于它有自身復(fù)制能力，所以能保持本細(xì)胞庫(kù)數(shù)的恒定。2.有分化為更成熟細(xì)胞的能力：即具有向骨髓多系細(xì)胞分化的能力。造血干細(xì)胞既能自身復(fù)制，經(jīng)常維持一定的數(shù)量，又能分化為使多系細(xì)胞相對(duì)穩(wěn)定。概括為：血細(xì)胞來(lái)源于骨髓的造血多能干

20、細(xì)胞，多能干細(xì)胞能分化為多系統(tǒng)的定向干細(xì)胞，然后經(jīng)過(guò)原始、幼稚各階段，而后成熟為多種血細(xì)胞。13 .試舉例說(shuō)明急性白血病的MICM 分型。答： M 形態(tài)學(xué) I 免疫學(xué) C 細(xì)胞化學(xué)M 分子生物學(xué)，以M3 為例， Hb 和 RBC 輕中度減少，WBC不定，分類(lèi)以異常早幼粒為主， 30% (NEC),早幼與原粒之 比3:1,異常阜幼粒細(xì)胞核大小不一，胞質(zhì)中有大小不等顆粒，可見(jiàn)束狀A(yù)uer小 體 ；POX(+),CD13/CD33(+),CD34/HLA-DR(-),t(15:17)(q22:q12) 形 成PML/RARA 融合基因。14 .血栓形成機(jī)制答： 1.血管壁損傷；局部皮細(xì)胞抗血栓形成活

21、性減弱或喪失，使血栓形成的皮下成分暴露，促使血小板黏附、聚集和釋放，激活源性、外源性凝血途徑，局部形成纖維蛋白的凝塊或血栓，同時(shí)激肽的生成和血小板釋放的血管壁通透性因子使血管壁通透性增加，利于血栓形成。2.血液成分的改變；血小板數(shù)量過(guò)多與功能亢進(jìn)， 血液凝固性增高。纖溶活性減低及白細(xì)胞等均利于血栓形成。3.血液淤滯；血流緩慢、停滯與渦流均可導(dǎo)致血栓形成、血黏度增高，利于血小板黏附、聚集，利于血栓形成。 15.原發(fā)性纖溶亢進(jìn)與DIC 繼發(fā)性纖溶的鑒別。答：原發(fā)性纖溶亢進(jìn)：PLT、B-TG、PF4、GNP-140、F1+2、FPA、SFMC、PCP、 D-二聚體、B B 1542肽，均是正常；B0

22、142肽升高。DIC:PLT下降；0-TG、 PF4、GNP-140、F1+2、FPA、SFMC、PCP、D-二聚體，均是升高；B0 1542 肽, 升高；B0 142肽，正常。16 .舉例說(shuō)明為什么分析骨髓象必須常規(guī)分析血常規(guī)？答： 1.骨髓象相似而血常規(guī)有區(qū)別，如類(lèi)白血病反應(yīng)，其骨髓象與慢粒相似，但血中的 WBC 增多及慢粒顯著。2.骨髓象有區(qū)別而血常規(guī)相似，如傳染性淋巴細(xì)胞增多癥和慢粒時(shí)，血常規(guī)都有小淋巴細(xì)胞增多，但骨髓象顯示前者淋巴細(xì)胞稍增多而后者顯著增多。3.骨髓象變化不顯著而血常規(guī)有顯著異常，如傳染性淋巴細(xì)胞增多癥，其骨髓象中的異性淋巴細(xì)胞遠(yuǎn)不及血常規(guī)中明顯。4.骨髓象有顯著變化而

23、血常規(guī)變化不顯著，如多發(fā)性骨髓瘤，骨髓中可見(jiàn)特異性骨髓瘤細(xì)胞，而血常規(guī)甚少見(jiàn)到。5.骨髓象細(xì)胞難辨認(rèn)，如白血病，血常規(guī)中白血病細(xì)胞分化程度較骨髓象為好，也較骨髓象容易辨認(rèn)。17 .鑒別類(lèi)白血病反應(yīng)和白血病。答： 1.明確病因：類(lèi)，有；白，無(wú)。2.臨床表現(xiàn)：類(lèi)，原發(fā)病癥狀常明顯；白，貧血、出血、發(fā)熱和肝脾腫大等、白細(xì)胞細(xì)胞浸潤(rùn)。3.WBC 計(jì)數(shù)：類(lèi)，中度增加 100*109/L;白，一般增多，可 100200*109/L。4.不成熟 WBC :類(lèi)，幼稚細(xì)胞515%，原始細(xì)胞15%；白，很常見(jiàn)，在30%以上。5.WBC 形態(tài)：類(lèi)，感染病例見(jiàn)中毒顆粒及空泡；白，常有細(xì)胞畸形，可見(jiàn)Auer 小體嗜堿性

