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文檔簡介
1、第1講微生物的利用和生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用考綱要求1.微生物的分離和培養(yǎng)。2.某種微生物數(shù)量的測定。3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。4.利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用。構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)考點一微生物的利用1有關(guān)微生物實驗的基本方法(1)制備培養(yǎng)基:計算稱量溶化滅菌倒平板。(2)無菌技術(shù):主要指消毒和滅菌。(3)倒平板操作:待培養(yǎng)基冷卻至50左右時,在酒精燈火焰附近倒平板。(4)平板劃線法:是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。(5)稀釋涂布平板法:先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋后涂布平板,在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生
2、物將被分散成單個細(xì)胞,從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。如圖:2微生物的分離與培養(yǎng)(1)分離方法:選擇培養(yǎng)基。(2)某種微生物的分離土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)a篩選菌株:利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。b計數(shù)方法:稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法。c過程:土壤取樣樣品的稀釋微生物的培養(yǎng)與觀察。分解纖維素的微生物的分離a實驗原理即:可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。b流程:土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋涂布平板挑選菌落。(3)鑒定方法鑒定分解尿素的細(xì)菌含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基細(xì)菌指示劑變紅,則該菌能分解尿素鑒定纖維素分解菌錯混診斷1在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間,
3、這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基上的細(xì)菌含量(2014·新課標(biāo),39(1)改編)(×)2某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(2013·江蘇,18C)(×)3純化菌種時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法(2011·新課標(biāo),39(2)改編)()4在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細(xì)菌(2011·重慶,2A)(×)5檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)實驗操作中,確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進(jìn)行計數(shù)(2009·安徽,6D)(×)6培
4、養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌(2013·江蘇,18A改編)(×)題組一從微生物的實驗室培養(yǎng)進(jìn)行命題1(2014·新課標(biāo),39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?;卮鹣铝袉栴}:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是_;然后,將1mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用平板劃線法分離水
5、樣中的細(xì)菌。操作時,接種環(huán)通過_滅菌,在第二次及以后劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。(3)示意圖A和B中,_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高_(dá)的利用率。答案(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)解析(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格,可在涂布
6、接種前,隨機取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。0.1mL稀釋液中平均有(393837)/338個活菌,則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1380,則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×1003.8×104,則每升水樣中活菌數(shù)目為3.8×104×10003.8×107。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,以達(dá)到迅速徹底滅菌的目的。在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出:A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性,是用平板劃線法接種培養(yǎng)后
