分光光度法測定葉綠素含量

1、一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? .了解植物組織中葉綠素的分布及性質(zhì)。2.掌握測定葉綠素含量的原理和方法。二、實(shí)驗(yàn)原理葉綠素廣泛存在于果蔬等綠色植物組織中，并在植物細(xì)胞中與蛋白質(zhì)結(jié)合成葉綠體。當(dāng)植物細(xì)胞死亡后，葉綠素即游離出來，游離葉綠素很不穩(wěn)定，對光、熱較敏感；在酸性條件下葉綠素生成綠褐色的脫鎂葉綠素，在稀堿液中可水解成鮮綠色的葉綠酸鹽以及葉綠醇和甲醇。高等植物中葉綠素有兩種：葉綠素a和b,兩者均易溶于乙醇、乙醛、丙酮和氯仿。葉綠素的含量測定方法有多種，其中主要有：2 .原子吸收光譜法：通過測定鎂元素的含量，進(jìn)而間接計(jì)算葉綠素的含量。3 .分光光度法：利用分光光度計(jì)測定葉綠素提取液在最大吸收波長下的吸光值，即

2、可用朗伯一比爾定律計(jì)算出提取液中各色素的含量。葉綠素a和葉綠素b在645nm和663nm處有最大吸收，且兩吸收曲線相交于652nm處。因此測定提取液在645nm、663nm、652nm波長下的吸光值，并根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式可分別計(jì)算出葉綠素a、葉綠素b和總?cè)~綠素的含量。三、儀器、原料和試劑儀器分光光度計(jì)、電子頂載天平（感量0. 01g）、研缽、棕色容量瓶、小漏斗、定量濾紙、吸水紙、 擦境紙、滴管。原料新鮮（或烘干）的植物葉片試齊|J1.96%乙醇（或80%丙酮）2.石英砂3.碳酸鈣粉四、操作步驟取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，去除中脈剪碎。稱取剪碎的新鮮樣品2g,放入研缽中

3、，加少量石英砂和碳酸鈣粉及3mL95 %乙醇，研成均漿，再加乙醇10mL ,繼續(xù)研磨至組織變白。靜置 35min。取濾紙1張置于漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗，濾液流至 100mL棕色容 量瓶中；用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，最后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分?。用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o綠色為止。最后用乙醇定容至 100mL,搖勻。取葉綠體色素提取液在波長665nm、645nm和652nm下測定吸光度，以 95%乙醇為空白對照。五、計(jì)算按照實(shí)驗(yàn)原理中提供的經(jīng)驗(yàn)公式，分別計(jì)算植物材料中葉綠素a、b和總?cè)~綠素的含量葉綠素 a= (12.7 A

4、665 -2.69 A645)X葉綠素 b= (12.7 A645 - 2.69 A665)X總?cè)~綠素 a= ( 20.0 A 645 + 8.02 A 665 )V1000 WV1000 WVx 1000 W或總?cè)~綠素a=學(xué)竺34.5 1000 W幾種葉綠素含量測定方法比較葉綠素含量是植物生長過程中一個(gè)重要的生理指標(biāo)，由于其對周圍環(huán)境很敏感，并與植物的光合作用、營養(yǎng)吸收等密切相關(guān) ，被廣泛作為植物生長的常規(guī)測定指標(biāo)項(xiàng)目。葉綠素含量的 測定方法有多種，在國際上以傳統(tǒng)的 Arnon法（也稱研磨法）應(yīng)用最為廣泛。但該法需要把植 物材料研磨并經(jīng)轉(zhuǎn)移、過濾或離心處理，不僅工彳量大，而且不可避免地使試驗(yàn)

5、人員較長時(shí)間 與揮發(fā)于空氣中的試劑相接觸，對人體損害較大。近年來，直接浸取法受到重視，張憲政等用不同配比的混合液對葉綠素進(jìn)行提取，證明了用混合液提取的可行性。李得孝，吳志旭等對傳統(tǒng)的Arnon法進(jìn)行了改進(jìn),將樣品冷凍處理后,用50c丙酮靜置提取并進(jìn)行測定 ,極大提高了 工作效率。（1）研磨法。稱取0. 5 g 樣品于研缽內(nèi)，加入少量CaCO3D5 mL 80%的丙酮，將材料充分研磨 細(xì)碎直至變白（45 min）,轉(zhuǎn)移至10 mL具塞離心管中，定容至刻度，搖勻后置于4c冰箱中靜 置12 h,離心10 min （2000 r/min）,取上清液測定。（2）直接浸取法。稱取0. 5 g 樣品放入10

