龍牙百合原生質(zhì)體制備與電融合條件初探

1、 JIANGXINORMALUNIVERSITY本科生畢業(yè)設(shè)計(論文)過程管理手冊 學號：0908180009學生姓名：程思睿選題編號：屆別：2013學院：生命科學學院 專業(yè)： 生物工程 指導教師姓名及職稱： 指導教師姓名及職稱： 評閱教師姓名及職稱： 江西師范大學教務(wù)處制說 明1.任務(wù)書由指導教師與學生共同商定，并由指導教師填寫，經(jīng)學院畢業(yè)設(shè)計(論文)工作指導小組(教研室)審核后，發(fā)至學生手中；2.學生應(yīng)認真撰寫畢業(yè)設(shè)計(論文)的開題報告，做好各階段進展情況記錄及個人工作總結(jié)；3.本手冊中各部分內(nèi)容應(yīng)填寫完整，簽名齊全;4.本手冊裝訂順序為：任務(wù)書、開題報告、過程進展情況記錄(含前期準備階段

2、、撰寫階段、中期自查、完善階段)、個人工作總結(jié)、形式審查表、指導教師評價表、評閱教師評價表、答辯評分及成績評定表；5.本手冊在畢業(yè)設(shè)計(論文)完成后，與畢業(yè)設(shè)計(論文)一起交指導教師，作為畢業(yè)設(shè)計(論文)答辯的主要檔案資料，并由各學院保存至學生畢業(yè)后四年。江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）任務(wù)書學號0908180009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探研究主要內(nèi)容及基本要求研究主要內(nèi)容：1 龍牙百合的組織培養(yǎng)技術(shù)研究2. 不同酶解時間對原生質(zhì)體產(chǎn)量的影響；3. 纖維素酶和果膠酶不同配比對原生質(zhì)體產(chǎn)量的影響；4. 原生質(zhì)體電融合最佳條件的測定；基

3、本要求：1.實驗操作正確、規(guī)范，實驗結(jié)果記錄完整；2.掌握原生質(zhì)體制備的方法；3.掌握植物細胞組織培養(yǎng)技術(shù)；4.熟練掌握無菌操作；5.論文書寫符合本科生論文形式要求。主要參考資料1 國家藥典委員會，中華人民共和國藥典：一部M.北京工業(yè)出版社，2005：12 涂鵬飛，何燕萍，樓之岑，肉蓯蓉的本草考證J 中國中藥雜志，1994,19(1):33 田愛梅，鄭日如，王國強，陳發(fā)菊，曹家樹，中國野生百合種質(zhì)資源的研究保護與利用，安徽農(nóng)業(yè)科學2007,35(31):9987-99904 張良波，李培旺，黃 振，李昌珠，木本植物原生質(zhì)體制備體系的研究進展，中南林業(yè)科技大學學報 5 聶瓊，劉仁祥，徐如宏，煙草

4、原生質(zhì)體分離純化條件的優(yōu)化，貴州農(nóng)業(yè)科學2012,40（9）：20-236 Davey M R,Anthony P,Power J B,et al.Plant proto-plast technology:Current statusJ.Acta PhysiologiaePlantarum,2005,27(1):117-129.7 于曉玲，李春強，彭 明，植物原生質(zhì)體技術(shù)及其應(yīng)用，中國農(nóng)學通報 2009,25(08):22-268 李浚明編譯.植物組織組織教程.中國農(nóng)業(yè)大學出版社M.2002.第2版.1909 于立杰,王憶,許雪峰等.珠眉海棠根原生質(zhì)體分離條件研究.干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究,2010,

5、28(2):118一1210 HoritaM,MorohashiH,KomaiF.RegenerationoffloweringPlantsfromdiffieilelilyProtoplastsbymeansofanurseculture.Planta,2002,215:880一88411 趙紅娟,張博,陳愛萍等.酶解對首稽子葉原生質(zhì)體分離效果的影響.草地學報,2008,16(1):50一5312 胡靜,毛罕平.洋蔥內(nèi)表皮原生質(zhì)體分離和純化研究.江蘇農(nóng)業(yè)科學,2009,3:43一4513 張寧，崛江百合原生質(zhì)體的分離與培養(yǎng)，華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文14 盧明艷.越橘原生質(zhì)體分離純化研究D.吉

