內(nèi)蒙古地方標準亞麻籽中α亞麻酸的測定液相色譜法編制說明

1、百度文庫-讓每個人平等地提升自我亞麻籽中a 亞麻酸含量的測定液相色譜法標準編制說明一、標準制定的背景及任務來源亞麻是我區(qū)的優(yōu)勢雜糧作物，亞麻籽中 -亞麻酸的含量很高。而-亞麻酸是一種多不飽和脂肪酸，是一種必需脂肪酸，是一種生 命核心物質(zhì)，是構(gòu)成人體腦細胞和組織細胞的重要成分、-亞麻酸是人體自身不能合成的，也無法由其他營養(yǎng)來合成的，必須要依靠膳 食來獲得。為篩選出亞麻優(yōu)良品種以指導生產(chǎn)，實現(xiàn)亞麻籽中-亞麻酸含量的準確檢測，內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學院資源環(huán)境與檢測技術(shù)研究所起草 并制定了 “亞麻籽中 -亞麻酸的測定 液相色譜法”標準。二、本標準與國內(nèi)現(xiàn)有分析方法的技術(shù)差異經(jīng)過對國內(nèi)關(guān)于 -亞麻酸檢測標準的

2、調(diào)研發(fā)現(xiàn)，目前亞麻籽中 “亞麻酸含量測定多采用 GCg GC-MJ&,分析過程中柱溫高使目標 組分易產(chǎn)生異構(gòu)現(xiàn)象，且需用到數(shù)種高制毒試劑。液相標準還屬空白。 三、標準編制概況以內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學院資源環(huán)境與檢測技術(shù)研究所近年來對農(nóng)畜產(chǎn)品加工及農(nóng)畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測方法研究為基礎(chǔ)，起草并擬訂工 作計劃，具體分以下幾個階段進行：1.工作進度/2012年上半年，主要通過實地調(diào)研及走訪，掌握了亞麻品種及 其種植范圍的大概情況。查閱資料，完成相關(guān)資料的收集、整理和實施方案的確定工作。主要參考文獻如下：(1)亞麻籽的保健功能和開發(fā)利用J.中國油脂，2006,31(3):71-74 (2)亞麻油中 -亞

3、麻酸含量的測定J.大理學院學報，2007, 6(12):1-3(3) GB/T食品中脂肪的測定(4) GB/T 5512-2008糧油檢驗 糧食中粗脂肪含量的測定/ (5) GB 28404-2012食品安全國家標準 保健食品中 -亞麻酸、二 十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的測定2012年下半年，基本確定試驗品種范圍，樣品的采集和制備、 試驗設備準備及試劑耗材采購。并初步摸索亞麻籽中-亞麻酸含量測定的實驗條件。2013年上半年，以前一年初步摸索條件為基礎(chǔ)，進行了改進優(yōu) 化，確定了標準方法，并以亞麻籽中亞麻酸含量的測定液相色譜法征求意見稿為標準，測定了種植范圍較廣較常見的16個品種亞

4、麻籽中a亞麻酸的含量。2013年下半年，選取了 “晉亞七號”、“輪選2號”兩個品種與 自治區(qū)級實驗室進行了比對試驗，對結(jié)果進行了統(tǒng)計，對標準方法進 行了驗證。2.實驗結(jié)果/提取時間及石油醍用量確定結(jié)合資料，對同一亞麻籽的超聲波震蕩提取進行實驗，最終確定提取兩次，每次30分鐘，分別加石油醍60mL與50mL表1提取時間試驗（稱取，每次加石油醴 100mL提取 時間15min1次30min1次45min1次60min1次'15min2次30min2次45min2次60min2次得油重（g）RS D%表2石油醴加入量試驗（稱取，超聲波提取 30min； 2次）第1次第2次得油重RSD （如1

5、0010010075100501002580758050607560504075、40502025一波長選擇使用PDA僉測器進行190 nm至300 nm掃描，發(fā)現(xiàn)最大吸收波長 為nm,如圖1。但因?qū)崪y樣品的不同，有時會存在干擾且太接近遠 紫外區(qū)，選擇205 nm時目標組分響應基本不降低，且基線噪音明顯 減少，故此選擇205 nm。圖1 a -亞麻酸190nm至300nm PDAm描光譜圖流動相選擇流動相只用甲醇和水，分離度不理想影響積分，調(diào)整水相為 %瞬 酸水溶液后，峰型尖銳對稱分離度好。當流動相甲醇與 麻酸水溶液 比例為90+10時 -亞麻酸保留時間為 min，如圖2;流動相比例95+5