24、粒細(xì)胞不增多，慢粒常增多。6.RBC:類(lèi)，無(wú)明顯變化；白，減少且為進(jìn)行性，并可出現(xiàn)幼紅細(xì)胞。7.PLT:類(lèi)，正?；蛟黾樱话?，除慢粒早期外均減少。8.NAP:類(lèi)，顯著增加；白，粒細(xì)胞白血病顯著減少。9.骨髓象：類(lèi)，粒系增加，核左移，但很少達(dá)到白血病程度；白，極度增生，并有大量原始及幼稚細(xì)胞。10.Ph染色體：類(lèi)，無(wú)；白，90%慢粒陽(yáng)性，急粒、急單偶見(jiàn)。11.病理檢查：類(lèi)，無(wú)器官和組織白血病細(xì)胞浸潤(rùn)；白，有浸潤(rùn)。12.治療反應(yīng)：類(lèi)，解除原發(fā)病迅速恢復(fù)；白，療效差。18 .列舉5 例引起外周血全血細(xì)胞減少的血液病及主要鑒別特征？答 1.Hb 再障：骨髓有核細(xì)胞增生低下，淋巴比例相對(duì)增高，粒紅巨三系細(xì)

25、胞增生減低?；顧z示造血組織減少，脂肪組織增加。2.PNH： Ham 實(shí)驗(yàn)和蔗糖溶血實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。3.MDS:骨髓象中可見(jiàn)至少一系的病態(tài)造血。4.非白血性白血?。汗撬柘笾锌梢?jiàn)大量原始細(xì)胞核幼稚細(xì)胞。5.惡性組織細(xì)胞?。汗撬柘笾锌梢?jiàn)惡性組織細(xì)胞。19 .傳染性單核細(xì)胞增多癥、傳染性淋巴細(xì)胞增多癥和急性淋巴細(xì)胞白血病有何不同？答：1.發(fā)熱：傳單，常持續(xù)13周；急淋，持續(xù)不規(guī)則發(fā)熱；傳淋，無(wú)或短暫發(fā)熱。2.淋巴結(jié)腫大：有；有；無(wú)。3.脾腫大：2575%有；有；無(wú)。4.傳染性：??；無(wú)；大。 5.WBC 計(jì)數(shù)：中等度增高；從減少到極度增高；顯著增高。6.有診斷價(jià)值的細(xì)胞：異淋；原淋、幼淋細(xì)胞；正常成熟小淋巴細(xì)

26、胞。7.貧血：無(wú)；有；無(wú)。8.血小板減少：一般無(wú)；有；無(wú)。9.骨髓象：有異淋；原淋、幼淋顯著增多；正常小淋巴增多。10.嗜異性凝集試驗(yàn)：+； -； -。預(yù)后：良好；不良；良好。20.病態(tài)造血時(shí)粒紅巨三系細(xì)胞區(qū)別。答：骨髓：紅，過(guò)多或過(guò)少；巨幼樣變；幼紅細(xì)胞多核；核可畸形、分葉、碎裂；環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞。粒，核分葉過(guò)多或過(guò)少；Pelger樣核異常；顆粒過(guò)多或過(guò)少；成熟細(xì)胞質(zhì)嗜堿性；雙核或畸形中幼粒細(xì)胞。巨核系，小巨核細(xì)胞；多個(gè)圓形巨核；單圓核、巨核。外周血：紅系，有核紅細(xì)胞；粒系，幼稚或原始細(xì)胞；巨系，巨大血小板。異形RBC:紅系，巨大RBC;粒系，其他同骨髓；巨系，小巨核細(xì)胞。輸血（血庫(kù)）1. 輸