6、 mL具塞離心管中，用80%丙酮定容至刻度，于暗柜中靜置72 h浸取，取上清液測定。（3）樣 品冷凍后用50c提取液提取法。稱取0. 5 g樣品于10 mL具塞離心管中，置冰箱中冷凍2h,取出后加入10mL在水浴鍋中加熱至50c的80%丙酮，充分振搖后于暗柜中靜置 4h,取上清液 測定。（4）葉綠素計(jì)法：葉綠素計(jì)是所有方法中最快捷的,你只需手持葉綠素計(jì)，將葉片插 入儀器的感應(yīng)部位，然后合上測量探頭即可。 應(yīng)用于這種測定的儀器又被叫做便攜式葉綠素僅，因?yàn)樵撊~綠素計(jì)擁有小巧的機(jī)身，僅 200g的重量，可以方便地裝入口袋并帶到現(xiàn)場進(jìn) 行測量。在以上幾種測定方法中，直接浸取法提取效果最好，但耗時(shí)長，傳

7、統(tǒng)研磨法葉綠素的損失較大，冷凍后用50c提取液提取法操作簡便且提取速度較快，在提取率和穩(wěn)定性方面均顯示良好的優(yōu)越性。冷凍后用50c提取液提取法的最優(yōu)試驗(yàn)條件為將試驗(yàn)材料冷凍1 h后，靜置提取3 ho而葉綠素儀法，則相較于其他三種化學(xué)方法，更加快速方便。而且用SPAD-50刎定葉綠素含量時(shí)，不會(huì)對葉片造成損傷，這也是使用葉綠素計(jì)的另一大好處。因?yàn)槟悴恍枰氯~片，直接用儀器夾住葉片測定即可，這樣就可以在作物的生長過程中全程對特定的葉片 進(jìn)行監(jiān)測，從而得到更科學(xué)的分析結(jié)果。分光光度法快速測定玉米葉片中的葉綠素作者：作者：潘玲玲 徐曉潔 譚晶晶 張海艷 喬英哲 張曄暉 來源：醫(yī)學(xué)期刊/基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物

8、醫(yī)學(xué)工程 收藏本文章【關(guān)鍵詞】 葉綠素，SPAD值,玉米葉,分光光度法摘要 以玉米葉片為材料，利用雙波長雙光束紫外可見分光光度計(jì)，用最大決定系數(shù) 增量回歸算法，研究了葉片葉綠素a、b及SPAD直同時(shí)、快速測量方法。結(jié)果表明，用 3個(gè)波長點(diǎn)建立的模型可以達(dá)到良好的預(yù)測效果，預(yù)測葉綠素a、b及SPAD直的相關(guān)系數(shù)分別為0.9919、0.9816和0.9757 ;標(biāo)準(zhǔn)差分別為 1.52、0.43和1.96 ;預(yù)測相對標(biāo)準(zhǔn)差分別為 4.64%、5.50%和4.88%。同時(shí)研究了儀器波長誤差和帶寬變化對測定結(jié)果的影響，發(fā)現(xiàn)波長偏移超過0.2 nm,誤差快速增大，且波長向長波方向偏移時(shí)對測量的影響要大于向

9、短波方向 偏移的影響；儀器帶寬變大，預(yù)測誤差也就越大。關(guān)鍵詞葉綠素，SPAD直，玉米葉，分光光度法1 引言葉綠素a、葉綠素b的含量的測定一般用光譜方法。先用某種溶劑（如丙酮等）提取葉綠素，然后用光譜儀器測定1,2,這類方法操作繁瑣，耗時(shí)太長。而活體葉片中葉綠素的測量一般只能測定葉綠素總量或SPAD（soil and plant analyzer development） 值3。同時(shí)測定葉綠素a、葉綠素b和SPAD直的方法，尚未見報(bào)道。本研究以玉米葉片為材料，利用雙波長雙光束紫外可見分光光度計(jì)，用最大決定系數(shù)增量回歸算法，研究了葉片葉綠素 a、葉綠素b及SPAD直同時(shí)、快速測量方法；研究了儀器波

