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文檔簡介

1、 壓差膨化紅棗和自然干燥紅棗黃酮、酚酸、抗氧化活性的比較(金絲小棗)摘要本研究的目的是探討膨化和自然干燥對紅棗四種形式酚酸(游離、酯、苷、不溶性結合)、總黃酮、總酚含量(TPC)、抗氧化活性的影響。酚類化合物用高效液相色譜法進行定性定量測定。 通過2 ,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽自由基清除能力和總還原力估算棗樣品的抗氧化能力。結果表明,所有樣品的的酚含量、酚酸和黃酮類成分、抗氧化活性等方面差異性顯著。膨化紅棗有較高的總沒食子酸、對羥基苯甲酸、香草酸、對香豆酸、阿魏酸、蕓香苷含量。此外,膨化紅棗的總酚和抗氧化活性比起其他處理更高。膨化棗的四種酚酸含量豐富,其次是新鮮和自然

2、干燥的棗。每個樣本的配糖和不溶性結合酚酸的形態(tài)分別代表了最高的TPC和最強的抗氧化活性。結果表明氣流膨化是大棗加工是一個很好的途徑。關鍵詞:鮮棗,酚酸,黃酮,氣流膨化,自然干燥前言紅棗(金絲小棗)是多刺的鼠李科植物,原產(chǎn)于中國,有4000多年歷史,廣泛分布于亞洲和美國的熱帶和亞熱帶地區(qū),因其富含微量礦物質、蛋白、糖、有機酸、維生素C、酚、多糖等而具有很高的營養(yǎng)價值和功能價值。棗通過不同的加工方法如傳統(tǒng)的干燥、發(fā)酵、炸、煮、蒸等加工成各種類型的食物被消費。此外,紅棗由于其健補、緩和、鎮(zhèn)咳的功效常用于中醫(yī)藥中。鮮棗采摘后的幾天后就容易變壞,加工成產(chǎn)品是必要的。紅棗最常用采用工藝是干制,可以保持其理

3、想的品質,延長其貨架期。自然干燥、冷凍、微波等不同的干燥方法已見報道于紅棗加工。以上加工方式中,自然干燥是生產(chǎn)脫水產(chǎn)品最常見的方法,且可確保適當?shù)谋2亍H欢?,自然干燥產(chǎn)品是直接暴露在太陽輻射下且干燥參數(shù)不能被控制,產(chǎn)品的質量不好。具體而言,自然干燥不均勻,產(chǎn)品焦糖化,外皮較硬。直接暴露在陽光下也破壞了產(chǎn)品的顏色、維生素、風味。與其他干燥方法相比,凍干棗中總酚含量(TPC)有顯著提高,但抗氧化活性最小。然而因其運行成本高,冷凍干燥是局限于高價值產(chǎn)品生產(chǎn)。根據(jù)東部地區(qū)研究中心的長期調查研究膨化是快速和廉價的水果和蔬菜的干燥方法。膨化過程是在一個有高壓力和過熱蒸汽連續(xù)膨化系統(tǒng)(CEPS)進行的,從而

4、迅速使干燥片內的水分達到高于其常壓沸點的溫度。當壓力立即恢復到常壓,棗片汽水閃蒸,形成多孔結構。膨化后,樣品片通過常規(guī)方法干燥,至3或更少的含水量。根據(jù)文獻土豆、胡蘿卜、蘋果已經(jīng)在CEPS膨化處理成功。膨化產(chǎn)品在味道、顏色、快速復水、常溫貯藏、最小的貯藏和運輸成本、耐久性等方面有優(yōu)良特性。將膨化產(chǎn)品與不同口味產(chǎn)品混合在防水塑料薄膜袋中在市場營銷,為逐漸接受和使用膨化產(chǎn)品提供了巨大的的機會,膨化食品主要是由于其便利性,有吸引力的外觀,風味獨受到特消費者的青睞。雖然膨化是一個極好的干燥方法,但沒有文獻涉及膨化、自然干燥、新鮮水果在游離、酯化、糖苷化、不溶性結合的酚酸和黃酮含量以及抗氧化活性。為了實