27、注全血有哪些缺點(diǎn)？答：1.全血中含有 WBC、PLT和血漿蛋白，可以使受血者產(chǎn)生抗體，再輸血時(shí)，可發(fā)生輸血反應(yīng)。2.由于血漿存在，全血容量較大，對(duì)老年人和兒童可引起循環(huán)超負(fù)荷，發(fā)生心力衰竭。3.全血的血漿中可能含有較高濃度的枸櫞酸鈉、鉀和氨等，易發(fā)生代性堿中毒。2. ABO 定型試驗(yàn)中常要注意哪些問(wèn)題？答：1.ABO亞型：RBC上的A或B抗原很弱，只作正定型時(shí)可導(dǎo)致血型誤定。2.抗 A 抗 B 定型血清質(zhì)量差，對(duì)弱得A 或 B 抗原漏檢。3.受檢血清中存在不規(guī)則抗體。 4.RBC 有多凝集現(xiàn)象。5.某些疾病如低丙種球蛋白血癥等，導(dǎo)致反定型時(shí)血清中抗體漏檢。3. 抗球蛋白配血法步驟答：1.取試管

28、2 支，分別標(biāo)明主次側(cè)，主側(cè)加受血者血清2 滴和供血者5%RBC鹽水懸液1 滴， 次側(cè)加供血者血清2 滴和受血者5%RBC 鹽水懸液1 滴。2.混和，置37度水浴致敏1h,取出后用鹽水離心洗滌 RBC3次，去上清液。3.加最適稀釋度抗球蛋白血清1 滴， 混勻， 1000rpm 離心1min， 觀察結(jié)果。4.陽(yáng)性對(duì)照：5%不完全抗D 致敏的 Rh 陽(yáng)性 RBC 懸液 1 滴，加抗球蛋白血清1 滴。陰性對(duì)照：5%O型RBC懸液1滴，加抗球蛋白血清1滴。鹽水對(duì)照：供血者 5%RBC鹽水懸液 1 滴， 加生理鹽水1 滴； 受血者5%RBC 鹽水懸液1 滴加生理鹽水1 滴。5.結(jié)果判定：如陽(yáng)性對(duì)照管凝集

29、，陰性對(duì)照管、鹽水對(duì)照管不凝集，主次側(cè)配血管都不凝集，表示無(wú)輸血禁忌。臨床生物化學(xué)1. 血糖的來(lái)源和去路。答：來(lái)源：1 肝糖原分解。2.食物經(jīng)消化吸收的葡萄糖。3.糖異生。去路：1.氧化供能。2.合成糖原。3.轉(zhuǎn)變?yōu)橹炯澳承┓潜匦璋被帷?.轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌穷?lèi)物質(zhì)。2 .根據(jù)米-曼氏方程計(jì)算，當(dāng)（S）是Km的5倍時(shí)，反應(yīng)速度v相當(dāng)于最大速度Vmax 的多少？答：根據(jù)v=Vmax S /（Km+ S ），當(dāng)S =5Km 時(shí) v=83% Vmax。3 . 說(shuō)明高氨血癥導(dǎo)致昏迷的生化基礎(chǔ)。答：氨+ a-酮戊二酸-谷氨酸；氨+谷氨酸-谷氨酰胺；腦a -酮戊二酸減少導(dǎo)致了三羧酸循環(huán)減弱，從而ATP 生成減

30、少，腦組織供能缺乏表現(xiàn)昏迷。4 . 體膽紅素來(lái)源于何種代途徑？答：1.大部分由衰老RBC 破壞進(jìn)入降解而來(lái)。Hb 破壞后亞鐵血紅素經(jīng)代轉(zhuǎn)變成膽紅素，約占75%。 2.小部分來(lái)自組織（特別是肝細(xì)胞）中非Hb 的血紅素蛋白質(zhì)的血紅素輔基的分解。3.極小部分由造血過(guò)程中血紅素的少量分解，即無(wú)效造血所產(chǎn)生。5 . 簡(jiǎn)述肝功能檢查及其意義。答：1.膽紅素代檢查了解其有無(wú)黃疸、黃疸程度并鑒定其類(lèi)型。2.蛋白質(zhì)代檢查了解肝細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的能力。3.酶類(lèi)檢查了解肝細(xì)胞受損的程度。4.反映肝外膽汁淤滯的檢查。5.反映肝纖維化程度的檢查。6.反映肝占位性病變的檢查。7.免疫功能檢查以確定肝炎類(lèi)型。8.輸血后肝炎檢

