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文檔簡介
1、植物組織培養(yǎng)設(shè)備:1、高壓消毒鍋:用于培養(yǎng)基、蒸餾水和接種器械的滅菌消毒。2、超凈工作臺(tái):用于培養(yǎng)物的無菌操作。3、接種工具:包括雙筒實(shí)體顯微鏡、鑷子、剪刀、解剖刀、酒精燈或接種滅菌器(電熱 消毒器)等。4、培養(yǎng)設(shè)備:包括空調(diào)機(jī)、定時(shí)器、溫度控制器、增濕機(jī)或去濕機(jī)、培養(yǎng)架、搖床、恒 溫培養(yǎng)箱、人工培養(yǎng)箱等。5、化學(xué)實(shí)驗(yàn)及分析設(shè)備:包括分析天平,天平、酸度計(jì)、蒸餾水器、烘箱或玻璃儀器烘干器、電爐、藥品柜、冰箱、晾干架等。6、封口膜,培養(yǎng)瓶,試管,培養(yǎng)皿,專用記號筆,托盤,手術(shù)接種剪,直鑷,槍型接種 鑷,手術(shù)刀柄,超凈工作臺(tái),接種滅菌器,不銹鋼接種盤,組織培養(yǎng)架,光照培養(yǎng)箱,人工 氣候箱,生化培養(yǎng)
2、箱,恒溫恒濕箱,照度計(jì), PH 計(jì),酸度計(jì),電導(dǎo)率儀,干濕溫度計(jì),玻 璃棒溫度計(jì),電子天平,精密電子秤,磁力攪拌器,生物顯微鏡,高壓滅菌鍋,純水器,組 培推車,三角燒瓶,燒杯,量筒,試管架,試管刷,容量瓶,酒精燈,干燥器,吸球及移液管(0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20ML),容量瓶,試劑瓶(含棕色試劑瓶)。組培試劑類:3.1.植物生長調(diào)節(jié)劑類 Plant growth regulator : 6-芐氨基嘌呤 (6-BA) 6-Benzylaminopurine ;6-糠氨基嘌呤( KT ;激動(dòng)素) 6-Furfurylaminopurine(Kinetin) ; 腺嘌呤(腺素)
3、Adenine ;氯吡苯脲 (KT-30 ; CPPU)Forchlorfenuron ;反玉米素 Trans-zeatin ; 塞苯隆 (TDZ)Thidiazuron ; 生物素 Biotin ;a -萘乙酸(NAA)I-Naphthylacetic acid ;3-吲哚乙酸 (IAA) 3-Indole acetic acid ;3-吲哚丁酸 (IBA) 3-Indole butyric acid ;2, 4-二氯苯氧乙酸 (2, 4-D)2,4-Dichlorophenoxyacetic acid ; 赤霉素 GA3 Gibberellic acid ;奈乙酰胺( NAD ) 2-(
4、1-Naphthyl ) acetamide;3 -奈氧乙酸 3 -Naphthoxyacetic acid ;對氯苯氧乙酸 (防落素 )4-Chlorphenoxyacetic acid ; 對溴苯氧乙酸 4-Bromophenoxyacetic acid ; 對碘苯氧乙酸 4-Iodophenoxyacetic acid ;24-表油菜素內(nèi)脂 24-Epibrassinolide ; 蕓苔素內(nèi)酯 Brassinolide ;赤霉素 GA4+7 (GA4:GA7=1:2)Gibberellin A4+7;青鮮素 Maleic hydrazide ; 丁酰肼 (比久 )Daminozide ;
5、 吲哚 -3-丙酸 Indole-3-propanoic acid ; 吲哚 -3-丙烯酸 3-Indole-propenoic acid ; 吲哚 -3-甲醇 3-Indole-methanol ; 吲哚 -3-甲醛 Indole-3-carboxylic acid ;吲哚 -3-甲酸 Indole-3-carboxylic acid ; 三十烷醇 Triacontanol ; 多效唑 (PP333)Paclobutrazol ; 2, 4-D 鈉鹽; 縮節(jié)胺 Mepiquat chloride ; 矮壯素 Chlormequat ; 乙烯利 Ethephon。3.2.有機(jī)物類 Organi
6、c matter : 煙酸 Nicotinic acid ; 肌醇 myo-Inositol ; 鹽酸硫胺( VB1 ) Thiamine HCL,VB1 ; 鹽酸吡哆辛( VB6 ) Pyridoxin HCL,VB6 ; 甘氨酸 Glycine ; 葉酸 Folic acid ; 核黃素 (VB2)Riboflavin,VB2 ; 抗壞血酸 (VC)Ascorbic acid,VC ; 正丁酸 n-Butyric acid ; 檸檬酸 Citric acid monohydrate ; 蔗糖 Sucrose; DL- 精氨酸 DL-Arginine ; 腺嘌呤硫酸鹽 Adenine sul