10、長誤差和帶寬變化對測定結(jié)果的影 響。本研究既可作為實(shí)驗(yàn)室快速測量的方法，也為開發(fā)研制野外活體葉片快速、無損測定 儀器提供了參考。2實(shí)驗(yàn)部分2.1 儀器與試劑557型紫外可見分光光度計(jì) （日本日立公司）；60片玉米葉片，SPAD值用SPAD5021量儀測定；葉綠素 a、葉綠素b含量用Arnon法測定。2.2 實(shí)驗(yàn)方法在分光光度計(jì)上，用雙波長方式，參比波長為750 nm；掃描區(qū)間為590700 nm,分別在帶寬為2、4、6、8、10 nm測量60片玉米葉片的吸收光譜。測得的光譜圖 經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室自主開發(fā)的光譜數(shù)字化系統(tǒng)，每隔0.1 nm采集一個(gè)數(shù)據(jù)，得到數(shù)字化的光譜圖。3結(jié)果與討論3.1 葉片的吸收光

11、譜圖圖1是帶寬為2 nm時(shí)的光譜，吸收峰值約 680 nm,噪聲很小，其它帶寬下測得的圖譜也類似。3.2 數(shù)學(xué)模型的建立 在590700 nm的波長范圍，每隔1nm取一個(gè)吸光值，用最大決定系數(shù)增量回歸算法來建立模型。選出葉片葉綠素a、葉綠素b和SPAD直同時(shí)測定的最優(yōu)波長，即選擇預(yù)測相對標(biāo)準(zhǔn)誤差最小的波長組合。結(jié)果表明：當(dāng)只選擇一個(gè)波長時(shí)，是625nm選擇兩個(gè)波長點(diǎn)時(shí)，最優(yōu)組合是635和625 nm；選擇3個(gè)波長點(diǎn)時(shí)，最優(yōu)組合是635、625和610 nm；選擇4個(gè)波長點(diǎn)時(shí)，最優(yōu)組合是635、625、610和655 nm；選擇5個(gè)波長點(diǎn)時(shí)，最優(yōu)組合是 635、625、610、655和700 n

12、m；選擇6個(gè)波長點(diǎn)時(shí)，最優(yōu)組合是635、625、610、655、700和595 nm。圖2是以上6種組合時(shí)各種物質(zhì)的預(yù)測相對標(biāo)準(zhǔn)差。圖160片玉米葉片吸收光譜圖(略)Fig.1 A bsorption spectra of 60 maize leaves圖2不同波長數(shù)目的預(yù)測效果(略)Fig.2 P rediction (RSD) of the models with different wavelength number從圖2中可以看出，所用波長數(shù)越多，測量效果越好。但這種變化越來越緩慢，尤其是 3個(gè)波長以后，隨著波長數(shù)目增加，測量效果改善不顯著。此外，葉綠素b的測量效果不如葉綠素a的測量效

13、果好，而 SPAD直的測量效果不同波長的差異不大；可能是葉綠素b的含量較低，化學(xué)值測量的相對誤差較大；而SPAD直本身是用一個(gè)波長的吸收而得，所以較容易準(zhǔn)確測定；總體上，當(dāng)選3個(gè)波長點(diǎn)組合，3種組分測定的相對標(biāo)準(zhǔn)差約5%如圖3和圖4所示。圖3 葉綠素a (A)和葉綠素 b (B)預(yù)測集的散點(diǎn)圖(略)Fig.3 Diagram of the prediction result of chlorophyll a (A) and chlorophyl b (B)圖4 SPAD預(yù)測集的散點(diǎn)圖(略)Fig.4 Diagram of the prediction result of Soil and Pl