31、查。6 . 試述 ApoAI 、 ApoB 測(cè)定的臨床意義？答： Apo 作為脂類(lèi)載體直接與脂類(lèi)代ApoAI 測(cè)定可直接反映HDL 和 LDL 水平，ApoAI 含量與 HDL 含量正相關(guān)，與冠心病和動(dòng)脈硬化的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)，ApoAI越高對(duì)人體越有益，而ApoB 則相反，其水平越高意味著LDL 越高患冠心病危險(xiǎn)越大， ApoAI 下降和 ApoB 增高見(jiàn)于冠心病，還見(jiàn)于未控制的糖尿病、腎病綜合征、活動(dòng)肝炎、營(yíng)養(yǎng)不良等，冠心病的優(yōu)選指標(biāo)是ApoB,其增高比HDL-CH降低和 TCH 升高更有意義，腦血管病以HDL-CH ， ApoAI 下降更明顯。7 . 肌鈣蛋白是反映哪個(gè)器官損傷的標(biāo)志物？有何

32、意義？答： Tn 是心肌組織的一種特有的調(diào)節(jié)蛋白，嚴(yán)重心肌缺損時(shí)釋放入血，是反映心肌損傷的血清標(biāo)志物。肌鈣蛋白以三種球型亞基組成，即TnT、 TnI 和 TnC，相對(duì)分子質(zhì)量一次減小。其含量與年齡、性別、 梗死部位及溶栓藥物種類(lèi)等無(wú)關(guān)。8 . 尿中微量蛋白的檢測(cè)對(duì)診斷早期腎損傷有什么意義？答： 蛋白尿是腎臟疾病的一個(gè)重要指標(biāo)。在某些腎臟病早期，尿常規(guī)測(cè)定常為陰性，尿中蛋白質(zhì)含量實(shí)際已有微量的增加(20200mg/L) 。若早期發(fā)現(xiàn)腎臟損害疾病如糖尿病腎損害等，必須做一些尿中微量蛋白的檢測(cè)，以監(jiān)測(cè)腎臟以及其他器官的功能狀態(tài)，提供可靠的生化指標(biāo)。9 .簡(jiǎn)述電泳的工作原理。答： 溶液中的帶電粒子在直

33、流電場(chǎng)中向電極相反方向移動(dòng)的現(xiàn)象稱(chēng)為電泳。蛋白質(zhì)、核酸與生物分子具有兩性電離及各自等電點(diǎn)。在PH 相同條件下這些生物分子將會(huì)有帶不同量得電荷。如果要分離一組等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)，只要選擇一個(gè)合適PH,使多種蛋白質(zhì)在該P(yáng)H的凈電荷差異最大，即可用此電泳方法檢查得到滿(mǎn)意的分離效果。10 .簡(jiǎn)述光譜吸收法的原理和朗伯-比爾定律。答：光譜吸收法是指利用各種化學(xué)物質(zhì)所具有的吸收光譜的特性來(lái)確定其性質(zhì)、結(jié)構(gòu)和含量的方法。朗伯-比爾定律：A=kbc,其中k是吸光系數(shù)，b是比色杯得 光徑，c為溶液濃度。C為1mol/L, b為1cm時(shí)，則系數(shù)k為摩爾吸光系數(shù)，以 e表示，單位為 L/ (mol?cm)。11 .

34、何為連續(xù)監(jiān)測(cè)法？其特點(diǎn)是什么？答：連續(xù)測(cè)定酶促反應(yīng)過(guò)程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時(shí)間變化的多點(diǎn)數(shù)據(jù)，求出酶反應(yīng)處速度，間接計(jì)算酶活性濃度的方法稱(chēng)連續(xù)監(jiān)測(cè)法。12 .何為電極法？表示電極法的基本公式是什么？答： 利用電極、電位和物質(zhì)濃度之間的關(guān)系來(lái)確定物質(zhì)含量的分析方法稱(chēng)為電極法?；竟绞悄芩固胤匠淌?。13 .自動(dòng)生化分析儀性能評(píng)價(jià)指標(biāo)主要由哪些？答：常用性能指標(biāo)有精確度、波長(zhǎng)準(zhǔn)確性、相關(guān)性、取樣量和最小反應(yīng)體積及攜帶污染情況等。14 .簡(jiǎn)述干化學(xué)法原理。答：是以被測(cè)樣本中存在的液體為反應(yīng)介質(zhì)（液體中的水溶解了試紙條上的試劑） ，被測(cè)成分直接與固化與載體上的干試劑反應(yīng)的一種方式。微生物學(xué)檢驗(yàn)