5、現(xiàn)膨化技術更好的發(fā)展及膨化產(chǎn)品消費的增加,其關鍵是要了解在促進健康的組分及其濃度以及這些有益成分在食品加工中的可用性。因此,測定比較了新鮮、適當自然干燥、膨化棗制品的重要生物活性物質和抗氧化活性。材料與方法化學品:下列標準用于酚類化合物的定量分析。兒茶酚、兒茶素、蕓香苷、槲皮素、沒食子酸、香草酸、原兒茶酸、對羥基苯甲酸、綠原酸、咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、肉桂酸、鞣花酸Sigma (St. Louis, MO).以流動相的水二次蒸餾凈化Milli-Q system (Millipore, Bedford, MA)。6-羥基-2,5,7,8-四甲基苯并二氫吡喃-2-羧酸(水溶性維生素E),2 ,

6、2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)及福林酚比色法試劑均購自Sigma(德國)。HPLC流動相為純甲醇,所有其他試劑均為分析純。植物材料、實驗設計稱為“梨棗”的當?shù)豘.紅棗品種,生長于中國陜西黃土高原西北農(nóng)林科技大學試驗園(東經(jīng)110°17,北緯37°36,海拔1049米以上)。所有的樹木都根據(jù)綜合培養(yǎng)協(xié)議管理。成熟的棗(經(jīng)驗豐富的園藝家基于顏色、味道、和果實結構判斷)用手工采摘于2012年9月25日,后立即轉移到實驗室。04 保存。選擇無肉眼可見的瑕疵或疾病的形狀均勻的紅棗隨后干燥。采用兩種脫水方法:(1)膨化處理(2)自然干燥處理。(1)膨化處

7、理 膨化的鮮棗用機械方法清洗、去核、切片后,立即浸漬在0.2檸檬酸的水溶液中,然后倒掉。將切片均勻地放置預干燥機(ZGW100,川楊有限公司,山東,中國)移動網(wǎng),以達到預定的水分含量(約30)。聚乙烯膜包裹樣品,并置于恒溫控制的腔室在25下24h以平衡水分和溫度分布。該腔室是由過熱蒸汽加熱到約90的壁溫,且腔室的壓力在開啟真空泵之前由空氣壓縮機加壓至0.2MPa。20min后,急劇的壓力降至真空中通過打開閥門進行。突然的壓力降引起物料中含有的過熱液體自動汽化,然后樣品立即被膨化。迅速通入冷卻水,蒸汽管道其溫度下降到80 。然后進行抽真空2.5h(約0.098 MPa),冷卻水冷卻到所需溫度條件

8、(2025°C)。溫度保持510min關閉蒸汽閥。打開通風閥至壓力達到大氣壓力,取出膨化樣品。膨化大棗樣品后的最終水分含量接近6%。這個過程是由封閉的膨化設備實現(xiàn)(QDPH10, Qinde New Material Co., Ltd.,中國 天津)。(2)自然干燥處理,鮮棗白天立即暴露在據(jù)地面1m高度,晚上放在室內,18天水分含量達到22%。分離游離的和結合的酚酸。酚酸的分離提取根據(jù)徐、王等人的方法。10 g鮮棗或5 g干棗以100或50 mL 80的甲醇水溶液在冷卻超聲波浴中浸提30 min。分離上清液,殘留物相同的條件下通過重復上述步驟再次提取。合并兩濾液,2191 g 離心1

9、5 min。將合并的上清液,然后在35真空下蒸發(fā)至約25mL以測定游離酚酸、可溶性酚醛酸苷、酚酸酯類,殘留物用以測定甲醇不溶酯結合的酚酸類物質的。用6 M HCl調水懸浮液pH值至2,用1:1(V / V)乙醚 - 乙酸乙酯在1:1的水相溶劑中萃取5次,以得到游離酚酸。水相由堿溶液(含10mM EDTA和1抗壞血酸的4M NaOH)在氮氣中室溫下處理4h。用6M鹽酸酸化至pH為2時,用1:1(V / V)乙醚 - 乙酸乙酯在1:1的水相溶劑中萃取5次以得到脂類中酚酸。然后水相在氮氣中85下用5ml的6M的HCl中水解30min。按上述處理水解液五次分離可溶性苷中的酚酸。80的甲醇提取的殘余物直

