丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒

1、丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)Bingxingganyan Bingdu Kangti Zhenduanshijihe(Meilianmianyifa)Diagnostic Kit for Antibody to Hepatitis C Virus (ELISA)本品系用丙型肝炎病毒（HCV）抗原包被的微孔板和酶標記抗人IgG及其他試劑制成，應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫法原理檢測人血清或血漿樣品中的HCV抗體。1 基本要求生產(chǎn)和檢定用設(shè)施、原料及輔料、水、器具、動物等應(yīng)符合“凡例”的有關(guān)要求。2 制造2.1 專用原材料2.1.1 HCV抗原選用重組抗原或人工合成肽抗原，應(yīng)包括結(jié)構(gòu)區(qū)和非結(jié)構(gòu)區(qū)?？?/p>

2、原的分子量、活性、純度應(yīng)符合要求。2.1.2 抗人IgG 可使用抗人IgG單克隆抗體或多克隆抗體?？贵w的純度，活性，應(yīng)符合要求。2.1.3 辣根過氧化物酶(或其他適宜標記的酶)辣根過氧化物酶的RZ值應(yīng)不低于3.0，其他酶的純度應(yīng)符合相應(yīng)的要求。2.1.4 陽性對照用血清或血漿HCV抗體檢測為陽性的人血清或血漿。2.1.5 陰性對照用血清或血漿抗HCV抗體檢測為陰性的人血清或血漿。2.1.6 微孔板CV（%）應(yīng)不高于10%。2.2 制備程序2.2.1 純化包被抗原采用適宜的方法純化抗原。純化后抗原的分子量、純度，活性，應(yīng)符合要求。純化后的抗原保存于適宜溫度。2.2.2 抗人IgG純化采用適宜的方

3、法純化抗體。純化后抗體的純度，活性，應(yīng)符合要求。純化后的抗體保存于適宜溫度。2.2.3 酶標記抗體的制備抗體純化及檢定方法同2.2.2項，采用常規(guī)過碘酸鈉乙二醇或其他適宜方法進行辣根過氧化物酶或其他酶標記，標記酶的抗體應(yīng)符合3.1.1-3.1.4和3.1.7項要求，加入適當?shù)谋Ｗo劑于低溫下保存。2.2.4 包被抗原濃度和酶標記抗體濃度的選定采用方陣滴定法選擇最佳包被抗原濃度和酶標記抗體的工作濃度。2.2.5 包被抗原板的制備采用最佳包被濃度的抗體包被微孔板孔，經(jīng)封閉、干燥和密封等處理后，保存于28。對包被抗原板須抽樣進行檢定，應(yīng)符合3.1.1-3.1.4和3.1.7項要求。2.2.6 陽性對照

4、選用HCV抗體檢測為陽性的5份以上人血清或血漿混合。經(jīng)60加溫1小時處理，除菌過濾后低溫保存。2.2.7 陰性對照選用HCV抗體檢測為陰性的5份以上人血清或血漿混合，經(jīng)60加溫1小時處理，除菌過濾后低溫保存。2.2.8反應(yīng)時間的設(shè)置檢測過程中加入樣本后反應(yīng)時間應(yīng)不低于60分鐘，加入酶結(jié)合物后反應(yīng)時間應(yīng)不低于30分鐘，加入顯色液后反應(yīng)時間應(yīng)不低于30分鐘。2.3 半成品檢定按3.1項進行。2.4 成品 2.4.1分批應(yīng)符合“生物制品分批規(guī)程”規(guī)定。2.4.2分裝與凍干應(yīng)符合“生物制品分裝和凍干規(guī)程”，分裝或凍干后保存于28。2.4.2 規(guī)格應(yīng)為經(jīng)批準的規(guī)格。2.4.3 包裝應(yīng)符合“生物制品包裝規(guī)

5、程”規(guī)定。3 檢定3.1 半成品檢定3.1.1陽性參考品符合率用國家參考品或經(jīng)國家參考品標化的參考品進行檢定，應(yīng)符合要求。3.1.2 陰性參考品符合率用國家參考品或經(jīng)國家參考品標化的參考品進行檢定，應(yīng)符合要求。3.1.3精密性 用國家參考品或經(jīng)國家參考品標化的參考品進行檢定，CV(%)應(yīng)不大于15%（n=10）。3.1.4最低檢出限用國家參考品或經(jīng)國家參考品標化的參考品進行檢定，應(yīng)符合要求。3.1.5無菌檢查依法檢查（附錄 XII A）含有蛋白成分的液體組分，半成品加防腐劑分裝后留樣做無菌檢查，采用直接接種法，應(yīng)符合規(guī)定。3.1.6 水分凍干組分水分應(yīng)不高于3.0% （附錄 VII D）。3.

6、1.7 穩(wěn)定性試驗試劑各組份放置37至少3天（有效期為6個月），應(yīng)符合3.1.13.1.4項要求。3.2 成品檢定3.2.1 物理檢查3.2.1.1 外觀液體組分應(yīng)澄清；凍干組分應(yīng)呈白色或棕色疏松體。3.2.1.2 溶解時間凍干組分應(yīng)在3分鐘內(nèi)溶解。3.2.2 陽性參考品符合率同3.1.1項。 3.2.3 陰性參考品符合率同3.1.2項。3.2.4精密性同3.1.3項。3.2.5最低檢出限同3.1.4項。3.2.6 穩(wěn)定性試驗出廠前進行，方法同3.1.7項。4 保存、運輸及有效期于28避光保存，有效期自組裝之日起計算，按批準的有效期執(zhí)行。5 使用說明使用說明書應(yīng)包括以下主要內(nèi)容【制品名稱】通用

7、名稱：丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)漢語拼音：Bingxingganyan Bingdu Kangti Zhenduanshijihe(Meilianmianyifa)英文名稱：Diagnostic kit for antibody to Hepatitis C virus (ELISA)【定義】本品系由純化HCV基因重組抗原或人工合成肽抗原相配比包被的微孔板和酶標記特異性抗人IgG及其他試劑配套組成，應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫法原理檢測人血清、血漿樣品中的HCV抗體?！驹噭┖薪M成】 本試劑盒應(yīng)包括下列主要成分：(1) 包被抗原的微孔板(2) 酶標記抗體(3) 樣品稀釋液(4) 底物及其稀釋液(5) 洗滌液(6) 陽性對照和陰性對照(7) 終止液【使用方法】 (1) 每次實驗每板設(shè)陽性對照至少2孔、陰性對照至少3孔和空白對照，其余孔加入規(guī)定量的樣品稀釋液，再加入規(guī)定量的待測樣品，在規(guī)定溫度下，放置規(guī)定時間后，用洗滌液充分洗滌，拍干。(2) 每孔分別加入規(guī)定量的酶標記抗體，空白孔不加，置規(guī)定溫度放置規(guī)定時間后，用洗滌液充分洗滌，拍干。(3) 各孔加入底物溶液，在規(guī)定時間顯色后，加入終止液終止反應(yīng)?！窘Y(jié)果判定】 使用酶標儀，按規(guī)定波長測定各孔吸光值（A值）。各生產(chǎn)單位應(yīng)對其試劑盒Cut off值的計算、陽性、陰性對照