薄層色譜分析的主要影響

1、薄層色譜分析的主要影響因素一、樣品的預(yù)處理及供試液的制備樣品供試液凈化的方法1 單一溶劑萃取法2 分段萃取法3 液液萃取法4 固液萃取法：氧化鋁小柱、聚酰胺小柱、硅烷化硅膠小柱等二、薄層色譜的上樣技術(shù)1要求原點(diǎn)v 3mm，否則分離數(shù) SN太大。上樣環(huán)形色譜效應(yīng)2 溶解樣品的溶劑具有洗脫能力，樣品在原點(diǎn)位置環(huán)形展開3 供試液溶劑在原點(diǎn)的殘留 改變展開的選擇性4 上樣時(shí)對(duì)薄層板的機(jī)械損壞三、吸附劑活性與相對(duì)濕度對(duì)薄層色譜的影響相對(duì)濕度的控制方法1有的種類要求不嚴(yán)格：30%70%即可。但為了實(shí)驗(yàn)具有良好的重現(xiàn)性，應(yīng)記錄實(shí)驗(yàn)時(shí)的 相對(duì)濕度。2 控制方法：將雙層展開槽中的一側(cè)加入一定濃度的硫酸，將點(diǎn)好樣

2、的薄層板放入另一側(cè)槽 中，密閉 15 30 分鐘后，再加入展開劑展開。四、溶劑蒸氣在薄層色譜中的作用薄層色譜與柱色譜的區(qū)別之一就是溶劑的蒸氣相在展開箱中也參與色譜展開而形成三 維的層析過程。 展開箱的氣體空間在層析過程中起著重要的作用。 通常所謂的“展開箱飽和” 應(yīng)該嚴(yán)格區(qū)分以下幾種情況：(1) 展開箱飽和； 是指展開前及展開中溶劑系統(tǒng)中所有組分在展開箱的整個(gè)氣體空間達(dá)到平衡，即達(dá)到飽和狀態(tài)；但在日常的實(shí)踐中較少需要在“飽和”狀態(tài)下展開，而只需用 展開劑 (或規(guī)定的溶劑 )的蒸氣在展開箱中預(yù)平衡一定的時(shí)間，即“預(yù)平衡”。(2) 預(yù)吸附：通常是指薄層板的干燥板面 (即未被溶劑濕潤的部分 )對(duì)展開

3、箱中氣體分子的任 何程度的吸附，即通常所謂的“預(yù)飽和” 。(3) 吸附飽和：是指薄層板的未被溶劑濕潤的部分與展開箱的飽和氣體空間達(dá)到平衡狀態(tài)， 即“完全飽和” ，這是預(yù)吸附的極限狀態(tài)。(4) 毛細(xì)管飽和：是指薄層板所有的自由空隙借毛細(xì)管的作用被溶劑充滿的過程，即相當(dāng)于 展外完成后的狀態(tài)。飽和的情況與展開箱的類型有關(guān)，常規(guī)的平底展開箱在展開前較難達(dá)到展開箱飽和，所以普通的做法是在內(nèi)壁加貼與之等寬等高的用溶劑濕潤的濾紙，有助于達(dá)到飽和。用雙槽展開箱在其一側(cè)槽中加溶劑可以較容易地達(dá)到吸附飽和及展開箱飽和。如用夾心式展開箱，由于箱內(nèi)空間間很小， 展開前因?yàn)榭臻g沒有溶劑分子、而且很難有空間擴(kuò)散， 所以實(shí)

4、際上是非飽和的。在這種非飽和的夾心式展開箱中薄層板不產(chǎn)生預(yù)吸附現(xiàn)象。通常誤認(rèn)為夾心式展開槽空間小很容易飽和，其實(shí)只有在展開完成后才達(dá)到飽和，但這時(shí)對(duì)層析過程已不起作用。在常規(guī)薄層色譜分析中， 預(yù)吸附和吸附飽和對(duì)層析過有程很大的影響。吸附劑表面的空間是很有限的。當(dāng)用多組分溶劑展開時(shí)，不同溶劑分子在吸附區(qū)相互競爭，發(fā)生“取代效應(yīng)”， 尤其薄層板的下部，一個(gè)組分的等溫吸附線會(huì)受到另外組分的性質(zhì)和相對(duì)飽和程度的影響， 硅膠是親水性吸附劑。它首先對(duì)溶劑組分中的極性分子有更大的親合力，所以在吸附平衡的過程中，被吸附的各組分的濃度比與氣體空間的很不相同，與溶劑的液相組成差別更大。可以想象在不加控制的情況下情

5、況是很復(fù)雜的。簡言之，薄層板在沒有預(yù)吸附時(shí)， 混合溶劑系中的一部分溶劑分子有選擇地被吸附在薄層板面上而形成固定相，同時(shí)在板上形成溶劑梯度從而直接影響層析過程，溶劑的蒸氣相、液相和固定相一起構(gòu)成了一個(gè)作用機(jī)制復(fù)雜的三維 層析過程。五、關(guān)于薄層色譜的優(yōu)化及溶劑系統(tǒng)(展開劑)的選擇 依靠色譜分離混合物質(zhì)需要解決的主要問題有兩個(gè)：(1) 相鄰物質(zhì)對(duì)的分離；(2) 在一個(gè)寬極性范圍內(nèi)的多組分混合物的分離。目前主要方法：1三角形法 2單純形優(yōu)選法3溶劑強(qiáng)度法4均勻設(shè)計(jì)法等但均不完美。實(shí)驗(yàn)中應(yīng)多做比較。楓性5-1物質(zhì)的極性附捌的吸附活度和展開制的極性三者的關(guān)系單一溶劑極性順序應(yīng)注意含水乙醚與無水乙醚的極性差異石油醞 < 環(huán)己烷 < 二硫化碳 < 四氯化碳 < 三氯乙烯 V苯V甲苯 < 二氯甲烷V氯仿 < 乙醛 < 乙酸乙酯 < 乙 酸甲酯 < 丙酮 < 正兩醇V乙館V甲醇V毗唳V酸.六、溫度對(duì)薄層色譜的影響在相對(duì)濕度恒定的情況下，一般在較高溫度展開時(shí)，Rf值較高；反之，Rf值降低；但一般來說溫度變化在土 5C, Rf值變化一般不會(huì)超過土 0.02。溫度首先影響各有機(jī)溶劑的蒸發(fā)程度，