小球藻的培養(yǎng)和保存技術(shù)新0001

1、小球藻的培養(yǎng)和保存技術(shù)如何培養(yǎng)和保存小球藻，是繁殖小丑魚的另一個關(guān)鍵。小球 藻可以買成品的，也不貴。也可以自己培養(yǎng)，但比較麻煩。下面是用小球藻培育和保存的經(jīng)驗。一、小球藻種的獲得小球藻種可以從活體小球藻種液獲得。 初次可以從漁友那取 得種液，也可從淘寶商家購買，一般一套（小球藻、小球藻、營 養(yǎng)液）100元左右。二、小球藻的有關(guān)知識小球藻屬于綠藻門，綠藻綱，綠球藻目，卵囊藻科，小球藻 屬，繁殖時，每個細胞形成2、4、8或16個似親孢子，似親孢子 經(jīng)母細胞壁破裂釋放。小球藻細胞內(nèi)含有豐富的葉綠素， 光合作 用非常強，是其他植物的幾十倍。其含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素、 礦物質(zhì)、食物纖維、核酸及葉綠素等

2、，特別是含有令人注目的生 物活性物質(zhì)糖蛋白、多糖體以及高達13%的核酸等物質(zhì)。小球藻的直徑只有38微米，必須用600倍以上的顯微鏡才 能看見，且形狀呈圓球形，所以被稱為小球藻（綠藻）。小球藻 可以生息在淡海水中，它借助陽光、水和二氧化碳，以每隔 20 小時分裂出4個細胞的旺盛繁殖能力，不停地將太陽能量轉(zhuǎn)化生 成蘊涵多種營養(yǎng)成分的藻體，并在增值中釋放出大量的氧氣。它 的光合能力高于其他植物10倍以上，繁殖能力比陸地上的高等植 物強100倍以上。小球藻生于熱帶、溫帶淡水和海水中，以細胞分裂進行無性 繁殖，并可產(chǎn)生配子進行有性繁殖。適宜溫度為20-23 C ,溫度過低會影響小球藻的繁殖。海水小球藻適

3、宜鹽度20- 30%o。適宜光照5000-10000LX，太弱會抑制光合作用，影響生長 和繁殖。適宜水質(zhì)為pH=8氮磷鉀、二氧化碳含量高的海水。含量 太低會抑制生長和繁殖。三、輪蟲繁殖用活體小球藻的培育條件溫度與繁殖缸相近即可，我用室溫 8-26 C。鹽度與繁殖缸一樣，我用30%。，比重1.02。合適的光線，我用自然光，必要時加照明。合適的營養(yǎng)液，可購買或自己配制（方法后面介紹）四、準備一容器做培養(yǎng)缸，可以是玻璃或透明塑料的，容積 可根據(jù)要繁殖的輪蟲的數(shù)量確定，我是用食用油瓶改制培養(yǎng)缸，我繁殖輪蟲只用5升的就夠了。準備加熱棒、照明、氣泵，根據(jù) 需要使用。收到活體小球藻后，測出比重（一般較低，1

4、.01左右），然后據(jù)此比重調(diào)整培養(yǎng)缸的海水比重， 加入合適的營養(yǎng)液， 初次培養(yǎng)用新配的海水和小球藻種液。然后將種液倒入，放光亮處繁殖。每天攪拌幾次，也可用氣泵加氣，不要加沙頭，就像孵 化豐年蝦一樣。當培養(yǎng)缸海水顏色從淡變深綠時（一般7天左右， 生長太快的小球藻營養(yǎng)低）就可以使用了。倒出一部分做藻種長 期保存（方法后面介紹），剩下的添加海水繼續(xù)培養(yǎng)3天左右（變 深綠色）。五、循環(huán)培養(yǎng)。正常培養(yǎng)缸在室溫 8-26 C時可不加溫，不 加氣，用自然光，節(jié)約能源。培養(yǎng)完成后部分把小球藻連水抽出 喂養(yǎng)輪蟲，每天不斷添加海水（可以用濾完輪蟲的海水，我是用 高質(zhì)量的沙頭過濾輪蟲），一周后只剩很少的小球藻了 （

5、水變成 淡綠色），喂養(yǎng)周期結(jié)束，然后調(diào)整好比重（一般加淡水），添 加營養(yǎng)液，重新進入培養(yǎng)循環(huán)。一般5-6個循環(huán)小球藻就會遭到 其他浮游生物的污染，就必須純化藻種了（方法后面介紹），有些人藻液被藍藻（有毒）污染，會造成輪蟲和小丑魚的死亡。六、時間節(jié)奏的調(diào)整。小球藻培養(yǎng)要掌握節(jié)奏，最好輪蟲重 新培養(yǎng)時達到最深顏色（培養(yǎng)一周左右）。小球藻太多時可連水 抽出放低溫處（冰箱冷藏室）保存幾十天沒有問題，還可以用下 面方法調(diào)整。減慢小球藻增殖的方法：減少照明，降低溫度。加 快小球藻增殖的方法：增加供氣，增加營養(yǎng)液，增加照明，提高 溫度。一般調(diào)整得好，可以和公子小丑魚產(chǎn)卵和孵化同步， 我的 公子小丑隔15天產(chǎn)