7、fate ; 葡萄糖 Glucose(Dextrose) ; 蛋白胨 Peptone;水解酪蛋白 Casein acid hydrolysate ; 水解乳蛋白 Lactoalbumin hydrolysate 。3.3.無機(jī)物類: 硫酸鐵 Ferric sulfate ; 乙二胺四乙酸二鈉鹽 Ethylenediamine tetraacetic acid disodium salt ; 乙二胺四乙酸鐵鈉鹽 Ethylenediamine tetraacetic acid monosodium ferric salt ; 硼酸 Boric acid ; 氯化鈷 Cobalt Chloride
8、 ; 碘化鉀 Potassium lodide ; 鉬酸鈉 Sodium molybdate ; 無水氯化鈣 Calcium choloride anhydrous ; 二水氯化鈣 Calcium choloride ; 干燥氯化鈣 Calcium choloride ( for drying ); 硝酸鈣 Calcium nitrate ;D- 泛酸鈣 Calcium D-pantothenate ; 磷酸三鈣 Tri-Calcium phosphate ; 硫酸銅 Cupric sulfate ; 硝酸胺 Ammonium Nitrate ; 硝酸鉀 Potassium Nitrate ;
9、 結(jié)晶硫酸鎂 Magnesium sulfate ; 硫酸亞鐵 Ferrous Sulfate;磷酸二氫鉀 Potassium dihydrogen phosphate ;硫酸錳 Manganese Sulfate;硫酸鋅 Zinc sulfate ;磷酸二氫鈉 Sodium phosphate mono basic;三氧化鉬 Molybdenum Trioxide ;氯化鉀 Potassium chloride;氫氧化鉀 Potassium hydroxide ;硫酸銨 Ammonium sulfate ;二氧化鈦 Titanlum dioxide。34 日用耗材 Consumptive m
10、aterial of daily expenses :瓊脂粉Agar;冷凝脂 Fungible Agar ;活性炭粉 Carbon Activated ;超細(xì)活性炭粉 Wispy Carbon Activated 。消毒試劑類:甲醛(福爾馬林溶液)Formalin ;高錳酸鉀 Potassium permanganate;新基爾滅(苯扎溴銨溶液)Benzalkonium Bromide Solution ;安替福民(次氯酸鈉溶液);過氧化氫 30%(雙氧水)Hydrogen Peroxide氯化汞。一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)1準(zhǔn)備室:進(jìn)行藥品的保存、配置、消毒、分裝等。器具的洗滌、干燥、消毒。(3)生理生
11、化指標(biāo)的測定等。2接種室:進(jìn)行材料的接種,內(nèi)置超凈工作臺(tái)或接種箱。外設(shè)緩沖間-放置拖鞋、工作服、工作帽等。3培養(yǎng)室:植物材料的無菌培養(yǎng),室內(nèi)主要有培養(yǎng)架和控制溫度及光照的設(shè)備。4細(xì)胞學(xué)觀察實(shí)驗(yàn)室:進(jìn)行培養(yǎng)材料的組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)、觀察照相等。二、玻璃器皿的選擇和清洗1玻璃器皿的選擇*試管-適合于用少量培養(yǎng)基及試驗(yàn)各種不同配方時(shí)選用。*三角錐瓶-適用于各種培養(yǎng)(如固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)、大規(guī)模培養(yǎng)或一般培養(yǎng))*L形管和T形管-為專用的旋轉(zhuǎn)式液體培養(yǎng)試管。*培養(yǎng)皿-適于作單細(xì)胞的固體平板培養(yǎng)、胚和花藥培養(yǎng)和無菌發(fā)芽。*角形培養(yǎng)瓶和圓形培養(yǎng)瓶 -適用于液體培養(yǎng)用,如單細(xì)胞和原生質(zhì)體的淺層培養(yǎng)。*果醬瓶-常用