14、ant Analyzer Development (SPAD)圖3A和B以及圖4分別是口f綠素a、葉綠素b和SPAD直測量時(shí)選擇波長 635 nm625 nm 以及610nm組合建立模型的預(yù)測效果圖。這時(shí)葉綠素a、葉綠素b和SPAD直測量的預(yù)測相關(guān)系數(shù)分別是09919、0.9816和0.9757;預(yù)測標(biāo)準(zhǔn)差分別是1.52、043和1.96;預(yù)測相對標(biāo)準(zhǔn)差分別是4.64%、550%口 4.88%;滿足葉片分析測量的要求。3.3 儀器波長誤差對測量的影響研究用635、625和610 nm 3個(gè)波長所建立的模型，當(dāng)測定樣品時(shí)儀器波長發(fā)生偏移對測量結(jié)果的影響。當(dāng)波長偏移土 0.1 nm. ±

15、0.2 nm ±0.5nm ± 1 nm時(shí)引起的相應(yīng)測量誤差如圖5所示。從圖中可以看到，波長偏差土 0.1 nm , 土0.2 nm ,葉綠素a、葉綠素b的RSD值變化將近到達(dá) 50%SPAD直測量的影響雖不如葉 綠素a、葉綠素b明顯，但是當(dāng)波長偏移超過0.2 nm時(shí)，影響也很大，所以葉綠素的測量對儀器的波長準(zhǔn)確性要求很高。3.4 儀器帶寬變化對測量的影響利用帶寬6 nm這組光譜數(shù)據(jù)，用 635、625以及610nm 3個(gè)波長建立的模型，預(yù)測在儀器帶寬為2、4、8、10 nm下測量的相應(yīng)樣品，結(jié)果如圖6所示。從圖中可以看到預(yù)測2、4 nm帶寬樣品的誤差較小，但預(yù)測8和10

16、nm帶寬樣品的誤差很大，且?guī)挼淖兓?，對葉綠素a、葉綠素b的影響要大于對 SPAD直的影響。說明當(dāng)儀器帶寬變大時(shí)會(huì)引起較大的測量誤差，而儀器帶寬變小時(shí)，對測量影響不大。圖5波長變化對測量的影響（略）Fig. 5 Prediction RSD of the models with these wavelengths changing圖66 nm帶寬下建立的模型用于其它帶寬的測量結(jié)果（略）Fig. 6 P rediction RSD of the models at 6 nm with bandwidth changingReferences1 Peng Yunsheng（彭運(yùn)生）,Wang Hu

17、aqi（ 王化琪）,He Daogeng（何道根）. Spectroscopy and Spectral Analysis（光譜學(xué)與光譜分析），1998, 18（3）: 2692722 Arnon D I . Plant Physiol, 1949, 24 ： 1 153 Ji Haiyan（吉海彥）,Yan Yanlu（ 嚴(yán)衍祿），F(xiàn)eng Xuemei（馮雪梅），WangLinghui（王靈慧）.Chinese J. Anal. Chem.（ 分析化學(xué)），1993, 21（8） : 869 872（中國農(nóng)業(yè)大學(xué)信電學(xué)院，北京 100094 ）（北京農(nóng)學(xué)院，北京 102206）甘肅農(nóng)科院外源

18、腐胺對干旱脅迫下小麥葉片滲透調(diào)節(jié)的影響來源：中國農(nóng)學(xué)通報(bào).-2009 , 25（09）,-148-151 作者：趙文才等 閱讀次數(shù)：122干旱脅迫誘導(dǎo)植物葉片氣孔關(guān)閉、萎焉，降低葉綠素和蛋白質(zhì)含量、改變細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能、增加 活性氧的含量。在水分脅迫下，礦質(zhì)元素的吸收能力下降，因此，在滲透調(diào)節(jié)中起主要作用的可能是小分 子有機(jī)物，如可溶性糖和脯氨酸等。許多研究表明，干旱脅迫下，小麥葉中脯氨酸、可溶性糖等有機(jī)溶質(zhì) 增加，參與降低植株體內(nèi)的滲透壓。多胺（polyamine, PA）是一類廣泛存在于原核生物和真核生物中的生物 活性物質(zhì)，是一類低分子脂肪族含氮堿。近年來，國內(nèi)外學(xué)者開始研究多胺在延長植