35、1. 細(xì)菌有哪些特殊結(jié)構(gòu)？它們?cè)卺t(yī)學(xué)上有何實(shí)際意義？答：1.莢膜：許多細(xì)菌胞壁外圍繞一層較厚的黏性、膠凍樣物質(zhì)。2.鞭毛：某些細(xì)菌體表面附著有細(xì)長(zhǎng)呈波狀彎曲的絲狀物。是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官。3.菌毛：一些細(xì)菌菌體表面遍布著短而細(xì)直的蛋白質(zhì)絲狀物，稱(chēng)為菌毛，與細(xì)菌的致病性有關(guān)。4.芽孢：某些細(xì)菌在一定環(huán)境條件下，細(xì)胞質(zhì)脫水濃縮，在菌體形成一個(gè)折光性強(qiáng)的圓形或卵圓形小體。芽孢對(duì)外界的抵抗力增強(qiáng)，不易被殺滅。2. 常見(jiàn)的細(xì)菌變異現(xiàn)象有哪些有何實(shí)際意義？答：有非遺傳性（表型性）改變和遺傳性（基因型）變異。其意義為：表型性改變， 是指當(dāng)外界環(huán)境條件發(fā)生改變時(shí)所引起的細(xì)菌某一性狀的改變。當(dāng)條件回復(fù)，可恢復(fù)原來(lái)的

36、性狀，不遺傳給后代。常見(jiàn)的有：形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變，細(xì)菌形態(tài)的改變，毒力的改變。基因型變異，是細(xì)菌自身遺傳物質(zhì)（細(xì)菌染色體、質(zhì)粒）發(fā)生改變而引起的變異。新獲得的性狀可以穩(wěn)定地傳給后代。3. 外毒素和毒素有哪些主要區(qū)別？答： 外毒素是某些細(xì)菌在代過(guò)程中產(chǎn)生并分泌到菌體外的毒性物質(zhì)。主要由革蘭陽(yáng)性菌產(chǎn)生，少數(shù)革蘭陰性菌也能產(chǎn)生。外毒素的化學(xué)成分是蛋白質(zhì)，性質(zhì)不穩(wěn)定，易被熱、酸及酶破壞；外毒素的毒性作用強(qiáng)；不同細(xì)菌產(chǎn)生的外毒素對(duì)人體組織有選擇性的毒性作用，引起特殊病變。外毒素有較強(qiáng)的抗原性，經(jīng)甲醛處理可脫去毒性作用，但仍保留抗原性，成為類(lèi)毒素，類(lèi)毒素可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗毒素， 用于人工自動(dòng)免疫；毒素是革

37、蘭陰性桿菌細(xì)胞壁中的脂多糖成分，只有當(dāng)菌體死亡裂解或用人工方法裂解細(xì)菌后才釋放出來(lái)。毒素對(duì)機(jī)體組織的毒性作用選擇性不強(qiáng)，引起的病理變化和臨床癥狀基本相同。4. 正常菌群一般不引起人體感染，請(qǐng)問(wèn)在什么情況下可發(fā)生感染？答： 當(dāng)病人免疫功能下降，體微生態(tài)環(huán)境失衡或發(fā)生細(xì)菌易位時(shí)，即可發(fā)生感染。5. 頭孢菌素類(lèi)抗生素，是否第四代頭孢就一定比第一代頭孢抗菌效果好，為什么？答： 不一定， 要看對(duì)什么細(xì)菌而言。如第一代頭孢菌素對(duì)革蘭陽(yáng)性菌抗菌效果要好于第四代頭孢菌素，而第四代頭孢菌素對(duì)革蘭陰性菌抗菌能力則強(qiáng)于第一代頭孢菌素。6. 藥敏試驗(yàn)時(shí)常報(bào)告“中介”結(jié)果，你知道其臨床意義嗎 ？答： 中介是介于敏感和耐