7、得到的結(jié)果;B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布,是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量,還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高了營養(yǎng)物質(zhì)的利用率,因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。題組二從微生物培養(yǎng)基的組成成分及純化方法進(jìn)行命題2(2014·四川,10)有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示。(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、_四類,該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是_。(2)與微生物培養(yǎng)基相比,
8、植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和_,這些植物激素一般需要事先單獨配制成_保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時,通常使用的劃線工具是_。劃線的某個平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有_。(4)為探究苯磺隆的降解機制,將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心,取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設(shè)是_,該實驗設(shè)計是否合理?為什么?_。答案(1)氮源和無機鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖(2)細(xì)胞分裂素母液(3)接種環(huán)接種環(huán)灼燒后未冷卻;劃線未從第一區(qū)域末端開始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理,缺少空白對
9、照解析(1)微生物生長繁殖需要的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、水和無機鹽四類。根據(jù)題意可知,土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力,該實驗的目的是探索其降解機制,因此,需要分離出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物,故選擇培養(yǎng)時為了排除其他碳源的干擾,培養(yǎng)基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基需要添加生長素和細(xì)胞分裂素,用于調(diào)節(jié)植物細(xì)胞脫分化和再分化;這些植物激素一般需要事先單獨配制成母液保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時,通常使用的劃線工具是無菌接種環(huán)。劃線的平板培養(yǎng)后,發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域的劃線上不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,而其他劃線上有菌落。造成
10、此現(xiàn)象的原因可能有兩個:一是接種環(huán)灼燒后未冷卻,菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡;二是劃第二劃線區(qū)域第一條線時未從第一區(qū)域末端開始。(4)根據(jù)圖乙所示實驗中的上清液加入蛋白酶溶液推測,實驗?zāi)康氖翘骄磕康木晔欠衲芊置诮到獗交锹〉牡鞍踪|(zhì),實驗設(shè)計不合理之處是缺少不加蛋白酶溶液、其他條件同圖乙的空白對照。用選擇培養(yǎng)基分離微生物的方法(1)在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入抗性物質(zhì)。舉例:加高濃度食鹽分離金黃色葡萄球菌;加青霉素分離酵母菌和細(xì)菌。(2)通過改變培養(yǎng)基的成分。舉例:培養(yǎng)基中缺乏氮源時,可分離自生固氮微生物,非自生固氮微生物因缺乏氮源而無法生存。培養(yǎng)基中若缺乏有機碳源則異養(yǎng)微生物無法生存,而自養(yǎng)微生物可利用
11、空氣中的CO2制造有機物生存。(3)利用培養(yǎng)基的特定成分。舉例:當(dāng)石油是唯一碳源時,可抑制不能利用石油的微生物的生長,使能夠利用石油的微生物生存,從而分離出能消除石油污染的微生物。當(dāng)纖維素為唯一碳源時,分離纖維素分解菌??键c二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作果酒果醋腐乳泡菜原理無氧:釀酒C6H12O62CO22C2H5OH;有氧:釀醋C2H5OHO2CH3COOHH2O蛋白質(zhì)小分子肽氨基酸;脂肪甘油脂肪酸無氧:C6H12O62C3H6O3控制O2無氧有氧有氧無氧條件溫度182530351518常溫實驗流程圖讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制錯混診斷1醋酸菌在無氧條件下利用
12、乙醇產(chǎn)生醋酸(2014·廣東,4A)(×)2酵母菌在無氧條件下利用葡萄汁產(chǎn)生酒精(2014·廣東,4B)()3泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵(2014·廣東,4C)()4腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶(2014·廣東,4D)()5某研究性學(xué)習(xí)小組以櫻桃番茄為材料進(jìn)行果酒、果醋發(fā)酵實驗。先供氧進(jìn)行果醋發(fā)酵,然后隔絕空氣進(jìn)行果酒發(fā)酵(2012·江蘇,14B改編)(×)6在制作果醋時,如果條件適宜,醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸(2012·江蘇,21B改編)()7在制作腐乳時,將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時,底