19、物衰老、提高植物抗 逆性等方面的作用機(jī)理，而對干旱脅迫下多胺與植物滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)關(guān)系的研究還未見相關(guān)報(bào)道。因此，筆 者研究源腐胺對干旱脅迫下冬小麥葉片內(nèi)二醛含量、質(zhì)膜透性、游離氨基酸含量、脯氨酸含量和可溶性糖 含量的影響，旨在探討腐胺提高冬小麥抗旱性的機(jī)理，為干旱區(qū)栽培和育種提供理論依據(jù)。1材料與方法1. 1材料試驗(yàn)于2007年9月2008年5月在河南農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院人工氣候室內(nèi)進(jìn)行，供試材料為冬 小麥（Triticum aestivum）品種洛早6號(hào)。種子經(jīng)10%次氯酸鈉消毒、蒸儲(chǔ)水沖洗、室溫吸漲12h后，于25c 恒溫箱中萌發(fā)24h,選露白一致的種子用Hoagland營養(yǎng)液在（251）

20、C恒溫室盆缽中進(jìn)行水培，每天光照1 2h,光強(qiáng)4400lx。待小麥幼苗四葉一心時(shí)，選取長勢一致的幼苗，進(jìn)行試驗(yàn)處理。1. 2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)設(shè) 3個(gè)處理：CK: Hoagland; T1 : Hoagland+15% PEG-6000; T2: Hoagland+15%PEG6000+1 00 pm" LPut;重復(fù)3次。在處理后0、1、2、4、8、24、36、48h,取小麥葉片用于各項(xiàng)指標(biāo)測定。1. 3方法1. 3. 1丙二醛MDA含量測定：按趙世杰的方法測定。1. 3. 2質(zhì)膜透性測定：膜相對透性按李錦樹等的方法測定。1. 3. 3游離脯氨酸（Pro）含量測定：用酸性西三酮法測定。1

21、. 3. 4游離氨基酸總量（TI'A）測定：按鄒琦的西三酮法測定。1 . 3. 5可溶性糖（SS）測定:蕙酮比色法測定。1 . 4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析2.試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel、DPS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析2結(jié)果與分析2. 1外源腐胺對干旱脅迫下冬小麥葉片丙二醛（A）含量的影響由表1 （略）可知，正常條件下（CK）,冬小麥葉片MDA含量變化不大，干旱脅迫處理（T1）和干旱結(jié) 合外源腐胺的處理（T2）的MDA含量均顯著高于對照平（P<O, 01）。干旱脅迫處理（T1）使冬小麥葉片MDA 含量變化呈急劇上升趨勢，脅迫 24h達(dá)到最高為28. 74- moJ/g FW,與1h時(shí)相比，增加了的557%

22、, 達(dá)到極顯著水平（P<O. 01）,是處理（CK）的4. 95倍。而100pmoJ/L腐胺的處理（T2）中，冬小麥葉片M DA含量隨脅迫時(shí)間延長呈緩慢上升的趨勢，但MDA含量顯著低于處理（T1）,在24h達(dá)到最低，僅為干旱脅迫處理（T1）的18%。2. 2外源腐胺對干旱脅迫下冬小麥幼苗葉片質(zhì)膜透性 （P）的影響由表1（略）可以看出，在正常供水條件下（CK）,冬小麥幼苗葉片的PMP變幅很小，維持在13%左右。 干旱脅迫條件下，葉片的PMP都高于對照，其中干旱脅迫處理（T1）,隨著脅迫時(shí)間的延長，葉片的 PMP 顯著增加，48h達(dá)到最高，為41. 257%,是對照的2. 99倍，達(dá)到極顯著

23、水平（P<O. 01）。結(jié)合外源腐胺 的處理（T2）,葉片的PMP在脅迫后4h最高，比對照提高34%,達(dá)到顯著水平（P<O. 05）,脅迫后36h,葉 片的PMP最低，僅為干旱處理（T1）的l5. 5%。說明外源腐胺顯著抑制了冬小麥幼苗葉片質(zhì)膜透性的增加。 2. 3外源腐胺對干旱脅迫下冬小麥葉片中可溶性糖 （SS於量的影響可溶性糖含量的增加被普遍看作是植物對水分脅迫的一種適應(yīng)機(jī)制。試驗(yàn)結(jié)果表明（表2）,與對照相比，干旱脅迫各處理的可溶性糖含量均顯著增加 （P<0. 05）。脅迫4h,干旱處理（T1）可溶性糖含量達(dá)到2. 7 13mg/g,與CK相比提高33%,達(dá)到極顯著水平（