38、藥之間的一個(gè)實(shí)驗(yàn)緩沖區(qū)域，有兩層意義：一是反映在操作中可能因控制不好出現(xiàn)的結(jié)果有誤，應(yīng)重復(fù)試驗(yàn)或改做MIC ;二是提示高于正常給藥或在某些生理藥物濃集的部位（如尿液中喹諾酮類(lèi)）時(shí)細(xì)菌可被抑制。7. 簡(jiǎn)述用細(xì)菌制片和進(jìn)行革蘭染色的基本步驟。答：制片：取生理鹽水一滴，置載玻片上，用接種環(huán)挑取菌落，將細(xì)菌放在生理鹽水研勻成薄得菌膜后，自然干燥，并經(jīng)火焰固定。染色：1.結(jié)晶紫初染1min后，用水洗去染液。2.碘液媒染1min,水洗。3.95%乙醇脫色，不時(shí)搖勻 30s, 至無(wú)紫色脫落為止，水洗。4.稀釋石碳酸復(fù)紅復(fù)染30s,水洗，干后鏡檢。8. 簡(jiǎn)述甲基紅試驗(yàn)的原理。答：某些細(xì)菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸

39、，并進(jìn)一步分解丙酮酸產(chǎn)生甲酸、乙酸、乳酸等使PH 下降至 4.5以下，加入甲基紅試劑后呈紅色，為陽(yáng)性。若分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步分解為其他非酸性物質(zhì)，則PH 在 6,.2 以上，加入甲基紅試劑后呈黃色，為陰性。9. 簡(jiǎn)述金黃色葡萄球菌的最低鑒定特征。答：1.革蘭陽(yáng)性球菌，呈葡萄串排列；2.血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán)；3.觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性；4.血漿凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性。10. 簡(jiǎn)述細(xì)菌鑒定的基本原理。答： 首先進(jìn)行革蘭染色以區(qū)分細(xì)菌的基本形態(tài)和革蘭染色性。根據(jù)形態(tài)和染色性的不同做一些大的分類(lèi)試驗(yàn)，如革蘭陰性桿菌做氧化酶試驗(yàn)，革蘭陽(yáng)性球菌觸酶試驗(yàn)，其后再進(jìn)行不同的生化試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)一步進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)

40、。11. 請(qǐng)敘述血液感染的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)程序。答：無(wú)菌采集血液標(biāo)本增菌培養(yǎng)（需氧或厭氧培養(yǎng)）有菌生長(zhǎng)取菌落。具體 步驟：1.涂片、染色、鏡檢。2.直接藥敏試驗(yàn)-初級(jí)報(bào)告。3.分離培養(yǎng)-觀察菌 落，取菌落涂片、染色、鏡檢。純培養(yǎng)-血清學(xué)鑒定、生化鑒定、藥敏試驗(yàn)-出 示報(bào)告。免疫學(xué)檢驗(yàn)1. 比較補(bǔ)體兩條激活途徑的不同點(diǎn)。答：1.激活物質(zhì)：經(jīng)典，抗原抗體復(fù)合物；旁路， LPS、酵母多糖凝聚的IgG、 IgA等。2.激活起點(diǎn)：經(jīng)典，C1q；旁路，C3。3.參與成分：經(jīng)典，C1C9;旁路, C3BDP因子，C5C9。4.C3轉(zhuǎn)化酶：經(jīng)典，C4b2b;旁路，C3bBbp。C3轉(zhuǎn)化酶： C4b2b3b;旁路，C