13、層和近瓶口處需加大用鹽量(2012·江蘇,21D改編)(×)8在家庭中用鮮葡萄制作果酒時,讓發(fā)酵裝置接受光照并放在45處(2010·北京,1AD改編)(×)題組從果酒、果醋和腐乳制作進(jìn)行命題1(2014·江蘇,24改編)某同學(xué)設(shè)計了如圖所示的發(fā)酵裝置,下列有關(guān)敘述正確的是(雙選)()A該裝置不能阻止空氣進(jìn)入,不可用于果酒發(fā)酵B該裝置便于果酒發(fā)酵中產(chǎn)生的氣體排出C去除彎管中的水,該裝置可滿足果醋發(fā)酵時底層發(fā)酵液中大量醋酸菌的呼吸D去除彎管中的水后,該裝置與巴斯德的鵝頸瓶作用相似答案BD解析A項,該裝置中注水的彎曲部分可阻止空氣進(jìn)入,能用于果酒發(fā)酵
14、。B項,果酒發(fā)酵產(chǎn)生的CO2可溶解在彎管的水中,CO2量多時可進(jìn)一步通過水排出。C項,醋酸菌是好氧菌,因沒有將無菌空氣通入發(fā)酵液中,故去除彎管中的水后也不能滿足底層發(fā)酵液中醋酸菌有氧呼吸的需求。D項,去除彎管中的水后,該裝置的彎管部分既能排出CO2,也能防止空氣中的微生物進(jìn)入,與巴斯德的鵝頸瓶作用類似。2下列有關(guān)果酒、果醋和腐乳制作的敘述,正確的是()A參與果酒發(fā)酵和果醋發(fā)酵的微生物都含有線粒體B果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制作果醋C在腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與D在腐乳裝瓶時自下而上隨層數(shù)的增加逐漸減少鹽量答案C解析參與果酒發(fā)酵的酵母菌是真核生物,有線粒體;
15、參與果醋發(fā)酵的醋酸菌是原核生物,無線粒體。果酒制成后將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中,同時要通入無菌空氣,可制作果醋。在腐乳裝瓶時自下而上隨層數(shù)的增加逐漸增加鹽量。1.果酒和果醋發(fā)酵裝置的設(shè)計思路(1)酵母菌繁殖需要氧氣,醋酸菌是好氧細(xì)菌,則果酒制作前期和果醋制作整個過程都需要氧氣;酵母菌產(chǎn)生酒精時是厭氧的,則在充氣口處應(yīng)該設(shè)置開關(guān)。(2)發(fā)酵過程中產(chǎn)生CO2,需要設(shè)置排氣口;為了防止空氣中微生物污染,排氣口應(yīng)該連接一個長而彎曲的膠管。(3)為便于取樣及監(jiān)測發(fā)酵情況,需要設(shè)置出料口。2制作果酒、果醋、腐乳、泡菜菌種的比較項目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學(xué)分類真核生物原核生物真核生物原核生物代謝類型異
16、養(yǎng)兼性厭氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型生產(chǎn)應(yīng)用釀酒、發(fā)面釀醋制作腐乳制作酸奶、泡菜氧的需求前期需氧,后期厭氧一直需氧一直需氧厭氧專題突破練1下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述,不正確的是()A利用稀釋涂布平板法只能分離微生物不能對微生物進(jìn)行計數(shù)B接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落C以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的過程中亞硝酸鹽含量變化是先增加后減少答案A解析用稀釋涂布平板法可以分離微生物,也可以對微生物進(jìn)行計數(shù);接種劃線可以將菌體分散,經(jīng)過培養(yǎng)可以得到單菌落;以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌;在泡菜腌制過程中,開
17、始時亞硝酸鹽含量增加,一般腌制10天后含量開始下降。2下列關(guān)于果酒和果醋的制作原理、發(fā)酵過程的敘述中,錯誤的是(雙選)()A果酒和果醋的發(fā)酵菌種不同,但代謝類型相同B制作果酒和果醋時都應(yīng)用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精對發(fā)酵瓶消毒C變酸果酒的表面觀察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D果酒和果醋的制作不可用同一裝置,因為發(fā)酵條件不同答案AD解析果酒發(fā)酵利用的是酵母菌,酵母菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型,果醋發(fā)酵利用的是醋酸菌,醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果酒和果醋的制作可用同一裝置,但需控制不同的發(fā)酵條件。3(2014·新課標(biāo),39)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?;卮鹣铝袉栴}:(1)分解秸稈
18、中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶,其中的葡萄糖苷酶可將_分解成_。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時,CR可與纖維素形成_色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的_。(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學(xué)設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表):酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基乙注:“”表示有,“”表示無。據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是_;培養(yǎng)基乙_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是_。答案(1)纖維
