系數(shù)倍率法測定復(fù)方氨基比林注射液中安替比林的含量

1、系數(shù)倍率法測定復(fù)方氨基比林注射液中安替比林的含量 管祥虹 3061904025 肖舜 3061904046 （浙江大學(xué) 藥學(xué)院） 【摘要】 ：目的：建立測定復(fù)方氨基比林注射液中安替比林的含量的方法。方法：用系數(shù)倍 率法測定復(fù)方氨基此林注射液中氨基此林和安替比林的含量。 結(jié)果： 復(fù)方氨基比林注射液中 安替比林的含量為19.2mg/ml(RSD=0.69%,n=3，232nm處加標(biāo)回收率為102.60%（RSD= 0.36%，n=3）254nm處加標(biāo)回收率為104.0%（RSD=0.42%，n=3）。結(jié)論：本法簡單快速， 可準(zhǔn)確測定復(fù)方氨基此林注射液中氨基此林和安替比林的含量。 關(guān)鍵詞：氨基比林

2、安替比林 系數(shù)倍率法。 復(fù)方氨基比林注射液是一種具有解熱、鎮(zhèn)痛、消炎、抗風(fēng)濕的藥物。它作用較強(qiáng)，緩 慢而持久。藥典中規(guī)定每 1ml復(fù)方氨基比林注射液中應(yīng)含：氨基比林（C13H17N3O） 18.022.0mg； 巴比妥 8H12N2O3） （C 8.559.45mg。 47.552.5mg； 安替比林 11H12N2O） （C 運(yùn)用紫外吸光光度法測定復(fù)方氨基比林注射液時(shí)， 由于氨基比林與安替比林在較廣泛的波長 范圍內(nèi)都有干擾， 所以必須采取特殊的實(shí)驗(yàn)方法來消除氨基比林對實(shí)驗(yàn)的干擾。 本文采用系 數(shù)倍率法測定復(fù)方氨基比林注射液中安替比林的含量， 測定不同波長處吸光度， 消除了氨基 比林對實(shí)驗(yàn)的干

3、擾。 1 實(shí)驗(yàn)材料 1.1 儀器：UT-1810 紫外分光光度計(jì) 1.2 藥品：復(fù)方氨基比林注射液復(fù)方氨基比林注射液（規(guī)格：2ml，批號：991118-1 生 產(chǎn)廠家：浙江新昌制藥廠） 、氨基比林對照品（浙江大學(xué)藥物分析實(shí)驗(yàn)室提供） 、安替比林對 照品（浙江大學(xué)藥物分析實(shí)驗(yàn)室提供） ，濃鹽酸（標(biāo)示：36%37%） （浙江大學(xué)藥物分析實(shí) 驗(yàn)室提供） 。 2 溶液配制 2.1 HCL 溶液配制：量取鹽酸（標(biāo)示：36%37%）10mL，加蒸餾水 990mL,稀釋成約 0.1mol/L 的鹽酸溶液，作溶劑使用。 2.2 樣品溶液配制：精密量取復(fù)方氨基比林注射液 1.00ml，用 0.1mol/lHCL

4、 溶液稀釋 至 100ml，精密量取 3.00ml，用 0.1mol/lHCL 溶液稀釋至 100ml。 2.3 氨基比林母液：精密稱取氨基比林標(biāo)準(zhǔn)品 0.1000g，用 0.1mol/lHCL 溶液稀釋至 100ml，配成氨基比林母液。 1 2.4 氨基比林標(biāo)準(zhǔn)液(10g/ml精密配制：精密移取 1.00ml 氨基比林母液，用 0.1mol/lHCL 溶液稀釋至 100ml。 2.5 安替比林母液：精密稱取安替比林標(biāo)準(zhǔn)品 0.01000g，用 0.1mol/lHCL 溶液稀釋至 100ml，配成安替比林母液。 2.6 安 替 比 林 標(biāo) 準(zhǔn) 液 (10 g/ml 的 配 制 ： 精 密 移