12、作試管苗大量繁殖用的培養(yǎng)瓶。藥品試劑:MS培 養(yǎng)基 的配制步驟這樣每次使用時(shí),取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀釋,制成培養(yǎng)液?,F(xiàn)將制備培養(yǎng)基母液所需的各類物質(zhì)的量列出,供配制時(shí)使 用。大量元素(母液I ) mg / LNH4NO333000KNO 338000CaCl2 2H2O8800MgSO4 7H2O7400KH2PO43400微量元素(母液U )KI166H3BO31 240Mn SO4 4H2O4 460Zn SO4 7H2O1 720Na2MoO4 2H2O50CuSO4 5H2O5C0CI2 6H2O5鐵鹽(母液川)FeSO4 7H 2O5 560
13、Na2-EDTA 2H2O7 460有機(jī)成分(母液W ) IV A肌醇20 000V B煙酸100鹽酸吡哆醇(維生素B6)100鹽酸硫胺素(維生素B1)100甘氨酸400以上各種營養(yǎng)成分的用量,除了母液I為20倍濃縮液外,其余的均為200倍濃縮液。上述幾種母液都要單獨(dú)配成1L的貯備液。其中,母液I、母液U及母液V的配制方法是:每種母液中的幾種成分稱量完畢后,分別用少量的蒸餾水徹底溶解,然后再將它們混溶,最后定容到1L 0母液川的配制方法是 :將稱好的 FeSO4 7H2O和Na2-EDTA 2H2O分別 放到450 mL蒸餾水中,邊加熱邊不斷攪拌使它們?nèi)芙?,然后將兩種溶液混 合,并將pH調(diào)至5
14、?5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。各種母液 配完后,分別用玻璃瓶貯存,并且貼上標(biāo)簽,注明母液號、配制倍數(shù)、日 期等,保存在冰箱的冷藏室中。MS培養(yǎng)基中還需要加入:2,4-二氯苯氧乙酸(2, 4-D)、萘乙酸(NAA)、6-芐基嘌呤(6-BA)等植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì),并且分別配成母液(0?1 mg/mL)。其配制方法是:分別稱取這3種物質(zhì)各10 mg,將2, 4-D和NAA用少量(1 mL)無水乙醇預(yù)溶,將 6-BA用少量(1 mL)的物質(zhì)的量濃度為 0.1 mol/L的 NaOH溶液溶解,溶解過程需要水浴加熱,最后分別定容至100 mL,即得質(zhì)量濃度為0?1 mg/mL的母液。配制培養(yǎng)液
15、 用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量:母液I為 50 mL,母液A 和W B 各 5 mL。再取 2, 4?D 5 mL、NAA 1mL,與各種母液一起放入燒杯中。MS培養(yǎng)基配制培養(yǎng)液時(shí)的注意事項(xiàng)配制培養(yǎng)液時(shí)應(yīng)注意: 在使用提前配制的母液時(shí),應(yīng)在量取各種母液之前,輕輕搖動(dòng)盛放 母液的瓶子,如果發(fā)現(xiàn)瓶中有沉淀、懸浮物或被微生物污染,應(yīng)立即淘汰 這種母液,重新進(jìn)行配制; 用量筒或移液管量取培養(yǎng)基母液之前,必須用所量取的母液將量筒 或移液管潤洗2次; 量取母液時(shí),最好將各種母液按將要量取的順序?qū)懺诩埳希咳?種,劃掉1種,以免出錯(cuò)。溶化瓊脂 用粗天平分別稱取瓊脂9 g、蔗糖30 g ,放入
16、1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入 蒸餾水750 mL,用電爐加熱,邊加熱 邊用玻璃棒攪拌,直到液體呈半透明狀。然后再將配好的混合培養(yǎng)液加入到煮沸的瓊脂中,最后加蒸餾水定容至1 000 mL ,攪拌均勻。需要注意的是,在加熱瓊脂、制備培養(yǎng)基的過程中,操作者千萬不能離開,否則沸騰的瓊脂外溢,就需要重新稱量、制備。此外,如果沒有搪瓷量杯,可用大燒杯代替 。但要注意大燒杯底的外表面不能沾水,否則加熱時(shí)燒杯容易炸裂,使溶液外溢,造成燙傷。調(diào)pH用滴管吸取物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培養(yǎng)基中,邊滴邊攪拌,并 隨時(shí)用精密的pH試紙(5.47.0)測培養(yǎng)基的pH,一直到培養(yǎng)基