41、3bnBbp。5.作用：經(jīng)典，在特異性體液免疫的效應(yīng)階段發(fā)揮 作用；旁路，參與非特異性免疫，在感染早期即發(fā)揮作用。2. 補(bǔ)體的生物學(xué)活性是什么?答： 補(bǔ)體的生物學(xué)活性是指補(bǔ)體活化過(guò)程的產(chǎn)物表現(xiàn)出的具有擴(kuò)大免疫效應(yīng)的多項(xiàng)生物學(xué)活性，根據(jù)這些產(chǎn)物的活性特點(diǎn)可分為五類(lèi)：1.細(xì)胞溶解作用。2 調(diào)理作用。3.引起炎癥反應(yīng)。4.清除免疫復(fù)合物。5.免疫調(diào)節(jié)作用。3. 細(xì)胞因子的生物學(xué)作用特點(diǎn)是什么？答：1.高效性，極微量即可發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。2.一時(shí)性，只在局部短時(shí)間發(fā)揮作用。3.多效性，一種細(xì)胞因子可作用于多種靶細(xì)胞，發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)。4.網(wǎng)絡(luò)性， 不同的細(xì)胞因子之間有相互協(xié)同或相互制約的作用，由此構(gòu)成

42、了復(fù)雜的細(xì)胞因子免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。4. 討論 MHC 在醫(yī)學(xué)上的意義。答：1.器官移植：移植排斥反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是免疫應(yīng)答，故移植成敗的關(guān)鍵是供受者問(wèn)MHC的相容程度。2.免疫調(diào)節(jié)：抗原提呈：無(wú)論外源性抗原還是源性抗原 大多需經(jīng)細(xì)胞加工處理后形成抗原肽段，再與HLA-I、R類(lèi)分子結(jié)合，HLA-抗原肽復(fù)合物共同表達(dá)于細(xì)胞膜表面，才能被CD8+T 細(xì)胞或 CD4+T 細(xì)胞所識(shí)別；MHC限制性：在免疫應(yīng)答過(guò)程中各種免疫細(xì)胞間的相互作用均受到不同 的 MHC 分子的調(diào)控或嚴(yán)格的約束。這種特定的T 細(xì)胞識(shí)別特定類(lèi)別自身MHC分子而發(fā)揮效應(yīng)的現(xiàn)象稱(chēng) MHC限制性；決定免疫應(yīng)答能力。5. 參與體液免疫應(yīng)答的細(xì)胞有哪些

43、？如何發(fā)揮作用？答：1.抗原呈遞細(xì)胞（APC）:主要是單核-巨噬細(xì)胞類(lèi)將處理的抗原提呈給 Th細(xì)胞并分泌IL-1 ， IL-6 活化 T 細(xì)胞。 2.Th 細(xì)胞：經(jīng)抗原激活后分泌細(xì)胞因子，特別是 Th2 細(xì)胞分泌IL-4、 IL-5、 IL-10 等，除輔助B 細(xì)胞活化分化變成漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體，還有調(diào)節(jié)抗體產(chǎn)生的作用。3.B 細(xì)胞：經(jīng)抗原次級(jí)后變成漿細(xì)胞合成并分泌抗體，在對(duì)應(yīng)抗原再次應(yīng)答時(shí) B細(xì)胞是主要的抗原提呈細(xì)胞（APC）,可處理并提呈抗原給Th 細(xì)胞，使之活化。6. 什么事自身抗原？是怎樣產(chǎn)生的？有何臨床意義？答：一般來(lái)說(shuō)，自身物質(zhì)對(duì)自身沒(méi)有抗原性。在一定條件下，自身物質(zhì)對(duì)自身發(fā)揮抗原作用

44、，引起免疫應(yīng)答，稱(chēng)之為自身抗原。產(chǎn)生的原因：1.隱蔽的自身抗原：某些自身物質(zhì)在正常條件下與血流和免疫系統(tǒng)相對(duì)隔絕。外傷、 感染或手術(shù)不甚等原因，是這些物質(zhì)進(jìn)入血液，引起自身免疫應(yīng)答。2.修飾的自身抗原：在病原微生物感染、電離輻射或藥物等影響下，自身組織分子改變，形成新的抗原決定簇或暴露出部的隱蔽的決定簇，成為自身抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，引起自身免疫疾病。7. 試述抗原抗體反應(yīng)基本原理。答： 抗體能夠特異性結(jié)合是基于兩種分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性，這兩種特性是由抗原與抗體分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定的?？乖贵w反應(yīng)分為兩個(gè)階段：第一階段為抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合階段，此階段反應(yīng)快，僅需幾秒鐘至幾分鐘，但