5、取 1.00ml 安 替 比 林 母 液 ， 用 0.1mol/lHCL 溶液稀釋至 100ml。 3 測定方法 用可見紫外分光光度計(jì)掃描安替比林與氨基比林的最大吸收波長。在 232nm 波長處測 氨基比林標(biāo)準(zhǔn)液吸光度， 記為 AXb。 254nm 波長處測氨基比林標(biāo)準(zhǔn)液吸光度， 在 記為 AYb。 設(shè) k1=AXb/AYb。 在 232nm 波長處測安替比林標(biāo)準(zhǔn)液(4g/ml吸光度， 記為 AXa， 計(jì)算百分吸光系數(shù)。 在 254nm 波長處測安替比林標(biāo)準(zhǔn)液(4g/ml吸光度，記為 AYa，計(jì)算百分吸光系數(shù)。 設(shè) k2=AXb/AXa。 在 232nm 波長處測樣品吸光度 AX(a+b；在

6、254nm 波長處測樣品吸光度 AY(a+b。 5 結(jié)果與討論 5.1 掃描波長的選擇： 232nm-400nm 范圍之內(nèi)掃描安替比林與氨基比林的最大吸收 在 波長，觀察到氨基比林在 254nm，與文獻(xiàn)報(bào)道的 258nm 有出入。安替比林在 232nm 處存 在波峰。這兩種物質(zhì)在 200nm 左右均有較強(qiáng)吸收但相互干擾嚴(yán)重，同時(shí)曲線斜率較大，儀 器不穩(wěn)定對吸收度影響較大，故不采用，而采用 254nm 與 232nm。 5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 表一原始數(shù)據(jù)記錄表 232nm 氨基比林吸光度（10g/ml） 安替比林吸光度（10g/ml） 樣品吸光度 0.3057 0.6243 0.7584 0.30

7、84 0.627 0.7625 0.3057 0.6228 0.7643 0.4129 0.2210 0.6713 254nm 0.4189 0.2247 0.6714 0.4148 0.2207 0.6740 表二吸光系數(shù)數(shù)據(jù)處理表 1 232nm 處安替比林吸收系數(shù) 254nm 處安替比林吸收系數(shù) 624.4 221.0 2 627.2 224.7 3 622.8 220.7 平均值 624.8 222.1 RSD 0.29% 0.82% 2 氨基比林 k1 值 0.7403 0.7362 0.7369 0.7379 0.24% 氨基比林的 k 值與文獻(xiàn)值相比偏小，可能是由于文獻(xiàn)實(shí)驗(yàn)采用的

8、波長為 232nm 與 258nm 而實(shí)際實(shí)驗(yàn)中采用的是 232nm 與 254nm。 表三系數(shù)倍率法測定復(fù)方氨基比林注射液中安替比林的含量 232nm 樣品 1 吸光度 樣品 2 吸光度 樣品 3 吸光度 平均值 RSD 百分吸光系數(shù) 倍率 k1 計(jì)算方法： 令 A1b/A2b=k(倍率因子 A(a-b = kA2(a+b -A1(a+b =( kA2b -A1b+( kA2a -A1a = kA2a- A1a =( kE2a- E1aCa A(a-b一函數(shù)，為了消除干擾物而進(jìn)行的一種運(yùn)算方式。 A1b 為在波長為 232nm 處氨基比林的吸光度。 A2b 為在波長為 254nm 處氨基比林

9、的吸光度。 A1a 為在波長為 232nm 處安替比林的吸光度。 A2a 為在波長為 254nm 處安替比林的吸光度。 E1b 為在波長為 232nm 處安替比林的吸收系數(shù)。 E2b 為在波長為 254nm 處安替比林的吸收系數(shù)。 A2(a+b為在波長為 232nm 處安替比林與氨基比林混合物的吸光度。 A1(a+b為在波長為 254nm 處安替比林與氨基比林混合物的吸光度。 (kE2a-E1a為常數(shù)，式中各變量與氨基比林無關(guān)，消除 b 的干擾。 測得安替比林的濃度 Ca 單位為 g/100ml。 再利用公式： 0.7584 0.7625 0.7643 / / 624.8 254nm 0.67