17、的 pH為5.8 為止(培養(yǎng)基的pH必須嚴(yán)格控制在 5.8) 趁熱分裝。分裝時(shí),先將培養(yǎng)基倒入燒杯中,然后將燒杯中的培養(yǎng)基倒入 錐形瓶(50 mL或100 mL)中。注意不要讓培養(yǎng)基沾到瓶口和瓶壁上。錐形瓶中培養(yǎng)基的量約為錐形瓶容量的1/51/4。每1 000 mL培養(yǎng)基,可分裝2530瓶。培養(yǎng)基分裝完畢后,應(yīng)及時(shí)封蓋瓶口。用2塊硫酸紙(每塊大小約為9 cmX9 cm)中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口,并用線繩捆扎。最后在錐 形瓶外壁貼上標(biāo)簽。B5培養(yǎng)基配方成分使用濃度(mg/L)r ,曰人里兒糸硝酸鉀 KN032500MgS04 7H2O250CaCI2 2H2O150(NH4)2SO4134微里
18、兒糸KI0.75H3BO43.0MnSO4 4H2O10Zn SO47H2O2.0Na2MoO4 2H2O0.25CoCI2 6H2O0.025鐵鹽CuSO45H2O0.025Na2-EDTA37.3FeSO47H2O27.8有機(jī)成分肌醇100煙酸1.0鹽酸吡哆醇1.0鹽酸硫銨10MS培養(yǎng)基配方:成分分子量使用濃度(mg/L)硝酸鉀KN03101.111900硝酸銨NH4NO380.041650大量元素磷酸二氫鉀KH2PO4136.09170硫酸鎂MgSO4.7H2O246.47370氯化鈣CaCI2.2H2O147.02440碘化鉀KI166.010.83硼酸H3BO361.836.2硫酸錳
19、MnSO4.4H2O223.0122.3微量元素硫酸鋅ZnSO4.7 H2O 287.548.6鐵鹽有機(jī)成分鉬酸鈉硫酸銅氯化鉆Na2MoO4.2 H2O 241.95CuSO4.5 H2OCOCI2.620.25249.68237.930.0250.025乙二胺四乙酸二鈉Na2.EDTA 372.25硫酸亞鐵肌醇甘氨酸鹽酸硫胺素鹽酸吡哆醇37.3FeSO24.7H2O278.0327.8100VB1VB6煙酸 VB5或VPP蔗糖 sucrose342.310.10.50.530g/LB5培養(yǎng)基的組成和配方組成成分?jǐn)?shù)量(mg/l)2500KNO3大量元素CaCI2 2H2O 150MgS04 7
20、H2O250(NH4)2SO4134KI0.75H3BO43.0MnS04 4H2O10微量元素ZnSO47H2O2.0Na2MoO4 2H2O0.25CoCI2 6H2O0.025CuSO4-5H2O0.025鐵鹽Na2-EDTA37.3FeSO4-7H2O27.8肌醇100煙酸1.0有機(jī)成分鹽酸吡哆醇1.0鹽酸硫銨10N6 培養(yǎng)基配方組成成分?jǐn)?shù)量 (mg/I )硝酸鉀 (KN03)2830硫酸銨 (NH4SO4)463大量元素氯化鈣(CaCI2 2HzO)166硫酸鎂(MgSO47H20)185磷酸二氫鉀 (KH2PO4)400硫酸亞鐵(FeS04 7H20)27.8硫酸錳 (MnS04
21、4H20)4.4微量元素硫酸鋅 (ZnSO4 7H20)1.6有機(jī)成分硼酸 (H2BO3)0.8碘化鉀 (KI)1.6甘氨酸2煙酸0.5鹽酸硫胺素 ( 維 B1)1.0鹽酸吡哆素 ( 維 B6)0.5有關(guān)高中iS文高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)創(chuàng)業(yè)計(jì)劃書有關(guān)互聯(lián)高中iS文,語文計(jì)創(chuàng)業(yè)計(jì)算機(jī)創(chuàng)業(yè)計(jì)劃書關(guān)鍵詞:互聯(lián)有關(guān)互聯(lián)高中iS文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)創(chuàng)業(yè)計(jì)劃書介紹創(chuàng)業(yè)計(jì)劃高中iS文,iS文試卷,計(jì)算札網(wǎng)絡(luò)創(chuàng)業(yè)者叩響投資者大門高中i欣中語遨卷文跡,J敲晞?wù)n件下疇中語文試卷語文試卷機(jī)計(jì)網(wǎng)絡(luò)創(chuàng)業(yè)絡(luò)前隨家整理高語文試卷試卷卷業(yè)務(wù)機(jī)息于,聯(lián)高高中語,語文文卷卷摘要一普計(jì)劃運(yùn)中語文大物已卷代了語統(tǒng)創(chuàng)業(yè)計(jì)計(jì)書往