10、接在與脂相同的條件用8mL 4M NaOH(含10mM EDTA和1抗壞血酸)水解。用6M鹽酸酸化至pH 2后,如上所述的處理水解產(chǎn)物5次萃取分離甲醇不溶的酯結合的酚酸,處理樣品三份。如上所述得到的酚酸餾分用無水硫酸鈉脫水,過濾,在真空下35°C干燥。干燥的殘留物溶解于5mL 80(V / V)甲醇水溶液中。酚類化合物的表征及定量10 g鮮棗或5 g干棗以100或50 mL 80的甲醇水溶液在冷卻超聲波浴中浸提30 min。分離上清液,殘留物相同的條件下通過重復上述步驟再次提取。合并兩濾液,2191 g 離心15 min。將合并的上清液用旋轉蒸發(fā)器(R-210,Buchi Labor

11、technik-AG,瑞士)蒸發(fā)至干得到類黃酮粗提取物。酚酸測量樣品的提取是根據(jù)用于分離游離的和結合的酚酸相同的方法。在被注入HPLC系統(tǒng)之前被轉移到一小瓶根據(jù)Gao等人。樣品的高效液相色譜法分析在Waters HPLC系統(tǒng)用UV-Vis檢測器(2487),在280nm處進行。Atlantis T3柱(4.6×150mm,3m)(Waters Corp,Milford,MA)30 下操作。注射量為10L,流量保持在0.8mL/min,洗脫溶劑為甲醇(A)和超純水(pH2.6)(B)。梯度設計如下:015 min,15%;1525 min,1525%;2565 min,2575%;65

12、70 min,7515% A。酚類化合物的鑒定是通過樣品萃取溶液的色譜峰的光譜和保留時間與標準化合物的比較實現(xiàn)。每個酚類化合物的濃度表示為每克干重微克數(shù)( g/g DW)且用于比較不同處理方法的結果。如圖1所示:總酚含量的測定(TPC)使用Gao等人所描述的方法測定各提取物的TPC。稀釋后的提取物或控制(125 L)和500L蒸餾水混合,然后加福林酚試劑125L。室溫下保持6分鐘后,加入7的碳酸鈉水溶液1.25mL和蒸餾水1mL中。將萃取物混合,并使其使在黑暗中反應1.5h后,用分光光度計(UV1240,日本)測定760nm處的吸光度。水和試劑的混合物作為空白對照。TPC表示為沒食子酸當量(G

13、AE)以mg/g干重計。平行重復三次??寡趸钚缘臏y定:ABTS清除能力根據(jù)以前的文獻資料,提取物清除自由基能力的計算與ABTS+生成相反。5m mol ABTS水溶液和1.5g二氧化錳室溫下黑暗中保溫30min以產(chǎn)生陽離子自由基ABTS+,然后過濾除去,二氧化錳。接下來,含3.0mL ABTS+和200L提取物的ABTS+反應液在反應1min后測定其734 nm處的吸光度。制備水溶性維生素E標準曲線,結果表示為Trolox的當量mmol / 100gDW。總還原力的測定提取物總還原力根據(jù)Ma等人的方法測定。1mL適當稀釋度的萃取液與2.0mL磷酸鹽緩沖液(0.2mol/L,pH6.6)和2.

14、0mL1的鐵氰化鉀混合,50保溫20min??焖倮鋮s后,加入2mL 10(w / v)的三氯乙酸以終止反應。然后2mL反應混合物混以2mL蒸餾水和0.4mL 0.1的氯化鐵,黑暗中反應30min后,在700nm處測定。還原力表示為維生素C當量mg / 100gDW。統(tǒng)計分析每個樣品至少重復三次,結果表示為平均值 ± 標準偏差(SD)。用單因素方差分析(ANOVA)被用來確定采用SPSS18.0軟件方式的差異。所有的統(tǒng)計差異在=0.05的差異水平上進行。結果和討論酚類化合物眾所周知,黃酮類化合物因其抗氧化和螯合能力具有很高的促進健康的活性。一些流行病學研究也發(fā)現(xiàn)黃酮的消費與降低患癌癥和