10、13 0.6714 0.6740 / / 222.1 A 0.2631 0.2670 0.2670 / / / / 含量（mg/ml 19.03 19.31 19.31 19.22 0.69% / / 相當(dāng)于標(biāo)示量的百分含量 95.14% 96.56% 96.54% 96.08% 0.69% / / 0.7379 3 安替比林的含量= (kA2(a+b-A1(a+b/(E2a-kE1a =(A2a-kA1a/(E2a-kE1a10000/31000/100(mg/ml 安替比林相當(dāng)于標(biāo)示量的百分含量=安替比林的含量/標(biāo)示量*100% 測得復(fù)方氨基比林注射液中安替比林的含量為 19.22mg/m

11、l(RSD=0.69%,n=3,位于 18.022.0mg 之間，符合規(guī)定，與一年前同學(xué)采用雙波長法（測得含量為 20.1mg/ml）比 較，安替比林偏低?？赡軐?shí)驗(yàn)產(chǎn)生的影響為藥品放置時(shí)間過久。 5.3 加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)： 加標(biāo)回收率=(加標(biāo)試樣測定值試樣測定值/加標(biāo)量100%。 樣品溶液配制(6g/ml） ：精密量取復(fù)方氨基比林注射液 1.00ml，用 0.1mol/lHCL 溶 液稀釋至 100ml，精密量取 3.00ml，用 0.1mol/lHCL 溶液稀釋至 100ml。 標(biāo)準(zhǔn)品溶液（6g/ml） ：精密移取 3.00ml 安替比林母液，用 0.1mol/lHCL 溶液稀釋 至 100

12、ml。 加標(biāo)試樣： 10.00ml 樣品， 取 加入 10.00*B ml 標(biāo)準(zhǔn)品， 加到 25ml 容量瓶中， 0.1mol/L 用 的鹽酸溶液稀釋至刻度。 為 80.0%，100%，120%） （B 試樣：取 20.00ml 樣品，加到 25ml 容量瓶中，用 0.1mol/L 的鹽酸溶液稀釋至刻度。 在相同條件下平行測三次，測定吸光度為 A1 和 A2，根據(jù)對照液吸光度與濃度的比值 求出相對應(yīng)的 C1 和 C2。 回收率=（C1-C2）*25.00ml/C 標(biāo)*(10.00*Bml*100%。 為 80.0%，100%，120%） （B 。 C1 可用校正曲線求得見圖 1、圖 2。 圖

13、1、232nm 處回收率曲線 圖 2、232nm 處回收率曲線 吸 光 度 吸 光 度 安替比林濃度（g/ml） 安替比林濃度（g/ml） C2 可根據(jù)樣品吸光度與安替比林之比為常數(shù)測得 （利用表三數(shù)據(jù)， 原因在討論中） 232nm ， 處樣品吸光度平均值=0.7617，安替比林濃度=6g/ml，為防止測出的吸光度不會落在 0.30.7 之外，實(shí)驗(yàn)中稀釋的倍數(shù)較小，樣品取樣也較多，但出于加標(biāo)回收率計(jì)算的需要在 4 C2 處除以 2，得到一個(gè)修正的公式計(jì)算回收率。C2=A 樣/(0.7617/6*2。 結(jié)果見表三與表四。 表四 232nm 處加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn) 80.0%加 標(biāo)溶液 組 1 吸光度

14、組 2 吸光度 組 3 吸光度 平均值 加標(biāo)回收率 0.4236 0.4233 0.4227 0.4232 102.7% 100.0%加標(biāo) 溶液 0.4521 0.4555 0.4522 0.4533 103.0% 120.0%加標(biāo) 樣品溶液 溶液 0.4843 0.4847 0.4810 0.4833 102.1% 0.6047 0.6050 0.6085 0.6061 102.6% 0.36% 率平均值 收率 RSD 加標(biāo)回收 加標(biāo)回 表五 254nm 處加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn) 80.0%加 樣溶液 組 1 吸光度 組 2 吸光度 組 3 吸光度 平均值 加標(biāo)回收率 0.3103 0.3119 0