19、二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素,不會形成CR纖維素紅色復(fù)合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌解析(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶能使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶能將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅是一種染料,可以與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中就會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(3)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基,而用于分離和鑒別纖維素分解菌
20、的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,并且培養(yǎng)基中需含有纖維素,才能與CR形成紅色復(fù)合物,有纖維素分解菌時才能形成以纖維素分解菌為中心的透明圈。4微生物強化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油粘度的原理,通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術(shù)。以下是篩選、純化和擴(kuò)大培養(yǎng)該類微生物的實驗操作。請回答下列問題:(1)土壤是微生物的大本營,該類微生物應(yīng)取自_的土壤。(2)為篩選和純化該類微生物,從功能上分,應(yīng)選用_培養(yǎng)基。常用的接種方法是_和_。(3)接種后,應(yīng)密封培養(yǎng)的原因是_,培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上形成降油圈,此時選取_的菌落就可獲得高效菌株。(4)擴(kuò)大培養(yǎng)過程中需
21、要對微生物進(jìn)行計數(shù)。取0.2mL樣品,用固體培養(yǎng)基對其培養(yǎng),最后統(tǒng)計三個平板,菌落數(shù)分別是200、180、220。則樣品中微生物的數(shù)量為_個/mL。該統(tǒng)計結(jié)果_(填“低于”或“高于”)實際值。答案(1)長期被石油污染(含石油多的)(2)選擇平板劃線法稀釋涂布平板法(3)該類微生物是厭氧型微生物降油圈大(4)1000低于解析(1)根據(jù)微生物對生存環(huán)境的要求,該類微生物應(yīng)到相應(yīng)的環(huán)境中尋找,即被石油污染的環(huán)境或含石油較多的環(huán)境。(2)篩選微生物常用選擇培養(yǎng)基,純化微生物常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)由于該類微生物是厭氧微生物,因此接種后應(yīng)密封培養(yǎng),一段時間后在培養(yǎng)基上形成降油圈,此
22、時選取降油圈較大的菌落就可獲得高效菌株。(4)根據(jù)公式計算菌株數(shù):C(200180220)÷3200,V0.2,M1,則樣品中微生物數(shù)量為·M1000個/mL。在統(tǒng)計菌落時,有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡,另外有些菌落是由多個活菌共同形成的,所以按形成的菌落數(shù)目來計算活菌數(shù)目的話,結(jié)果往往會低于活菌實際數(shù)目。5如圖簡單表示葡萄酒的釀制過程,請據(jù)圖分析:(1)葡萄酒的釀制原理是:先通氣使酵母菌進(jìn)行_,以增加酵母菌的數(shù)量,然后使酵母菌發(fā)酵獲得葡萄酒。(2)隨著發(fā)酵過程的加深,液體密度會逐漸變低(可用密度計測量)。其原因是_。(3)在甲中進(jìn)行攪拌的目的是_,丙中一段時間后,揭開蓋子是否
23、能夠產(chǎn)生果醋?_(填“能”或“不能”)。(4)蘋果醋是最受歡迎的飲料之一,其生產(chǎn)過程中利用了_的發(fā)酵作用。在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中,果醋制作往往在果酒制作的基礎(chǔ)上進(jìn)行,其相關(guān)的反應(yīng)式為:_。答案(1)有氧呼吸(2)發(fā)酵時糖被消耗,產(chǎn)生了酒精和CO2,而酒精密度比糖和水低(3)增加溶氧量能(4)醋酸菌C2H5OHO2醋酸菌,CH3COOHH2O解析(1)酵母菌為一種兼性厭氧真菌,在有氧情況下可進(jìn)行有氧呼吸,缺氧則進(jìn)行無氧呼吸。(2)由于發(fā)酵時糖被消耗,產(chǎn)生酒精和CO2,而酒精的密度比糖和水低,這是液體密度降低的原因。(3)攪拌可增加甲內(nèi)溶氧量,酵母菌有氧呼吸需要氧。揭蓋后氧氣充足,丙中酒精可在醋酸菌作用
24、下被氧化生成醋酸。(4)果醋制作過程中,起作用的微生物主要是醋酸菌。6(2014·江蘇,30)為了獲得胡蘿卜素產(chǎn)品,某小組開展了產(chǎn)胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實驗。請回答下列問題:(1)實驗用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是_;為了減少滅菌后器皿被污染,滅菌前應(yīng)該_。(2)為了篩選出酵母菌,培養(yǎng)基中添加了青霉素,其目的是_。(3)下圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖,圖中甲、乙、丙指示的依次是_。 (填序號)安全閥、放氣閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表安全閥、放氣閥、溫度表放氣閥、安全閥、溫度表(4)為了將分離到的菌株純化,挑取了菌落在3塊相同平板上劃線,結(jié)果其中一塊平