24、P<O. 01）, 4h后，干旱處理的緩慢下降，但仍高于對 照；結(jié)合外源腐胺處理（T2）,可溶性糖含量逐漸上升，在 48h達(dá)到2. 978mg/g,是處理（T1）的1. 73倍， 達(dá)顯著水平（P<0. 05）。2. 4外源腐胺對干旱脅迫下冬小麥葉片脯氨酸（Pro）含量的影響脯氨酸的積累是對水分脅迫的一種適應(yīng)。從表2 （略）可知，正常處理（CK）條件下，小麥葉片中Pro含量約為1030仙/g,干旱脅迫下（T1）,冬小麥幼苗葉片的Pro含量在lh時(shí)，達(dá)到50. 546仙/g,是 對照的3. 07倍，達(dá)顯著水平（P<0. 05）,此后，隨著脅迫時(shí)間的延長，Pro含量迅速降低，48h

25、時(shí)最低為 16. 155 僅為對照的58%。處理（T2）,冬小麥幼苗葉片的Pro含量與對照相比顯著提高（P<0. O1）,脅 迫后8h達(dá)到212. 562仙/g,是對照的l6. 26倍，干旱脅迫處理（T1）的9. 5倍。表明外源腐胺可通過 提高冬小麥葉片中Pro含量，降低滲透勢，緩解干旱對冬小麥的傷害，同時(shí)也表明，干旱脅迫條件下葉片 脯氨酸含量可以作為抗旱性指標(biāo)。2. 5外源腐胺對干旱脅迫下冬小麥葉片中游離氨基酸（TFA）含量的影響正常條件下，冬小麥幼苗葉片中 TFA的含量維持在較低的水平（表2略）。干旱脅迫下（T1）,冬小麥幼 苗葉片游離氨基酸含量顯著增加。脅迫后 1h,葉片中TFA的

26、含量是對照的1. 78倍，脅迫后24h,葉片 中TFA的含量與對照相比，增加了 115%,達(dá)極顯著水平（P<0. 01）。外源腐胺處理（T2）,干旱脅迫4h后, 葉片中TFA的含量是對照的1. 78倍，脅迫后24h,葉片中TFA的含量與對照相比，增加了 115%,達(dá)極 顯著水平（P<0. 01）。外源腐胺處理（T2）,干旱脅迫4h后，葉片中TFA的含量與對照相比極顯著增加（P< 0. 01）,是對照的2. 79倍：脅迫8h后，Pro/FA為0. 1789。這表明，干旱脅迫下，葉片脯氨酸含量占的 比例越大，冬小麥抵御干旱的能力越強(qiáng)，外源腐胺處理顯著提高了脯氨酸所占的比例，提高了

27、冬小麥的抗 旱性。2. 6干旱脅迫下冬小麥幼苗葉片有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)與丙二醛 （MDA）含量及質(zhì)膜透性（PMP）的相關(guān)性由表3 （略）可見，處理（CK）的MDA含量與可溶性糖、脯氨酸和游離氨基酸含量為正相關(guān)關(guān)系，干 旱處理（T1）的MDA含量與游離氨基酸和可溶性糖含量呈正相關(guān)關(guān)系，而脯氨酸含量與MDA含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，且達(dá)到顯著水平。干旱結(jié)合外源腐胺處理 （T2）的MDA含量與脯氨酸含量為正相關(guān)關(guān)系，且相關(guān) 性達(dá)到顯著水平，而與可溶性糖含量呈正相關(guān)關(guān)系。而對 PMP來說，處理（CK）的PMP與可溶性糖含量為 正相關(guān)關(guān)系，而與脯氨酸、游離氨基酸的含量呈負(fù)相關(guān)。干旱處理（T1）的PMP與脯氨酸、游離