22、語會(huì)課創(chuàng)業(yè)計(jì)算到事模式倍上購物不受時(shí)間和空間高中iS文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)有關(guān)互聯(lián)高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)創(chuàng)業(yè)計(jì)劃書詳情:創(chuàng)業(yè)計(jì)劃高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)創(chuàng)業(yè)者叩響投資者大門高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)敲門磚”,高中iS文,語文試卷,計(jì)算札網(wǎng)絡(luò)創(chuàng)業(yè)者計(jì)劃創(chuàng)立高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)業(yè)務(wù)高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)書面摘要一份優(yōu)秀高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)創(chuàng)業(yè)計(jì)劃書往往會(huì)使創(chuàng)業(yè)者達(dá)到事半功倍高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)效果課件下面高中iS文,語文試卷,計(jì)算札網(wǎng)絡(luò)小'編為大家整理高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)關(guān)于互聯(lián)高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)創(chuàng)業(yè)計(jì)劃書,歡迎大家高中語文
23、,iS文試卷,計(jì)算機(jī)閱讀課件前言隨著生活高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)信息化電腦高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)普及及運(yùn)用,上購物已經(jīng)取代了傳統(tǒng)高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)購物模式,上購物不受時(shí)間和空間高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)限制以及產(chǎn)品多樣化給予消費(fèi)者更多高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)便利與選擇,吸引了越來越多高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)消費(fèi)者,高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)現(xiàn)今流行高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)購物模式,因此上開店成為了一種潮流,并且越來越多高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)人選擇電子商務(wù)產(chǎn)業(yè)背景及地位在我國至始發(fā)展電子商務(wù)以來,他也驚人高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)速而蓬正發(fā)以,速