15、心血管疾病的風險有關。先前的研究已經(jīng)在干、鮮棗中發(fā)現(xiàn)了4類黃酮類化合物(兒茶素,表兒茶素,槲皮素,蕓香苷)。棗黃酮類化合物見表1。兒茶素,表兒茶素和槲皮素只在新鮮和膨化棗中檢出。相比于鮮棗,膨化處理槲皮素的量增加59。它是槲皮素糖苷的熱誘導降解導致槲皮素濃度增加。膨化的鹽膚木果實也觀察到在槲皮素的增加,這是由于槲皮苷的水解和脫糖水解。結果可能與槲皮苷高溫下不穩(wěn)定事實有關,盡管槲皮素在200 是穩(wěn)定的。這可以解釋在目前的研究中經(jīng)過膨化槲皮素含量明顯增加(P0.05)。相比與膨化棗,鮮樣品有兒茶素(10.84gg DW)和表兒茶素(49.26gg DW)含量較高,膨化棗兒茶素和表兒茶素的含量分別降

16、至2.04和5.48 g/g DW。這證實了高溫和氧濃度對食品加工過程的負面影響。以往的研究得到了一些結果表明,葡萄牙梨在自然干燥后分別損失91兒茶素和96表兒茶素。此外,自然干燥處理引起蕓香苷含量顯著下降,相較于鮮棗,只剩31的蕓香苷。自然干燥棗的槲皮素和蕓香苷表現(xiàn)出不同的特性,這是由于蕓香苷有更高的穩(wěn)定性和蕓香苷分子中糖存在。根據(jù)Gao等人研究但膨化,蕓香苷濃度增加了13。所有的干燥處理(自然干燥、冷凍、微波、烘干)都使蕓香苷含量急劇下降。然而,蕓香苷在標準高溫度處理的梅干中相當大的值,這是在其結果上與膨化處理蕓香苷顯著增加一致。在鮮棗含沒食子酸,原兒茶酸,對羥基苯甲酸,綠原酸,香草酸,p

17、-香豆酸,阿魏酸,鞣花酸,肉桂酸九游離酚酸,而膨化樣品含八游離酚酸。自然干燥的中只有四種有利酚酸。鮮棗主要的游離酚酸為原兒茶酸、綠原酸、沒食子酸,其含量均高于文獻的水平。這種差異可能是由于農(nóng)藝措施、采收時間、采收后條件、中國黃土高原干旱的氣候條件以及當?shù)氐母吆0卧斐傻?。與鮮棗相比,膨化棗中的原兒茶酸、綠原酸含量分別顯著下降到8.78和0.57gg DW。在目前的研究中,在膨化出現(xiàn)66%原兒茶酸損失。然而,在自然干燥的樣品沒有檢測到。另外,根據(jù)其他的干燥方法的研究,通過冷凍干燥和烘干處理分別損失約94、98的原兒茶酸。結果表明,大棗膨化原兒茶酸可以保留在可接受的水平。綠原酸除了其膨化大棗中的自由

18、形式外在干燥過程中消失。這些結果可以歸因于膨化過程升高的壓力和溫度。據(jù)文獻報道綠原酸對高壓力、熱敏感。例如,通過微波加熱、煮制、焙烤土豆中綠原酸含量分別降低46%、60%、100%。自然干燥過程中綠原酸的損失可能是由于多酚氧化酶的活性,綠原酸是PPO體外最好的一種底物,這可以解釋綠原酸減少。也可能是化合物加熱分解為咖啡酸。事實上,研究結果發(fā)現(xiàn)干果制品的咖啡酸大量增長,印證了綠原酸的去糖基化產(chǎn)生咖啡酸的觀點。自然干燥棗沒食子酸的含量比鮮棗低。然而相比于鮮棗,膨化棗中的沒食子酸含量顯著增加(P0.05)。紅棗中沒食子酸的增加的一個可能的原因是膨化引起沒食子鞣質降解的產(chǎn)生游離沒食子酸。zaderno