15、.3106 0.3109 104.4% 100.0%加 樣溶液 0.3219 0.3244 0.3249 0.3237 104.2% 120.0%加樣 樣品溶液 溶液 0.3349 0.3364 0.3371 0.3361 103.4% 0.5318 0.5322 0.5303 0.5314 104.0% 0.42% 平均值 率 RSD 加標(biāo)回收率 加標(biāo)回收 由表三與表四可知 232nm 處加標(biāo)回收率為 102.60%（RSD=0.36%，n=3）254nm 處 加標(biāo)回收率為 104.0%（RSD=0.42%，n=3） ，均在 95.00%105.00%z 之間，在 232nm 處 的回收率要

16、比 254nm 處更接近 100.0%，RSD 也更小，可能是由于安替比林的紫外吸收的 波峰位于 232nm，吸光系數(shù)較大，有 624.8（見表三） ，靈敏度較高。而 254nm 處的吸光 系數(shù)只有 222.1（見表三） ，靈敏度較低。在儀器誤差一定的條件下，吸光系數(shù)大的一組實(shí) 驗(yàn)產(chǎn)生的相對誤差較小，即儀器誤差對吸光度小的一組實(shí)驗(yàn)有較大的影響，所以在 232nm 處的回收率要比 254nm 處更接近 100.0%，RSD 也更小。同時(shí)也說明了選擇有較大的吸光 系數(shù)的波長對于紫外可見分光光度法測量的準(zhǔn)確性與精確性有重要意義。 5.4 日內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)： 5 表六日內(nèi)精密度 組1 安替比林標(biāo) 0.4

17、087 準(zhǔn)品吸光度 0.4022 0.4035 0.4063 0.4077 0.4085 0.4062 0.61% 組2 組3 組4 組5 組6 平均值 RSD 5.5 溶液濃度的選擇：由于文獻(xiàn)未給出溶液配制的濃度，我們對各溶液濃度參考相關(guān)資 料進(jìn)行了摸索。 配制的標(biāo)準(zhǔn)氨基比林溶液與標(biāo)準(zhǔn)安替比林溶液均與樣品溶液中相對應(yīng)物質(zhì)的 濃度不相同，其主要原因?yàn)?，在吸光度?0.20.8 時(shí)，朗伯比爾定律有較好的線性關(guān)系，4 g/ml 的安替比林溶液在 232nm 處吸光度符合吸收度要求而在 254nm 處吸光度不足 0.1 即使， 為了在不改變波長的條件下增大安替比林的吸光度， 只能提高溶液的濃度至為了

18、不使 其他試驗(yàn)中吸光度不超過 0.7 同時(shí)配液過程不至于過于復(fù)雜，將溶液配成 10g/ml。如能 將所有試液的吸光度都控制在 0.30.7 之內(nèi)，實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性將更好，這也是本實(shí)驗(yàn)值得改進(jìn) 之處。其而據(jù)文獻(xiàn)所述 10g/ml 氨基比林溶液、4g/ml 安替比林溶液，及其混合溶液， 在他們的最大吸收波長處，吸光度與濃度有較好的線性關(guān)系。而在回收率試驗(yàn)中，要保證加 標(biāo)樣中原始樣品的取樣體積、稀釋倍數(shù)及測試體積，盡可能與樣品測試時(shí)一致，取 6g/ml 的濃度。 5.6 樣品吸光度與安替比林之比為常數(shù)：由于安替比林在樣品中的含量是固定的設(shè)為其 含量為 k/（1+k） ，因?yàn)?A=A1+A2=E1LC1+ E2LC2，1 為安替比林，2 為其他物質(zhì)，由于 C2=kC1，A=（