24、乎各語各,語文電子商計(jì)方面有長成度課件電件商務(wù)現(xiàn)在占全國總消費(fèi)水平高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)XX你選擇高中語文發(fā)語現(xiàn)試卷折計(jì)算機(jī)商品類型我從事高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)高中語文,iS文試卷語計(jì)iS機(jī)試卷絡(luò)絡(luò)游算點(diǎn)等向游戲所周知現(xiàn)在絡(luò)文試卷經(jīng)高究文要卡營騰方計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)一個(gè)人們生活休閑娛樂當(dāng)中高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)必須品,他可以在人們工作累高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)時(shí)候給人們一種放松,而且可以給人一種在現(xiàn)實(shí)生活當(dāng)中無法體現(xiàn)高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)成就感'滿足感課件讓人們在緊張高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)工作生活中得到放松,從而更好地工作生活課件中國現(xiàn)在高中語文,iS文試卷
25、,計(jì)算機(jī)游戲市場很大而且相關(guān)高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)配套設(shè)施tt較完善,針對有游戲高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)法律法規(guī)已經(jīng)相當(dāng)高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)健全,這也使得中國高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)游戲市場得到了良性高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)發(fā)展,并且游戲高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)發(fā)展速度高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)在電子商務(wù)領(lǐng)域當(dāng)中發(fā)展最快高中iS文,語文試卷,計(jì)算札也高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)盈利性最強(qiáng)高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)課件我研究高中語文語文試卷,計(jì)算機(jī)高中語文,語文試卷,計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)現(xiàn)在絡(luò)上最熱門高中語文語文試卷,計(jì)算機(jī)幾款游戲,高高語文文,文文試,計(jì)計(jì)
26、算游戲網(wǎng)色,讓他們?nèi)说米罴痈咧姓Z文,i取試卷,欄皿大,從睡而軽己游中滅大語側(cè)讎耀當(dāng)中磁地展腿當(dāng)中臓了電子商卷臺(tái)對分寶盈行高中輙,多文都愿意計(jì)算民幣段,它中耐高中語瞬,iS文購,網(wǎng)絡(luò)機(jī)用戶合源不斷高中語文試卷文試卷機(jī)平臺(tái)機(jī)充值來裝備自己高中語文,iS文試卷,計(jì)算機(jī)商家S1M龐大高戲當(dāng)中高中文試卷語文試卷消費(fèi)用戶群體課件也高中iS文試卷文試卷機(jī)地算機(jī),網(wǎng)絡(luò)目前中國電子商務(wù)領(lǐng)域件這高中語文語文試卷,計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)一個(gè)多么大高中語文,語文試卷獨(dú)立完成數(shù)字語而且這些文試卷金額都算機(jī)課件可見語文試高中iS文:機(jī)文試卷由成計(jì)算萬值所在,并且淘寶高中語文淘語文試人,云算機(jī)在網(wǎng)年高中電文商語領(lǐng)試卷iS文機(jī)商文試卷