6、時磷酸溶液保留時間min ,如圖3。最終選擇95+5,分離度好用時短。圖2甲醇+%#酸水溶液=90+10 （上標品，下試樣）10檢出限 UCi圖3甲醇+%#酸水溶液=90+10 （上標品，下試樣）名稱稱籽重（g）得油重（g）油脂率（%晉業(yè)七號同業(yè)12號隴亞八號輪T輪三號輪選2號H10-19925-7-4-3-299-42l067H08-22000-16Y0310 H10-29301D-11-2-2-99143-4表3北方地區(qū)種植面積較廣的亞麻品種籽實油脂率逐級稀釋標準工作液，測定 -亞麻酸含量，得到儀器響應限值 為w g/mL （即2 ng）。從表3中大量實驗看到，大部分亞麻籽油脂率均在40施

7、右，故此設定50 %由脂率為極限值，即稱取亞麻籽可得油（即公式1中的m-mi）。故此根據(jù)公式計算得到方法檢出限為g/100g。/ 計算公式：X C V3 V1 m2 m1V2 m3 m 10X 樣品中a -亞麻酸的含量，單位為克每百克（g/100g）C 樣液中a -亞麻酸的檢出濃度，單位為微克每毫升（以g/mL）;賦值m 稱取研磨好的亞麻籽重量，單位克（g）;賦值 m 茄形瓶干重，單位克（g）m2經(jīng)提取后茄形瓶與亞麻籽油脂的總重，單位克（g）m 稱取亞麻籽油脂的重量，單位毫克（mg ；賦值Vi調(diào)至中性的定容體積，單位毫升（mD ;賦值V 調(diào)至中性定容后從中吸取樣液的體積，單位毫升（ mD ;賦

8、值 V3吸取樣液后定容體積，單位毫升（mD ;賦值線性精密稱取 -亞麻酸標準品，用甲醇定容至，得濃度為 mL的- 亞麻酸標準品儲備液，并用甲醇稀釋至w g/mL待用。以濃度w g/mL 的標準品儲備液為基礎(chǔ)，用甲醇配置成g g/mL至g g/mL不同濃度對 照品溶液，搖勻，分別進樣10pL。得到曲線Y=x 104X+X 104, R =。 多次測定得到不同曲線，R2在至之間。圖4 a-亞麻酸標準工作曲線精密度和回收率濃度為g g/mL的廠亞麻酸標準工作溶液重復進樣 7次，測得峰面積，計算RS防制備晉亞七號亞麻籽平行樣6份，分別進樣10wL測得含量，RS兩%精密稱取亞麻籽油脂適量，準確加入 mL

9、 0c-亞麻酸2mL測得平士回收率 RSM%表4 <> g/mL重復7次表5六份“晉亞七號”試樣亞麻酸含量實測值ug/mL平均值ug/mLRSD(%)檢測量ug/mL油脂中含量 g/100g籽實中含量g/100g籽實中含量RSD (%)平均值一表6 “晉亞七號”加入mlLx -亞麻酸稱油重g檢測量ug/mL實測含量 g/100g理論添加量 g/100g實測量 g/100g回收率ck +1+1+2+2+3+3回收率RSD (%四、標準編制原則為保證亞麻籽中 -亞麻酸的準確測定，確定優(yōu)勢品種的選擇和 后期的加工工藝，有效地指導種植，在制定本標準的過程中，汲取國 內(nèi)外同類相關(guān)先進的檢測標

10、準及編制的先進經(jīng)驗和方法，力求實事求 是的原則，使本標準具有較強的科學性、先進性。在進行大量實驗室研究的基礎(chǔ)上， 參考國內(nèi)相關(guān)資料，對亞麻籽 中-亞麻酸的檢測方法進行了大量試驗摸索，確定了具體的、可操 作性好的、高效可靠的快速檢測方法。五、采用國際標準本標準的編制、編寫、調(diào)研完全依照國際標準尺度，并遵照GB/T 要求進行撰寫。五、與現(xiàn)行法律法規(guī)和強制性標準的關(guān)系本標準完全符合現(xiàn)行法律法規(guī)和強制性標準，不存在任何與現(xiàn)行法律法規(guī)和強制性標準相違背之處。六、重大分歧意見的處理經(jīng)過和依據(jù)亞麻籽中0c亞麻酸含量的測定液相色譜法目前在我區(qū)是一項空白，因此在編制“標準”中無重大的分歧意見。七、標準作為強制性或推薦性標準的意見本標準作為推薦性地方規(guī)范，發(fā)布實施后，對亞麻籽中-亞麻酸含量的準確測