臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)主管技師考試輔導(dǎo)149

1、最新修正版其他革蘭陰性桿菌及檢驗(yàn)考點(diǎn)嗜血桿菌屬生物學(xué)性狀臨床意義微生物學(xué)檢查軍團(tuán)菌屬、鮑特菌屬、【內(nèi)容講解】 其他革蘭陰性桿菌： 一些無動力，無芽胞, 主要包括嗜血桿菌屬、布魯菌屬菌體小，形態(tài)近似球桿菌，對營養(yǎng)要求較苛刻的小桿菌。 鮑特菌屬、布魯菌屬等。一、嗜血桿菌屬 一類無動力、無芽胞的革蘭陰性小桿菌，常呈球桿狀，有時呈桿狀、長絲狀等多形態(tài)。與臨床有關(guān)的為 9個種，即流感、副流感、溶血、副溶血、嗜沫、副嗜沫、杜克及埃及嗜血桿菌。人工培養(yǎng)基中加入新鮮血液才能生長，故稱嗜血桿菌。(二)流感嗜血桿菌簡稱流感桿菌，不是流感的病原菌。1. 生物學(xué)性狀(1) 形態(tài)與染色：急性感染標(biāo)本，如腦脊液中多為短小

2、球桿菌，恢復(fù)期病灶或長期人工傳代培養(yǎng)呈球桿狀、長桿狀、 絲、狀等多形態(tài)性。 G-，著色較淺。石碳酸復(fù)紅或美藍(lán)單染色，兩端濃染現(xiàn)象。毒力株(粘液型菌株)在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上，68h有明顯莢膜，在陳舊培養(yǎng)物中莢膜消失。無鞭毛，無芽胞。(2) 培養(yǎng)特性：需氧菌。初次分離培養(yǎng)時，最好在5%10%C0環(huán)境中，以促進(jìn)其生長。普通培養(yǎng)基中須加入 X和V因子，才能生長。巧克力瓊脂平板上生長較佳：圓形、光滑、濕潤、邊緣整齊，呈露滴狀的小菌落。徑1.01.5mm灰白色較大的菌落。有莢膜菌株的菌落呈輕度粘稠。衛(wèi)星現(xiàn)象：有助于對流感嗜血桿菌的鑒定。當(dāng)流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血瓊脂平板上共同培養(yǎng)時，由于后者能合成

3、較多的48h后可形成直V因子，可促進(jìn)流感嗜血桿菌的生長，在葡萄球菌菌落周圍生長的流感嗜血桿菌菌落較大，離葡萄球菌菌落越遠(yuǎn)的菌落 越小。液體培養(yǎng)基中：有莢膜的菌株呈均勻混濁生長，無莢膜的(3) 生化反應(yīng)：對糖發(fā)酵不穩(wěn)定。一般分解葡萄糖只產(chǎn)酸，不分解乳糖或甘露醇，對麥芽糖、蔗糖或糊精的發(fā)酵不 穩(wěn)定。還原硝酸鹽。有莢膜菌株產(chǎn)生吲哚。典型菌株不溶血。產(chǎn)生自溶酶，可被膽汁溶解。2. 致病性致病物質(zhì)為內(nèi)毒素、莢膜、菌毛和酶類。R型菌株則為顆粒狀沉淀生長。關(guān)節(jié)炎、直接鏡檢初步診斷：短小桿菌或多形態(tài)桿 菌，結(jié)合臨床癥狀1亠（增菌）分離培養(yǎng)I定種！菌落形態(tài).涂 片染色，衛(wèi)星現(xiàn)象，X. V因子需求與否 分型：生化

4、試驗(yàn)和英 膜腫脹試驗(yàn)通過呼吸道感染，引起原發(fā)性或繼發(fā)性感染。原發(fā)性感染多由b型莢膜強(qiáng)毒株引起，為急性化膿感染，如腦膜炎、鼻咽炎、咽喉會厭炎、化膿性 心包炎及敗血癥等。繼發(fā)感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺結(jié)核等后發(fā)生，多為無莢膜菌株引起。如慢性支氣管炎、中耳炎、鼻竇炎等。3.微生物檢驗(yàn)痰液.腦脊液.鼻咽分泌物及膿液96.7%。149人,有34人19種，其中主要菌種XV溶血性致病性流感嗜血桿菌+-原發(fā)性化膿性感染及繼發(fā)性感染等副流感嗜血桿菌-+-偶可引起細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、尿道炎埃及嗜血桿菌+-急性、亞急性眼結(jié)膜炎杜克嗜血桿菌+-+/-軟性下疳嗜沫嗜血桿菌+-偶引起細(xì)菌性心內(nèi)膜炎或腦膿腫溶血性嗜血桿菌

5、+很少致病如何提高流感嗜血桿菌的陽性率： 初次培養(yǎng)應(yīng)在 50%- 10%CO環(huán)境。 生長需要X、V因子，故在培養(yǎng)基中應(yīng)添加此因子。 應(yīng)用選擇性培養(yǎng)基，如巧克力瓊脂中加一定量抗生素，嗜血桿菌分離率可達(dá)（三）其他嗜血桿菌二、軍團(tuán)菌屬1. 命名和分類 1976年在美國費(fèi)城召開的全美退伍軍人會議期間，暴發(fā)流行一種嚴(yán)重肺炎，與會者死亡。從死者肺組織中分離到一種新菌，1978年美國疾病控制中心將其命名為軍團(tuán)菌。伯杰系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊（1984）定為軍團(tuán)菌科，軍團(tuán)菌屬。從人體分離的已有 致病菌為嗜肺軍團(tuán)菌。2. 生物學(xué)性狀 G-桿菌，常規(guī)染色不易著色，有端生或側(cè)生鞭毛。需氧菌。含有 2.55%CO環(huán)境中生長良好