28、氨基酸含量呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，而與可溶性糖含量呈正相關(guān)關(guān)系，但未達(dá)到顯著水平。結(jié)合外源腐胺的干旱處理 （T2） 的PMP與可溶性糖、脯氨酸含量為負(fù)相關(guān)關(guān)系，且相關(guān)性不顯著，而與游離氨基酸含量呈正相關(guān)關(guān)系。 3討論干旱脅迫打破了植物體內(nèi)活性氧產(chǎn)生和消除的平衡，造成活性氧的積累，而作為膜脂過氧化產(chǎn)物的 MDA能損傷細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能，直接導(dǎo)致質(zhì)膜透性升高。干旱脅迫處理的MDA含量從處理的第4小時(shí)開始均極顯著高于對照，最高分別達(dá)對照的 4. 95倍，PMP從處理的第1小時(shí)開始均極顯著高于對照，最 高分別達(dá)對照的2. 99倍。說明干旱脅迫處理引發(fā)了小麥幼苗的膜脂過氧化作用。同時(shí)，脅迫后 1-2h,冬 小

29、麥幼苗葉片可溶性糖、游離氨基酸、脯氨酸含量分別是對照的1. 33, 1. 77, 3. 07倍，相關(guān)性分析表明，干旱脅迫處理的脯氨酸含量與 MDA含量呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0. 01）,這說明，干旱脅迫前期，冬小 麥感受干旱信號(hào)，通過應(yīng)激反應(yīng)提高滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量，降低葉片細(xì)胞水勢，緩解干旱對冬小麥的傷害。 但滲透調(diào)節(jié)作用有一定的局限性，隨著脅迫環(huán)境的延續(xù)，會(huì)使植物體滲透調(diào)節(jié)能力降低或喪失。筆者也證 明了這一點(diǎn)，脅迫4h后，干旱脅迫超過了傷害閾值，導(dǎo)致膜脂中不飽和脂肪酸被氧化，膜的完整性受到 破壞，從而使小麥葉片受到傷害。許多研究表明，外源多胺緩解干旱脅迫下作物葉片膜脂過氧化和提高作物抗旱

30、性。筆者認(rèn)為，外源腐 胺處理，葉片的PMP在脅迫后4h最高，比對照提高34%,脅迫36h后，葉片的PMP最低，僅為干旱處 理（T1）的15. 5%,達(dá)到顯著水平（P<0. 05）。說明外源腐胺顯著抑制了冬小麥幼苗葉片質(zhì)膜透性的增加，這與段輝國的研究一致。同時(shí)，外源腐胺處理，無論是SS、Pro還是TFA,在干旱脅迫48h內(nèi)，均明顯增加其中干旱脅迫后8h, SS、Pro還是Pro/TFA分別是干旱脅迫處理的1. 35、9. 51、10. 64倍。外源腐 胺可以通過誘導(dǎo)可溶性糖、游離氨基酸、脯氨酸含量增加，提高冬小麥葉片脯氨酸含量所占的比例，降低 滲透勢。這可能是腐胺提高作物抗旱性的又一途徑。

31、品外源腐胺對小麥根中鹽脅迫引起的氧化損傷的保護(hù)作用苑國鼠受前在線閱讀整本下載以分章下載五分頁下載本系統(tǒng)暫不支持迅雷或FlashGet等下載工具【英文題名】The Protection of Exogenous Putrescine to the Oxidative Damage Induced by Salt Stress in Wheat Roots【作者】馬瑛；【導(dǎo)師】畢玉蓉；【學(xué)位授予單位】蘭州大學(xué)；【學(xué)科專業(yè)名稱】植物學(xué)【學(xué)位年度】2008【論文級(jí)別】碩士【網(wǎng)絡(luò)出版投稿人】蘭州大學(xué)【網(wǎng)絡(luò)出版投稿時(shí)間】2008-10-31【關(guān)鍵詞】腐胺;抗氧化酶；脯氨酸;H_2O_2 ; NaCl;【英文關(guān)鍵詞】antioxidant enzymes ; H_2O_2 ; NaCl; proline ; putrescine ;鹽脅迫是限制農(nóng)作物產(chǎn)量的主要原因之一，多胺在