浮游植物數(shù)量（密度）和生物量的調(diào)查 - 天空教室- 浙江海洋學院

1、實驗八、浮游植物數(shù)量（密度）和生物量的調(diào)查 一、實驗目的：、通過浮游植物細胞密度與單位水體葉綠素a（Chla）含量的測定，了解浮游植物數(shù)量和生物量的表示方法，并對不同粒徑浮游植物加以比較。、學會使用采水瓶、水樣固定、濃縮及浮游植物計數(shù)框的方法，掌握葉綠素的測定方法。二、原理：見海洋生態(tài)學第六章第一節(jié)。生物量是指某一特定時間、某一特定范圍內(nèi)存在的有機體的量。浮游植物是海洋生態(tài)系統(tǒng)的初級生產(chǎn)者，而初級生產(chǎn)水平與葉綠素a含量存在密切關(guān)系，因而往往用葉綠素a含量來表示浮游植物的生物量。海洋生態(tài)系統(tǒng)的種類組成結(jié)構(gòu)以及能流、物質(zhì)流特征與初級生產(chǎn)者的粒徑大小有密切關(guān)系。不同類型海區(qū)初級生產(chǎn)者的粒徑

2、組成存在很大差異，了解某一特定海區(qū)初級生產(chǎn)者的粒徑組成，有助于深入研究海區(qū)的新生產(chǎn)力水平、營養(yǎng)平衡狀態(tài)等結(jié)構(gòu)、功能特征。三、儀器與設備：、分光光度計 、顯微鏡 、浮游植物計數(shù)框 、采水瓶 、電動吸引器 、離心沉淀器 、抽濾器 、微孔濾膜 、核孔濾膜 10、冰箱 11、20m孔徑篩絹四、藥品與試劑： 丙硐、甲醛、路戈氏碘液、MgCO3等。五、實驗步驟：1、采樣：選擇完站位后，以500mL、或1000mL采水瓶采取一定水層（也可幾個水層比較）的水樣。2、m微孔濾膜（葉綠素a總量）、2m核孔濾膜（2m孔徑葉綠素a含量）以及先經(jīng)20m孔徑篩絹過濾后再以2m核孔濾膜（220m孔徑葉綠素a含量）過濾，以9

3、0%丙酮溶解濾膜后冰凍過夜。3、數(shù)據(jù)測定：濾膜冰凍24小時后取出離心，取上清液于分光光度計測定葉綠素a含量（方法見附頁），將所得不同孔徑葉綠素a含量及占葉綠素a總量比例等數(shù)據(jù)填入下表。  孔 徑數(shù) 水層 值2m2-20m葉綠素a總量表層數(shù) 值   含量比例  100%底層數(shù) 值   含量比例  100% 附：葉綠素a含量測定方法（分光光度法）：3。B方法概述：已知體積的海水以玻璃纖維過濾器過濾，用90丙酮將色素從濾器上萃取出來，其濃度以分光光度法測定。C儀器和設備： 、分光光

4、度計 、抽濾器 、電動吸引器 、采水瓶 、微孔濾膜 、離心沉淀器 、冰箱 、離心管D取樣方法和貯存： -10升m微孔濾膜過濾。開始過濾海水時，加幾滴碳酸鎂懸浮液于海水中，以防止濾膜變酸性。濾膜經(jīng)風干、轉(zhuǎn)移、折疊放在干燥器中。如果不能馬上進行分析，在20下至少可保存30天。濾膜應對半析用一張普通濾紙墊著，用另一張濾紙緊固以便保存。E試劑：190丙酮量取100ml蒸餾水于1升的燒瓶中，并用分析純的丙酮加到1000ml。該試劑裝于蓋密的瓶中，保存在暗處。2碳酸鎂將約1克細粉末狀的MgCO3加到100ml蒸餾水中，裝于100ml洗瓶中，使用前用力振搖，加幾滴即可。F實驗步驟1海水樣品倒人帶有

5、過濾膜的過濾器中，在下1/2大氣壓真空度下過濾樣品。2在海水過濾時，加幾滴（3-5滴）碳酸鎂溶液到海水中。3抽氣使過濾膜完全干燥，保存（D）。如果需要也可萃取。4將濾膜轉(zhuǎn)移到 10 mL離心管中，加10mL90丙酮到管中，充分振搖。置于暗處過夜（最好冷凍）。5室溫下將各離心管離心5-10分鐘。離心時間長短取決于離心機的型號和要求得到溶液的清澈程度（10cm光程時在750um處的消光值應低于0.05）。6傾倒上清液到10cm光程的分光光度計的液池中，并在以下波長下連續(xù)測量消光值（樣品應為室溫，以避免濕氣蒙在光電管上）。波長：750，664，647，630，510和480nm（如果僅需要測定葉綠素

6、，那么，510和480 nrn就不必測定。7從664，647和630 nm的消光值減去750 nrn的消光值，以校正微粒濁度空白的消光值（510 nm的消光值以減去 2×750nm消光值校正，480 nm吸光值以減去3×750nm消光值校正）。 8用下面各式計算原海水樣品中色素的含量。 葉綠素 （Ca）Chl.a = 11.85 E664-1.54 E647- （Cb）Chl.b = 21.03 E647- 5.43 E664- （Cc）Chl.C = 24.52 E630-l.67 E664-式中，E是上述不同波長下所測的消光值（以750 nrn讀數(shù)校正）。Ca、Cb和Cc為葉綠素的含量（如果用 1