6、。 劑敏感。3. 微生物檢驗(yàn)營養(yǎng)要求較苛刻，且生長緩慢，初次分離需L-半胱氨酸，培養(yǎng)基中含鐵鹽可促進(jìn)生長?；钚蕴?酵母浸出液瓊脂（BCYE培養(yǎng)基：35天形成12mn圓形凸起，灰白色有光澤的菌落。 觸酶陽性，部分菌株氧化酶陽性，不分解糖類，多數(shù)菌株產(chǎn)3 -內(nèi)酰胺酶。具有O H抗原，H抗原無特異性，0抗原具有特異性。自然界廣泛存在，人工管道的水源中常存在此菌，如醫(yī)院空調(diào)冷卻水中常有此菌，對常用化學(xué)消毒直接涂片意義不大。分離培養(yǎng)后的菌落進(jìn)行革蘭染色鏡檢，進(jìn)行氧化酶和觸酶試驗(yàn)，明膠液化試驗(yàn)及 3 -內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)。利用PCR技術(shù)及熒光抗體染色進(jìn)行鑒定。臨床上常利用血清學(xué)診斷方法檢測軍團(tuán)菌抗體IgG、Ig

7、M。有交叉反應(yīng)，應(yīng)引起注意。4. 臨床意義引起軍團(tuán)病，主要由嗜肺軍團(tuán)菌，輕癥型類似流感，病人有發(fā)燒、頭痛、無力等癥狀。重癥型是以 肺部感染為主要特征，常導(dǎo)致多器官損害，最終導(dǎo)致呼吸衰竭死亡。5. 結(jié)果評價及治療原則呼吸道標(biāo)本中分離出軍團(tuán)菌，應(yīng)確定為軍團(tuán)菌感染三、鮑特菌屬 G-小桿菌烈咳嗽。 一般治療方案為大環(huán)內(nèi)酯類加利福平。營養(yǎng)要求很高，血平板及巧克力平板不生長，常用鮑-金培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)。不發(fā)酵糖類，不產(chǎn)生 fS吲哚，不液化明膠，不能還原硝酸鹽，不能利用枸櫞酸鹽。 該菌抵抗力弱，56C 30分鐘、日光照射1小時可致死亡。毒素：即百日咳毒素、絲狀血細(xì)胞凝集素和腺嘌呤環(huán)化酶毒素。 百日咳鮑特菌

8、和副百日咳鮑特菌是百日咳的病原菌。主要通過飛沫經(jīng)呼吸道傳播，引起百日咳。傳染源主要是早期患者和帶菌者。主要癥狀為陣發(fā)性劇 由于病程較長，故名百日咳。sIgA抗感染作用重要。病后或預(yù)防接種后，可獲得持久免疫力，再次感染少見。氣管粘膜局部的四、布魯菌屬生物學(xué)性狀： G-小桿菌或球桿菌，無動力，無芽胞和莢膜。需氧，對營養(yǎng)要求較高，在血瓊脂平板上培養(yǎng)57天可形成微小、灰色不溶血菌落。利用葡萄糖等糖類，尿素酶陽性，硝酸鹽還原試驗(yàn)陽性。檢測：凝集反應(yīng)，PCR檢測，抗體檢測。臨床意義：人畜共患感染性疾病的病原菌，布魯菌可通過人類疫膚、呼吸道和消化道進(jìn)入人體而感染, 進(jìn)入人體后首先侵犯局部淋巴結(jié)，之后入血，再

9、進(jìn)入肝、脾、骨髓等器官，患者熱型呈波浪熱。治療：首選多西環(huán)素，次選 TMP/SMZ用藥需46周。五、弗朗西斯菌屬主要有土拉弗朗西斯和新兇手弗朗西斯菌，是野生動物的自然疫源性疾病，人類多由于接觸患病動物 而感染。【例題】軍團(tuán)菌病的傳播是經(jīng)A. 食物B. 空氣C. 血液D. 皮膚接觸E. 動物媒介答疑編號 502389210101【正確答案】B【例題】分離流感嗜血桿菌常用的培養(yǎng)基為A. 血瓊脂平板培養(yǎng)基B. 巧克力瓊脂培養(yǎng)基C. SS培養(yǎng)基D. TCBS培養(yǎng)基E. 麥康凱培養(yǎng)基；答疑編號 502389210102【正確答案】B【例題】慢性波浪熱患者分離布魯菌陽性率最高的標(biāo)本是A. 血液B. 糞便C

10、. 尿液D. 痰液E. 骨髓答疑編號 502389210103【正確答案】E【例題】培養(yǎng)分離軍團(tuán)菌可以采用A. 血平板B. 羅氏培養(yǎng)基C. 活性炭酵母浸液瓊脂D. 堿性平板E. 沙保弱培養(yǎng)基答疑編號 502389210104【正確答案】C【例題】白百破三聯(lián)疫苗的組成是A. 白喉類毒素、百日咳類毒素、破傷風(fēng)類毒素B. 白喉類毒素、C. 白喉死菌苗、D. 白喉死菌苗、E. 白喉類毒素、 百日咳死菌苗、 百日咳死菌苗、 百日咳死菌苗、 百日咳類毒素、 破傷風(fēng)類毒素 破傷風(fēng)類毒素 破傷風(fēng)死菌苗 破傷風(fēng)死菌苗答疑編號 502389210105【正確答案】B 【例題】屬于動物源性細(xì)菌的是A. 布魯菌B. 百日咳鮑特菌C. 結(jié)核分枝桿菌D. 麻風(fēng)分枝桿菌E