45、不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。第二階段為可見(jiàn)反應(yīng)階段，抗原抗體復(fù)合物在環(huán)境因素的影響下，進(jìn)一步交聯(lián)和聚集，表現(xiàn)為凝集、沉淀、溶解、補(bǔ)體結(jié)合介導(dǎo)的生物現(xiàn)象等肉眼可見(jiàn)的反應(yīng)。此階段反應(yīng)慢，往往需要數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)。8. 簡(jiǎn)述 HVGR 和 GVHR 的主要區(qū)別。答： HVGR 和 GVHR 的主要區(qū)別在于：HVGR 是由宿主體致敏的免疫效應(yīng)細(xì)胞和抗體對(duì)移植物進(jìn)行攻擊，導(dǎo)致移植物排斥；而GVHR 是由移植物中的抗原特異性淋巴細(xì)胞，即“過(guò)路”淋巴細(xì)胞識(shí)別宿主抗原而發(fā)生的一種排斥反應(yīng)。這種反應(yīng)不僅導(dǎo)致移植失敗，而且還能給受者造成嚴(yán)重后果。9. T細(xì)胞亞群檢測(cè)有何意義？答： T 細(xì)胞亞群檢測(cè)已作為臨床輔助診斷與研究的一種

46、重要手段，對(duì)各種疾病如自身免疫病，免疫缺陷病、病毒感染、惡性腫瘤等的發(fā)生、發(fā)展、臨床療效考核和預(yù)后估計(jì)都具有極其重要的意義；對(duì)了解機(jī)體的免疫狀態(tài)也有十分重要的意義。10. 簡(jiǎn)述ELISA 的基本原理。答： 1.使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。2. 使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或酶標(biāo)抗體，這種酶標(biāo)抗原或酶標(biāo)抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，令受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗原或抗體)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi)，最后結(jié)合在固相載體上的， 酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例

47、。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化形成有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可極大的反應(yīng)效果，從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。11試述直接Coomb' s試驗(yàn)與間接Coomb' s試驗(yàn)的共同點(diǎn)與不同點(diǎn)。答：直接Coomb' s試驗(yàn)主要用于檢查已吸附在紅細(xì)胞上的不完全抗體。此試驗(yàn)常用于新生兒溶血癥、自身免疫性溶血癥及特發(fā)性自身免疫性貧血等檢查。間接Coomb s 試驗(yàn)主要用于檢查血清中游離的不完全抗體。此試驗(yàn)多用于檢測(cè)母體Rh(D)抗體，可及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的發(fā)生。亦可對(duì)紅細(xì)胞抗原不相容性

48、輸血所產(chǎn)生的血型抗體進(jìn)行檢測(cè)。12. 簡(jiǎn)述 ELISA 雙抗體夾心法的操作步驟。答：1.特異性抗體與固相載體相連接，形成固相抗體：洗滌除去為結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2.加受檢標(biāo)本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段之間，讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他為結(jié)合物質(zhì)。3.加酶抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈正相關(guān)。4.加底物：夾心復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。13. ELISA 操作的注意事項(xiàng)有哪些？答：1.加樣：在ELISA 中除了包被外

49、，一般需要進(jìn)行45 次加樣在定性測(cè)定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量得準(zhǔn)確性。在定量測(cè)定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出現(xiàn)氣泡。2.孵育：在ELISA 中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加標(biāo)本后，此時(shí)反應(yīng)的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定的要求，保溫容器最好是水浴箱，可使溫度迅速平衡。各ELISA 板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)⑵桨宸旁诘撞坑袧窦啿嫉脻窈兄小窈袘?yīng)該 是金屬的，傳熱容易。如用保溫箱，空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其中，以平衡溫度，這一步在室溫較低時(shí)更為重要。加入底物后，反應(yīng)時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。3.洗滌：洗滌在ELISA 過(guò)程中雖不是反應(yīng)步驟，但卻是決定成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反映中沒(méi)有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。4.顯色及終止反應(yīng)：顯色是酶促反應(yīng)，應(yīng)按規(guī)定的溫度和時(shí)間操作，用酸終止。5.結(jié)果判斷：用比色計(jì)測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于ELISA 板底得平整與透明度和比色計(jì)的質(zhì)量。14. 試述流式細(xì)胞術(shù)（FCM）的工作