19、wski等人發(fā)現(xiàn)幾種生長在波蘭東北部小漿果中歐洲唐棣屬的游離沒食子酸含量(7.2mg/kg DW)最高。值得注意的是,膨化棗游離沒食子酸幾乎歐洲唐棣屬是高5倍。此外鮮棗含有少量游離肉桂酸。鮮棗中游離和不溶性結合肉桂酸的范圍分別為0.37、5.90 g/ gDW,膨化樣品分別為4.62、0.17 g/ gDW。膨化后,游離和不溶結合酚酸分別顯著增加和減少(P<0.05),膨化處理能釋放主要與細胞壁相關的脂結合的肉桂酸來解釋游離肉桂酸增加的事實是合理的。關于酯化酚酸,p-香豆酸和可溶性酯形式阿魏酸在所有樣品中都檢測到。要強調的是膨化大棗中p-香豆酸和可溶性酯形式阿魏酸的含量( 8.18和11

20、.16g/ gDW)比鮮棗(7.92和1.45g/ gDW)高得多。Gong等人還指出通過氣流膨化阿魏酸和p-香豆酸共軛形式的產(chǎn)量大幅上升。實驗發(fā)現(xiàn)酯化的阿魏酸是膨化棗已鑒別出四種形式的阿魏酸中的主要化合物。據(jù)報道阿魏酸糖酯具有比游離阿魏酸更強抑制LDL的氧化的作用,因為它具有延長LDL過氧化誘導期和降低LDL氧化系統(tǒng)最大速度和最大濃度的能力。以前的研究表明天然抗氧化劑,如阿魏酸對牽涉氧化應激的神經(jīng)退行性疾病有重要影響。然而自然干燥分別損失77p-香豆酸和88水溶性酯中的阿魏酸。類似阿魏酸和香豆酸,膨化后酯化肉桂酸從0.16g/ gDW增至0.91g/ gDW。雖然肉桂酸在鮮棗和干棗中含量低,

21、但是抗氧化活性比苯甲酸類強。膨化棗酯化咖啡酸2.19g/ gDW比鮮棗1.48g/ gDW高,自然干燥棗未檢測到。酯化酚酸,這是非常合適的多酚氧化酶底物,可能發(fā)生的降解反應。自然干燥處理可降低酯化咖啡酸的假設是合理的。在可溶性酯中沒食子和p-對羥基苯甲酸只在干樣品中檢出。相比于鮮棗,就膨化大棗中的糖苷化酚酸而言,香草酸量顯著(P <0.05)增加,而沒食子酸呈顯著下降(P <0.05),在自然干燥棗中未檢出。這由于某些共軛多酚類如木質素在高溫下被降解成簡單的酚類化合物。木質素的解聚和再聚合可能起源于酸性條件下碳正離子的形成,這可能在非常溫和的條件下被抑制。有很多證據(jù)表明木素中獲得的

22、主要降解產(chǎn)物為香草酸。我們的研究結果也證明了膨化能有效提高香草酸產(chǎn)量。p-香豆酸只在干樣中檢出,其含自然干燥棗量高達2.58g/ gDW和膨化只有1.57g/ gDW。在我們的研究中對香豆酸高量與前報告不同棗組織(去皮,果肉,種子)未檢出不符,這因為p-香豆酸和木質素之間的聯(lián)系在干燥過程中可以通過高溫和促成熟酶如糖苷酶破壞。糖苷化鞣花酸是鮮棗第二大豐富的酚酸,而自然干燥處理導致其含量顯著下降(P<0.05)。在不溶性結合酯化鞣花酸中觀察到了類似的趨勢。不同與這個結果,自然干燥棗游離鞣花酸的含量顯著(P <0.05)增加了77。以前的研究也表明游離在草莓和紅樹莓果醬加工中鞣花酸含量增

23、加150%。這中增加與鞣花單寧釋放六羥基聯(lián)苯甲酸轉化為鞣花酸相關。加工對影響促進健康性質的不同形式水果鞣花酸含量的影響顯著。關于果實的鞣花酸含量和加工對其的影響的準確知識對評估鞣花酸對人類健康和疾病的影響很重要。膨化大棗增加了不溶性的結合的酚酸,研究表明膨化干燥過程中沒食子酸的不溶性結合的形式增加了24%,而自然干燥處理不溶性結合的沒食子酸損失18%。膨化大棗中含有較高水平的不溶性結合的香草酸,比鮮棗約高11倍。高壓膨化產(chǎn)生的機械和化學作用可能使結合的酚酸類物質被釋放。然而,在自然干燥棗中未檢出。結果表明,干燥處理后酚酸的含量和分布發(fā)生了變化,所以必須采取適當?shù)奶幚矸椒▉砭S持其功能價值。在前人