25、板的各劃線區(qū)均未見菌生長,最可能的原因是_。(5)為增加胡蘿卜素提取量,在研磨酵母細(xì)胞時,添加石英砂的目的是_;研磨時_(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是_。答案(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)用牛皮紙(報紙)包扎器皿(2)抑制細(xì)菌(放線菌)生長(3)(4)接種環(huán)溫度過高,菌被殺死(5)有助于研磨充分不需要胡蘿卜素較耐酸解析(1)培養(yǎng)皿滅菌常用的方法有濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)、干熱滅菌等。將培養(yǎng)皿放入滅菌鍋之前通常用牛皮紙或報紙包扎,避免滅菌后的再次污染。(2)青霉素能抑制細(xì)菌和放線菌的生長繁殖,但對酵母菌等真菌不起作用,因此添加青霉素可篩選出酵母
26、菌。(3)圖中乙連接軟管,為排(放)氣閥,甲為安全閥,丙是壓力表。(4)三塊平板中有兩塊平板長有菌落,說明含有菌株并可在培養(yǎng)基上生長;而其中一塊平板未見菌落,說明接種不成功,可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻或未充分冷卻,使菌株因溫度過高而被殺死。(5)從胡蘿卜素酵母中提取胡蘿卜素,參照葉綠體中色素提取的方法,可添加石英砂,因為石英砂有助于研磨充分。在提取葉綠體中色素時,CaCO3的作用是中和酸性物質(zhì),防止葉綠素被分解,而胡蘿卜素較耐酸,不易被分解,故在研磨酵母細(xì)胞時無需添加CaCO3。7從自然菌樣中篩選理想的生產(chǎn)菌種的一般步驟是:采集菌樣選擇培養(yǎng)純種分離性能測定。(
27、1)不同微生物的生存環(huán)境不同,獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣,然后再按一定的方法分離、純化。若培養(yǎng)噬鹽菌的菌樣應(yīng)從_環(huán)境中采集。(2)選擇培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)特定環(huán)境條件,使待分離微生物在群落中的數(shù)量大大增加,從而達(dá)到從自然菌樣中分離到所需特定微生物的培養(yǎng)方法。人們對富含耐高溫淀粉酶的微生物選擇培養(yǎng)應(yīng)選擇以_為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,并在_條件下培養(yǎng)。(3)實驗室最常用的滅菌方法是利用高溫處理達(dá)到殺菌的效果。高溫滅菌的原理是高溫使微生物的_等物質(zhì)發(fā)生變性。_滅菌法是微生物研究中應(yīng)用最廣、效果最好的濕熱滅菌法。(4)下圖甲表示在平板培養(yǎng)基上的第一次和第二次劃線,請在圖乙中畫出第三次劃線。劃線后
28、在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時,培養(yǎng)皿須倒置,目的是_。(5)植物組織培養(yǎng)過程中也要十分注意滅菌及避免被雜菌污染。在配制好的MS培養(yǎng)基中,若要促進(jìn)愈傷組織的生長,需要進(jìn)行的處理是_。答案(1)高鹽(2)淀粉高溫(3)蛋白質(zhì)和核酸高壓蒸汽(4)如右圖避免培養(yǎng)皿蓋上的水滴污染培養(yǎng)基(5)添加比例適中的生長素和細(xì)胞分裂素解析(1)嗜鹽菌就生活在高鹽環(huán)境中,如海灘等環(huán)境。(2)耐高溫淀粉酶應(yīng)存在于以淀粉為唯一碳源且在高溫環(huán)境中生存的微生物體內(nèi)。(3)實驗室最常用的滅菌方法是利用高溫處理達(dá)到殺菌的效果。高溫滅菌的原理是高溫使微生物的蛋白質(zhì)和核酸等物質(zhì)發(fā)生變性,高壓蒸汽滅菌法是微生物研究和教學(xué)中應(yīng)用最廣、效果最好的
29、濕熱滅菌法。(4)每劃一個新區(qū)域前都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌處理。(5)在配制好的MS培養(yǎng)基中,添加比例適中的生長素和細(xì)胞分裂素可促進(jìn)愈傷組織的生長。8某化工廠的污水池中,含有一種有害的、難于降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功地篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答問題:(1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選_,這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的_,實驗需要振蕩培養(yǎng),由此推測“目的菌”的代謝類型是_。(3)培養(yǎng)若干天后,應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量_的培養(yǎng)液,接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng),使“目的菌”的數(shù)量_。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時,常采用_的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(5)若研究“目的菌”的生長規(guī)律,將單個菌落進(jìn)行液體培養(yǎng),可采用_的方法進(jìn)行計數(shù),以時間為橫坐標(biāo),以_為縱坐標(biāo),繪制生長曲線。(6)實驗結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行_處理后,才能倒掉。答案(1)目的菌選擇(2)化合物A異養(yǎng)需氧型(3)減少增加(4)平板劃線(5)定期取樣細(xì)菌數(shù)目的對數(shù)(6)滅菌解析培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選目的菌,這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基?!澳康木鄙L所需的營養(yǎng)物質(zhì)必須包括水、無機鹽、碳源、氮源和生長因子五類,故其氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的化合物A。實驗需要
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