6、林：吉林農(nóng)業(yè)大學,2006，6（3）：43-4715 潘增光,鄧秀新.蘋果原生質(zhì)體制備培養(yǎng)及植株再生J.園藝學報, 2000, 27(2): 95-101 16 涂藝聲, 熊立亭, 冷 冰，3種杜鵑屬植物原生質(zhì)體制備純化條件的研究，江西師范大學學報2009年4月第33卷第2期17 江 力,孔小衛(wèi),吳曉杰,李少松，煙草原生質(zhì)體的分離純化，安徽大學學報，2006年11月第30卷第6期 17 江 力,孔小衛(wèi),吳曉杰,李少松，煙草原生質(zhì)體的分離純化，安徽大學學報，2006年11月第30卷第6進程計劃第一階段：2012年09月01日-2012年09月30日，收集資料，確定指導老師和研究方向，開會選題。第

7、二階段：2012年10月01日-2012年10月31日，查閱資料，進行總結(jié)；閱讀分析文獻，撰寫開題報告。第三階段：2012年11月01日-2012年11月30日，實驗初期階段，根據(jù)文獻資料，設(shè)計實驗流程。第四階段：2012年12月01日-2012年12月20日，預(yù)備試驗，領(lǐng)取實驗材料，審定修改研究方案。第五階段：2012年12月21日-2013年01月08日，確定試驗方法，正式試驗。第六階段：2013年02月13日-2013年02月28日，論文前期準備工作，分析整理實驗數(shù)據(jù)，著手寫論文綜述。第七階段：2013年03月01日-2013年03月31日，撰寫論文初稿。第八階段：2013年04月01日

8、-2013年05月01日，修改論文，準備答辯。畢業(yè)設(shè)計(論文)工作指導小組 (或教研室)審核意見畢業(yè)設(shè)計(論文)工作指導小組組長(或教研室主任)簽名： 年 月 日簽名學生簽名： 年 月 日指導教師簽名： 年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）開題報告學號0908180009學生姓名程思睿學院生命科學學院專業(yè)生物工程選題編號屆別2013指導教師姓名及職稱涂藝聲（教授）指導教師姓名及職稱涂藝聲（教授）中文題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探外文題目Preparation and fusion of protoplast of longya Lily optimization開題報告內(nèi)容

9、見附件開題報告內(nèi)容學生簽名： 年 月 日指導教師簽名： 年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）進展情況記錄學號0908180009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探時間自2012 年 9 月1日 至 2012年 9月30日進展情況記錄初始階段：1.了解完成畢業(yè)論文的程序，選擇感興趣的研究方向，確定指導老師及論文選題；2.對學院老師的研究方向進行了解，確定導師，根據(jù)論文題目，搜集資料。根據(jù)老師提供的文獻以及自己查閱相關(guān)的資料，了解課題的研究內(nèi)容及發(fā)展方向；3.查閱文獻資料，了解實驗原理和技術(shù)； 4.植物原生質(zhì)體就是除去細胞壁的具有生活力的“

10、細胞”。由于在原生質(zhì)體制備的過程中,沒有對細胞核內(nèi)染色體及細胞質(zhì)中各個細胞器進行操作,使得每個原生質(zhì)體均含有該植物的全部遺傳信息,并在適當?shù)呐囵B(yǎng)條件下能通過細胞壁再生、細胞繁殖、愈傷組織萌發(fā)或體胚發(fā)生、器官發(fā)生的途徑再生得到與親本性狀相似的個體。5. 在作物雜交育種中，原生質(zhì)體融合可以有效地克服有性雜交不親和性以及花期不育等常規(guī)育種中所遇到的問題，并創(chuàng)造新的種質(zhì)或優(yōu)良的品種。學生簽名： 年 月 日指導教師意見該生在這個階段通過查閱了大量的文獻資料，對原生質(zhì)體有了較深的了解，并且在閱讀資料過程中，了解原生質(zhì)體制備的基本方法。指導教師簽名： 年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）進展情況記錄

11、學號0908180009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探時間自2012 年 10 月1日 至2012 年 10月31日進展情況記錄撰寫開題報告階段：充分學習了有關(guān)文獻和資料后，撰寫開題報告。1.通過查閱國內(nèi)外關(guān)于原生質(zhì)體制備的文獻和資料，了解原生質(zhì)體的意義；2.通過查閱國內(nèi)外關(guān)于制備原生質(zhì)體的文獻和資料，了解原生質(zhì)體的研究進展；學生簽名： 年 月 日指導教師意見該生能認真查閱文獻，構(gòu)思清晰，在獨立完成工作時極為認真負責，能按要求完成開題報告。指導教師簽名： 年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）進展情況記錄學號0908180009學生姓

