大腸桿菌、菌落總數(shù)檢測步驟

1、大腸桿菌及菌落總數(shù)檢測方法為了對雞精產(chǎn)品的微生物指標(biāo)進行有效的控制，對微生物的 檢測就顯的十分重要。下面是雞精產(chǎn)品的大腸桿菌及菌落總數(shù)實驗檢測方法。一、大腸桿菌：1）培養(yǎng)基準(zhǔn)備（以3.5g乳糖膽鹽發(fā)醉瓊脂為例） 雙料試管配制A、用量杯量取加熱的100ML蒸播水（實驗前需對蒸儲水進 行高壓滅菌處理，處理方法詳見注一）。B、用0.1g稱量天平秤取7g乳糖。C、將A、B混合均勻，并用10ml吸管各取10ml混合液分 別注入三根裝有小導(dǎo)管的試管中（此三根為雙料試管，即雙 倍原料）。單料試管配制A、用量杯量取加熱的 100ML蒸播水（實驗前需對蒸播水 進行高壓滅菌處理，處理方法詳見注一）。B、用0.1g

2、稱量天平秤取3.5g乳糖。C、將A、B混合均勻，并用10ml吸管各取10ml混合液分 別注入六根裝有小導(dǎo)管的試管中（此六根為單料試管，即單 倍原料）。2）將配制好的試管放入滅菌鍋進行115c進行滅菌10min3）將滅菌過后的試管放置在無菌室，常溫保存一周。4）若要對生產(chǎn)的樣品檢測其大腸桿菌，其步驟如下：A、量取滅菌后的蒸儲水 225ml加溫后與25g樣品混合均 勻。（樣品需要在無菌室中，有封蓋的塑料杯中進行混合）B、取三個玻璃培養(yǎng)皿，分別標(biāo)上 -1、-2、-3標(biāo)記。C、取兩根新試管取9ml蒸儲水分別標(biāo)為a、b。D、用吸管吸取1ml樣品液體，注入-1培養(yǎng)皿中，并蓋上 蓋子。E、用吸管吸取1ml樣

3、品液體，注入a試管中，記為-2培養(yǎng) 基液。F、用吸管吸取1ml a試管中的液體，注入到 b試管中，記 為-3培養(yǎng)基液。G、用1ml吸管取樣品液體分別注入 3根單料試管中，用 10ml吸管取樣品液體分別注入雙料試管中H、用1ml吸管取-2培養(yǎng)試管液體，分別注入到單料試管 中。I、裝好液體的試管，用試管塞封好，放到36 c ±1C的恒溫 培養(yǎng)箱中24小時培養(yǎng)。J、24小時培養(yǎng)后，取生并用肉眼觀察試管的顏色及冒氣泡 情況，若有其中的任意狀況，說明有大腸桿菌，需要通過美 蘭做進一步的檢測。二、菌落總數(shù)的測定1、取平板計數(shù)瓊脂 23.5g與100ml滅菌后的蒸儲水混合均勻。2、分別取15ml平板瓊脂液到-1、-2、-3培養(yǎng)皿中，待培養(yǎng)皿液體凝固后將培養(yǎng)皿放入36 C±1 C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時。3、取由培