27、說計(jì)今機(jī)淘寶要程造十萬億高文,語丈試卷試計(jì)算機(jī)標(biāo)機(jī)交他最先,而了這么易高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)可行金額安后高中語文is文試卷件計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)有著強(qiáng)大高中語文,語文在未來發(fā)展目開發(fā)環(huán)境高中律法規(guī)高文試卷想計(jì)算機(jī)身邊高中語逐步完善來配套計(jì)算機(jī)哥們,哪個(gè)不見手機(jī)共同個(gè)不需件課件高中語文語文試卷,計(jì)算機(jī)未來發(fā)展高中語文,語:無需物流不見皴高中i取,語文鹹流T算不猶趣快遞只要高鐘文撥款文試元就可以舷了!產(chǎn)切操容語動(dòng)卷工課件機(jī)存哦叭職基昨不門班駆卿文試輾計(jì)算返高問遞件語文試卷,將機(jī)浪費(fèi)時(shí)蠟只要物一臺(tái)般信可以隨慢工交見信譽(yù)寶店客中率就高,而什話中計(jì)周文機(jī)地主能指鉆課件語文實(shí)語文加易算機(jī)ft伐文中語文計(jì)算機(jī)
28、試需計(jì)算參高中語文貝充值戲幣等等課機(jī)一些實(shí)實(shí)在在高中語文,語文試卷,計(jì)算機(jī)商品,比如服裝'化妝品等等課件在實(shí)物寶貝中有一類高中語文語文試卷,計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)tt較特殊高中語文語文試卷,計(jì)算機(jī),tt如在淘寶文試卷,計(jì)算機(jī)生活服務(wù)類目下高中i取,語文試卷,計(jì)信有I啊友會(huì)知範(fàn)類寶貝帶店鋪經(jīng)營瞬iS敲極試卷,計(jì)交易也件于高中語文交S卷試計(jì)算機(jī)以后機(jī)經(jīng)網(wǎng)闕一于新高淘昨剛從事這玲行業(yè)初剜朋且淘寶自身也出了充值系統(tǒng)在貝交易刪中S文多人i)說沖語文算機(jī)掌柜就最計(jì)算機(jī)先靠虛高中語文后轉(zhuǎn)型做實(shí)物高算機(jī)店鋪有任何高中語文算機(jī)文試!不再適算了擬寶貝交易高中盼來高中磁,語文加,計(jì)算機(jī)方法大量高中語文文語文試卷,計(jì)算
29、機(jī)朋友高中語文到文試卷個(gè)中算機(jī)語文試卷虛擬每一然后說生實(shí)物加要么文錢打造出來高中去文變五語文試年二十算機(jī)店鋪高還高中語文:文試文語文試卷,計(jì)算機(jī)時(shí)候,就下定決心一定要活著,當(dāng)生命遇到危險(xiǎn)高中語文,語文試卷,計(jì)算機(jī)高中語文語成功卷于我算機(jī)不網(wǎng)絡(luò)你候生不和他有劃有錢號他中會(huì)變出語來試想盡一算機(jī)法候所你當(dāng)人生命遇到問試高中語算機(jī)人文試中永遠(yuǎn)算機(jī)時(shí)候口永遠(yuǎn)當(dāng)有沒口借因?yàn)橹幸欢ㄒ钗脑嚿鼘λ阄視r(shí)重不你真高中語文語文試卷,計(jì)算機(jī)可以大成功了高中語文語文試卷,計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)還高中語文,語文試卷,計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)不高中語文語文試卷,計(jì)算機(jī),網(wǎng)絡(luò)雖然上創(chuàng)業(yè)已經(jīng)開始成為大學(xué)生自主創(chuàng)業(yè)高有很但存試卷多亟計(jì)算機(jī)一種發(fā)展態(tài)勢很好高中語文算,問題機(jī)創(chuàng)第算機(jī)問題創(chuàng)業(yè)相關(guān)信息高中iS文但高文試卷,語文算機(jī)不了算機(jī)1高中語對創(chuàng)“S高試語文高中中文,課語大卷相關(guān)信息可中說為不學(xué)生創(chuàng)業(yè)計(jì)算括意創(chuàng)業(yè)潛在高中iS文,語文試卷,計(jì)算機(jī)問題之一課件第二個(gè)問題計(jì)算機(jī)規(guī)模件盡管上創(chuàng)有太成本中少高文語文文試卷試卷算機(jī)算機(jī)優(yōu)點(diǎn)但在校大學(xué)生信用檔案與社會(huì)沒有接軌,導(dǎo)致融資借貸困難重重資金問題局限了大學(xué)生上創(chuàng)業(yè)外在絡(luò)創(chuàng)業(yè)作為一種創(chuàng)業(yè)形式,那么就必不可少高中iS文,語文試卷案肯
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