12、名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探時間自2012 年 11 月1日 至2012 年 11月30日進展情況記錄實驗初期階段：1. 根據(jù)收集及查閱的文獻資料和專業(yè)知識，準備實驗材料，設(shè)計實驗流程；2. 進行龍牙百合的組織培養(yǎng)，為實驗準備材料。3. 開始實驗，記錄好實驗數(shù)據(jù)。學生簽名： 年 月 日指導教師意見該生做事嚴肅認真，實驗方案具體可行，獨立完成實驗時實事求是，一絲不茍完成實驗并做好相關(guān)記錄。指導教師簽名： 年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）進展情況記錄學號0908180009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體

13、制備與電融合條件初探時間自2012 年 12 月1日 至2012年 12 月20日進展情況記錄實驗階段：根據(jù)已經(jīng)設(shè)計好的實驗流程開始進行實驗，并且及時的做好實驗記錄。 1. 不同酶解時間對原生質(zhì)體產(chǎn)量的影響； 2. 纖維素酶和果膠酶不同配比對原生質(zhì)體產(chǎn)量的影響； 3. 進行原生質(zhì)體電融合的最佳條件；學生簽名： 年 月 日指導教師意見該生在實驗中勤思好問，實驗態(tài)度嚴謹端正，按質(zhì)保量完成預(yù)期實驗?zāi)繕?。指導教師簽名?年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）進展情況記錄學號09081810009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探時間自2012 年

14、 12 月21日 至2013 年 1月8日進展情況記錄實驗數(shù)據(jù)處理階段：整理實驗結(jié)果，做好數(shù)據(jù)處理；做好實驗數(shù)據(jù)分析，準備寫論文。1確定了酶液組成為1%纖維素酶+1%果膠酶時原生質(zhì)體產(chǎn)量最高； 2.初步確定了最佳酶解時長為3.5小時； 3.初步確定了最佳電融合條件為交流電壓 6V 持續(xù)時間50S 直流電壓300V 脈沖時間25S 脈沖次數(shù)10次學生簽名： 年 月 日指導教師意見這一時間段該生已經(jīng)能完全自主獨立里對實驗進行分析和操作，完成實驗的能力已經(jīng)提高了很多，在整個實驗過程中，一直認真負責，很細心的做每次檢測，對于每個工藝的控制操作也很用心。很好的完成了最后的驗證實驗。指導教師簽名： 年 月

15、 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）進展情況記錄學號0908180009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探時間自2013 年 2月13日 至2013 年 2月28日進展情況記錄論文初期：1論文前期的工作（包括初始階段、撰寫開題報告階段、實驗初期階段、實驗階段、實驗數(shù)據(jù)處理階段），準備寫論文。2著手寫論文綜述部分。本實驗表明野生卷丹百合原生質(zhì)體制備的最適條件為酶液組成為1%纖維素酶+1%果膠酶，最佳酶解時長為3.5小時，電融合最佳條件為 交流電壓6V 時間50S 直流電壓300V 脈沖時間25S 脈沖次數(shù) 10次學生簽名： 年 月 日指導教師意

16、見該生在實驗過程中每個操作步驟都非常認真細心，做事也很負責，已經(jīng)能逐步單獨完成實驗，操作能力和分析能力進一步提高，對于實驗的完成有了很大的幫助，在分析實驗過程方面也愈來愈成熟，表現(xiàn)出了良好的分析能力。指導教師簽名： 年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）進展情況記錄學號0908180009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探時間自 2013 年 3 月1日 至2013 年 3月31日進展情況記錄論文初稿：1已經(jīng)進入了論文階段，根據(jù)文獻資料及實驗數(shù)據(jù)，完成論文初稿；論文主要分為3章。第一章主要介紹原生質(zhì)體制備的意義及國內(nèi)外研究進展；第二章主要

17、介紹實驗材料和方法；第三章是對結(jié)果的討論，如不同酶解時長對原生質(zhì)體產(chǎn)量的影響，不同酶液組成的酶解效果。2對論文進行查漏補缺，交給老師，請老師幫忙審查、更正。學生簽名： 年 月 日指導教師意見該生在表現(xiàn)出了良好的分析能力和整理數(shù)據(jù)能力，對于數(shù)據(jù)的的分析非常到位，在許多不足的地方又認真負責的彌補，在數(shù)據(jù)整理方面很細心，能很好的按時完成。指導教師簽名： 年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）進展情況記錄學號09081800009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探時間自2013 年 4 月1日 至2013 年 5月1日進展情況記錄論文修改：根據(jù)老

18、師指出的缺點和不足，自己認真修改、完善論文。 1根據(jù)老師提出的建議，完善了論文的綜述部分，使本篇論文更加完整，更具有研究價值。 2根據(jù)老師提出的建議，對開題報告進行了完善和補充，使之更具有可讀性。學生簽名： 年 月 日指導教師意見該生能很好的同老師交流，在論文的撰寫中非常認真細心，學習的態(tài)度端正，學習是很虛心的向老師，同學請教，這對于論文的撰寫是非常有幫助的。指導教師簽名： 年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）中期自查學號0908180009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探時間自2013 年 3 月10日 至2013 年 3月15日中