6、卵一次，小球藻培養(yǎng)8天喂7天，也是15 天循環(huán)一次。七、小球藻種的保存1。液體保存。用第一次培養(yǎng)好后倒出的一部分藻液 （深綠色）做藻種，用 水族呼吸袋包裝好后再用橡筋扎緊密封，然后放入透氣的塑料盒 中，再放入冰箱的冷藏室保存即可。使用時取出搖勻（會有沉淀） 讓溫度慢慢升到室溫就可以當藻種用了。我最長保存過近一年， 還可以正常繁殖。更長的時間就沒有試過了。八、小球藻種的保存2.干法保存。在加過營養(yǎng)液的海水中加入瓊脂，加熱融化后冷卻成果凍 狀，切成小塊，然后放入第一次培養(yǎng)好后倒出的一部分藻液（深 綠色）中，幾天后果凍表面會長有一層小球藻，呈綠色，取出后 放入透氣的塑料盒中，再放入冰箱的冷藏室保存即

7、可。 使用時取 出，讓溫度慢慢升到室溫就可以當藻種用了。 我最長保存過近一 年，還可以正常繁殖。更長的時間就沒有試過了。每次從冰箱取 出一部分即可，使用和保存比液體更方便。九、小球藻種的濃縮。1、小球藻在光照和營養(yǎng)鹽缺乏的情況下會產(chǎn)生沉淀。在培 養(yǎng)時，當營養(yǎng)鹽較低的時候（生長條件正常，但小球藻不增殖，即濃度不變化），把小球藻裝入瓶內(nèi)，放入冰箱冷藏室，1-3天后就會沉淀，倒出上層清液，即可取得濃縮小球藻液體。用前面 介紹的呼吸袋效果更好，小球藻的活力更高。營養(yǎng)鹽還可以用離 子交換樹脂吸附來降低。2、用電泳或陽離子絮凝劑如明磯、聚合氯化鋁、聚合硅酸 硫酸鋁等可以讓小球藻沉淀，此方法會引入其他鹽類。

8、3、用蛋白分離器打出濃縮小球藻，此方法容易破壞小球藻 活性，還會富集其他蛋白質(zhì)。九、營養(yǎng)液的配制。配方一(適合保存藻種和精細培養(yǎng))A液：NaN03150g/LK2HPO44g/LMgS047.5 g/LCaCI3.6 g/LNa2CO3100g/LB液：Citric acid0.6 g/500mLFerric ammonium citrate0.6g/500mLEDTANa2C液：H3BO3MnCl2 4H2OZnSO4- 7H2ONa2MoO4.2H2OCuSO4. 5 H2O0.1g/500mL0.286g/100mL0.186g/100mL0.022g/100mL0.039g/100mL

9、0.008g/100mLCo(NO3)2.6 H2O0.005g/100mL使用時，每1000 mL海水添加A液10 mL, B液5mL, C液1mL即可，即用即配，配后海水不能長期保存，否則營養(yǎng)會失效。 配方二（適合一般使用）A:三氯化鐵5 0毫克、氯化錳1.8毫克、硼酸168毫克、乙二胺四乙酸四鈉2 2 5毫克、 磷酸二氫鉀10 0毫克、 和 硼酸鈉5 0 0毫克B :氯化鋅0.5克、氯化鉆0.5克、鉬酸銨0.25克、和硫酸銅0.5克將AB倒入1000毫升的海水中，再加入適量維生素E1和E12即可配成營養(yǎng)液。此營養(yǎng)液要即用即配，不能長期保存。配方三（適合臨時添加使用）營養(yǎng)液母液配方：硝酸鈉

10、50克、磷酸二氫鉀5克、檸檬酸鐵銨0.5克。將以上營養(yǎng)鹽加入 1000毫升海水中即可。使用時每 1000毫升海水加母液10毫升。此配方容易使小球藻產(chǎn)生沉淀和 白化。配方四（適合有經(jīng)驗的使用）蛋分打出污水經(jīng)加熱冷卻后使用或經(jīng)過 1微米的物理過濾后使用。一般每1000毫升海水添加10毫升蛋分水（可根據(jù)蛋分 水的濃度不同作適當?shù)恼{(diào)整）。此配方經(jīng)濟環(huán)保，就是打氣容易 產(chǎn)生氣泡和容易引入有害污染。十、小球藻生長慢、沉淀、發(fā)白和突然死亡小球藻在溫度過低或過高、鹽度過高、光照過低、太高或太 低、營養(yǎng)鹽太低、二氧化碳太低時生長和繁殖很慢甚至死亡。只 要保持合適的條件就能保證小球藻的正常生長。小球藻小部分沉淀是正常的，而大量沉淀一般是密度太高或 溫度過低，還有就是不小心混入促沉淀的化合物（如