24、研究的基礎上,顯而易見的是加工方法對酚酸的含量有著顯著影響。不溶性結合形式p-香豆酸的只有存在在干燥的樣品中。 統(tǒng)計上自然干燥和膨化處理之間不溶性結合的p-香豆酸顯著差異在研究進行了測量。少量不溶性的結合形式的咖啡酸只在膨化大棗中檢測到。許多分析方法已經(jīng)被用來測定干、鮮棗的酚類化合物,但目前用于大棗提取物中的酚類化合物的測定只針對主要黃酮類化合物和可溶性酚酸。這使得與文獻報道的結果難以比較。此外,酚類化合物在干燥處理過程變化也不是很清楚,因為它的含量可能增加或減少。這需要進一步研究??傊?,膨化棗的沒食子酸(游離、酯、苷、不溶性結合的形式)、對羥基苯甲酸、香草、咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸和蕓香苷

25、含量最高。TPC和抗氧化活性表2總結了游離、酯化、糖苷化和不溶性結合形式的TPC結果(GAE/g DW的毫克數(shù))。膨化后棗的游離、酯化、糖苷化和不溶性結合的形式TPC各為6.93、6.74、18.91、21.35 mg GAE/g DW,顯著增加,分別增加了279、170、380、402(P <0.05),而自然干燥棗含量分別為1.26、0.89、2.74和2.89 mg GAE/g DW,分別減少了31、64、30和32(P <0.05)。這個結果的一個可能的原因是突然的壓力降的影響使一部分的水蒸發(fā),誘導膨化形成多孔結構,有利于溶劑接觸并從而膨化大棗提取物含量更高。 事實上,已經(jīng)

26、證實,膨化紅參(41.148.2 g/100g)比未膨化(29.745.7 g/100g)的萃取率高。此外,膨化可能使存在的棗的多酚氧化酶滅活并避免一些多酚類物質的降解。另外,部分木質素可能通過用高溫高壓蒸汽下的水解反應溶解成低分子量的酚類化合物。膨化處理是抗氧化成分提取分離的一種有效預處理。Gong等人還報告了膨化后總游離酚從98.9增至664.1mg GAE/g DW,總可溶性結合物從73.2增之208.2 mg GAE/g DW,Conde報告了類似的結果。此外,Dewanto等人還發(fā)現(xiàn),熱處理可從細胞成分分解釋放更多結合的酚酸,雖然細胞壁的斷裂也可能導致氧化和水解酶的釋放,破壞水果和蔬

27、菜中的抗氧化劑,熱處理會抑制這些酶,防止酚類化合物的損失。這能夠解釋自然干燥棗中TPC的減少,自然干燥的TPC的損失可能是自然干燥過程由酶的作用造成的。一些降解酶如多酚氧化酶沒有立即滅活,在棗果實沒有完全干之前能降解酚類化合物。另一方面,氣候因素也導致TPC的不均勻損耗。許多研究還報告植物樣品的TPC干燥處理后減少。值得注意的是鮮棗、膨化棗、自然干燥棗分別約85、87、84是結合的形式。這是難以消化,可能胃腸道消化后仍能存在達到結腸定位,提供健康益處。鮮棗酯化酚含量顯著高于游離酚(P0.05),相反干棗酯化酚類物質含量均低于游離酚。游離酚酸占膨化棗和自然干燥棗總酚酸的13和16,而相應的酯化酚酸分別占12和11。結果表明,干燥處理因酯化酚酸的釋放可以增加棗游離酚酸的比例。氣流膨化可以有效地水解酚類化合物、木質素、碳水化合物中的酯和醚鍵。 另據(jù)報道,增加加熱時間和溫度熱處理后,甜玉米總游離酚含量顯著增加,這可能是由于酯化和不溶性結合酚的釋放。結果還表明,膨化后游離酚酸占總酚的百分比大幅增加,與文獻報道相符。細胞壁的不溶性結合的酚類物質豐富,通過氫鍵、疏水鍵、共價鍵連接,如酚酸和多糖之間的酯鍵。推測膨化可能有助于結合酚酸的釋放。同樣其他研究者報告了的氣流膨化對結合酚酸

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