19、期自查在前期查閱大量文獻后，初步掌握查閱文獻資料對方法。設(shè)計好本次論文的實驗流程，完成了正式實驗，初步掌握了無菌操作的要求、培養(yǎng)基的配制方法及原生質(zhì)體制備工藝，取得了以下實驗結(jié)果：1.確定了離心的最佳條件；2.確定了酶液的最佳組成；3.確定了龍牙百合原生質(zhì)體電融合的最佳條件；。 學生簽名： 年 月 日指導教師意見該生做事認真負責，不但及時的完成自己的事情，并且在空余時間還會幫助同學做他力所能及的事情，在完成事情方面也非常細心，每件事情都考慮的很周到，對于實驗的態(tài)度非常嚴謹和端正。指導教師簽名： 年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）個人工作總結(jié)學號0908180009學生姓名程思睿專業(yè)生

20、物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探時間自2012 年 9 月7日 至2013 年 5月1日工作總結(jié)本畢業(yè)論文從2012年9月初開始，到2013年4月下旬結(jié)束。在這8個月的學習過程中，我得到了涂藝聲老師的悉心指導和其他同學的熱心幫助。通過完成本篇畢業(yè)論文，我從中學到了很多。我認識到科學研究要有嚴謹?shù)膽B(tài)度及吃苦的精神，對所要進行的研究有一個清晰的認識，對實驗數(shù)據(jù)要做到實事求是，對論文細節(jié)要求嚴格，對科學研究要持有不斷完善的精神。我順利完成本科論文的實驗?zāi)繕耍?確定了酶液組成為1%纖維素酶+1%果膠酶時原生質(zhì)體產(chǎn)量最高； 2.確定了最佳酶解時長為3.5小時； 3.確定了

21、龍牙百合原生質(zhì)體進行電融合的最佳條件為交流電壓6V 持續(xù)時間50S 直流電壓300V 脈沖時間25S 脈沖次數(shù)為10次學生簽名： 年 月 日指導教師意見該生實驗工作時認真負責，細心的做著各方面的事情，態(tài)度端正，樂于學習，在遇到問題時能虛心向別人請教。指導教師簽名： 年 月 日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）形式審查表學號0908180009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探形式審查內(nèi)容（在是、否、無相應(yīng)的空格里打“”，“否”指未達到規(guī)范要求，“無”指沒有相應(yīng)要求或項目）項目是否無封面填寫完整正確（含外文題目）文稿為A4打印稿文字編排格式規(guī)范統(tǒng)

22、一有中文摘要（含中文關(guān)鍵詞）中文關(guān)鍵詞為35個有外文摘要（含外文關(guān)鍵詞）有目錄（標題文字、頁碼與內(nèi)文相符）正文有小標題正文標點符號使用正確正文無錯別字或病句參考文獻有10篇以上參考文獻含外文資料參考文獻含最新期刊資料參考文獻序號在文中有標注參考文獻格式規(guī)范過程進展情況記錄含中期自查過程進展情況記錄含個人工作總結(jié)過程進展情況記錄反映了學生的實際工作過程進展情況記錄填寫完整過程進展情況記錄內(nèi)容無邏輯錯誤圖表設(shè)計與繪制規(guī)范附帶了光盤等程序載體或電子稿已復(fù)制至學院指導教師審查意見形式審查合格（）不合格（）指導教師簽名： 年月日核查意見形式核查合格（）不合格（）學院畢業(yè)設(shè)計(論文)領(lǐng)導小組組長簽名： 年月日江西師范大學本科生畢業(yè)設(shè)計（論文）指導教師評價表學號0908180009學生姓名程思睿專業(yè)生物工程畢業(yè)設(shè)計(論文)題目龍牙百合的原生質(zhì)體制備與電融合條件初探指導教師評語本論文是對龍牙百合原生質(zhì)體制備以及電融合條件進行了優(yōu)化。該生專業(yè)理論知識掌握較好。能查閱大量中外文獻，實驗動手能力較強。在畢業(yè)論文期間已基本掌握原生質(zhì)體的制備方法，整個論文工作包括龍牙百合的組織培養(yǎng)、酶解條件的優(yōu)化。能獨立進行實驗方案設(shè)計和操作，實驗態(tài)度認真。在實驗中遇到問題與老師討論，提出解決的方法，分析問題和實驗操作能力得到提高。論文條理清晰，討論合理充分，格式規(guī)范。工作量飽滿，符合本科論文要